TRƯỜNG ĐẠI HỌC MỞ TP. HỒ CHÍ MINH KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC   BÀI BÁO CÁO SEMINAR CHUYÊN NGÀNH ĐỀ TÀI: ĐÁNH GIÁ CÁC ĐẶC TÍNH PROBIOTIC CỦA BACILLUS TRONG ỐNG NGHIỆM PHÂN LẬP TỪ CHÁO LÊN MEN TỰ NHIÊN TỪ VÙNG MÔNG CỔ CỦA TRUNG QUỐC GV hướng dẫn: Thầy Nguyễn Văn Minh Cô Dương Nhật Linh Nhóm sinh viên: Ngô Văn Quang 30700406 Hồ Sơn Hải 30700106 Văn Đặng Hồng Cẩm 30700035 Thái Duy Tân 30700442 Nguyễn Anh Tôn 30700536 Đào Minh Thịnh 30660234 TPHCM, ngày 29 tháng 9 năm 2010. MỤC LỤC Danh mục các bảng 3 Lời mở đầu 4 Phần 1: Probiotic 5 I. Khái niệm, các định nghĩa :……………………………………………5 1 Giới thiệu về probiotic:………………………………………….5 2. Các định nghĩa:………………………………………………….6 II. Tính an toàn của probiotic:…………………………………………….6 1. Tính an tòan về probiotic trước đây và sau này:……………………6 2. Tính an tòan về probiotic trên động vật:……………………………8 3. Tính an tòan về probiotic trên người:………………………………9 4. An tòan của vi khuẩn đề kháng kháng sinh:……………………… 10 5. Nghiên cứu lâm sàng:………………………………………………11 6. Giám sát dịch tễ học:……………………………………………….11 Phần 2: Đánh giá các đặc tính probiotic của Bacillus trong ống nghiệm phân lập từ cháo lên men tự nhiên ở Inner Mongolia của Trung Quốc 12 I. Giới thiệu 12 II. Nguyên liệu và phương pháp 13 1. Phân lập Bacillus từ cháo lên men tự nhiên…………………… 13 2. Nhận dạng 16 rDNA…………………………………………… 13 3. Thử nghiệm hoạt động kháng khuẩn……………………………….15 4. Các thử nghiệm khuếch tán agar………………………………… 15 Phần 3: Kết quả và thảo luận 16 I. Sự cô lập và nhận diện của vi khuẩn Bacillus bằng kết quả phân tích trình tự gen 16S rDNA…………………………………………………………16 II. Hiệu quả của việc mô tả khả năng vận chuyển của tế bào thực vật của Bacillus…………………………………………………………… 17 III. Sự đề kháng muối mật…………………………………………………18 IV. Hoạt tính kháng sinh……………………………………………… 19 V. Kết luận…………………………………………………………………20 DANH MỤC CÁC BẢNG Bàng 1. Một số vi khuẩn sử dụng làm probiotic và có khả năng gây bệnh Bảng 2. Nhận dạng và phân loại 33 chủng Bacillus phân lập từ cháo lên men tự nhiên ở Inner Mongilia dựa trên trình tự 16S rDNA Bảng 3. Tỷ lệ sống sót của các chủng Bacillus phân lập được lựa chọn từ cháo lên men tự nhiên ở Inner Mongolia trong môi trường nuôi cấy ở pH 2.5 và dịch dạ dày nhân tạo ở pH 2.0 Bảng 4. Khả năng chịu mật của 4 chủng Bacillus được chọn Bảng 5. Khả năng chịu mật của Bacillus licheniformis IMAUB1002 ở mức độ mật khác nhau Bảng 6. Vùng ức chế (mm) của 4 chủng Bacillus được chọn Probiotics thường được sử dụng như là chất bổ sung hữu hiệu đối với động vật bằng cách cải thiện các vi khuẩn ký sinh đường ruột “cân bằng” (Fuller 1992). Hiện tại không có lớp chung cho vi khuẩn probiotic và các loại hình thương mại nhất hiện có là vi khuẩn acid lactic và vi khuẩn bifidus (Kleerebezem and Vaughan 2009). Có nhiều nghiên cứu tập trung vào Bacillus spp, Bifidobacteriumspp cho thực phẩm chức năng sử dụng chế phẩm sinh học (Kabir et al. 1997; Singh et al. 1997). Ngoài ra, một số chủng Bacillus cũng cho thấy tiềm năng để có probiotic (Cavazzoni and Adami 