Đang tải... (xem toàn văn)
Xác định môi trường tối ưu để thu sinh khối và enzyme của vi khuẩn Bacillus subtilis, Lactobacillus acidophilus. Thử nghiệm sản xuất chế phẩm sinh học
[...]... gốc Bacillus subtilis Tăng sinh Môi trường NB (nutrien broth) 5 % giống Môi trường Nomura Môi trường Fragie Môi trường rỉ đường +2 % tinh bột s su Môi trường Edwards Môi trường pepton - gelatin ss 48 giờ, to phòng Kiểm tra Số lượng vi khuẩn Hoạt tính enzyme Hoạt tính enzyme có trong 1ml protease amylase Chọn môi trường tối ưu nhất 10 % giống Môi trường A Môi trường B Môi trường C Môi trường D Chọn môi. .. cho sinh khối và hoạt độ enzyme cao nhất để tiến hành sản xuất Mỗi môi trường thí nghiệm được lập lại 3 lần Môi trường Số lượng tế bào vi khuẩn Lần 1 A B C D E Lần 2 Lần 3 Hoạt độ enzyme amylase Hoạt độ enzyme protease Lần 1 Lần 2 Lần 3 Lần 1 Lần 2 Lần3 30 3.3.1.3 Sản xuất chế phẩm chứa Bacillus subtilis Sau khi tìm được môi trường nhân giống cấp 2 tối ưu nhất chúng tôi tiến hành sản xuất chế phẩm. .. D Chọn môi trường tối ưu nhất Sản xuất chế phẩm chứa Bacillus subtilis Bảo quản, kiểm tra Sơ đồ 3.1 Sơ đồ bố trí thí nghiệm đối với Bacillus subtilis Môi trường E 29 3.3.1.2 Khảo sát khả năng tăng sinh khối và enzyme của Bacillus subtilis trên môi trường nhân giống cấp 2 Sau khi chọn lọc được môi trường nhân giống cấp 1 tốt nhất chúng tôi tiến hành xác định môi trường nhân giống cấp 2 tối ưu nhất Cách... release 13.20 để so sánh sự khác biệt giữa các môi trường Đối với thí nghiệm trên Bacillus subtilis Môi trường nhân giống cấp 1 và môi trường nhân giống cấp 2 chúng tôi dùng dùng trắc nghiệm 1 yếu tố để xem tác động của: Môi trường lên số lượng tế bào vi khuẩn Môi trường lên hoạt độ enzyme amylase Môi trường lên hoạt độ enzyme protease Đối với thí nghiệm trên Lactobacillus acidophilus Môi trường sữa... giống cấp1: môi trường Frage, môi trường pepton – gelatin, môi trường chứa mật rỉ đường + 2 % tinh bột, môi trường Edward và môi trường Nomura • Môi trường sản xuất: bắp, đậu nành, bột sữa, bột mì… Thành phần và tỉ lệ các loại môi trường được trình bày chi tiết ở mục 1 phần phụ lục 3.2.4.2 Đối với Lactobacillus acidophilus • Môi trường tăng sinh chọn lọc MRSB 25 • Môi trường phân lập MRSA • Môi trường nuôi... như thí nghiệm 3.3.1.1 32 3.3.2 Đối với Lactobacillus acidophilus Chế phẩm Antibio (chứa L acidophilus) Phân lập MRSA Chọn khuẩn lạc điển hình MRSB tăng sinh (24 giờ /37oC) Kiểm tra sinh hóa Xác định Lactobacillus acidophilus Môi trường sữa đặc có đường Môi trường sữa đậu nành 24 giờ, nhiệt độ phòng Kiểm tra Số lượng vi khuẩn có trong 1ml Độ chua Therne Chọn ra môi trường tối ưu Sản xuất chế phẩm chứa... phân lập MRSA • Môi trường nuôi cấy và thử các phản ứng sinh hóa • Môi trường sản xuất: môi trường sữa đặc có đường và môi trường sữa đậu nành Thành phần và tỉ lệ các loại môi trường được trình bày chi tiết ở mục 1 phần phụ lục 3.3 PHƯƠNG PHÁP THÍ NGHIỆM 3.3.1 Đối với Bacillus subtilis 3.3.1.1 Khảo sát khả năng tăng sinh khối và enzyme của Bacillus subtilis trên môi trường nhân giống cấp 1 Cách tiến... nhuộm Gram và cấy giữ giống Những khuẩn lạc nghi ngờ này được tăng sinh trong môi trường MRSB trong 24 giờ ở nhiệt độ 37oC để tiến hành thử các phản ứng sinh hóa Xác định vi khuẩn Lactobacillus acidophilus Vi khuẩn Lactobacillus acidophilus xác định dựa trên các phương pháp truyền thống như: o Quan sát hình dạng tế bào khuẩn lạc và sự bắt màu khi nhuộm Gram o Thử nghiệm bằng các phản ứng sinh hóa Phản... nhất định và lượng enzyme đã xác định trước 23 • Tiến hành xác định thời gian cần thiết để thu nhận được một lượng biến đổi nhất định của lượng cơ chất hay lượng sản phẩm tương ứng với một lượng enzyme nhất định • Tiến hành chọn nồng độ enzyme cần thiết để trong một thời gian nhất định sẽ thu được sự biến đổi nhất định về cơ chất hay sản phẩm 2.5.3.2 Đơn vị hoạt độ Khả năng xúc tác của enzyme được xác. .. 47% Lactobacillus của sản phẩm A và 70% của sản phẩm B có thể ức chế tất cả 6 serotype E coli Ozayabal và Coner (1995) báo cáo rằng 3 chủng thương mại (L acidophilus, L casei và L faecium) có thể ức chế sự phát triển của của 6 serotype Salmonella Jin et al (1996) phát hiện ra rằng tất cả 12 chủng Lactobacillus có thể ức chế sự phát triển của 5 chủng Salmonella và 3 chủng E coli Các sản phẩm vi sinh
