Ministry of Agriculture & Rural Development BÁO CÁO TIẾN ĐỘ CỦA DỰ ÁN CHẨN ĐOÁN VÀ KHỐNG CHẾ BỆNH TIÊU CHẢY Ở LỢN CON TRƯỚC CAI SỮA CARD Project 001/04VIE MỐC DỰ ÁN SỐ 8 : BÁO CÁO TỔNG KẾT Tháng 4, 2010 Mục lục 1. CÁC THÔNG TIN Về CÁC ĐốI TÁC: 3 4. ĐặT VấN Đề & CƠ Sở KHOA HọC: 6 5. TIếN Độ ĐÃ THựC HIệN TớI NGÀY BÁO CÁO 6 5.3 LợI ÍCH CủA CÁC Hộ CHĂN NUÔI NHỏ: 15 5.4 TĂNG CƯờNG NĂNG LựC 16 5.5 CÔNG Bố THÔNG TIN ĐạI CHÚNG 16 5.6 QUảN LÝ Dự ÁN 16 6. Về MộT Số VấN Đề CÓ LIÊN QUAN 17 7. MộT Số VấN Đề Về VIệC THựC HIệN VÀ TÍNH BềN VữNG 17 8. CÁC BƯớC CÓ TÍNH CHấT TIÊN QUYếT TIếP THEO 18 9. KếT LUậN 18 1. Các thông tin về các đối tác: Tên dự án: Chẩn đoán và khống chế bệnh tiêu chảy ở lợn con trước cai sữa Đối tác phía Việt nam Viện Thú Y (NIVR) Trưởng dự án phía Việt nam TS. Trương Văn Dung Đối tác phía Australia The University of Queensland/Victorian Department of Primary Industry Những thành viên chính phía Australia Dr Darren Trott, Dr Ian Wilkie, Dr Tony Fahy Ngày bắt đầu 13/4/2005 Ngày kết thúc (ban đầu) 1/2007 Ngày kết thúc (sau khi thay đổi) 4/2007 Thời gian báo cáo 3/2006 – 3/2008 và bao gồm các các số liệu từ 2009/2010 Các đầu mối liên lạc: Phía Australia: Trưởng dự án Tên Dr Darren Trott Telephone: 617 336 52985 Chức vụ PGS về Vi sinh vật học Thú Y Fax: 617 336 51355 Cơ quan công tác Trường Thú Y, thuộc trường Đại học Tổng hợp Queensland Email: d.trott@uq.edu.au Phía Australia: Liên lạc về hành chính Tên Melissa Anderson Telephone: 61 7 33652651 Chức vụ Chủ nhiệm văn phòng các dự án nghiên cứu Fax: 61 7 33651188 Cơ quan công tác Trường Đất và Thức ăn, thuộc trường Đại học Tổng hợp Queensland Email: Phía Việt Nam Tên Dr Cu Huu Phu Telephone: 84 4 8693923 Chức vụ Trưởng Bộ môn Vi trùng Fax: 84 4 8694082 Cơ quan công tác NIVR Email: cuhuuphu@netnam.org.vn 2. Tóm tắt dự án: Dự án được xây dựng nên để nâng cao năng suất chăn nuôi tại các nông hộ nhỏ ở Việt nam thông qua việc tăng cường quản lý thú y, đặc biệt là giai đoạn lợn trước cai sữa. Bằng cách tư vấn và giao tiếp với những người nông dân và thú y cơ sở, một chương trình chăn nuôi thích hợp sẽ được thiết lập và xây dựng nên. Mô hình này sẽ tập trung vào giai đoạn lợn con trước cai sữa - là giai đoạn mà các thiệt hại về kinh tế là lớn nhất. Mô hình này bao gồm các quy trình về quản lý chăm soc nuôi dưỡng đàn lợn một cách chung nhất. Việc chuyển giao các kết quả của mô hình này sẽ được tiến hành thông qua các chương trình tập huấn cho các thú y cơ sở và một số nông dân đã được chọn lựa. Ngoài chương trình quản lý, nuôi dưỡng chăm sóc đàn lợn, dự án cũng sẽ thiết lập và tiế n hành các phương pháp chẩn đoán phù hợp cho việc xác định các chủng vi khuẩn có độc lực có vai trò chính trong gây bệnh Colibacillosis ở lợn, đồng thời cũng tiến hành cải thiện tốc độ và mức độ chính xác của các chẩn đoán trong phòng thí nghiệm. Phần thứ 3 của dự án là nâng cao khả năng và hiệu quả chế tạo một loại vacxin E. coli nội địa. Cụ thể, vacxin này sẽ có chứa chủng vi khuẩn phân lập được duy nhất tại Việt Nam như đã được chỉ ra trong các nghiên cứu trước đây - đó chính là một tác nhân quan trọng gây tiêu chảy cho lợn trước cai sữa ở một số tỉnh, và có thể là ở tất cả các tỉnh của Việt Nam. 3. Tóm tắt kế hoạch: Báo cáo này tổng kết này trình bày các tiến độ công việc sau đã được thực hiện (có liên quan tới các mục tiêu và các công việc đã được mô tả trong đề cương) 1. Các số liệu về an toàn và hiệu lực của vacxin (Chế tạo