Hình 3 - Dấu hiệu bệnh lý của cá ba sa giống (nội quan) - Cá thương phẩm: Cá ăn ít hoặc bỏ ăn, hay nhào lộn bất thường, bụng trướng to, ngữa bụng trôi theo dòng nước tấp theo mặt khại bè, hay uốn cong thân, bơi lội không đònh hướng. Biểu hiện bệnh lý bên ngòai cũng như bên trong của cá rất rõ ràng. Xoang miệng cá xuất huyết, mang đen bầm, vi lưng, vi ngực, vi bụng, vi hậu môn đều xuất huyết, vi ngực, vi lưng thường tưa rách, hay tia cứng bò gảy, vi đuôi bò cụt, hậu môn lồi đỏ. Thân cá mất nhớt, màu da không tươi sáng, da bụng xuất huyết, bụng trướng to, có mùi hôi đặc trưng, mặc dù cá vẫn còn sống. Giải phẩu bên trong thấy gan đen bầm, màu vàng nhạt, hay đỏ sậm có đốm trắng hoặc sưng, hay ửng đỏ từng vùng, dạ dày và ruột xuất huyết không chứa thức ăn, bóng khí đầy hơi và xuất huyết, mật ửng vàng có đốm xanh, lách và thận đen bầm,hoặc thận nhủn, mạch máu trương to, mô mở xuất huyết, thòt có đốm đỏ, xoang bụng chứa dòch vàng. 39 Những dấu hiệu bệnh lý bên ngoài và bên trong của cá bệnh nêu trên, phần nhiều trùng hợp với mô tả cá bệnh xuất huyết của Phan văn Ninh (1993) và Nguyễn văn Hảo (1996). III.2 3 Phân nhóm các dấu hiệu bệnh lý xuất hiện trên những mẫu cá thu được + Cá giống: Trong 20 mẫu khảo sát, các biểu hiện bệnh lý bên ngòai của cá được ghi nhận như sau: Cá có biểu hiện xuất huyết ở vi đuôi 19,50%, xoang miệng 15,58%, vi ngực 12,98%, vi lưng 11,68%, vi hậu môn 11,68% và vành môi 10,38% chiếm tỉ lệ cao trong số lần bắt gặp. Biểu hiện của các dấu hiệu bệnh lý nầy (được liệt kê trong bảng 6) xuất hiện qua một vài dấu hiệu kết hợp với nhau và chưa thấy trường hợp nào xuất hiện riêng lẻ. Bảng 6. Tần số xúât hiện các dấu hiệu bệnh lý trên mẫu cá giống Dấu hiệu bệnh lý Số lần xuất hiện Tỷ lệ % Xuất huyết vi đuôi 15 19,50 Xuất huyết xoang miệng 12 15,58 Xuất huyết vi ngực 10 12,98 Xuất huyết vi lưng 9 11,68 Xuất huyết vi hậu môn 9 11,68 Xuất huyết vành môi 8 10,38 Xuất huyết vi bụng 6 7,80 Xuất huyết da bụng 3 3,60 Xuất huyết hàm dưới 2 2,60 Hậu môn lồi đỏ 2 2,60 Vi ngực tưa rách, gai cứ ng gảy 1 1,30 Cộng 77 100% 40 Biểu đồ 2 . Tần số xúât hiện các dấu hiệu bệnh lý trên mẫu cá giống + Cá thương phẩm * Nhóm cá bệnh có biểu hiện bệnh lý bên ngòai 41 Gồm 47 mẫu cá, ghi nhận các biểu hiện bệnh lý bên ngòai như sau:Thòt có đốm đỏ 16,43%, xuất huyết trên các vi như vi lưng 13,61%, vi ngực 13,61%, vi bụng 13,15%, vi hậu môn 7,51%, vi đuôi 7,51%. Vi ngực, vi lưng tưa rách, gai cứng bò gảy, xuất huyết da bụng chiếm tỉ lệ khá cao trong số lần bắt gặp. Các dấu hiệu bệnh lý nêu trên, với vài dấu hiệu xuất hiện kết hợp với nhau và chưa thấy có dấu hiệu nào xuất hiện riêng lẻ. Bảng 7. Tần số xúât hiện các dấu hiệu bệnh lý trên mẫu cá thương phẩm Dấu hiệu bệnh lý Số lần xuất hiện Tỷ lệ % Thòt