Đang tải... (xem toàn văn)
1. Vector Là một phân tử ADN thường có dạng vòng có khả năng xâm nhập vào tế bào chủ của vi khuẩn và mượn bộ máy di truyền của vi khuẩn để tạo ra bản sao giống hệt vector ban đầu. Những yêu cầu tối thiểu của một vector chuyển gen: Vector phải tồn tại trong tế bào qua nhiều thế hệ Vector có kích thước nhỏ Vector phải có khả năng tự sao chép trong tế bào chủ Đảm bảo sự di truyền bền vững của một ADN tái tổ hợp Chúng có khả năng sống sót ngoài tế bào chủ Khả năng biến nạp lớn.Dễ theo dõi sự biểu hiện của gen tái tổ hợp.
MÔN: Công nghệ sinh học thực phẩm Đề tài: VECTOR ☺Thực hiện: 1. Đặng Duy Dài 2.Nguyễn Văn Ân 3. Nguyễn Thị Phấn 4. Nguyễn Thị Thơm 5. Nguyễn Thị Thu Nguyệt 1. Vector 1. Vector - - Là một phân tử ADN thường có dạng Là một phân tử ADN thường có dạng vòng vòng - có khả năng xâm nhập vào tế bào chủ - có khả năng xâm nhập vào tế bào chủ của vi khuẩn và mượn bộ máy di truyền của vi khuẩn và mượn bộ máy di truyền của vi khuẩn để tạo ra bản sao giống hệt của vi khuẩn để tạo ra bản sao giống hệt vector ban đầu. vector ban đầu. 2. Các loại vector chuyển gen: 2. Các loại vector chuyển gen: plasmid plasmid phage phage Các vector lai nhân tạo:cosmid, bluescipt Các vector lai nhân tạo:cosmid, bluescipt Những yêu cầu tối thiểu của một vector Những yêu cầu tối thiểu của một vector chuyển gen: chuyển gen: • Vector phải tồn tại trong tế bào qua nhiều thế Vector phải tồn tại trong tế bào qua nhiều thế hệ hệ • Vector có kích thước nhỏ Vector có kích thước nhỏ • Vector phải có khả năng tự sao chép trong tế Vector phải có khả năng tự sao chép trong tế bào chủ bào chủ • Đảm bảo sự di truyền bền vững của một ADN Đảm bảo sự di truyền bền vững của một ADN tái tổ hợp tái tổ hợp • Chúng có khả năng sống sót ngoài tế bào chủ Chúng có khả năng sống sót ngoài tế bào chủ • Khả năng biến nạp lớn.Dễ theo dõi sự biểu Khả năng biến nạp lớn.Dễ theo dõi sự biểu hiện của gen tái tổ hợp. hiện của gen tái tổ hợp. CÁC VẬT CHỦ THU NHẬN VECTOR CHUYỂN CÁC VẬT CHỦ THU NHẬN VECTOR CHUYỂN GEN GEN • Vi khuẩn E.coli và các vi khuẩn khác Vi khuẩn E.coli và các vi khuẩn khác • Nấm men và nấm mốc Nấm men và nấm mốc • Tế bào thực vật bậc cao Tế bào thực vật bậc cao • Tế bào động vật có vú Tế bào động vật có vú plasmid plasmid Plasmid là 1 đoạn Plasmid là 1 đoạn ADN ngắn dạng vòng ADN ngắn dạng vòng nằm ngoài nhânvà nằm ngoài nhânvà được tìm thấy đầu được tìm thấy đầu tiên ở vi khuẩn,sao tiên ở vi khuẩn,sao chép không phụ thuộc chép không phụ thuộc vào sự sao chép nhân vào sự sao chép nhân vi khuẩn vi khuẩn Plasmid có 3 thế hệ: Plasmid có 3 thế hệ: - thế hệ con dại được tìm thấy trong tự - thế hệ con dại được tìm thấy trong tự nhiên. VD: EColR1, pSC101. nhiên. VD: EColR1, pSC101. - thế hệ 2: tập trung nhiều tính quí của các - thế hệ 2: tập trung nhiều tính quí của các plasmid tự nhiên vào một cấu trúc plasmid plasmid tự nhiên vào một cấu trúc plasmid nhân tạo vd:PBR322 nhân tạo vd:PBR322 - thế hệ 3:có kích thước nhỏ, sao chép - thế hệ 3:có