và thử nghiệm vacxin E. coli sản xuất trong nước với quy mô nhỏ và thử nghiệm trên thực địa - Logframe Reference 1) 2. Kế hoạch về khống chế bệnh tiêu chảy và ghi chép các dữ liệu về chăn nuôi tại 10 trại đã được chọn lọc (5 trại thí nghiệm và 5 trại đối chứng trong thời gian 12 tháng) (Xây dựng kế hoạch khống chế bệnh tiêu chảy trước cai sữa bằng cách xây dựng mô hình cải tiến liên tục - Logframe Reference 2a và 2b) 3. Chế tạo huyết thanh đa giá và PCR, bao gồm cả kỹ thuật chẩn đoán nhanh kháng nguyên bám dính loại mới (Nâng cao năng lực chẩn đ oán bệnh tiêu chảy lợn trước cai sữa - Logframe reference 3) Các tiến độ của dự án đã đạt được đối với 3 mục tiêu trên, theo đúng như các nội dung đã đặt ra như trong đề cương được xây dựng trước đó, vẫn còn một vài vấn đề tồn đọng trong quá trình nhận biết loại kháng nguyên bám dính mới có mặt trong các chủng E. coli O8 lưu hành tại Việt Nam (mà tạm thời có thể được đặ t tên là F19), cũng như là trong xây dựng chiến lược khống chế bệnh tiêu chảy với 1 phương án khả thi. Các nỗ lực cuối cùng trong việc tinh chế kháng nguyên bám dính loại mới này đã đạt được với rất nhiều thành công vào giữa năm 2010 với sự hỗ trợ nguồn kinh phí từ trường ĐH Adlaide và hiện nay, chúng tôi đang đợi các kết quả giải mã trình tự các amino acid và gen đối với loại kháng nguyên bất thường này. Trong 1 thử nghiệm quy mô nhỏ được tiến hành tại NIVR, ETEC vacxin (bao gồm các chủng F4, F5 và F19) đã được chứng minh là an toàn và có hiệu lực khi tiêm cho lợn nái có chửa (2 liều vào lúc 5 và 2 tuần trước khi đẻ). Hiện nay, vacxin này đã đang được dùng thử nghiệm tại một số trại tại miền Bắc Việt Nam và chỉ giới hạn ở mục đích nghiên cứu, với các phản hồi tốt từ các trại về hiệu quả của vacxin đối với việc phòng bệnh tiêu chảy do E. coli gây ra, đồng thời cũng không gây ra các phản ứng phụ. Vacxin cũng đã được chế tạo và cung cấp cho dự án CARD 004/05VIE và sử dụng ở các nông hộ chăn nuôi nhỏ ở miền Trung Việt Nam, như một phần của mô hình CPI nhằm đưa các thực hành chăm sóc nuôi dưỡng tốt nhất vào trong kế hoạch cải tiến chăn nuôi có tính khả thi. Thử nghiệm quy mô nhỏ cũng đã chỉ ra rằng vacxin đã có hiệu quả làm giảm đáng kể sự xuất hiện tiêu chảy nói chung và các nghiên cứu của đ àn tiêm vacxin đã cho thấy lợn bị tiêu chảy nhưng không phải do ETEC, như vậy là tiêu chảy không phải do vi khuẩn E. coli độc. Các số liệu chăn nuôi theo dõi tại 5 trại thử nghiệm và đối chứng trong thời gian >12 tháng đã được phân tính và tính toán thống kê sinh học. Kết quả cho thấy các trại thử nghiệm có tỷ lệ chết trung bình trước cai sữa thấp hơn hẳn so với các trại đối chứng (8.6% ± 3.6 so với 15.6 ± 4.3; p<0.05). Một c ải tiến rộng rãi hơn có thể đã bị sai lệch do kích cỡ mẫu nhỏ, nhưng các vấn đề trong việc tiếp nhận mô hình CIP cũng đã có các tác động nhất định. Vấn đề chính gặp phải trong các chuyến đi thực tế tại các trại là sự tiếp thu không đầy đủ của những người quản lý chăn nuôi tại các trại về các kỹ năng, kiến thức và các lới khuy ến cáo. Bởi vậy, chúng tôi đã áp dụng một chương trình Tập huấn cho các cán bộ chủ chốt từ đầu tới cuối trong khuôn khổ dự án CARD004/05VIE mà trong đó, chủ yếu đã được áp dụng thành công ở các nông hộ chăn nuôi nhỏ tại các tỉnh miền Trung Việt Nam. Máy PCR và các bộ kít chẩn đoán nhanh được tiến hành mua trong khuôn khổ dự án tiếp tục được sử dụng cho các nghiên cứu của NIVR về bệnh tiêu ch ảy. Một phân tích đầy đủ về các kết quả chẩn đoán về tiêu chảy trước và sau cai sữa, cùng với các kết quả về thử nghiệm an toàn và hiệu lực của vacxin đã được TS. Do Ngoc Thuy trình bày dưới dạng báo cáo tại Hội nghị AAAP tại Hà Nội vào 09/2008. Một điều tra đối với 117 mẫu phân từ lợn trước cai sữa bị tiêu chảy thu được từ các trại quy mô lớn và 45 mẫu từ các nông h ộ nhỏ đã cho thấy sự xuất hiện của rất nhiều tác nhân gây bệnh ở cả 2 hình thức chăn nuôi, tuy nhiên, chỉ các trại nuôi quy mô lớn là có các trường hợp tiêu chảy do 1 nguyên nhân đơn lẻ. Trong đó các nguyên nhân phổ biến nhất là RTGV và TGEV, thường có mặt cùng với nhau, cùng với ETEC ở các lợn lớn hơn. Kết quả này đã khẳng định rằng việc chăm sóc lợn nái và lợn con trong giai đoạn trước cai sữa ở cả 2 hình thức chăn nuôi tại Việt Nam là chưa được tốt, điều này sẽ được tập trung chính vào các công việc của dự án 004/05VIE Đặc tính độc lực của các chủng ETEC phân lập được từ các trường hợp tiêu chảy trước và sau cai sữa đã có những kết quả đáng chú ý. Mười loại gen đã được xác định là có liên quan đến các loại tổ hợp gây bệnh nhất định của E. coli trong các nghiên cứu khác. Các gen này bao gồ m Paa, AIDA-1, EAST-1, stx2 (thường gây ra bệnh phù đầu) và Aero (thường là dấu hiệu của E. coli gây bệnh ngoài đường ruột) đã được phát hiện thấy trong số các chủng ETEC thu thập được. Trong tiêu chảy trước cai sữa, F4:Paa:STa:STb:LT:EAST-1 vẫn là tổ hợp phổ biến nhất và Paa:STa:STb:LT:EAST-1 vẫn là các yếu tố gây bệnh đánh dấu cho tổ hợp các yếu tố gây bệnh của các chủng O8 F19. Tổ hợp này phổ biến thứ 2 trong việc gây bệnh tiêu chảy cho l ợn trước cai sữa tại Việt Nam. Trong tiêu chảy sau cai sữa, tổ hợp chính là có liên quan tới F18, hơn là f4 và các chủng có mang F18 cũng mang cả độc tố Stx2, điều đó khẳng định rằng các chủng này có khả năng gây ra cả tiêu chảy sau cai sữa và phù đầu ở lợn. Tóm lại, vacxin do NIVR chế tạo đã được chứng minh là an toàn, hiệu quả, nên phải được sớm đăng ký với các cơ quan có thẩm quyền để có thể sớm được đưa vào sản xuất. Một thử nghiệm trên thực địa đang được tiến hành và sẽ kết thúc vào tháng 11 năm 2010 và trên cơ sở các số liệu này, nên tìm kiếm các đối tác sản xuất vacxin trong nước như NAVETCO để tiến hành sản xuất và phân phối sản phẩm này. Một số lượng lớn các tác nhân gây bệnh đã được phân lập từ các lợn tiêu chảy trước cai sữa đã xác định r ằng cần phải tập trung hơn để phòng bệnh tiêu chảy cho lợn bằng các biện pháp như chăn nuôi và quản lý đàn, sử dụng NIVR vacxin, sử dụng các loại thuốc trị bệnh chính và giảm thiểu dùng kháng sinh, nhờ đó sẽ góp phần đáng kể giúp làm tăng lợi nhuận cho các hộ chăn nuôi. 4. Đặt vấn đề & Cơ sở khoa học: Tiêu chảy trong giai đoạn theo mẹ của lợn là 1 trong những bệnh chủ yếu, gây thiệt hại về kinh tế chô cả chăn nuôi lợn quy mô nhỏ và lớn tại Việt nam. Các nghiên cứu đã được tiến hành trước đây đã khẳng định rằng sự xuất hiện của 1 loại kháng nguyên bám dinh mới của các chủng vi khuẩn E. coli gây bệnh Colibacillosis ở Việt nam và bởi vậy bệnh khó có thể khống chế b ằng các loại vacxin đang có sẵn trên thị trường. Hơn nữa, các loại vacxin hiện nay ở Việt nam là vacxin nhập ngoại, có giá thành cao. Bên cạnh đó, có rất nhiệu nguyên nhân gây tiêu chảy trước cai sữa mà các nguyên nhân đó có thể chưa được biết đến với điều kiện ở Việt nam. Tất cả những nguyên nhân này đều bị ảnh hưởng với chăn nuôi và chăm sóc trong suốt giai đoạn mang thai và nuôi