1 SPECTINOMYCIN HYDROCLORID Spectinomycini hydrocloridum C 14 H 24 N 2 O 7 .2HCl.5H 2 O P.t.l: 495,4 Spectinomycin hydroclorid là (2R,4aR,5aR,6S,7S,8R,9S,9aR,10aS)-4a,7,9- trihydroxy-2-methyl-6,8-bis(methylamino)-decahydro-4H-pyrano[2,3- b][1,4]benzodioxin-4-on dihydroclorid pentahydrat, chất kháng khuẩn được sản xuất bởi Streptomyces spectabilis hay các phương pháp khác, phải chứa từ 95,0 đến 100,5% C 14 H 24 N 2 O 7 .2HCl, tính theo chế phẩm khan. 2 Tính chất Bột màu trắng hay gần như trắng, hơi hút ẩm. Dễ tan trong nước, rất khó tan trong ethanol 96%, thực tế không tan trong ether. Định tính A. Phổ hồng ngoại của chế phẩm (Phụ lục 4.2) phải phù hợp với phổ hồng ngoại của spectinomycin hydroclorid chuẩn (ĐC). B. Pha loãng 1,0 ml dung dịch S đến 10 ml bằng nước. Dung dịch thu được phải cho phản ứng A của phép thử ion clorid (Phụ lục 8.1). Độ trong và màu sắc dung dịch Dung dịch S: Hoà tan 2,0 g chế phẩm trong nước không có carbon dioxyd (TT) để được 20,0 ml. Pha loãng 2,0 ml dung dịch S thành 20,0 ml bằng nước. Dung dịch thu được phải trong (Phụ lục 9.2) và không màu (Phụ lục 9.3, phương pháp 2.). pH pH của dung dịch S phải t ừ 3,8 đến 5,6 (Phụ lục 6.2) 3 Góc quay cực riêng Từ +15 o đến +21 o , tính theo chế phẩm khan (Phụ lục 6.4). Dùng dung dịch S trong vòng 20 phút sau khi pha để thử. Tạp chất liên quan Không được quá 1,0%. Xác định bằng phương pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4). Bản móng: Silica gel G (TT). Dung môi khai triển: Acid acetic băng - pyridin - nước - propanol (5 : 5 : 40 : 50). Dung dịch thử: Pha loãng 2,0 ml dung dịch S thành 10 ml bằng nước. Dung dịch đối chiếu: Pha loãng 1,0 ml dung dịch thử thành 100 ml bằng nước. Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên bản mỏng 10 µl mỗi dung dịch trên. Triển khai sắc ký đến khi dung môi đi được 12 cm. Làm khô bản mỏng bằng luồng khí nóng và phun dung dịch kali permanganat 5% . Để yên bản mỏng 2 đến 3 phút. Bất kỳ vết phụ nào, ngoài vết chính, trên sắc ký đồ của dung dịch thử không được có màu đậm hơn màu của vết trên sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu. 4 Nước Từ 16,0 đến 20,0% (Phụ lục 10.3). Dùng 0,200 g chế phẩm. Tro sulfat Không được quá 1,0% (Phụ lục 9.9, phương pháp 2). Dùng 1,000 g chế phẩm. Độ vô khuẩn Nếu chế phẩm dùng để sản xuất thuốc tiêm mà không tiến hành tiệt trùng thì phải đạt yêu cầu về độ vô khuẩn (Phụ lục 13.7). Nội độc tố vi khuẩn Không được quá 0,09 IU/mg (Phụ lục 13.2). Nếu chế phẩm dùng để sản xuất thuốc tiêm mà không tiến hành loại bỏ nội độc tố vi khuẩn thì phải thử chỉ tiêu này. Chuẩn bị các dung dịch bằng cách dùng dung dịch natri hydrocarbonat 0,42%. Định lượng Xác định bằng phương pháp sắc ký khí (Phụ lục 5.2). 5 Dung dịch chuẩn nội: Hoà tan 0,150 g phenazon (TT) trong dimethylformamid (TT) để được 100,0 ml. Để yên các dung dịch thử và dung dịch chuẩn 1 giờ rồi tiến hành định lượng ngay. Dung dịch chuẩn: Cân 60,0 mg spectinomycin hydroclorid chuẩn (ĐC) vào bình định mức 20,0 ml. Thêm 10,0 ml dung dịch chuẩn nội và 2,0 ml hexamethyldisilazan (TT), lắc kỹ để hoà tan và thêm dimethylformamid (TT) đến vạch. Dung dịch thử (1): Cân 60,0 mg chế phẩm vào bình định mức 20,0 ml. Thêm 10 ml dimethylformamid (TT) và 2,0 ml hexamethyldisilazan (TT), lắc kỹ để hoà tan và thêm dimethylformamid (TT) đến vạch. Dung dịch thử (2): Cân 60,0 mg chế phẩm vào bình định mức 20,0 ml. Thêm 10,0 ml dung dịch chuẩn nội và 2,0 ml hexamethyldisilazan (TT), lắc kỹ để hoà tan và thêm dimethylformamid (TT) đến vạch Điều kiện sắc ký: Cột thuỷ tinh (1,5 m x 4 mm) được nhồi đất diatomaceous đã được silan hoá dùng cho sắc ký khí (TT) và đã được tẩm 3% (kl/kl) hỗn hợp của polyphenylmethylsiloxan (TT). Khí mang là nitrogen dùng cho sắc ký khí (TT), lưu lượng 45 ml/phút. 6 Detector ion hoá ngọn lửa. Nhiệt độ: Cột ở 200 o C, buồng tiêm và detector ở từ 200 o C đến 230 o C. Cách tiến hành: Tiêm một thể tích đã chọn của các dung dịch thử. Phép thử chỉ có giá trị khi trên sắc ký đồ của dung dịch thử (2) độ phân giải giữa pic chính và pic chuẩn nội ít nhất là 8,0. Tiêm lần lượt dung dịch thử (2) và dung dịch chuẩn. Bảo quản Trong đồ đựng kín, ở nhiệt độ không quá 30 o C. Nếu chế phẩm vô trùng thì phải bảo quản trong đồ đựng kín và vô trùng. . 1 SPECTINOMYCIN HYDROCLORID Spectinomycini hydrocloridum C 14 H 24 N 2 O 7 .2HCl.5H 2 O P.t.l: 495,4 Spectinomycin hydroclorid là (2R,4aR,5aR,6S,7S,8R,9S,9aR,10aS)-4a,7,9- trihydroxy-2-methyl-6,8-bis(methylamino)-decahydro-4H-pyrano[2,3- b][1,4]benzodioxin-4-on. tính A. Phổ hồng ngoại của chế phẩm (Phụ lục 4.2) phải phù hợp với phổ hồng ngoại của spectinomycin hydroclorid chuẩn (ĐC). B. Pha loãng 1,0 ml dung dịch S đến 10 ml bằng nước. Dung dịch thu. thử và dung dịch chuẩn 1 giờ rồi tiến hành định lượng ngay. Dung dịch chuẩn: Cân 60,0 mg spectinomycin hydroclorid chuẩn (ĐC) vào bình định mức 20,0 ml. Thêm 10,0 ml dung dịch chuẩn nội và 2,0