1993; Kumprecht and Zobac 1996). Cháo lên men tự nhiên (acidic-guel), một thực phẩm lên men truyền thống ở Inner Mongolia của Trung Quốc, có thể sử dụng như là nguồn tiềm năng để cô lập probiotics. Nó được sản xuất tại hộ gia đình từ nguyên vật liệu ngũ cốc khác nhau như: cỏ đuôi chồn, hạt kê và gạo. Hạt kê và gạo được lên men tự nhiên bởi nước bã canh chua trong một bình ở nhiệt độ phòng để qua đêm và sau đó được sử dụng để nấu cho đến khi chín. Do đó, cháo lên men được làm đồ ăn với cả hai hương vị thú vị và có chức năng nâng cao sức khỏe. Bacillus là một chi của vi khuẩn hình que và là chi của bộ phận Firmicutes. Bacillus là một loài vi khuẩn hiếu khí hoặc hiếu khí tùy nghi, và xét nghiệm dương tính đối với enzyme catalase (Turnbull 1996). Bacillus được xem là dễ dàng lây lan từ môi trường tự nhiên qua nhiều loại thức ăn thực vật (Roberts et al 1982). Một số chủng vi khuẩn Bacillus đã được phân lập từ các loại thực phẩm lên men truyền thống bao gồm ngũ cốc khác nhau, họ đậu và thực vật dựa trên các loại thực phẩm lên men (Gadaga et al. 1999;. Roy et al. 2007; Valero et al. 2007). Đặc tính chức năng của các loại thực phẩm ngũ cốc lên men truyền thống dựa trên liên kết chặt chẽ giữa vi sinh vật có lợi và vi khuẩn Bacillus đã chứng minh là gây một tác dụng đồng lên men với các vi sinh vật khác (Blandino et al. 2003;. Mante et al. 2003). So với loài lactobacillus mà chủ yếu nhạy cảm với điều kiện sinh lý bình thường, một số chủng trực khuẩn có thể tồn tại ở nhiệt độ cao, độ chua của dạ dày và các axít mật (Hyronimus et al. 2000).Bacillus coagulans Ganeden BC30 TM được chứng minh là an toàn cho con người (Endres et al. 2009). Hơn nữa, Bacillus subtilis (Hong et al. 2009) đã được phân lập từ đường tiêu hóa của con người và hội sinh ở ruột. Do đó, trực khuẩn cho thấy một cái mới lạ và nguồn đầy hứa hẹn của các vi khuẩn probiotic. Probiotic được định nghĩa là vi sinh vật sống có thể chống lại dạ dày, mật, và tuyến tụy tiết ra (Del piano et al. 2006). Những đặc điểm có thể được quan sát trong ống nghiệm và có thể được sử dụng để lựa chọn các chủng (Salminen và Wright von et al.1998). Mục tiêu của nghiên cứu để đánh giá tính chất tiềm năng probiotic (kháng pH thấp, dịch dạ dày mô phỏng, muối mật và hoạt tính kháng khuẩn) của một số trực khuẩn phân lập từ cháo lên men tự nhiên trong ống nghiệm với một nỗ lực để đưa vào danh sách có thể sử dụng được trong y học như là probiotics. Phần 1: PROBIOTIC I. Khái niệm, các định nghĩa về probiotics: 1.Giới thiệu về probiotic:[1] Theo (Fuller,1922) , probiotic là những vi khuẩn sống mà nó có ảnh hưởng tốt đến vật chủ bằng cách cân bằng hệ vi khuẩn đường ruột và có lợi cho vật chủ. Định nghĩa này được mở rộng ra probiotic bao gồm cả một vi khuẩn hay một hệ vi khuẩn sống được dùng cho người hay động vật ảnh hưởng tích cực đến vật chủ bằng cách cải thiện tính chất hệ vi khuẩn đường ruột giúp cho dễ tiêu hóa ,chúng cũng tác động trực tiếp đến hệ tiêu hóa . Trong giới hạn của sự nghiên cứu , probiotic có giới hạn rõ ràng là hệ vi