con. Dự án 001/04VIE (Chẩn đoán và kh ống chế bệnh tiêu chảy ở lợn con trước cai sữa) đã được bắt đầu với 3 mục tiêu để giải quyết vấn đề này: 1. Chế tạo và thử nghiệm vacxin sản xuất nội địa 2. Lập kế hoạch chăn nuôi để phòng bệnh tiêu chảy trước cai sữa, sử dụng mô hình cải tiến liên tục (CIP) 3. Tăng cường năng lực chẩn đ oán trong phòng thí nghiệm bệnh tiêu chảy trước cai sữa 5. Tiến độ đã thực hiện tới ngày báo cáo 5.2 Điểm qua các công việc đã được thực hiện Mục tiêu 1: Chế tạo và thử nghiệm vacxin nội địa Kết quả 1.1: Xác định các thành phần kháng nguyên, bao gồm cả chủng có mang yếu tố bám dính loại mới Các ống giống gốc chứa chủng vacxin (50 x 1 ml các ỗng của 3 chủng vacxin trong môi trường BHI, có bổ xung 12% glycerol) được giữ ở điều kiện -80oC tại NIVR. Ngoài ra, giống cũng được cất giữ ở dạng đông khô để phòng trường hợp có trục trặc của giống được bảo quản ở tủ -80oC (nếu điều kiện -80oC bị trục trặc, giống cũng có thể được giữ ở -20oC trong thời gian ngắn). Các lô vacxin được chế tạo theo quy trình được trình bày tại Phụ lục 2 của báo cáo MS3 và MS6. Một ống giống gốc mới chứa chủng vacxin được nuôi cấy và kiểm tra mức độ thuần khiết. Các ống này, sau đó sẽ chính là các giống nhỏ để sản xuất vacxin. Với một số lượng ống giống được giữ trong các điều kiện tối ưu, sẽ đảm bảo tố i đa cho sự bộc lộ kháng nguyên fimbriae. Ngoài ra, các chủng gốc cũng được lưu giữ trong điều kiện AQIS tại trường Thú Y, thuộc trường Queensland (do GS. Darren Trott chịu trách nhiệm) và tại phòng thí nghiêm tham chiếu về vi khuẩn E. coli của OIE tại trường Montreal (do GS. John Fairbrother chịu trách nhiệm). Các đặc tính độc lực (kháng nguyên nhóm OK, bám dính và độc tố đường ruột) của 3 chủng được lựa chọn là giống đã được đánh giá độc lập tại Trung tâm nghiên c ứu bệnh lợn (PHRU), DPI, Australia (Bảng 1). Các chủng này đã được đông khô ở 3 phòng thí nghiệm tách biệt (NIVR, UQ và PHRU). Bảng 1 : Các chủng E. coli dùng chế tạo vacxin Các đặc tính độc lực Ký hiệu chủng O-serogroup Kháng nguyên bám dính Độc tố NVP613 (CARD-VN1) O8 5F-* STa/STb/LT NVP1402 (CARD-VN2) O149: K91 F4 STa/STb/LT NVP1372 (CARD-VN3) O64 F5 STa * Negative for all five recognized fimbriae associated with porcine enterotoxigenic E. coli (F4, F5, F6, F18 and F41). May therefore possess a novel fimbrial antigen. Kết quả 1.2: Đặc tính của kháng nguyên bám dính mới Hai chủng 5F- ETEC đã được kiểm tra về hoạt tính ngưng kết kháng mannose đối với hồng cầu cừu. Ngưng kết kháng mannose đã được quan sát thấy tại 37oC, nhưng không quan sát thấy ở 18oC đối với cả 2 chủng. Kết quả này đã khẳng định sự sản sinh của 1 loại yếu tố bám dính tại 37oC (Bảng 1) Bảng 3 : Kết quả ngưng kết của 2 chủng 5F- ETEC Điều kiện nuôi cấy tại: 37 o C 18 o C Chủng NaCl 0.85% 1.5% D-Mannose NaCl 0.85% 1.5% D-Mannose CARD-VN1 H (1/1024) H (1/1024) Âm tính Âm tính EC-VN8 H (1/1024) H (1/1024) Âm tính Âm tính Các ảnh chụp kính hiển vi điện tử được chụp ở độ phân giải thấp và cao đã cho thấy các cấu trúc giống dạng lông trên bề mặt của vi khuẩn. Nghiên cứu được tiến hành vào 2006-2008 tại phòng thí nghiệm OIE do TS. Do Ngọc Thuy tiến hành đã cho thấy chúng ta đã tiến rất gần đến bước tinh chế và xác định đặc tính của loại kháng nguyên bám dính mới, tuy nhiên, cũng đã quan sát thấy hiện tượng lẫ n với một số loại protein khác. Trong chuyến sang công tác trở lại của Dr Thuy vào 07/2010 do ngân sách của University of Adelaide, loại