1 CEFOTAXIM NATRI Cefotaximum natricum C 16 H 16 N 5 NaO 7 S 2 P.t.l: 477,4 Cefotaxim natri là (6R,7R)-3-[(acetyloxy)methyl]-7-[[(Z)-2-(2-aminothiazol-4- yl)-2-(methoxyimino)acetyl]amino]-8-oxo-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-en-2- carboxylat natri, phải chứa từ 96,0 đến 101,0% C 16 H 16 N 5 NaO 7 S 2 , tính theo chế phẩm khan. Tính chất Bột trắng hoặc hơi vàng, hút ẩm, dễ tan trong nước, hơi tan trong methanol, thực tế không tan trong ether. 2 Định tính Có thể chọn một trong hai nhóm định tính sau: Nhóm I: Phép thử A, D Nhóm II: Phép thử B, C, D A. Phổ hồng ngoại (Phụ lục 4.2) của chế phẩm phải phù hợp với phổ hồng ngoại của cefotaxim natri chuẩn (ĐC). B. Tiến hành phương pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4) Bản mỏng: Silicagel HF 254 (TT) đã silan hóa. Dung môi khai triển: Aceton - dung dịch amoni acetat 15,4% đã được điều chỉnh trước tới pH 6,2 bằng acid acetic (15 : 85). Dung môi pha mẫu (dung dịch A): Hỗn hợp methanol - dung dịch đệm phosphat 0,067 M pH 7,0 (1 : 1). Dung dịch thử: Hòa tan 20 mg chế phẩm trong dung dịch A và pha loãng thành 5,0 ml với cùng dung môi. Dung dịch đối chiếu (1): Hòa tan 20 mg cefotaxim natri chuẩn (ĐC) trong dung dịch A và pha loãng thành 5,0 ml với cùng dung môi 3 Dung dịch đối chiếu (2): Hòa tan 20 mg cefotaxim natri chuẩn (ĐC) và 20 mg cefoxitin natri chuẩn (ĐC) trong dung dịch A và pha loãng thành 5,0 ml với cùng dung môi Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên bản mỏng 1 l mỗi dung dịch trên. Triển khai sắc ký đến khi dung môi đi được 15 cm. Lấy bản mỏng ra, để khô và quan sát dưới ánh sáng tử ngoại ở bước sóng 254 nm. Vết chính thu được trên sắc ký đồ của dung dịch thử phải phù hợp về vị trí, kích thước với vết chính trên sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu (1). Phép thử chỉ có giá trị khi sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu (2) cho 2 vết tách rõ. C. Cho phản ứng B trong phép thử Phản ứng màu của các penicilin và cephalosporin (Phụ lục 8.3). D. Chế phẩm cho phản ứng của natri (Phụ lục 8.1). Độ trong và màu sắc của dung dịch Dung dịch S: Hòa tan 2,5 g chế phẩm trong nước không có carbon dioxyd (TT) và pha loãng thành 25,0 ml với cùng dung môi. Dung dịch S phải trong (Phụ lục 9.2). Thêm 1 ml acid acetic băng (TT) vào 10 ml dung dịch S. Quan sát ngay, dung dịch thu được phải trong. Độ hấp thụ (Phụ lục 4.1) của dung dịch S đo ở bước sóng 430 nm không được quá 0,20. 4 pH pH của dung dịch S từ 4,5 đến 6,5. Góc quay cực riêng Từ +58 o đến +64 o , tính theo chế phẩm đã làm khô (Phụ lục 6.4). Hòa tan 0,100 g chế phẩm trong nước và pha loãng thành 10,0 ml với cùng dung môi. Độ hấp thụ ánh sáng Hòa tan 20,0 mg chế phẩm trong nước và pha loãng thành 100,0 ml với cùng dung môi. Pha loãng 10,0 ml dung dịch thu được thành 100,0 ml bằng nước. Giá trị A(1%, 1 cm) ở 235 nm phải từ 360 đến 390, tính theo chế phẩm đã làm khô. Tạp chất liên quan Xác định bằng phương pháp sắc ký lỏng như đã mô tả trong mục Định lượng. Tiêm dung dịch thử và dung dịch đối chiếu (2). Chạy sắc ký dung dịch thử trong thời gian ít nhất là 8 lần thời gian lưu của pic chính. Trên sắc ký đồ thu được của dung dịch thử, bất kỳ pic nào, trừ pic chính, không được có diện tích lớn hơn diện tích của pic chính trong dung dịch đối chiếu (2) (1%); tổng diện tích của các pic 5 phụ này không lớn hơn 3 lần diện tích của pic