Đang tải... (xem toàn văn)
Công nghệ Enzyme tài liệu, giáo án, bài giảng , luận văn, luận án, đồ án, bài tập lớn về tất cả các lĩnh vực kinh tế, ki...
CÔNG NGH ENZIM GVC: Ths. Trn Xuân Ngch Trang: 1 c lc Chng 1: NGUYÊN LIU THU ENZIM VÀ PHÂN B 3 1.1. Ngun ng vt: 3 1.2. Ngun gc thc vt: 4 1.3. Ngun vi sinh vt: 4 Chng 2: N XUT CÁC CH PHM ENZIM T VI SINH VT 5 2.1. u hoà quá trình sinh tng hp enzim trong môi trng nuôi cy vi sinh vt 5 2.2. Tuyn chn và ci to ging vi sinh vt cho enzim có hot lc cao: 11 2.3. Phng pháp bo qun ging vi sinh vt : 12 2.4. Môi trng nuôi cy vi sinh vt sinh tng hp enzim: 13 2.5. Các phng pháp nuôi cy vi sinh vt: 17 2.6. Tách và làm sch ch phm enzym : 22 Chng 3: THUT SN XUT CH PHM T HT CC NY MM (MALT) 24 3.1. Nguyên liu i mch: 24 3.2. Làm sch và phân loi ht: 25 3.3. a, sát trùng và ngâm ht: 26 3.4. y mm: 28 3.5. y malt: 34 3.6. Tách mm, r, bo qun malt: 37 3.7. thut sn xut mt s loi malt c bit: 38 Chng 4: N XUT ENZIM T THC VT 40 4.1. n xut ureaza tu ra: 40 4.2. Thu nhn bromelain t da: 40 Chng 5: ENZIM CNH 44 5.1. Gii thiu chung: 44 5.2. t s phng pháp ch yu ch to enzim cnh : 44 5.3. t s liên kt trong vic cnh enzim. 45 5.4. nh hng ca s cnh n hottính ca enzim 46 5.5. Các reactor cha enzim cnh: 48 5.6. . S dng enzim cnh trong y hc và trong công nghip: 50 Chng 6: GII THIU MT S LOI ENZIM CH YU VÀ KH NNG NG NG 55 6.1. Amylaza 55 6.2. Proteaza 58 6.3. Pectinaza 60 6.4. Xenluloza: 64 CÔNG NGH ENZIM GVC: Ths. Trn Xuân Ngch Trang: 2 6.5. Saccaraza và glucooxydaza 66 Chng 7: PHNG PHÁP XÁC NH HOT MT SÔ LOI ENZIM 68 7.1. n vo hot : 68 7.2. Các phng pháp xác nh hot enzim: 69 7.3. Chun b dch chit enzim xác nh ho 71 CÔNG NGH ENZIM GVC: Ths. Trn Xuân Ngch Trang: 3 Chng 1: NGUYÊN LIU THU ENZIM VÀ PHÂN B 1.1. Ngun ng vt: 1.1.1. Tu tng: (Pan creas) ây là ngun enzim sm nht, lâu dài nht, có cha nhiu loi enzim nht nh: tripxin, kimotripxin, cacboxy pectidaza A và B, ribonucleaza, amilaza, lipaza. + Tripxin y hc phi là loi tinh ch. + ng dng u tiên ca ch phm tripxin là làm mn da lt da, kh các vt nt trên da. + Sn xut sn phm thu phân protein y hc (dch truyn y t) và môi trng nuôi cy vsv. + Ch phm dch tu y hc cha bnh v tu (ri lon chc nng, b ct b tu). + Sn xut ch phm enzim ty ra (vt bn, màu khó tan) nhit va phi, không thích hp vi nhit cao và pH thay i. 1.1.2. Màng nhy d dày ln: Là ngun enzim pepxin A, B, C, D, gastrisin. Các enzim này c tit ra ngoài t bào cùng vi dch v ( khi tiêu hoá thc n). i vi các typ pepxin có pH opt =1.3÷2.2. 1.1.3. dày bê: Trong ngn th t ca d dày bê có tn ti enzim thuc nhóm Proteaza tên là renin. Enzim này ã t lâu c s dng ph bin trong công ngh phomat. Renin làm bin i cazein thành paracazein có kh nng kt ta trong môi trng sa có nng Ca 2+ . ây là quá trình ông t sa rt n hình, c nghiên cu và ng dng y nht. Trong thc t nu ch phm renin b nhim pepxin (trong trng hp thu ch phm renin bê quá thì. Khi ó, d dày bê ã phát trin y có kh nng tit ra pepxin) thì kh ng ông t sa kém i. n ây có nghiên cu sn xut proteaza t vsv có c tính renin nh các loài Eudothia Parasitica và Mucor Purillus. 