kháng nguyên bám dính mới đã được chiết tách thành công, không có sự tạp nhiễm protein và hiện tại, chúng tôi đang đợi các kết quả về giải mã gen. Kết quả 1.3 Chế tạo vacxin Môi trường đặc biệt đã được sử dùng để tạo các điều kiện tối ưu nhất cho việc sản xuất fimbriae. Nh ằm tạo ra được lượng F4 tối đa, chủng CARD-VN2 đã được nuôi cấy trên môi trường BGNA, F5 của chủng CARD-VN3 trên môi trường Minca. Đối với chủng có sản sinh loại kháng nguyên bám dính mới (CARD-VN-1), môi trường BGNA cũng đã thể hiện là có thể tạo ra tối đa loại fimbriae mới. Quy trình chế tạo được trình bày trong hình 1. Hình 1: Chế tạo vacxin đa giá (1 ml vacxin có chứa khoảng 10 10 vi khuẩn) Kết quả 1.4: Kết quả kiểm tra hiệu lực của vacxin NIVR đã chế tạo vacxin cho các thử nghiệm quy mô nhỏ về an toàn và hiệu lực của vacxin. Một cách tóm tắt, vacxin được chế tạo không có tác dụng phụ đối với lợn hậu bị được tiêm vacxin và các con con của chúng. Khi so sánh với Littergard và Ecovac, hai loại vacxin thương mại có trên thị trường từ các công ty Pfizer và Intervet, vacxin do NIVR sản xuất đã có các kết quả thống kê tương tự về hàm lượng kháng thể đối với F4 fimbriae của E. coli. Điều này đã ch ứng minh rằng trong điều kiện thử nghiệm, vacxin đã thể hiện là an toàn và hiệu quả trong việc tạo kháng thể kháng F4. Một lượng nhỏ vacxin được cung cấp cho đàn lợn được chọn ở phía Bắc Việt Nam và cho một số nông hộ ở miền Trung Việt Nam như là một phần của dự án 004/05VIE. Nhận xét từ các trại đã sử dụng cho thấy không có tác dụng phụ hoặc phả n ứng của vacxin, điều này chứng tỏ vacxin cũng có hiệu quả, mặc dù rằng rất khó để xác định các nguyên nhân gây tiêu chảy trước cai sữa ở miền trung Việt Nam. Vì vậy một số dạng tiêu chảy ở lợn con từ lợn nái được tiêm vacxin có thể đã được gây ra bởi 20 ml TSB (37 o C, q ua đêm ) PBS (10 10 VK/ml) Bổ xung keo phèn theo tỷ lệ 1/5 Giống đông khô 2 ml TSB (37 o C, qua đêm) SBA (37 o C, qua đêm) Môi trường nuôi cấy thích hợp (37 o C, qua đêm) Kiểm tra thuần Bổ xung formalin 0.3% Trộn lẫn các lô canh trùng với tỷ lệ ngang nhau Ra chai và dán nhãn Kiểm tra vô trùng Kiểm tra vô trùng các tác nhân khác như cầu trùng, rotavirus hoặc TGEV, tất cả đều đã được chứng minh ở các nông hộ chăn nuôi nhỏ ở Việt Nam. Kết quả 1.5: Kết quả thử nghiệm vacxin trên thực địa Một thử nghiệm trên thực địa đã được tiến hành tại hai xã của tỉnh Thừa Thiên Huế và ba xã của Quảng Trị trong 2009/2010. Lợn nái mang thai được tiêm 2 ml vacxin (khoảng 1,5 x 10 9 vi khuẩn) tại tuần chửa thứ 9 và 12, nhóm đối chứng không được tiêm vacxin. Không quan sát thấy phản ứng cục bộ hoặc hệ thống và tất cả các con lợn nái đã đẻ con bình thường ở đúng thời gian đẻ với số lượng trung bình là 9,3 lợn con khỏe mạnh/náii. Tỷ lệ tiêu chảy trước cai sữa ở lợn con sinh ra từ các lợn nái được tiêm vacxin tại 1, 2 hoặc 3 tuần tuổi là: 16,1; 22,7 và 26,5%, so với các số li ệu tương ứng là 48,1; 33,8 và 37,5% ở nhóm đối chứng (P <0,005 ). Các mẫu phân ngẫu nhiên (n = 37) được lấy từ các lợn con bị tiêu chảy đã được chẩn đoán để xét nghiệm cho sự hiện diện của 6 nguyên nhân phổ biến nhất gây tiêu chảy trước cai sữa. Tỷ lệ TGEV TGEV, RV và cầu trùng không có khác biệt đáng kể giữa nhóm được tiêm vacxin hoặc không tiêm vacxin. Clostridium perfringens chỉ quan sát thấy trong nhóm không được tiêm. Các chủng E. coli thu được từ nhóm tiêm vacxin không mang gen độc tố, trong khi các chủng E. coli phân lập từ nhóm đối