BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG PHAN VĂN HÀ NGHIÊN CỨU TỔNG HỢP VÀ THĂM DÒ HOẠT TÍNH SINH HỌC MỘT SỐ DẪN XUẤT CỦA AXIT URSOLIC TÁCH CHIẾT TỪ CÂY SƠN TRÀ POILAN (ERIOBOTRYA POILANEI) LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Đà Nẵng – Nă m 2011 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG PHAN VĂN HÀ NGHIÊN CỨU TỔNG HỢP VÀ THĂM DÒ HOẠT TÍNH SINH HỌC MỘT SỐ DẪN XUẤT CỦA AXIT URSOLIC TÁCH CHIẾT TỪ CÂY SƠN TRÀ POILAN (ERIOBOTRYA POILANEI) Chuyên ngành: Hóa Hữu cơ Mã số: 60.44.27 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Người hướng dẫn khoa học: TS. NGUYỄN THANH TÂM Đà Nẵng – Nă m 2011 LỜI CAM ĐOAN Tôi cam ñoan ñây là công trình nghiên cứu của riêng tôi. Các số liệu, kết quả nêu trong luận văn là trung thực và chưa từng ñược ai công bố trong bất kỳ công trình nào khác. Tác giả PHAN VĂN HÀ MỤC LỤC Trang TRANG PHỤ BÌA LỜI CAM ĐOAN MỤC LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH DANH MỤC KÍ HIỆU CÁC CÔNG THỨC HÓA HỌC MỞ ĐẦU 1 Chương 1- TỔNG QUAN 4 1.1. CÁC HỢP CHẤT TRITECPEN 4 1.1.1. Khái niệm chung 4 1.1.2. Một số khung tritecpen chính 5 1.1.2.1. Tritecpen mạch thẳng 5 1.1.2.2. Tritecpen khung dammaran 6 1.1.2.3. Tritecpen khung hopan 7 1.1.2.4. Khung lupan 9 1.1.2.5. Tritecpen khung oleanan 12 1.1.2.6. Tritecpen khung friedelan 14 1.1.2.7. Tritecpen khung taraxeran (friedooleanan) 17 1.1.3. Sinh tổng hợp các tritecpen 19 1.1.4. Hoạt tính sinh học 19 1.1.4.1. Hoạt tính chống ung thư và khối u 21 1.1.4.2. Hoạt tính chống vi rút và kháng khuẩn 22 1.1.4.3. Hoạt tính chống viêm 24 1.1.5. Một số nghiên cứu về tổng hợp các dẫn xuất của các tritecpen 24 1.2. TỔNG QUAN VỀ AXIT URSOLIC VÀ CÁC DẪN XUẤT CỦA NÓ 31 1.2.1. Axit ursolic 31 1.2.2. Một số nghiên cứu về tổng hợp các dẫn xuất của axit ursolic 33 Chương 2- THỰC NGHIỆM 36 2.1. CHIẾT TÁCH AXIT URSOLIC 36 2.2. TỔNG HỢP CÁC DẪN XUẤT Ở VỊ TRÍ C3-OH CỦA AXIT URSOLIC 37 2.2.1. Tổng hợp dẫn xuất axit 3-oxo-urs-12-en-28-oic 87 37 2.2.2. Tổng hợp dẫn xuất axit 3-hydroxyimino-urs-12-en-28-oic 88 40 2.2.3. Tổng hợp dẫn xuất axit 3-acetoxyimino-urs-12-en-28-oic 89 40 2.2.4. Tổng hợp dẫn xuất axit 3-hydrazono-urs-12-en-28-oic 90 40 2.3.TỔNG HỢP CÁC DẪN XUẤT Ở VỊ TRÍ C17-COOH CỦA AXIT URSOLIC 41 2.3.1.Tổng hợp chất axit 3β-axetyl ursolic 91 42 2.3.2.Tổng hợp dẫn xuất Methyl N-(3β-acetoxy-urs-12-en-28-oyl]-11- amino undecanoate 92 42 2.3.3.Tổng hợp dẫn xuất axit N-(3β-Hydroxy-urs-12-en-28-oyl]-11- amino undecanoic 93 