1.1.4. Các loi ni tng khác: Gan, lá lách, thn, phi, c hoành tim, d con, huyt. Các loi này u có cha enzim, a s tn ti trong t bào. Ch có mt s loi c sn xut di dng ch phm nh: gan, tim ln tách aspartat-glutamat aminotransferaza, huyt tng (t huyt) tách ra trombia (Proenzim chng ông máu) Nhìn chung nguyên liu ng vt dùng tách enzim phi ti tt (ly ngay sau khi git m) hoc gi -20 0 C có thc 1÷12 tháng vn không làm gim hot tính enzim. CÔNG NGH ENZIM GVC: Ths. Trn Xuân Ngch Trang: 4 1.2. Ngun gc thc vt: 1.2.1. Cây u ra (Canavalin ensifirmis): ây là cây thuc hu Canavalia – có nhiu châu Phi, Vit Nam có nòi k trên. Trong tt c các nòi u ra u rt giàu enzim Ureaza, hàm lng có thn 20% cht khô. 1.2.2. da (Bromalaceae): Bao gm tt c các nòi da trng ly qu, ly si (k c các nòi da di). Trong các b phn khác nhau ca cây da (v, lõi, chi, thân, lá,…) u có cha enzim bromelain. Trong ó nhiu nht là phn lõi u qu da. Hot tính ca enzim bromelain ph thuc nhiu vào trng thái và u kin bo qun nguyên liu. Các nghiên cu ã ch ra rng các nguyên liu sy khô nhit 400C s gi c hot tính enzim tt hn so vi nguyên liu ã c bo qun lnh nhit 4 0 C. 1.2.3. Nha u (Carica Papaya. L): ây là loi cây n qu ph bin các nc nhit i. T qu ti hoc thân thu c nha (latex) chính là ch phm papain thô tó tinh ch thành papain thng phm. Hin nay ngi ta ã to ra c các ging u có sn lng m và hot tính papain cao khai thác có hiu qu ngun enzim này (không t vn ly qu). 1.2.4. t s loi nguyên liu thc vt khác: Khi tin hành nghiên cu khoa hc, y sinh hc, nhiu khi cn xem xét (nh tính, nh ng, cu trúc phân t, hot ng enzim, …) ca mt s loi enzim có trong bn thân nguyên liu ó nh lng s dng. áng chú ý hn c là: Ch phm enzim Polyphenoloxydaza (EPPO): n hình nht là eppo ca lá chè, ca i nh ht ca cao ti, nc ép qu nho. Ch phm loi này ph bin hn c là loi “bt axeton”. 1.2.5. t cc và mt s loi c cha tinh bt: Trong ht cc ny mm (malt) và mt s loi c ny mm (n hình là khoai lang) có t h enzim rt phong phú c ngi ta s dng t rt lâu trong các lnh vc: mt tinh t (mch nha), ru và bia (thm chí có mt phng pháp sn xut ru etylic mang tên là phng pháp maltaza hay phng pháp malt) 1.3. Ngun vi sinh vt: ây là ngun enzim phong phú nht, có hu ht các loài vi sinh vt nh: nm mc, vi khun và mt s loài nm men. Có th nói vi sinh vt là ngun nguyên liu thích hp nht sn xut enzim qui mô ln dùng trong công ngh và i sng. Dùng ngun vi sinh vt có nhng li ích chính nh sau: + Chng v nguyên liu nuôi cy vi sinh vt và ging vi sinh vt. + Chu k sinh trng ca vi sinh vt ngn: 16÷100 gi nên có th thu hoch nhiu ln quanh nm. + Có thu khin sinh tng hp enzim d dàng theo hng có li (nh hng s ng và