chứng vẫn còn mang các gen độ c tố như Sta, Stb và/hoặc LT. Kết quả này đã chứng minh rằng việc tiêm phòng vacxin E. coli sản xuất trong nước, không chỉ giảm tỷ lệ mắc tiêu chảy trước cai sữa, mà còn có thể ngăn chặn sự hiện diện của các chủng E. coli độc trong ruột của lợn con. Một thử nghiệm thứ hai đang được thực hiện tại Viện Chăn nuôi và sẽ kết thúc trong tháng 11/2010. Đây là thử nghiệm cuối cùng cần để cung cấp các dữ liệu cần thiết cho việc cấp giấy phép của vacxin. Kết quả 1.6: Thương mại hóa vacxin NIVR tiếp tục sản xuất vacxin cho mục đích nghiên cứu, như đã được chứng thực bởi các theo dõi về vacxin (báo cáo MS3 và MS6), nhưng việ c đăng ký đòi hỏi một tài liệu chi tiết sẽ phải được nộp cho Cục Thú y. Hầu hết các yêu cầu cho việc đăng ký, bao gồm an toàn và hiệu lực đã được đáp ứng bởi trong dự án hiện tại, với một thử nghiệm trên thực địa đang được tiến hành để cung cấp các dữ liệu về thực địa cần thiết. Hiệu quả cần thiết. BM Vi trùng c ủa NIVR không có kinh nghiệm trong việc thương mại hóa các kết quả của mình, do đó chúng tôi đề nghị hợp tác giữa hai nhà sản xuất vacxin chính và có đầy đủ các giấy phép GMP/GLP là NAVETCO (đối với miền Nam Việt Nam) và Xí nghiệp thuốc thú y (đối với phía Bắc) để hoàn chỉnh hồ sơ đăng ký. Trước khi việc này xảy ra, chúng tôi cho rằng một luật sư có chuyên môn về sáng chế độc quyền nên được thuê để hỗ trợ TS Do Ngoc Thuy, người có nhi ều công trong việc chế tạo ra loại vacxin này đăng ký với Văn phòng Sở hữu trí tuệ của Việt Nam thuộc Bộ Khoa học và Công nghệ. Một khi điều này đã đạt được, các cuộc đàm phán có thể được bắt đầu, theo đó một phần lợi nhuận sẽ được quay trở lại NIVR như đã được thống nhất rõ ràng. Sự sự hỗ trợ của Ban quản lý chươ ng trình CARD cũng là cần thiết để thúc đẩy các tiến trình làm việc với Cục Thú y và các bên liên quan khác. Điều này sẽ đảm bảo cho sự chậm trễ được giữ ở mức tối thiểu và vacxin sẽ sớm được có mặt trên thị trường dể cung cấp cho nông dân. Một chiến lược như vậy đối với thương mại hóa cũng có thể được sử dụng đối với các vacxin NIVR khác như vacxin phù đầu – m ột loại vacxi có hiệu lực tốt nhưng hiện tại vẫn chưa được đăng ký. Mục tiêu 2: Kế hoạch khống chế bệnh tiêu chảy đối với lợn con trước cai sữa thông qua việc áp dụng mô hình CIP Kết quả 2.1 Các số liệu theo dõi thực tế thu thập được từ các trại thử nghiệm và đối chứng. Một phân tích về tỷ lệ chết đã được báo cáo trong giai đoạn 14 tháng đã cho thấy rằng các trại thí nghiệm mà đã được đón nhận các hướng dẫn trong quá trình thực hiện dự án đã có tỷ lệ chết trung bình trước cai sữa thấp hơn hẳn so với các trại đối chứng (8.6% ± 3.6 so với 15.6 ± 4.3; p<0.05). Một trại đối chứng đã không tham gia hết quá trình dự án thực hiện do vấn đề về bệnh dịch tả lợn quá nặng. Còn đối với hầu hết các trại thí nghiệm, tỷ lệ chết trước cai sữa là thấp hơn và giữ vững một cách ổn định trong suốt giai đoạn thí nghiệm. Trại Đong My, Thai Binh, tỷ lệ chết ở mức xấp xỉ 20% đã giảm xuống mức 10% ở cuối giai đoạn thí nghiệm. Thực ra, cũng rất khó để có thể xác định chính xác rằng việc giảm tỷ lệ chết trước cai sữa là có liên quan tới việc những người quản lý trại đã tiếp thu các lời khuyến cáo/hướng dẫn từ các chuyến công tác của các chuyên gia trước đó tới trại hay không bởi vì cùng một số các vấn đề giống nhau vẫn gặp phải trong các chuyến kiểm tra/đánh giá lần sau. 0.00 5.00 10.00 15.00 20.00 25.00 30.00 35.00 40.00 45.00 50.00 