khuẩn chỉ phù hợp với một hoặc một vài sản phẩm (theo WHO, 1994). Về lịch sử thì vi khuẩn và nấm men rất có ích trong nông nghiệp và khoa học dinh dưỡng . Ví dụ phổ biến như là sử dụng vi khuẩn (chủ yếu là vi khẩn Lactic) cho những sản phẩm lên men như cải bắp (món dưa cải) và những sản phẩm lên men từ sữa như sữa chua, ngoài ra còn có phomat và kefir. Còn nấm men (chủ yếu là Saccharomyces cerevisiae) cho sản phẩm như bánh mì, bia và rượu. Hệ thống nghiên cứu trong probiotic cho người bắt đầu sử dụng vào thế kỉ 20. Elie Metchnikoff là nhà sinh học Nga người mà làm việc vào khoảng 1900 ở Institut Pasteur tại Pháp học được sự màu nhiệm, kỳ vọng có đời sống thọ của người Cô –đắc ở Bungari. Ông ấy kỳ vọng vào việc nâng cao tuổi thọ lên 115 năm và họ đã sử dụng nhiều sản phẩm lên men từ sữa. Ông tìm ra tên thích hợp cho sự lên men Bacillus bulgaricus và sau đó phân loại là Lactobacillus bulgaricus mà được sử dụng lần nữa giúp giảm được bệnh đau dạ dày ở người sớm vào năm 1920. Có một chủ đề hấp dẫn về probiotic trong suốt 10 năm từ 1960-1970 khi họ đã tái phát hiện khoa học dinh dưỡng ở người và động vật. Sản phẩm có hiệu lực đầu tiên về khoa học dinh dưỡng trên động vật là đáp ứng nhu cầu đặc trưng là chất cho thêm vào thức ăn của động vật. Không xuất hiện ở thị trường châu Âu cho tới giữa 1980. Ngày nay, nguồn khoa học dinh dưỡng hiện đại ở động vật có sự xuất hiện đầy đủ những định nghĩa của probiotic bao gồm nhóm vi khuẩn Lactic, bào tử Bacillus và nấm men. 2. Các định nghĩa: Probiotic là những vi sinh vật như vi khuẩn hay nấm men mà có thể thêm vào thực phẩm với mục đích điều chỉnh quần thể sinh vật đường ruột của sinh vật chủ (Parker, 1974). Định nghĩa của Guamer và Schaafsma (1998): " những vi sinh vật sống, nếu được đưa vào có thể với một số lượng đủ có thể đem lại sức khoẻ cho người sử dụng”. Định nghĩa của FAO/WHO[4]: “Probiotic là những vi thể sống mà với số lượng được kiểm soát hợp lý sẽ giúp bồi bổ sức khoẻ cho người tiếp nhận”. Vậy: Probiotic là những vi sinh vật như vi khuẩn hay nấm men nếu được đưa vào cơ thể với số lượng được kiểm soát hợp lí sẽ đem lại sức khỏe cho người sử dụng. Ngoài ra, chúng có thể được thêm vào sản phẩm lên men sữa, và cũng góp một phần trong việc hình thành sản phẩm lên men, hoặc được bổ sung dưới dạng bột đông khô. II. Tính an toàn của probiotics: 1. Tính an toàn về probiotic trước đây và hiện nay:[2] Hiện tại, thông thường probiotic có lợi ích chung là bảo vệ hệ đường ruột và cải thiện khả năng tiêu hóa. Những chủng vi khuẩn khác thì đang được nghiên cứu cho khả năng chữa trị bệnh viêm ruột, ức chế vi khuẩn gây bệnh, cải thiện bệnh tiêu chảy của những bệnh nhân khác, ngăn ngừa bệnh sâu răng, và làm giảm bớt chứng dị ứng. Đó là những yêu cầu đối với probiotic có vai trò trong sự miễn dịch và ngăn chặn được sự phát sinh bệnh ung thư. Trong khi nghiên cứu tập trung trên probiotic sao cho phù hợp với hệ vi khuẩn đường ruột bao gồm dùng qua đường uống, đường hô hấp trên hay niệu sinh dục (dùng tại chỗ). Probiotic thông thường