tng hiu sut tng thu hi). + Giá thành tng i thp vì môt trng tng i r, n gin, d t chc sn xut. Tuy nhiên trong mi trng hp cn lu ý kh nng sinh c t (gây c, gây bnh) có bin pháp phòng nga, x lý thích hp. CÔNG NGH ENZIM GVC: Ths. Trn Xuân Ngch Trang: 5 sn xut ch phm enzim, ngi ta có th phân lp các ging vi sinh vt có trong t nhiên hoc các ging t bin có la chn theo hng có li nht, ch tng hp u th t loi enzim nht nh cn thit nào ó. Chng 2: SN XUT CÁC CH PHM ENZIM T VI SINH VT 2.1. u hoà quá trình sinh tng hp enzim trong môi trng nuôi cy vi sinh vt i mc ích nuôi cy thu hi enzim vi hiu sut cao, cn phi nhn r quá trình u hoà sinh tng hp enzim có các nh hng tác ng thích hp trong công ngh. T bào vi sinh vt ch tng hp enzim khi cn thit vi s lng thích hp mong mun. 2.1.1. u hoà theo hng óng m bi gen operator (gen u khin) _hin ng trn áp : + hin tng trn áp (c ch) (repression): là làm gim quá trình sinh tng hp do sn phm cui cùng ca quá trình nuôi cy. Hin tng này thng gp i vi các enzym xúc tác quá trình sinh tng hp mt chiu nh: quá trình sinh tng hp axit amin, nucleotit. Ví d: khi thêm mt axit amin nào ó vào môi trng nuôi cy thì t bào s không cn ng hp này na. Do ó cng sình ch quá trình sinh tng hp enzym, xúc tác cho quá trình tng hp nên chính axit amin ó. Enzym này chc tng hp tr li khi có nhu u ngha là khi làm gim nng axit amin tng ng. i vi h thng phân nhánh ngha là quá trình dn n vic to thành nhiu sn phm cui cùng khác nhau t mt c cht chung ban u thì c ch trn áp có thc thc hin theo các cách khác nhau. Ví d: Phn ng u tiên ca quá trình sinh tng hp các axit amin lizin, methionin, treonin u do enzym aspactokinaza xúc tác. Enzym này có 3 izoenzim. Ký hiu: a l , a m , a t . Quá trình sinh tng hp a l s b trn áp bi nng lizin. a m ca methionin. Riêng i vi a t thì treonin va là sn phm cui cùng ca c quá trình va là cht ban u sinh tng hp izolxin. Do ó quá trình sinh tng hp axit t ch b trn áp khi c treonin và izolexin t nng cao vt quá nhu cu ca t bào. Có th minh ho c ch trn áp này theo s: CÔNG NGH ENZIM GVC: Ths. Trn Xuân Ngch Trang: 6 al am at A B C D Methionin E G Lizin Treonin Izoloxin Ghi chú: A – C cht Aspartic ban u. B, C, D, G là các sn phm trung gian có tác dng trn áp. Nh vy ây s trn áp ch xy ra khi có s hp ng tác dng ca c 2 sn phm. u trn áp hp ng này cùng xy ra i vi quá trình sinh tng hp enzym ging nhau xúc tác cho các phn ng song song to thành 2 sn phm cui cùng khác nhau. Ví d: quá trình sinh tng hp valin và izolxin do 4 enzym ging nhau xúc tác theo s sau: Valin Izoloxin 432 1 Hin nay ngi ta cho rng ARN mi là yu t trn áp thc s cho quá trình sinh tng p các enzym xúc tác tng hp các axit amin tng ng. + Hin tng cm ng (induction): là hin tng ngc li vi hin tng trn áp làm ng lng enzym ca t bào (Ghi chú s trên: 1: -axeto.