chính trong sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu (2) (3%). N,N-Dimethylanilin Không được quá 20 phần triệu (Phụ lục 10.16, phương pháp 2). Acid 2-ethylhexanoic Không được quá 0,5% (kl/kl) (Phụ lục 10.17). Mất khối lượng do làm khô Không được quá 3,0% (Phụ lục 9.6). (1,000 g, 100 – 105 o C). Độ vô khuẩn Nếu chế phẩm dự định dùng trong sản suất thuốc tiêm mà không có phương pháp hữu hiệu nào để tiệt khuẩn thì phải đáp ứng yêu cầu về phép thử độ vô khuẩn (Phụ lục 13.7). Nội độc tố vi khuẩn 6 Không được quá 0,05 UI/mg (Phụ lục 13.2), nếu chế phẩm dự định dùng trong sản suất thuốc tiêm mà không có phương pháp hữu hiệu nào loại bỏ nội độc tố vi khuẩn. Định lượng Tiến hành phương pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3) Pha động: Hòa tan 3,5 g kali dihydrophosphat (TT) và 11,6 g dinatri hydrophosphat (TT) trong 1000 ml nước pH 7,0 và thêm 180 ml methanol (TT). Dung dịch thử: Hòa tan 25,0 mg chế phẩm trong pha động và pha loãng thành 25,0 ml với cùng dung môi. Dung dịch đối chiếu (1): Hòa tan 25,0 mg cefotaxim natri chuẩn (ĐC) trong pha động và pha loãng thành 25,0 ml với cùng dung môi. Dung dịch đối chiếu (2): Pha loãng 1,0 ml dung dịch đối chiếu (1) thành 100,0 ml bằng pha động. Dung dịch phân giải: Thêm 1,0 ml dung dịch acid hydrocloric loãng (TT) vào 4,0 ml dung dịch thử. Đun nóng dung dịch thu được ở 40 o C trong 2 giờ. Thêm 5,0 ml dung dịch đệm phosphat pH 6,6 và 1,0 ml dung dịch natri hydroxyd loãng (TT). Điều kiện sắc ký: 7 Cột (0,25 m x 4,6 mm) được nhồi octadecylsilyl silica gel dành cho sắc ký (5 m). Detector quang phổ tử ngoại đặt ở bước sóng 235 nm. Tốc độ dòng: 1,0 ml/phút. Thể tích tiêm: 10 l Cách tiến hành: Tiêm dung dịch đối chiếu (1) và dung dịch phân giải, điều chỉnh độ rộng của thang đo sao cho chiều cao các pic chính của dung dịch phân giải ít nhất bằng 50% của thang đo. Phép thử chỉ có giá trị khi cefotaxim được rửa giải như là pic chính thứ hai và độ phân giải giữa 2 pic chính ít nhất là 3,5. Nếu cần, dùng pha tĩnh khác hoặc điều chỉnh nồng độ methanol trong pha động. Phép thử không có giá trị khi hệ số đối xứng của pic cefotaxim lớn hơn 2,0. Tiêm dung dịch đối chiếu (1) 6 lần. Phép thử chỉ có giá trị khi độ lệch chuẩn tương đối của diện tích pic cefotaxim không lớn hơn 1,0%. Tiếp tục tiêm lần lượt dung dịch thử và dung dịch đối chiếu (1). Bảo quản Trong đồ đựng kín và tránh ánh sáng, bảo quản ở nhiệt độ không quá 30 o C. Nếu chế phẩm vô khuẩn thì bảo quản trong đồ đựng kín vô khuẩn. 8 Nhãn Chế phẩm là vô khuẩn thì trên nhãn phải ghi là vô khuẩn. Chế phẩm không có nội độc tố vi khuẩn thì trên nhãn phải ghi là không có nội độc tố vi khuẩn. Loại thuốc Thuốc kháng khuẩn. Chế phẩm Thuốc tiêm cefotaxim. . 1 CEFOTAXIM NATRI Cefotaximum natricum C 16 H 16 N 5 NaO 7 S 2 P.t.l: 477,4 Cefotaxim natri là (6R,7R)-3-[(acetyloxy)methyl]-7-[[(Z)-2-(2-aminothiazol-4- yl)-2-(methoxyimino)acetyl]amino]-8-oxo-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-en-2- carboxylat. 20 mg cefotaxim natri chuẩn (ĐC) trong dung dịch A và pha loãng thành 5,0 ml với cùng dung môi 3 Dung dịch đối chiếu (2): Hòa tan 20 mg cefotaxim natri chuẩn (ĐC) và 20 mg cefoxitin natri. B, C, D A. Phổ hồng ngoại (Phụ lục 4.2) của chế phẩm phải phù hợp với phổ hồng ngoại của cefotaxim natri chuẩn (ĐC). B. Tiến hành phương pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4) Bản mỏng: Silicagel