Apr-05 May-05 Jun-05 Jul-05 Aug-05 Sep-05 Oct-05 Nov-05 Dec-05 Jan-06 Feb-06 Mar-06 Apr-06 May-06 Jun-06 Month % Pre Weaning Mortality Anh De Thai Binh C Anh Thiet Hung Yen C Trang Due Hai Phong C Minh Duong Ha Tay C Dinh Dung Binh Dinh C Dong My Thai Binh T Anh Hiep Hung Yen T Anh Tinh Hai Phong T Thanh Bich Ha Tay T Nhon Hoa Binh Dinh T Đồ thị 2 : Tỷ lệ chết trung bình trước cai sữa ở 5 trại thí nghiệm (T) và 5 trại đối chứng trong giai đoạn 14 tháng theo dõi. Trại Anh Thiết đã không tiếp tục thực hiện dự án do trại bị mắc bệnh dịch tả lợn Kết quả 2.3: Mô hình CIP đối với các nông hộ chăn nuôi nhỏ Tóm lược các kết quả về chuyến đi thực địa tại các trại thử nghiệm và đố i chứng đã được trình bày cùng với các báo cáo tiến độ MS3 và MS6. Nhìn chung, trong khi một số cải tiến đã được ghi nhận tại các trại riêng rẽ, rất nhiểu các khuyến nghị được đưa ra từ những lần kiểm tra trước đó đã không được thực hiện. Hệ thống làm mát đã được lắp đặt cũng đã được gỡ bỏ ở một số trang trại, các trại đã không ho ạt động để đủ năng lực về số lượng lợn nái so với số công nhân chăn nuôi và các chăm sóc lợn sơ sinh và lợn cai sữa vẫn không đúng cách. Một số bệnh rõ ràng liên quan đến chỉ số nhiệt độ quá cao đã được ghi lại trong một số chuồng nuôi, lượng thức ăn bị hạn chế và số lượng lớn lợn nái với điểm số thấ p và điều kiện thông gió kém. Trại Anh Hiệp (tỉnh Hưng Yên) có lẽ đã thể hiện những cải tiến lớn nhất trong suốt quá trình thực hiện dự án, trại này đạt được mức tỷ lệ chết trước cai sữa thấp nhất trong suốt năm. Mục tiêu tổng thể của mô hình CIP, thông qua các chuyến thăm trại, cung cấp cho các nhà khoa học Việt Nam với các kiến thức về quả n lý sức khỏe đàn gia súc (tập trung vào tỷ lệ chết trước cai sữa) trong khi tạo ra các trại mô hình có thể được sử dụng cho các buổi tập huấn cho các nông hộ chăn nuôi nhỏ sau này. Tuy nhiên, chúng tôi sớm nhận ra rằng mô hình này là không khả thi và là các nguồn lực được phân bổ không đủ. Với lời khuyên và sự hỗ trợ của Ban Quản lý Chương trình CARD, Dự án 004/05VIE đã được xây dựng nên như là một kế hoạch tổng thể nh ằm xây dựng năng lực, tập trung vào hộ chăn nuôi nhỏ ở Quảng Trị và Thừa Thiên Huế. Dự án này đã rất thành công [...]... khả năng chẩn đoán bệnh tiêu chảy lợn trước cai sữa Kết quả 3.1: Tỷ lệ của các nguyên nhân gây tiêu chảy trước cai sữa ở các trại lớn và các nông hộ nhỏ Kết quả điều tra của Dr Thuy về các nguyên nhân gây chết trước cai sữa ở các mẫu thu được từ các trại chăn nuôi công nghiệp so với các trại gia đình đã cung cấp các kết quả rất thú vị Trước hết, tác nhân gây bệnh đơn lẻ chỉ có thể tìm thấy ở các trại... hợp ở các lợn con nuôi tại các nông hộ, mặc dù các mẫu từ các lợn này dường như là có chứa một "túi tổng hợp" của các tác nhân gây bệnh Phần lớn các mẫu được thu thập từ các lợn hơn 1 tuần tuổi, chứng tỏ rằng tiêu chảy lợn con về cơ bản là đã được khống chế (bằng cách sử dụng vacxin nhập khẩu có đắt tiền) và E coli dung huyết là chủ yếu có liên quan tới tiêu chảy ở lợn con >14 ngày cho tới khi cai sữa. .. kiến thức và kinh nghiệm thu được từ dự án 001/04VIE 3) Nhận biết kiểu tổ hợp các yếu tố gây bệnh ETEC ở các nông hộ nhỏ Đặc tính của các chủng ETEC thu được từ các nông hộ nhỏ đã khẳng định kiểu tổ hợp các yếu tố gây bệnh chiếm đa số ở các nông hộ chăn nuôi nhỏ là F4:Paa:STa:STb:LT:EAST-1 Tổ hợp này gây ra tiêu chảy cho lợn con mới sinh và lợn con sau cai sữa 2-3 tuần tuổi, có thể được