43 2.3.4.Tổng hợp dẫn xuất N-(3β-acetoxy-urs-12-en-28-oyl)-1,7- diaminoheptane 94 43 Chương 3-KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 45 3.1. CHIẾT TÁCH AXIT URSOLIC 45 3.2. NGHIÊN CỨU TỔNG HỢP CÁC DẪN XUẤT CỦA AXIT URSOLIC 49 3.2.1. Phản ứng ở nhóm C3-OH của axit ursolic 49 3.2.1.1. Tổng hợp axit 3-acetocyimino-urs-12-en-28-oic 89 49 3.2.1.2. Tổng hợp axit 3-hydrazono-urs-12-en-28-oic 90 57 3.2.2. Phản ứng ở nhóm C17-COOH của axit ursolic 57 3.2.2.1.Tổng hợp axit N-(3β-Hydroxy-urs-12-en-28-oy)]-11-amino undecanoic 93 57 3.2.2.2.Tổng hợp các dẫn xuất N-(3β-acetoxy-urs-12-en-28-oyl)-1,7- diaminoheptane 94 64 3.3. NGHIÊN CỨU HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO CÁC DẪN XUẤT TỔNG HỢP ĐƯỢC 70 KẾT LUẬN 72 TÀI LIỆU THAM KHẢO 73 QUYẾT ĐỊNH GIAO ĐỀ TÀI LUẬN VĂN THẠC SĨ (BẢN SAO). DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT BuOH : Butanol 13 C-NMR : 13 C- Nuclear Magnetic Resonance COSY : Correlated Spectroscopy DEPT : Distortionless Enhancement by Porlarisation Transter EI-MS : Electron Impact Mass Spectroscopy ESI-MS : Electrospray Ionization Mass Spectrometry EtOAc : Etyl axetat EtOH : Etanol FTIR : Fourier Transform Infrared GC-MS : Gas Chromatography-Mass Spectroscopy 1 H-NMR : 1 H- Nuclear Magnetic Resonance HPLC : High Pressure Liquid Chromatography HIV : Human Immunodeficiency Virus MeOH : Metanol MPLC : Medium Pressure Liquid Chromatography IR : Infrared spectra THF : Tetrahydrofuran DANH MỤC CÁC BẢNG Số hiệu bảng Tên bảng Trang 3.1 Số liệu phổ 13 C- và 1 H-NMR (500 MHz) của axit ursolic tách ñược và số liệu dẫn trong tài liệu [39] 45 3.2 Kết quả thử hoạt tính gây ñộc tế bào của axit ursolic và các dẫn xuất tổng hợp ñược 70 DANH MỤC CÁC HÌNH Số hiệu hình Tên hình Trang Hình 1.1 Sự hình thành các tritecpen từ squalen 20 Hình 2.1 Sơ ñồ chiết, tách axit ursolic từ lá cây Sơn Trà Poilan 38 Hình 2.2 Sơ ñồ tổng hợp các dẫn xuất 89, 90 ở nhóm C3- OH của axit ursolic 39 Hình 2.3 Sơ ñồ tổng hợp dẫn xuất 93, 94 ở nhóm C17- COOH của axit ursolic 42 Hình 3.1 Phổ 1 H-NMR của axit ursolic 47 Hình 3.2 Phổ 13 C-NMR của axit ursolic 48 Hình 3.3 Phổ 1 H-NMR của chất 87 50 Hình 3.4 Phổ 13 C-NMR của chất 87 51 Hình 3.5 Phổ 1 H-NMR của chất 88 52 Hình 3.6 Phổ 13 C-NMR của chất 88 53 Hình 3.7 Phổ IR của chất 89 54 Hình 3.8 Phổ EIS-MS của chất 89 55 Hình 3.9 Phổ 1 H-NMR của chất 89 56 Hình 3.10 Phổ IR của chất 90 58 Hình 3.11 Phổ ESI-MS của chất 90 59 Hình 3.12 Phổ 1 H-NMR của chất 90 60 Hình 3.13 Phổ 13 C-NMR của chất 90 61 Hình 3.14 Phổ 1 H-NMR của chất 91 62 Hình 3.15 Phổ 13 C-NMR của chất 91 63 Hình 3.16 Phổ IR của chất 93 65 Hình 3.17 Phổ ESI-MS của chất 93 66 Hình 3.18 Phổ 1 H-NMR của chất 93 67 Hình 3.19 Phổ 13 C-NMR của chất 93 68 Hình 3.20 Phổ 1 H -NMR của chất 94 69 [...]