có đốm đỏ 35 16,43 Xuất huyết vi lưng 29 13,61 Xuất huyết vi ngực 29 13,61 Xuất huyết vi bụng 28 13,15 Xuất huyết vi đuôi 16 7,51 Xuất huyết vi hậu môn 16 7,51 Vi ngực tưa rách,gai cứng gảy 14 6,57 Vi lưng tưa rách, gai cứng gảy 11 5,16 Xuất huyết da bụng 8 3,76 Xuất huyết xoang miệng 7 3,30 Hậu môn lồi đỏ 6 2,82 Vi đuôi tưa rách 4 1,87 Bụng trướng 3 1,41 Thân mất nhớt 3 1,41 Vi bụng tưa rách 1 0,47 Da sần sùi 1 0,47 Xuất huyết hàm dưới 1 0,47 42 Xuất huyết vành môi 1 0,47 Cộng 213 100% Biểu đồ 3. Tần số xúât hiện các dấu hiệu bệnh lý trên mẫu cá thương phẩm * Nhóm cá bệnh không có biểu hiện xuất huyết bên ngòai 43 Gồm 8 mẫu cá thương phẩm bệnh trong mùa mưa. Khi quan sát bằng mắt thường không thấy dấu hiệu bệnh lý bên ngoài, nhưng nội quan được ghi nhận có những dấu hiệu khác thường về mầu sắc trên các cơ quan gan, thận, lách. Bảng 8 - Màu sắc các cơ quan gan, thận,lách của cá bệnh không biểu hiện xuất huyết bên ngòai Màu sắc cơ quan Số lần xuất hiện Tỷ lệ% Gan: màu đen xám 7 29,17 Gan : màu vàng xanh 1 4,17 Thận : màu hồng nhạt 4 16,66 Thận: màu tái xám 3 12,5 Thận: màu xám nhạt 1 4,17 Lách : màu hồng nhạt 4 16,66 Lách: màu tái xám 3 12,5 Lách: màu xám nhạt 1 4,17 Cộng 24 100,00 Biểu đồ 4. Màu sắc các cơ quan gan, thận,lách của cá bệnh không biểu hiện xuất huyết bên ngoài 44 Các dấu hiệu bệnh lý biểu hiện bên ngòai rõ nhất của cá ba sa được tóm tắt như sau: - Cá giống xuất huyết trên các vi: vi đuôi, vi ngực,vi lưng, vi hậu môn, xoang miệng, vành môi có tỷ lệ khá cao. - Cá thương phẩm: thòt có đốm đỏ, xuất huyết vi lưng, vi ngực, vi hậu môn, xoang miệng, vi đuôi và các tia cứng bò gảy cũng có tỷ lệ khá cao. - Cá không có dấu hiệu bệnh lý bên ngòai, nhưng bên trong nội quan có màu sắc khác thường biểu hiện rõ trên gan, thận, lách. Trong giới hạn đề tài không nghiên cứu về bệnh ký sinh trùng. Nhưng những nghiên cứu trước đây trên cá basa đã công bố một số ký sinh trùng gây bệnh như : trùng bánh xe Trichodina ký sinh trên da cá, sán lá đơn chủ Silurodiscoides và Silurodiscoides sp7 ký sinh trên mang cá, Balantidum, Nyctotherus ký sinh trong ruột cá ba sa (Bùi Quang Tề 1993). Bệnh xuất huyết trên cá ba sa xảy ra gần như quanh năm. Theo ngư dân nuôi bè thì trong chu kỳ một năm, có những tháng bệnh bộc phát cao điểm như các tháng mùa khô 2 - 4, mùa nước đỗ tháng 7 - 8, mùa nước rút tháng 11. Có lẽ do những tháng mùa nắng, nhiệt độ không khí lên cao, trung bình từ 33 - 35 o C, nhiệt độ nước cũng tăng cao, dòng chảy chậm, mực nước thấp, cá dễ phát sinh bệnh. Tháng nước đổ, nước từ thượng nguồn sông Mékông tràn về, mang đến khu vực nuôi bè nhiều phù sa hòa tan trong nước, tốc độ dòng chảy rất mạnh, ngư dân di chuyển bè nhiều lần có thể làm cá bỏ ăn, ảnh hưởng đến sức khỏe của cá. Tháng nước