Đang tải... (xem toàn văn)
Bước 1: Chuẩn bị mẫu: Lấy 10ml sữa cho vào erlen 100. Thêm 20ml nước cất. Cho 3 giọt phenolphthalein. Thêm nước cất vào để pha loãng sữa, giảm độ đục của sữa, giúp dễ nhận biết khoảng chuyển màu. Bước 2: Định phân: Định phân bằng dung dịch NaOH 0.1N cho đến khi xuất hiện màu hồng nhạt bền trong 30 giây. Sai lệch giữa 2 lần thí nghiệm không quá 0.1ml.
Bài báo cáo thí nghiệm hố sinh NHĨM Lê Diệp Xuân Chi Vũ Mạnh Huy Phạm Thị Thúy Nhi BÁO CÁO BÀI THÍ NGHIỆM SỐ 8: TÍNH CHẤT CỦA PROTEIN 8.3 XÁC ĐỊNH ĐỘ CHUA CỦA SỮA Mẫu thí nghiệm : Sữa tươi tiệt trùng có đường (hãng TH true milk) SƠ ĐỒ TRÌNH TỰ THÍ NGHIỆM: Sữa Phenolphtalein n Nước cất Erlen 100ml NaOH Định phân Dung dịch màu hồng nhạt Giải thích: Bước 1: Chuẩn bị mẫu: Lấy 10ml sữa cho vào erlen 100 Thêm 20ml nước cất Cho giọt phenolphthalein Thêm nước cất vào để pha loãng sữa, giảm độ đục sữa, giúp dễ nhận biết khoảng chuyển màu Bài báo cáo thí nghiệm hố sinh NHĨM Lê Diệp Xn Chi Vũ Mạnh Huy Phạm Thị Thúy Nhi Bước 2: Định phân: Định phân dung dịch NaOH 0.1N xuất màu hồng nhạt bền 30 giây Sai lệch lần thí nghiệm không 0.1ml Kết a Độ chua sữa: Công thức: T= (VK x100)/10 Với V: Số ml NaOH 0.1N dùng chuẩn độ K: hệ số hiệu chỉnh dung dịch kiềm K=Vlt/Vtt = 1.01 Tính tốn kết quả: Số lần thực Số ml NaOH0.1N Độ chua Lần 1.4ml 14.14 Lần 1.4ml 14.14 Lần 1.5ml 15.15 Lần 1.5ml 15.15 Đánh giá kết quả: Độ chua sữa phản ánh độ tươi tốt sữa Ðộ chua sữa tươi dao động từ 1820 thorner, tăng 22 thorner kèm theo có tượng kết tủa casein sữa chắn bị nhiễm khuẩn Đối với mẫu thử độ chua khoảng 14-15 thorner, nằm mức cho phép mẫu thử đạt tiêu chuẩn Bài báo cáo thí nghiệm hố sinh NHÓM Lê Diệp Xuân Chi Vũ Mạnh Huy Phạm Thị Thúy Nhi BÀI BÁO CÁO THÍ NGHIỆM SỐ 5: LIPIT 5.2 XÁC ĐỊNH CHỈ SỐ ACID VÀ HÀM LƯỢNG ACID BÉO TỰ DO *Nguyên liệu chất béo : Mẫu dầu động vật (hãng Cái Lân) (mẫu mẫu cũ) SƠ ĐỒ TRÌNH TỰ TIẾN HÀNH THÍ NGHIỆM TN1: xác định số AV Bước 1: hòa tan chất béo Lấy 5g chất béo cho vào erlen, thêm 20ml hỗn hợp etherethylic – rượu ethylic (1:1) để hòa tan chất béo - Bước 2: chuẩn độ Chuẩn độ hỗn hợp dung dịch KOH 0,05N rượu với giọt thị phenolphthalein dung dịch có màu hồng bền 30 giây Etherethylicrượu ethylic Chất béo Hòa tan chất béo Chuẩn độ KẾT QUẢ: Dung dịch màu hồng 30s Phenolphtalein KOH 0.05 N Bài báo cáo thí nghiệm hố sinh NHĨM Lê Diệp Xuân Chi Vũ Mạnh Huy Phạm Thị Thúy Nhi a) Xác định số AV Mẫu dầu Số lần Trung bình VKOH (ml) 0,4 0,15 0,1 0,3 0.95 Hệ số hiệu chỉnh nồng độ dung dịch KOH: T = Chỉ số axit Hàm lượng axit béo tự (axit oleic) FFA = Mẫu dầu cũ 2.8055∗V ∗T AV = = m Số lần VKOH (ml) 1.8 20 21.3 2.8055∗0.95∗20 21.3 =0.5 2.8055∗1.8∗20 21.3 Chỉ số acid AV = =0.95 Hàm lượng axit béo tự (axit oleic) FFA = Kết luận: Av∗M 0.5∗282 =0.25 = 561.1 561.1 Av∗M 0.95∗282 =0.48 = 561.1 561.1 Mẫu dầu có hàm lượng chất béo tự số AV thấp nhiều so với mẫu dầu cũ, từ cho thấy hàm lượng acid béo bị thủy phân dầu cũ nhiều dầu Bài báo cáo thí nghiệm hố sinh NHÓM Lê Diệp Xuân Chi Vũ Mạnh Huy Phạm Thị Thúy Nhi BÀI THÍ NGHIỆM SỐ 4: ĐỊNH LƯỢNG GLUXIT 4.1 ĐỊNH LƯỢNG ĐƯỜNG KHỬ BẰNG PHƯƠNG PHÁP CHUẨN ĐỘ OXY HOÁ KHỬ VỚI KALI FERRYCYANURE NGUYÊN TẮC: Khi cho ferrycyanua K3Fe(CN)6 phản ứng với đường khử sản phẩm thu ferrycyanua Dựa vào phản ứng này, ta suy lượng đường khử có mặt dung dịch cần xác định Việc chuẩn độ tiến hành mơi trường kiềm NaOH đun nóng với thị xanh metylen blue Phương trình phản ứng: CH2OH-(CHOH)4-CHO+K3Fe(CN)6+2NaOH CH2OH-(CHOH)4-COONa + NaK3Fe(CN)6+ H2O Phương pháp đơn giản phương pháp dùng dung dịch kiềm sunfat đồng không tạo kết tủa kết thúc chuẩn độ khơng rõ ràng Kết tính tốn khơng dựa vào lý thuyết mà dựa vào thực nghiệm Độ xác phụ thuộc vào nhiều yếu tố, trình tự tiến hành thao tác quan trọng Tất monosacarit mà oligosacarit đường khử Các oligosacarit polysacarit dễ bị thuỷ phân thành monosacarit, định lượng đường khử trước sau thuỷ phân để tính hàm lượng chúng SƠ ĐỒ TRÌNH TỰ THÍ NGHIỆM: a Xử lý mẫu định lượng đường khử: Nguyên liệu (cà chua) Cà chua (nghiền nhuyễn) Bài báo cáo thí nghiệm hố sinh NHĨM Lê Diệp Xuân Chi Vũ Mạnh Huy Phạm Thị Thúy Nhi giọt metyl red Dung dịch xuất màu hồng Trích ly NaOH 5% Bã Định mức Dung dịch đường Giải thích: Nguyên liệu nghiền nhuyễn nhằm khai thác tối đa lượng đường mẫu acid Khi thêm NaOH 5% với mục đích trung hồ hết acid có ngun liệu (dứa) với thị metyl red Khi dung dịch xuất màu hồng nhạt nghĩa dung dịch mẫu hết acid, ta loại bỏ hồn tồn acid Trích ly: nhằm thu lại dịch đường, đồng thời loại bỏ cặn dứa khỏi dung dịch Định mức tới vạch 100ml bình định mức 100ml Thí nghiệm 1: Xác định lượng đường khử: Bài báo cáo thí nghiệm hố sinh NHĨM Lê Diệp Xn Chi Vũ Mạnh Huy Phạm Thị Thúy Nhi 10ml K3Fe(CN)6 1% Becher khô 2,5ml NaOH 2,5N Đun sôi Đường khử Chuẩn độ giọt metyl blue Dung dịch màu xanh Giải thích: Khi cho dd 2,5ml NaOH vào, tạo môi trường bazo Chuẩn độ: dịch đường khử chứa buret Khi cho giọt metyl blue vào chuẩn độ dung dịch đường khử, ban đầu dd có màu xanh, dư giọt đường làm màu dd Thí nghiệm 2: Xác định lượng đường tổng: Bài báo cáo thí nghiệm hố sinh NHĨM Lê Diệp