... COOH c a axit ursolic phân l p ñư c t cây Sơn Trà Poilan c a Vi t Nam 2 -Nghiên c u ho t tính sinh h c c a các ch t t ng h p ñư c như ho t tính gây ñ c t bào, kháng khu n, kháng n m… 3 Đ i tư ng và ph m vi nghiên c u * Đ i tư ng nghiên c u -M u lá cây Sơn Trà Poilan thu hái t i r ng qu c gia Bì Dúp, Núi Bà thu c t nh Lâm Đ ng vào tháng 3 năm 2009 ñư c s y khô, nghi n nh và chi t tách l y axit ursolic. .. 27 58 Hexanolyl ursolat 27 59 But-2-inyl ursolat 27 60 Axit oleanolic 28 61 Axit clo oleanolic 28 62 Xetopentametylendiaxit ursolic 29 63 Xetoxiclopendimetylendiaxit ursolic 29 64 Xetoizopropyldiaxit ursolic 29 65 Xetopentyl amit axit ursolic 29 66 Xetoxiclopendimetylenamitaxit ursolic 29 67 Benzylamit ursolic axit 30 68 Propandiyl amit ursolic axit 30 69 Oleanolic amit 30 70 Oleanolic indole amit 31... -Th ho t tính sinh h c c a các ch t t ng h p ñư c như ho t tính gây ñ c t bào, ho t tính kháng vi sinh v t ki m ñ nh, kháng oxy hóa… 5 Ý nghĩa khoa h c và th c ti n c a ñ tài Trong khuôn kh ñ tài này, chúng tôi ñã s d ng axit ursolic tách ñư c t cây Sơn Trà Poilan ñ ti n hành nghiên c u t ng h p m t s d n xu t m i nh m tìm ki m các ch t có ho t tính lý thú, t ñó có th tìm ra các thu c phòng và ch a... l y axit ursolic -Sau khi tách ñư c axit ursolic, chúng tôi ñã ti n hành t ng h p các d n xu t amin, amit các nhóm th hydroxy v trí C-3 và cacboxyl C-28 * Ph m vi nghiên c u -Thu hái m u th c v t Chi t tách, tinh ch axit ursolic ñ s d ng làm nguyên li u ñ u -T ng h p các d n xu t m i t axit ursolic tách ñư c -Th ho t tính sinh h c c a các ch t t ng h p ñư c 4 Phương pháp nghiên c u -Thu hái m u th... u thành ph n hóa h c cây Sơn Trà Poilan c a Vi t Nam, chúng tôi ñã phân l p ñư c axit ursolic v i hàm lư ng khá cao (0.32% so v i m u khô) Vì v y, ñ t n d ng ngu n nguyên li u này và góp ph n tìm ki m nh ng d n xu t có ho t tính lý thú c a axit ursolic, ñ tài ñ nh hư ng t ng h p m t s d n xu t amin, amit vào các nhóm th hydroxy carboxyl v trí C-3 và C-28 2 M c ñích c a ñ tài -Nghiên c u t ng h p các... y, k t qu c a ñ tài s có ý nghĩa khoa h c và th c ti n 6 C u trúc c a lu n văn Lu n văn g m 81 trang, trong ñó có 02 b