-oxyaxítintetaza 2: reductoizomeraza (axetolactat mutaza) 3: hydrooxyaxit dehydrataza 4: amino transpheraza 4 Phn ng 4 Phn ng 6 Phn ng -axetolactat -axeto -Oxybutirat -Dioxy metylvalerat -Xeto - metyl -Xeto izovalerat -Dioxy izovalerat CH 3 CHO hot ng CÔNG NGH ENZIM GVC: Ths. Trn Xuân Ngch Trang: 7 Ngha là khi trong môi trng nuôi cy có cht cm ng s kích thích cho vi sinh vt sinh tng hp nên nhiu enzym hn so vi bình thng. Cht cm ng c xem nh là mt cht nn (Cht c s, b khung cácbon) sinh ng hp enzym. Hin nay, ngi ta ch ra rng có th các sn phm trung gian ca quá trình bin i óng vai trò là cht cm ng, thm chí nhiu c cht ca enzym cng có th là cht cm ng. n hình là các gluxit (monosaccarit và polysaccarit). Trong s các enzim do vi sinh vt tng hp, có nhng enzim bình thng chc ng hp rt ít i nhng khi thêm mt s cht nht nh vào môi trng nuôi cy thì hàm ng ca chúng có th tng lên rt nhiu ln. Monod và Cohn (1925) gi các enzim này là enzim cm ng, cht gây nên hiu qu này là gi là cht cm ng. Các enzim cm ng thng là nhng enzim xúc tác cho quá trình phân gii nh: Proteinaza, amylaza, pectinaza, penixilinaza, _galactosidaza t bào E. coli. Khi nuôi cy E. coli trong môi trng glucoza và glyxerin, vi khun ch tng hp khong 10 phn t_galactosidaza/t bào. Nu nuôi cy trên môi trng lactoza là ngun các bon duy nht thì hàm lng enzim là 6÷7% tng hp lng protein ca t bào. Trích ra t t bào cha n 6000 phn enzim, ngha là tng lên gn 1000 ln so vi khi nuôi cy trong môi trng c. cm ng thng có tính cht dây chuyn. Trong h thng gm nhiu phn ng, c cht u tiên ca h thng có th cm ng quá trình sinh tng hp tt c các enzim xúc tác cho quá trình chuyn hoá ca nó. u này c thc hin theo c ch sau: Trc ht cht cm ng làm tng quá trình sinh tng hp enzim tng ng, sau ó sn phm này li m ng tng hp enzim phá hu nó, tip theo sn phm th 2 này li cm ng tng p nên enzim th 3,… Ví d: Histidin có tác dng cm ng hàng lot các enzim xúc tát cho quá trình chuyn hoá nó thành axít glutamic (Chasin và Magasamil (1968)). + C chu hòa theo kiu trn áp và cm ng: Zocob và Monod ã ra mô hình gii thích c ch ca 2 hin tng trn áp và cm ng trên c s di truyn. Theo mô hình này, s trn áp và cm ng sinh tng hp enzim c thc hin theo cùng mt c ch chung da trên c su hoà hot ng ca các gene di tác dng ca các cht phân t thp. Nhng cn c chính ca thuyt này nh sau: 1) Có s phân hoá chc nng ca các giai n khác nhau trong phân t AND trong nhim sc th, da vào chc phn ca chúng trong qui trình sinh tng hp Protein có th chia thành các loi gene sau: - Gene cu trúc (ký hiu: S 1 ,S 2 ,S 3 ) : mã hoá phân t protein enzim c tng hp, tc là th t các axit amin trong phân t enzim c tng hp là tu thuc vào th t các nucleotit ca n gene này. Các gene mã hóa các enzim c íp xp lin nhau thành t nhóm trên nhim sc th. Chúng là khuôn tng hp phân t ARN tt . - Gene Operator (ký hiu: O): cnh nhóm gene cu trúc, không mã hoá protein nhng m bo cho quá trình sao chép mã gene cu trúc