là những chủng Lactobacillus và Bifidobacterium. Ngoại lệ trong số đó cũng có loài Enterococcus và Saccharomyces .Các chủng này được coi là an toàn bởi vì chúng đã được sử dụng từ rất lâu trong sản xuất bơ sữa. Có những vi khuẩn khác không phải là probiotic thích nghi sống trong vùng ruột non và chúng thường là điều kiện dẫn đến sự nhiễm trùng và gây bệnh. Hệ vi sinh vật được xem là probiotic khi có ảnh hưởng tích cực trong sản phẩm bơ sữa và những thực phẩm lên men truyền thống. Thành phần của các sản phẩm probiotic trong nhiều thế kỉ thì không có tác dụng phụ rõ ràng. Probiotic tiêu thụ trong thực phẩm và bổ sung vào chế độ ăn kiêng được công nhận là an toàn theo GRAS. Và không cần thực hiện thêm một nguyên tắc nghiêm ngặt nào hơn đối với probiotic, mà đòi hỏi phải được cải thiện hoặc ngăn chặn bệnh khi đưa vào phân tích “lịch sử của tính an toàn khi sử dụng “ như là một tiêu chuẩn phân loại an toàn đối với vi sinh vật thực phẩm . Trước đây định nghĩa này chưa được xác định pháp lý. Để khắc phục tình trạng này, liên đoàn Quốc tế ngành sữa và thực phẩm châu Âu cùng nhau xem xét hệ vi sinh vật và lịch sử sử dụng trong sản xuất thực phẩm. Kiểm tra danh sách phân loại và ứng dụng của vi khuẩn Lactic ở loài Enterococcus và Streptococcus, nấm men và nấm mốc. Nó mở ra sự thay đổi định nghĩa về vi sinh vật là thêm vào hay bớt ra với những thay đổi trong nguyên tắc phân loại. Bắt đầu là mục lục có hệ thống các vi sinh vật được cho là hợp lý và cho là an toàn. Vì mức độ sử dụng của chúng trong thực phẩm thì không gây bệnh Nó quy định căn bản cho những chủng, loài, giống về tính an toàn và nguồn gốc từ những giống vi khuẩn mới thì luôn luôn làm ra những sản phẩm probiotic mới. Mức độ an toàn hợp lý của vi khuẩn probiotic mới thì không thể được giả đinh. Trước khi kết hợp của những giống mới trong sản phẩm hiệu lực của chúng phải được đánh giá cẩn thận và sự đánh giá phải dựa vào mức độ an toàn của vi sinh vật trong sản phẩm. Người tiêu dùng chống lại sự biến đổi gen của vi sinh vật trong sản phẩm. Như vậy sự biến đổi gen của probiotic thì ít có khả năng được sử dụng gần đây. Ngoại trừ có thể có của các ứng dụng lâm sàng. Và đã chứng tỏ một probiotic Lactococcus lactics đã tiết ra cytokine interleukin (IL)- 10 ngăn ngừa viêm kết tràng trong thí nghiệm trên chuột. Một chủng tái tổ hợp của Bacilus subtilis 2335 được dùng trong sản xuất protein với tính chất kháng khuẩn và virus là tăng hiệu quả trị liệu trên chuột. Từ việc thí nghiệm trên một loài chuột người ta đã phát triển hơn và ứng dụng điều trị cho người theo đánh giá yêu cầu về mức độ an toàn đối với probiotic theo GMO. Việc chứng minh tính hiệu lực của probiotics đã mang lại những cơ hội lớn để phát triển đối với các sản phẩm cho người và động vật. Việc bổ sung những chủng vi khuẩn mới trong thực phẩm và các sản phẩm điều trị cần được xem xét lại tính an toàn. Những sản phẩm probiotic có yêu cầu về dinh dưỡng chức năng hoặc điều trị. Sự khác biệt giữa những hình thức bổ sung vào chế đô ăn hoặc uống thuốc đang