kích thước nhỏ, sao chép nhanh và mang nhiều đoạn polylinker gồm nhanh và mang nhiều đoạn polylinker gồm 3 nhóm pCU,pGEM,Pbluscrip 3 nhóm pCU,pGEM,Pbluscrip plasmid plasmid Sơ đồ minh họa một tế bào vi khuẩn với Sơ đồ minh họa một tế bào vi khuẩn với plasmid plasmid ở bên trong. (1) DNA nhiễm sắc thể. (2) ở bên trong. (1) DNA nhiễm sắc thể. (2) Plasmids Plasmids ☺ Các nhóm plasmid thông dụng hiện đang được sử dụng rộng rãi: 1.Nhóm các plasmid pUC. Kích thước khoảng 2.600 bp, mang gen Ampr và gen lacZ’, xen vào giữa gen lacZ’ là polylinker Plasmid vector pUC19. Vị trí tạo dòng (từ 396-447) được gắn vào gen lacZ’, nhưng không can thiệp vào chức năng của gen. plasmid Nhóm pUC là nhóm véctơ plasmid thuộc thế hệ thứ 3. Thờng mang dấu chuẩn là Amp r và LacZ. Chứa cả điểm khởi đầu sao chép của phage M13 cho phép tách dòng nhờ véctơ helper. [...]... gen lacZ, polylinker v promoter c trng cho cac RNA polymerase (SP6, T7) hai bờn vung polylinker cho phep phiờn ma oan DNA gn trong vector thanh nhiờu RNA ng dng: Cac RNA nay thng dung trong nghiờn cu cõu truc va chc nng cua RNA Hinh Plasmid vector pGEMđ-T Easy Loi vector ny ó c m sn vựng to dũng trờn gen lacZ mang hai u T, thớch hp cho vic gn cỏc sn phm PCR do chỳng cú mang hai u A 3.Nhúm cac... hiờn nay Hinh - Plasmid vector pBluescript II SK (+/-) Vector ny mang vựng to dũng v trớ t 598-826 trờn gen lacZ, v cỏc v trớ gn primer khỏc nhau dựng cho phõn tớch trỡnh t on DNA ngoi lai Plasmid pM13 Bản chất là phân tử ADN mạch đơn Không làm phân giải tế bào chủ khi giải phóng khỏi tế bào nên tách dòng thuận tiện Plasmid PBR322 U im: Cú ln nh Mang 2 nhúm gen khỏng sinh Cú s lng bn sao ln... trũ quan trng trong cỏc phũng thớ nghim di truyn v sinh húa, c thng mi húa cho cỏc ng dng trờn l to ra protein vi s lng ln Vi khun cha plasmid mang gene mong mun c nuụi cy v chỳng s c kớch hot sn xut ra s lng ln protein t gene mong mun nm trờn plasmid õy l mt phng phỏp n gin v r tin to ra mt lng ln plasmid hoc protein, nh insulin hay c cỏc khỏng sinh Phage *Bacteriophage gi tt l phage l nhng virut... nhng virut ch nhõn lờn trong vi khun nú cú hỡnh dỏng ging qu chựy phn uụi c gn vo t bo vi khun ng thi tit ra 1 loi ezim lm tan v t bo,ri y phn AND ca mỡnh vo Hiu qu xõm nhim mnh Kh nng sinh sụi ny n nhanh; kớch thc on DNA m vector cú th tip nhn c l ln hn rt nhiu .Thao tỏc trờn phage thỡ phc tp hn trờn plasmid véctơ Phage Phần lớn xuất phát từ phage Kích thước khoảng 48,5 kb Có thể mang các đoạn ADN . MÔN: Công nghệ sinh học thực phẩm Đề tài: VECTOR ☺Thực hiện: 1. Đặng Duy Dài 2.Nguyễn Văn Ân 3. Nguyễn Thị Phấn 4. Nguyễn Thị Thơm 5. Nguyễn Thị Thu Nguyệt 1. Vector 1. Vector . sao giống hệt vector ban đầu. vector ban đầu. 2. Các loại vector chuyển gen: 2. Các loại vector chuyển gen: plasmid plasmid phage phage Các vector lai nhân. bào qua nhiều thế Vector phải tồn tại trong tế bào qua nhiều thế hệ hệ • Vector có kích thước nhỏ Vector có kích thước nhỏ • Vector phải có khả năng tự sao chép trong tế Vector phải có khả