rút, nước từ đồng ruộng, kênh, rạch, tuôn ra sông, mang nhiều chất hữu cơ do 45 cây cỏ phân hủy, dư lượng nông dược và hóa chất dùng trong nông nghiệp. Vì vậy, vào các thời điểm nầy thường gặp cá bệnh. III.3 Kết quả phân lập nuôi cấy và đònh danh vi khuẩn trên các mẫu cá thu thập được III.3.1 Số lượng mẫu theo mùa vụ, khu vực Số lượng mẫu cá bệnh thu được là 75 mẫu, và 5 mẫu đối chứng (thu vào mùa khô, trên bè sông Hậu) đều là cá nuôi bè, được chia theo mùa và khu vực. - Mùa mưa có 53 mẫu, gồm 32 mẫu, thu trên khu vực bè sông Tiền, 21 mẫu thu trên khu vực bè sông Hậu. - Mùa khô có 22 mẫu, gồm 10 mẫu, thu trên khu vực bè sông Tiền, 12 mẫu thu trên khu vực bè sông Hậu. III.3 .2 Kết quả phân lập vi khuẩn đònh tính Vi khuẩn phân lập từ các cơ quan gan, thận, lách cá bệnh, nuôi cấy trong môi trường BHI, TSA và môi trường phân lập Aeromonas. Trên môi trường TSA các khuẩn lạc được ghi nhận như sau: khuẩn lạc hình tròn, rìa đều, bóng, trong suốt hoặc bán trong suốt, lồi thấp hoặc dẹp, đường kính khuẩn lạc 2 - 3 mm. Tiến hành nhuộm Gram, quan sát hình thái vi khuẩn. Nhận thấy các vi khuẩn hình que, hoặc hình que hơi cong thanh mảnh, bắt màu Gram âm. Hình 4. Khuẩn lạc vi khuẩn Aeromonas hydrophila trên môi trường TSA 46 Hình 5. Vi khuẩn Aeromonas hydrophila nhuộm Gram Đặc điểm của các chủng vi khuẩn phân lập từ cá basa được trình bày ở Bảng 9 . Dựa vào kết quả này, đã xác đònh được 5 loại vi khuẩn thuộc hai giống: Giống Aeromonas gồm các lòai: A. hydrophila, A. caviae, A. sobria và Aeromonas sp.; 47 Giống Pseudomonas : Pseudomonas sp. Bảng 9. Đặc điểm của các chủng vi khuẩn phân lập từ cá basa Đặc điểm Aeromonas sp A . caviae A.sobria A.hydrophila Pseudomonas sp. Motility + + + + + Gram stain - - - - - OF/O, OF/F +/+ +/+ +/+ +/+ +/- Sinh Indol nd + + + - ONPG nd + - + nd MR-VP nd +/- +/d +/+ nd Gelatine + + + + nd H 2 S nd - + + nd Simmon citrate nd d d d nd Lysine nd - + d nd Arginine nd + + + nd Ornithine - - - - nd KCN nd + - + nd Nitrate nd + + + nd Oxydase + + + + + Catalase + + + + + Urea - + + + - Phenylalanine - + + + - Gas from glucose + - - + - Arabinose nd + - + nd Manitol nd + + + nd Maltose nd + + + nd Sucrose nd + d + nd Ghi chú: nd : không thực hiện; + : dương tính; - :âm tính Theo Poppoff (1984), các loài vi khuẩn thuộc giống Aeromonas chia thành 2 nhóm, nhóm không di động và di động. Nhóm Aeromonas di động gồm A. hydrophila, A. caviae, A. sobria là những loài ưa nhiệt ôn hòa, di động. A. 48 [...]... 