là những thách thức để điều chỉnh phù hợp với người tiêu dùng. Bằng chứng cho sự an toàn và hiệu quả của probiotic gần đây được đưa vào những nghiên cứu nhỏ.Vi khuẩn lactic và nấm men dùng trong sản xuất các loại thực phẩm lên men truyền thống được xem là an toàn mà không có bất kì tiêu chuẩn khoa học nào bởi vì chúng tồn tại rất rộng rãi và sự hiện diện của chúng không gây bất lợi nào. Sự giới thiệu một probiotic mới đòi hỏi phải có những chỉ tiêu an toàn, được đề ra bao gồm bản chất của vi khuẩn, cũng như sự hoạt động của enzym, sự đề kháng kháng sinh và sự nhiễm trùng. 2. Tính an toàn probiotic trên động vật: [2] Việc sử dụng probiotic ở động vật và nuôi trồng thủy sản thì được đánh giá cao.Probiotic giúp cải thiện sức khỏe của động vật, giúp tăng trọng và ngăn chặn tác nhân gây bệnh. Sự lạm dụng kháng sinh trong ngành chăn nuôi và khả năng đề kháng kháng sinh đã làm tăng mối quan tâm đến probiotics. Việc sử dụng probiotics trong thực phẩm được đề xuất rằng có thể làm giảm nguy cơ gây bệnh truyền từ thực phẩm sang người. Thí nghiệm phân lập E.faecalis và E faecium từ người, gà, lợn có tính nhạy cảm đối với 12 chủng vi sinh khác và mã hóa gen đề kháng bằng phương pháp PCR. Những sự kết hợp của tính đề kháng kháng sinh được giám sát trong quá trình phân lập mẫu từ người và động vật và các gen mã hóa cho tính đề kháng đã được phát hiện. Ủy ban khoa học châu Âu (EC) về dinh dưỡng động vật (2003) đã khuyến cáo rằng, những giống vi khuẩn trước đây có thể chấp nhận như một probiotic động vật thì bản chất của gen đề kháng kháng sinh phải được xác định. Đối với các loài biết được bản chất của sự đề kháng kháng sinh ví dụ như khả năng đề kháng vancomycin của lactobacillus, cần xác nhận các gen đề kháng chưa được biết đến. Những chủng mang gen đề kháng kháng sinh được sử dụng trong y dược thì không nên bổ sung vào thức ăn chăn nuôi trừ khi vi khuẩn đó có đột biến trên gen đề kháng kháng sinh. Chính sách này sẽ ngăn chặn được việc sử dụng các vi khuẩn có khả năng truyền gen kháng kháng sinh sang các vi khuẩn khác làm probiotic bổ sung vào thức ăn chăn nuôi. Điều này cũng hạn chế ứng dụng của probiotic cho người. Thực tế probiotic cần thiết được bổ sung vào thức ăn chăn nuôi trong nông nghiệp và nuôi trồng thủy sản và an toàn đối với người. Probiotic sử dụng cho động vật có nguy cơ nhiễm vào thức ăn của người hoặc truyền khả năng đề kháng kháng sinh, do đó nó cần được chứng minh là an toàn đối với người và động vật. Sự bám dính lên niêm mạc đường tiêu hóa của vi khuẩn probiotic được xem là cơ chế quan trọng để ngăn chặn các tác nhân gây bệnh. 3. Tính an toàn của probiotic trên người: [3] Những tiêu chuẩn an toàn về probiotic được đề cập rất nhiều. Một vấn đề gây tranh cãi là có nhất thiết probiotic phải bắt buộc có nguồn gốc từ người hay không.Tuy nhiên hầu hết các chủng probiotic được sử dụng thành công hiện nay đều có nguồn gốc từ người.Ngoài ra cũng có những tranh luận khác cho rằng chức năng hoạt động của probiotic sẽ tốt hơn trong một môi trường mà có những