Xn Chi Vũ Mạnh Huy Phạm Thị Thúy Nhi 50ml dd mẫu + 20ml dd HCl 5% Đun cách thuỷ Làm nguội nhanh Trung hoà NaOH 2.5N Metyl red Định mức Dung dịch đường Giải thích: 50ml mẫu 20ml HCl 5% đựng bình tam giác 250ml Trung hồ: trung hồ acid HCl 5% dư dung dịch NaOH 2,5N với thị metyl red (dung dịch chuyển từ màu đỏ sang màu vàng) Giải thích: Khi cho dd 2,5ml NaOH vào, tạo môi trường bazo Chuẩn độ: dịch đường khử vừa chuẩn độ chứa buret Khi cho giọt metyl blue vào chuẩn độ dung dịch đường khử, ban đầu dd có màu xanh, dư giọt đường làm màu dd Kết quả: Thí nghiệm 1: Xác định đường khử Bài báo cáo thí nghiệm hố sinh NHĨM Lê Diệp Xuân Chi Vũ Mạnh Huy Phạm Thị Thúy Nhi Số lần Thể tích đường Lần (ml) 4.1 ml Lần (ml) ml Lần (ml) ml =(0.5 x 3.2 x 100 x 100)/(100 x 4.1 x 10) =3.902% =( 0.5 x 3.2 x 100 x 100)/ (100 x x 10) = 4% Xktb= (3.902 + + 4)/3 = 3.967 % Thí nghiệm 2: Xác định đường tổng Số lần Thể tích đường Lần (ml) ml Lần (ml) ml Lần (ml) ml = ( 0,5 x 3.2 x 100 x 250 x 100)/ (100x x 50 x 10) = 13.333 % Nhận xét đánh giá kết quả: Từ kết lượng đường tổng đường khử suy lượng đường khơng khử dịch đường cách lấy hiệu số lượng đường tổng với đường khử Bài báo cáo thí nghiệm hố sinh NHĨM Lê Diệp Xn Chi Vũ Mạnh Huy Phạm Thị Thúy Nhi Xkhông khử = 13.333-3.967 = 9.365% Bài báo cáo thí nghiệm hố sinh NHĨM Lê Diệp Xuân Chi Vũ Mạnh Huy Phạm Thị Thúy Nhi BÀI BÁO CÁO THÍ NGHIỆM SỐ 10: ĐỊNH LƯỢNG VITAMIN C (ACID ASCORBIC) TIẾN HÀNH Bước 1: cân 10g mẫu nguyên liệu, nghiền nhỏ với dung dịch HCl 1% Chuyển dung dịch thu vào bình định mức 100ml, trích ly định mức đến vạch dung dịch HCl 0.1% Lắc trộn lọc, ta thu dung dịch cần phân tích Chanh Nghiền nhuyễn Bình định mức 100ml Trích ly, định mức đến vạch dd HCl 0.1% Lọc Dung dịch HCl 1% Bài báo cáo thí nghiệm hố sinh NHĨM Lê Diệp Xuân Chi Vũ Mạnh Huy Phạm Thị Thúy Nhi Bước 2: 10ml dung dịch cho vào erlen, thêm giọt hồ tinh bột đem định phân KIO 3/ KI 0.01N xuất màu xanh KIO3/KI 0.001N dd phân tích giọt hồ tinh bột Cho vào erlen Chuẩn độ Dung dịch màu xanh KẾT QUẢ Hàm lượng vitamin C tính theo cơng thức: X= ( a−b )∗0.088∗100 10 100 *m Trong đó: x: hàm lượng vitamin C (mg%) a: số ml KIO3/KI 0.001N cần dùng để định phân dịch chiết vitamin C Bài báo cáo thí nghiệm hố sinh NHÓM Lê Diệp Xuân Chi Vũ Mạnh Huy Phạm Thị Thúy Nhi b: số ml KIO3/KI 0.001N cần dùng để định phân mẫu đối chứng 100 : thể tích bình định mức 0.088: số mg acid ascorbic ứng với 1ml dung dịch KIO3/KI 0.01N m: khối lượng mẫu nguyên liệu (g) Với m = 10g, b= 0.5ml, hàm lượng vitamin C lần định phân: VKIO3/KI (a- b) x(mg%) V1= 0.45ml V2=0.56ml 0.05 0.1 0.44 0.88 Nhận xét: Sau lần định phân ta nhận thấy có chênh lệch thể tích KIO 3/KI 0.01N định phân, gặp phải sai số dừng định phân khơng thời điểm BÁO CÁO THÍ NGHIỆM SỐ 9: ENZYME Bài báo cáo thí nghiệm hố sinh NHÓM Lê Diệp Xuân Chi Vũ Mạnh Huy Phạm Thị Thúy Nhi 9.1 TÍNH ĐẶC HIỆU CỦA ENZYME TIẾN HÀNH a) Chuẩn bị dịch chiết Amylaza: 10g ĐẬU XANH NẢY MẦMU XANH NẢY MẦMY MẦMM NGHIỀN NGHUYỄN N NGHUYỄN N pha loãng định mức 100ml lắc ngâm 30’ lọc bã Dịch chiết enzyme Amylaza b) Tiến hành thí nghiệm KẾT QUẢ Ống nghiệm Cơ chất Enzym Phản ứng thử Kết Sacaroza Amilaza Fehling Tạo kết tủa, có màu nâu nâu Bài báo cáo thí nghiệm hố sinh NHĨM Lê Diệp Xn Chi Vũ Mạnh Huy Phạm Thị Thúy Nhi đỏ Tinh bột Amilaza Khơng Khơng có tượng *Giải thích: - Ống nghiệm có dung dịch Sacaroza xúc tác enzym Amilaza nên đường Sacaroza thủy phân dễ dàng tạo thành đường Maltoza Fructoza, hai đường dễ dàng xảy phản ứng Fehling kết tủa Cu 2O làm đổi màu dung dịch có ống nghiệm - Ống nghiệm có hồ tinh bột có thêm enzym Amilaza, nhiên enzym Amilaza khơng hoạt động môi trường tinh bột nên không thủy phân đường đơn để xảy phản ứng ống nghiệm khơng có tượng xảy Tác dụng chất kích thích chất kìm hãm Kết - Ống thứ (nước cất): Có màu xanh da trời nhạt - Ống thứ (NaBr): Có màu xanh dương đậm - Ống thứ (CuSO4): Có màu xanh dương Cả ba ống nghiệm có tượng đổi màu xuất kết tủa nhiều *Giải thích: Do xúc tác enzym Amilaza giúp kích thích thủy phân tinh bột tạo đường đơn khiến phản ứng Fehling xảy ra, nhiên ống thứ hai có màu đậm ống lại NaBr chất kích thích enzym Amilaza hoạt động, cịn ống thứ ba CuSO4 chất kìm hãm tính hoạt động enzym khiến enzym khó hoạt động BÀI THÍ NGHIỆM SỐ LIPIT (TT) 6.1 Xác định số xà phịng hóa Bài báo cáo thí nghiệm hố sinh NHĨM Lê Diệp Xuân Chi Vũ Mạnh Huy Phạm Thị Thúy Nhi Kết V0: Mẫu 0,5ml nước cất - Lần 1: 4,8ml H2SO4 0,5N sử dụng để chuẩn độ - Lần 2: 4,7ml H2SO4 0,5N sử dụng để chuẩn độ - Lần 3: 4,8ml H2SO4 0,5N sử dụng để chuẩn độ => V0 = 4,7ml V: Mẫu 0,5ml dầu thực vật - Lần 1: 4,3ml H2SO4 0,5N sử dụng để chuẩn độ - Lần 2: 4,4ml H2SO4 0,5N sử dụng để chuẩn độ - Lần 3: 4,4ml H2SO4 0,5N sử dụng để chuẩn độ => V = 4,4ml * Tính kết quả: Chỉ số xà phịng hóa: SV = (V −V )×T ×28,05 (4,7−4,4)×4,6 × 28,05 = =77,4 m 0,5 Hàm lượng axit béo tự do: FFA= 3×MC H 561,1 18 34 O2 = 3× 282 =1,5 561,1 *Giải thích: Cho KOH dư vào để thủy phân liên kết este đem chuẩn độ để tính số xà phịng hóa có mẫu 6.3 Tính chất Lipit (a, b, c) a) Tách Lecithin từ lỏng đỏ trứng gà Dụng