33,33%) Tuy nhiên, không phân lập được A hydrophilla từ các mẫu cá này Từ những kết quả trên, có thể thấy rằng A hydrophila và Aeromonas sp có quan hệ chặt chẽ với sự xuất hiện bệnh xuất huyết của cá basa nuôi bè tại An Giang trong thời gian nghiên cứu III.3.3 Kết quả phân lập vi khuẩn đònh lượng Kết quả phân lập đònh lượng vi khuẩn từ các mẫu cá bệnh trong mùa mưa và 50 ... (Hazen et al 197 8; Heuschmann- Brunner 197 8; Kaper et al, 199 81) Vi khuẩn thuộc giống Pseudomonas phân bố rộng rãi nhiều nơi trong tự nhiên, bao gồm đất, nước , da, ruột, miệng của người, động vật và trong nhiều lọai thực phẩm (Bergan, 198 1), Pseudomonas sp được xem là tác nhân gây bệnh thứ cấp, Pseudomonas sp đi kèm với Aeromonas sp gây xuất huyết nặng trên da (Kabata Z, 198 5) Tần số xuất hiện của... khuẩn phân lập từ gan, thận, lách của cá bệnh có sự biến động theo mùa và khu vực thu mẫu (Bảng 10) Vào mùa mưa, Aeromonas sp chiếm ưu thế trong các mẫu cá bệnh với tỷ lệ 67,7% trên khu vực sông Tiền và 68,2% trên khu vực sông Hậu Riêng vi khuẩn Pseudomonas sp xuất hiện với tỷ lệ 31,25% trên sông Tiền nhưng không thấy Pseudomonas sp xuất hiện trên khu vực sông Hậu rên sông Hậu, số lần xuất hiện của vi... caviae, A sobria là những vi khuẩn gắn liền với bệnh nhiễm trùng máu xuất huyết của cá nước ngọt (Roberts, 199 3) Aeromonas di động thường phân bố rộng rãi trong hệ sinh thái thủy sản, chúng có thể gây bệnh cho động vật biến nhiệt, động vật máu nóng và ngay cả người (Faire, 197 8; Salton & Schnick 197 3) Aeromonas di động xuất hiện ở mọi thủy vực, trừ nước mặn, xuất hiện trong nước sạch và phong phú trong... Mùa Mưa Sông Tiền 96 Sông Hậu 63 65 (67.7%) 0 22 9 30 (22 ,9% ) (9, 4%) (31,25%) 43 36 18 4 (68,2%) (57,1%) (28,6%) (6,3%) 0 Mùa Khô Sông Tiền 30 Sông Hậu 36 6 21 (20%) (70%) 12 18 (33,33%) (50%) 0 0 15 15 (50%) (30%) 9 (25%) 0 Đặc biệt, đã phân lập được vi khuẩn từ gan, thận, lách của 5 mẫu cá không thấy biểu hiện bệnh lý bên ngoài Các chủng vi khuẩn phân lập được là Aeromonas sp (9/ 15 mẫu = 60%), Pseudomonas... 57,1% Vào mùa khô, A hydrophila vi khuẩn xuất hiện chiếm ưu thế trên cả hai khu vực sông Tiền và sông Hậu là 70% và 50% Ngoài ra, còn phân lập được Aeromonas sp là 33,33% trên sông Hậu, 20 % trên khu vực sông Tiền và cũng không thấy Pseudomonas sp xuất hiện trên khu vực sông Hậu vào mùa khô 49 Bảng 10 Kết quả phân lập đònh tính vi khuẩn từ gan, thận, lách cá basa Khu vực thu mẫu Số mẫu phân lập được . % Xuất huyết vi đuôi 15 19, 50 Xuất huyết xoang miệng 12 15,58 Xuất huyết vi ngực 10 12 ,98 Xuất huyết vi lưng 9 11,68 Xuất huyết vi hậu môn 9 11,68 Xuất huyết vành môi 8 10,38 Xuất huyết. các mẫu cá này Từ những kết quả trên, có thể thấy rằng A. hydrophila và Aeromonas sp có quan hệ chặt chẽ với sự xuất hiện bệnh xuất huyết của cá basa nuôi bè tại An Giang trong thời gian nghiên. dòch vàng. 39 Những dấu hiệu bệnh lý bên ngoài và bên trong của cá bệnh nêu trên, phần nhiều trùng hợp với mô tả cá bệnh xuất huyết của Phan văn Ninh ( 199 3) và Nguyễn văn Hảo ( 199 6). III.2