khống chế bằng... định các tác nhân gây tiêu chảy ở lợn trước cai sữa nuôi tại các trang trại tập trung và các nông hộ nhỏ (báo cáo 1), tổ hợp gen độc lực của các chủng ETEC (báo cáo 2) Tất cả các báo cáo này cũng đã được nộp cho CARD như một phần của các báo cáo tiến độ trước đây Trong năm 2008 và 2010, Dr Thuy đã tham gia các tập huấn nâng cao tại phòng thí nghiệm tham chiếu của OIE ở Montreal dưới sự hướng dẫn của... đảm bảo đủ độ khô và ấm, rất nhiều phương pháp đơn giản có thể áp dụng để giảm thiểu các tiêu chảy do rotavirus và TGEV bằng cách dùng nước rửa nền chuồng có phân của các lợn con bị tiêu chảy, pha loãng 1/20 (trong nước) và cho các lợn nái đang ở giai đoạn chờ phối và có chửa ăn để cung cấp kháng thể qua con mẹ; và bởi vì có tới 47.9% các số mẫu từ trại công nghiệp và 60% từ các nông hộ có ETEC, việc... nghiệm để chẩn đoán chính xác bệnh tiêu chảy trước cai sữa là một trong những thành công lớn của dự án này Kỹ thuật đã được chuyển giao ngay từ những ngày đầu thực hiện dự án và các chẩn đoán viên tại NIVR hiện nay đã rất thành thục trong các kỹ thuật và có thể tự tin xác định các tác nhân gây bệnh trong các mẫu Điều này khẳng định rằng rất nhiều lợn con tại Việt Nam, cả ở trại tập trung và nông hộ đều... trại và phân tích dữ liệu NIVR chịu trách nhiệm sản xuất và thử nghiệm vacxin E coli cho dự án và cung cấp các tư vấn và hỗ trợ điều tra dịch bệnh và giám sát thông qua các chẩn đoán phòng thí nghiệm 6 Về một số vấn đề có liên quan 6.1 Môi trường Sử dụng kháng sinh và kháng kháng sinh: Việc chế tạo ra vacxin E coli của NIVR và việc chẩn đoán chính xác các nguyên nhân gây tiêu chảy trước cai sữa sẽ... sở rất lý tưởng cho các thử nghiệm này bởi vì các trại này đã tiến hành nuôi các lợn con trong điều kiện vệ sinh tốt ở môi trường khô và ấm Ngoài ra, cũng có một cơ số các trại xung quanh có thể được sử dụng như là các trại đối chứng - có thể thu thập các số liệu về tỷ lệ các bệnh tiêu chảy, bao gồm cả ETEC trong tuần đầu sau khi sinh 2) Xác định các nguyên nhân gây tiêu chảy trước cai sữa ở các nông. .. nhiên, bệnh này là rất phổ biến ở Việt Nam (bệnh này cũng được quan sát thấy ở các nông hộ chăn nuôi lợn ở miền Trung Việt Nam trong dự án 004/005 VIE) NIVR đã chế tạo được một loại vacxin phù đầu, tuy nhiên cũng đòi hỏi phải được hoàn thiện hơn và có tiền trình thương mại hóa sản phẩm Bảng 2: Tổ hợp các yếu tố gây bệnh của các chủng vi khuẩn E coli phân lập từ các lợn bị tiêu chảy trước và sau cai sữa. .. các lợn trước và sau cai sữa đã cung cấp các kết quả rất thú vị và các so sánh giữa các chủng thu được từ các lợn nuôi công nghiệp so với chăn nuôi tại các nông hộ Trước hết, chưa tính đến các thông tin thu được từ phòng thí nghiệm của GS John Fairbrother về tổ hợp các yếu tố độc lực điển hình có mang trong các chủng F19 O8, Dr Thuy đã chứng minh rằng trong trường hợp các mẫu tiêu chảy trước cai sữa . Rural Development BÁO CÁO TIẾN ĐỘ CỦA DỰ ÁN CHẨN ĐOÁN VÀ KHỐNG CHẾ BỆNH TIÊU CHẢY Ở LỢN CON TRƯỚC CAI SỮA CARD Project 001/04VIE MỐC DỰ ÁN SỐ 8 : BÁO CÁO TỔNG KẾT . ảnh hưởng với chăn nuôi và chăm sóc trong suốt giai đoạn mang thai và nuôi con. Dự án 001/04VIE (Chẩn đoán và kh ống chế bệnh tiêu chảy ở lợn con trước cai sữa) đã được bắt đầu với 3 mục tiêu. thống và tất cả các con lợn nái đã đẻ con bình thường ở đúng thời gian đẻ với số lượng trung bình là 9,3 lợn con khỏe mạnh/náii. Tỷ lệ tiêu chảy trước cai sữa ở lợn con sinh ra từ các lợn nái