cụ: - Ống nghiệm - Đũa thủy tinh - Becher 50ml - Phễu thủy tinh Bài báo cáo thí nghiệm hố sinh NHĨM Lê Diệp Xuân Chi Vũ Mạnh Huy Phạm Thị Thúy Nhi - Giấy lọc Hóa chất - Ethanol nóng - Ethyl ether - Aceton - Mẫu: lòng đỏ trứng gà Kết *Hiện tượng: - Sau thêm ethanol nóng vào lịng đỏ trứng thấy bắt đầu kết lại thành mảng trứng, khuấy liên tục 10 phút mảng bắt đầu tan dần thêm 5ml ethyl ether vào đem lọc lấy dịch lọc Sau lọc nhiều lần cho dịch lọc trong, tiếp tục cho aceton vào ta thấy bắt đầu xuất kết tủa, kết tủa nhiều dần theo thời gian Đem lọc lấy tủa ta có Lecithin *Giải thích: Thí nghiệm dựa vào tính chất lecithin tan ethanol không tan aceton Ban đầu cho lịng đỏ trứng tác dụng ethanol nóng để trích ly lecithin sau đem kết tủa lại aceton b) Thủy phân Lecithin Dụng cụ: - Ống nghiệm - Đũa thủy tinh Hóa chất - NaOH 10% - Mẫu: Lecithin vừa kết tủa Kết Bài báo cáo thí nghiệm hố sinh NHĨM Lê Diệp Xn Chi Vũ Mạnh Huy Phạm Thị Thúy Nhi *Hiện tượng: - Có mùi trứng bay đun *Giải thích: Do thủy phân kiềm, phân tử lecithin thủy phân thành glycerol, axit béo, axit phospholipit cholin nên có khí bay c) Định tính axit béo có lecithin - Mẫu: Lecithin vừa kết tủa Kết *Hiện tượng: - Có lớp axit béo xuất cho HCl 10% vào trung hòa *Giải thích: Do thủy phân kiềm, phân tử lecithin thủy phân thành glycerol, axit béo, axit phospholipit cholin nên có khí bay Trong mơi trường axit, axit béo tự giải phóng, tạo thành lớp bề mặt Bài báo cáo thí nghiệm hố sinh NHĨM Lê Diệp Xn Chi Vũ Mạnh Huy Phạm Thị Thúy Nhi Bài thí nghiệm số PROTEIN 7.3.1 Phản ứng biure Ống nghiệm 1: cho vài tinh thể biure, đun nóng chảy bắt đầu cứng lại ngừng đun Để nguội, thêm vào 2ml dd NaOH 10%, lắc tan, cho thêm vài giọt CuSO4 1% Ống nghiệm 2: cho vào 2ml dd protein trứng, thêm vào 1ml dd NaOH 10%, lắc tan, cho thêm vài giọt CuSO4 1% Kết Hiện tượng: Ống nghiệm 1: dd có màu tím hồng Ống nghiệm 2: dd có màu tím xanh Giải thích: Ống nghiệm 1: Khi đun, phân tử ure kết hợp lại tạo thành biure, làm xuất liên kết peptit: -CO-NH- Trong môi trường kiềm, biure kết hợp với CuSO4 cho phức hợp muối Cu có màu tím hồng Sự tạo thành biure: Muối phức hợp Cu với biure: Bài báo cáo thí nghiệm hố sinh NHĨM Lê Diệp Xuân Chi Vũ Mạnh Huy Phạm Thị Thúy Nhi Ống nghiệm 2: Trong dd protein trứng có liên kết peptit: -CO-NH- nên cho phản ứng biure tạo phức hợp muối Cu với polypeptit có màu tím xanh Muối phức hợp Cu với biure: Kết luận: Phản ứng biure phản ứng màu đặc trưng để phát liên kết peptit Độ tím phản ứng khác tùy theo độ dài mạch polypeptit lượng muối CuSO4