tính chất ban đầu mà chúng được phân lập( chẳng hạn như đường ruột của người). Khía cạnh an toàn bao gồm: • Có định danh chính xác • Những chủng sử dụng cho người tốt nhất là có nguồn gốc từ người • Được phân lập từ đường tiêu hóa của người khỏe mạnh • Được chứng minh là không có khả năng gây bệnh • Không liên quan tới bệnh tật, (nhiễm trùng nội mạc cơ tim,hay gây rối loạn tiêu hóa) • Không gây khử liên hợp muối mật • Đặc điểm di truyền ổn định • Không mang các gen đề kháng kháng sinh có thể truyền được. Bảng 1: Một số vi khuẩn sử dụng làm probiotic và có khả năng gây bệnh 4. An toàn của vi khuẩn đề kháng kháng sinh: [3] Việc sử dụng kháng sinh một cách bừa bãi ở người và thú y đã góp phần gia tăng tình trạng đề kháng kháng sinh và dẫn đến vấn đề nghiêm trọng trong việc điều trị nhiễm trùng do tự nhiên hoặc mắc phải. Đề kháng tự nhiên được xem như là một đặc điểm tự nhiên của loài, trong khi đó đề kháng mắc phải là do những đột biến về di truyền hay thu được từ gen của những vi khuẩn đề kháng kháng sinh khác. Vi khuẩn Lactobacillus có khả năng đề kháng tự nhiên với nhiều loại kháng sinh, nhưng trong hầu hết các trường hợp thì các chủng này không có khả năng truyền gen đề kháng kháng sinh. Các chủng Lactobacillus có gen đề kháng kháng sinh không truyền được chưa hẳn được xem là an toàn khi sử dụng một vài chủng Lactobacillus như L. rhamnosus, L. casei có tính đề kháng tự nhiên dối với vancomycin.đã có một lịch sử được sử dụng lâu dài một cách an toàn như là probiotic, và không có biểu hiện nào cho thấy chúng truyền gen đề kháng này cho những vi khuẩn khác. 5. Nghiên cứu lâm sàng: [2] Tên vi sinh vật Khả năng gây bệnh Lactobacillus Không gây bệnh, đôi khi gây nhiễm trùng cơ hội ở các bệnh nhân suy giảm miễn dịch Streptococcus Phần lớn không gây bệnh, một số gây nhiễm trùng cơ hội Enterococcus Một vài chủng là tác nhân gây bệnh cơ hội với hoạt tính và có khả năng đề kháng kháng sinh. Bifidobacterium Phần lớn không gây bệnh và một số gây nhiễm trùng ở người Saccharosemyce s Phần lớn không gây bệnh, một số gây nhiễm trùng ở người. [...]... phân lập từ máu không thay đổi trong báo cáo ở Phần Lan các quốc gia có tỷ lệ trung bình hằng năm của nhiễm lactobacillus ước tính là 0.29/100.000 người/năm Nghiên cứu này cung cấp bằng chứng bằng mức tiêu thụ của L rhamnosus GG đã không dẫn đến sự gia tăng tương ứng trong lactobacillus nhiễm trùng máu Phần 2: Đánh giá các đặc tính probiotic của Bacillus trong ống nghiệm phân lập từ cháo lên men tự nhiên. .. cháo lên men tự nhiên: Mẫu thu Mười sáu mẫu cháo lên men tự nhiên được thu thập từ các vùng khác nhau của Mông Cổ Các mẫu được lưu giữ trong thùng đá và vận chuyển đến phòng thí nghiệm của chúng tôi để phân tích trong vài giờ pH của các mẫu đã được xác định bằng cách sử dụng giấy pH Phân lập Bacillus Một ml mẫu được chuyển vô trùng vào các ống 1,5 ml EP, sau đó ngâm trong nước nóng ở 90oC trong 10 phút... kháng khuẩn của Bacillus licheniformis IMAUB1002 bị cô lập để cô lập, đặc điểm và xác định các hợp chất kháng khuẩn sản