ng và 24 hình Ph n m ñ u g m 03 trang, k t lu n g m 01 trang và tài li u tham kh o 09 trang N i dung c a lu n văn chia làm 3 chương: Chương 1: T ng quan- 35 trang Chương 2: Th c nghi m- 09 trang Chương 3: K t qu nghiên c u và th o lu n- 27 trang 4 CHƯƠNG 1 T NG QUAN 1.1 CÁC H P CH... Oxidosqualen 3 Axit turbinaric 4 1.1.2.2 Tritecpen khung dammaran Khung dammaran (5) có c u trúc khung như các steroit, v i các nhóm th metyl -yl v trí C-4α và β, C-8β, C-10β, C-14 α và m t m ch nhánh isooct- C-17β C u hình khung dammaran ñ u d ng transi-trans-trans Trong ñó c u hình gi a khung A/B là trans (5α); B/C: trans (9α); C/D: trans (14α), c u hình d ng trans-anti-trans là d ng ph bi n và b n hơn... nhau Axit ursolic và các d n xu t có tác d ng h tr ch a b nh ung thư, kháng viêm, kháng khu n, kháng HIV và là thành ph n chính trong m ph m ñ phòng ng a và ch ng l i b nh ung thư da t i Nh t B n Do có tính ch t sinh, dư c h c thú v , nên tritecpen này cũng như d n xu t c a nó ñã thu hút s quan tâm nghiên c u c a nhi u nhà khoa h c nh m tìm ki m các ch t m i có ho t tính sinh h c cao hơn Khi nghiên. .. lupeol (43) có ho t tính gây ñ c ñ i v i các dòng t bào Hep-G2, A-431, H-4IIE v i giá tr IC50 l n lư t là 77; 101 và 77,6µM Ngoài ra, lupeol còn ñư c ng d ng trong m ph m b o v da do có tính ch t ch ng oxi hoá và kháng viêm [15] Hai h p ch t axit koetjapic và axit katonic ñư c phân l p t loài Sandoricum koetjape th hi n ho t tính gây ñ c t bào dòng P-388 v i các giá tr ED50= 0.61 và 0.11 µg/ml [51],... t bào dòng P-388 v i các giá tr ED50= 0.61 và 0.11 µg/ml [51], [52] Lupeol 43 1.1.4.2 Ho t tính ch ng vi rút và kháng khu n Epilupeol và epilupeol axetat th hi n ho t tính rõ r t ch ng vi rút gây b nh Ranikhet ph i gà [51] Các axit ursolic, axit betulinic, axit salaspermic và axit pomolic cũng ñã th hi n ho t tính kháng vi rút HIV các giai ño n phát tri n khác nhau  . GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG PHAN VĂN HÀ NGHIÊN CỨU TỔNG HỢP VÀ THĂM DÒ HOẠT TÍNH SINH HỌC MỘT SỐ DẪN XUẤT CỦA AXIT URSOLIC TÁCH CHIẾT TỪ CÂY SƠN TRÀ POILAN (ERIOBOTRYA POILANEI). 1.1.5. Một số nghiên cứu về tổng hợp các dẫn xuất của các tritecpen 24 1.2. TỔNG QUAN VỀ AXIT URSOLIC VÀ CÁC DẪN XUẤT CỦA NÓ 31 1.2.1. Axit ursolic 31 1.2.2. Một số nghiên cứu về tổng hợp các dẫn. KHOA HỌC Đà Nẵng – Nă m 2011 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG PHAN VĂN HÀ NGHIÊN CỨU TỔNG HỢP VÀ THĂM DÒ HOẠT TÍNH SINH HỌC MỘT SỐ DẪN XUẤT CỦA AXIT