xuất chống lại các mầm bệnh Kể từ khi một số các chủng vi khuẩn Bacillus cho thấy tính chất thú vị kháng khuẩn, đó cũng là hữu ích để nghiên cứu tính probiotic của chúng V Kết luận 33 chủng Bacillus được phân lập từ 16 mẫu cháo lên men truyền thống ở Inner Mongolia của Trung Quốc và... động của 5 mầm bệnh trong thực phẩm Kết quả cho thấy rằng Bacillus licheniformis IMAUB1002 cần được xem xét như là một probiotic tiềm năng Nghiên cứu sâu hơn nữa sẽ tập trung đánh giá đặc tính của những chế phẩm sinh học trong cơ thể và làm rõ chức năng của các đặc tính khác để sử dụng nó trong sản xuất thực phẩm chức năng trong tương lai II.Nguyên liệu và phương pháp: 1 Phân lập Bacillus từ cháo lên men. .. loài các chỉ số chưa biết được đưa ra kết quả phân tích Bằng việc so sánh trình tự gen 16S rDNA của các cá thể cô lập và cá thể điển hình Những cá thể cô lập được quan tâm như là 1 loài khi điểm tương đồng của chúng hơn 99% Bảng 2: Nhận dạng và phân loại 33 chủng Bacillus phân lập từ cháo lên men tự nhiên ở Inner Mongilia dựa trên trình tự 16S rDNA Loài Bacillus licheniformis Bacillus firmus Bacillus. .. đợi để có thể phát triển được trong đường tiêu hóa (Salminen et al 1996) 11 chủng (33.33%) của Bacillus từ việc lên men cháo tự nhiên của người Mông Cổ có thể phát triển, tăng trưởng trung bình tại PH 2.5 và tỷ lệ sống là hơn 90% Hơn nữa 6 chủng sống sót tốt trong dịch vị với PH 2.0 sau 3 giờ ủ (Hyronimus et al 2000) đã báo cáo chỉ có Bacillus laevolacticus DSM6475 có thể sống tại PH 2.5 sau 3 giờ ủ với... Inner Mongolia của Trung Quốc I Giới thiệu: Có tất cả 33 chủng Bacillus được phân lập từ 16 mẫu cháo lên men tự nhiên ở Inner Mongolia của Trung Quốc và được xác định bằng phân tích trình tự 16S rDNA Đặc tính của chế phẩm vi sinh bao gồm acid, khả năng chịu mật và chịu được dịch tiêu hóa nhân tạo cũng như sự ức chế vi khuẩn gây bệnh đã được áp dụng để sàng lọc Bacillus Sau khi lựa chọn sơ bộ, trong đó có... bào sinh dưỡng của Bacillus thì rất dễ tiếp xúc với tác động của dịch mô phỏng dịch da dày với một sự giảm xuống những tế bào sống sót hơn 98% trong vòng 5 phút Như vậy kết quả của chúng tạo ra tiềm năng probiotic có lợi từ những giống đã cấy phân lập trong thời gian hiện tại sự nguyên cứu chắc chắn thừa hưởng những giống tự nhiên được lên men đông lạnh III Sự đề kháng muối mật Bốn giống được chọn với... biệt giữa các phương tiện của phương pháp điều trị đã được thử nghiệm bởi ANOVA ở mức ý nghĩa của P . SINH HỌC   BÀI BÁO CÁO SEMINAR CHUYÊN NGÀNH ĐỀ TÀI: ĐÁNH GIÁ CÁC ĐẶC TÍNH PROBIOTIC CỦA BACILLUS TRONG ỐNG NGHIỆM PHÂN LẬP TỪ CHÁO LÊN MEN TỰ NHIÊN TỪ VÙNG MÔNG CỔ CỦA TRUNG QUỐC GV hướng. Đánh giá các đặc tính probiotic của Bacillus trong ống nghiệm phân lập từ cháo lên men tự nhiên ở Inner Mongolia của Trung Quốc I. Giới thiệu: Có tất cả 33 chủng Bacillus được phân lập từ 16. 33 chủng Bacillus phân lập từ cháo lên men tự nhiên ở Inner Mongilia dựa trên trình tự 16S rDNA Bảng 3. Tỷ lệ sống sót của các chủng Bacillus phân lập được lựa chọn từ cháo lên men tự nhiên ở