theo c ch “óng m” ta nh công tc ca mt dây èn. Quá trình sao chép ch có th tin hành khi gene operator trng thái “m” (không kt vi cht nào c) và ngng li khi nó b “óng” (kt hp vi t cht c bit gi là cht trn áp represson). Mt gene operator có th “ph trách” mt nhóm gene cu trúc các gene cu trúc này cùng vi gene operator ca chúng hp thành CÔNG NGH ENZIM GVC: Ths. Trn Xuân Ngch Trang: 8 t n v sao chép s cp gi là mt operon. S tng hp ARN tt c bt u mt u ca operon và chuyn qua các gene cu trúc n u kia ca operon. - Gene Promotor (gene hot hoá ký hiu P) ng trc gene operator là n And mà ARN-polimeraza s kt hp và bt u quá trình sao chép các gene cu trúc. - Gene u hoà regulator (ký hiu R): Gene này mã hoá cho mt protein c bit gi là cht trn áp (repressor). Cht trn áp có vai trò “óng-m” gene operator. Do ó gene u hoà có th kim tra quá trình sao chép gene cu trúc thông qua cht trn áp này. + Không có repressor (sn phm cui cùng) R P O S1 S2 S3 ADN E3E2E1 A BC D ARNtt + Có repressor (sn phm cui cùng): Phiên mã CÔNG NGH ENZIM GVC: Ths. Trn Xuân Ngch Trang: 9 R P O S1 S2 S3 ADN : ARN-polymeraza : Repressor : coreressor R: Gene u hoà, P: Gene promotor, O: Gene Operator, S1, S2, S3: Các gene cu trúc. 2) Trong trng hp u hoà sinh tng hp enzim theo c ch trn áp, repressor do gene u hoà tng hp còn dng không hot ng (aporepessor) cha có kh nng kt p vi gene operator nên quá trình sao chép các gene cu trúc tin hành bình thng. Các enzim c tng hp xúc tác cho các phn ng to thành các sn phm cui cùng, n phm cui cùng này li có kh nng kt hp vi aporepessor và hot hoá nó. Aporepessor ã c hot hoá s kt hp vi operator ngn cn quá trình sao chép các gene cu trúc, làm ngng vic tng hp ARN tt tng ng do ó ình ch quá trình sinh ng hp các enzim tng ng. Trong trng hp này các sn phm mi c coi nh là cht trn áp (repressor). 3) i vi trng hp cm ng: + Không có cht cm ng R P O S1 S2 S3 ADN + Có cht cm ng: CÔNG NGH ENZIM GVC: Ths. Trn Xuân Ngch Trang: 10 ADNS3S2S1OPR ARNtt A BC D E1 E2 E3 minh ho c ch cm ng sinh tng hp enzim : Cht cm ng Khi không có mt cht cm ng, cht trn áp (repressor) c tng hp ã trng thái hot ng, nó kt hp vi gene u khin operator, quá trình sao chép mã ca gene cu trúc b bao vây nên các enzim tng ng không c tng hp. Khi có mt cht cm ng thì cht trn áp repressor b mt hot ng, tách khi gene u khin operator và quá trình sao chép mã bt u, kt qu làm tng lng enzim c ng hp. Nh vy ta thy hin tng trn áp và cm ng sinh tng hp enzim là hai mt i lp a mt quá trình hoá sinh thng nht c thc hin thông qua hot ng “óng-m” gene di tác dng ca các cht phân t thp 2.1.2. u hoà tng tác gia ARN-polymeraza vi gene promotor: Nhiu du hiu thc nghim cho thy các gene bo m sinh tng hp mt s enzim m ng xúc tác cho quá trình phân gii không ch chu s kim tra theo c ch cm ng nhã trình bày trên mà còn chu s kim tra theo mt c ch khác nh tác dng ca AMP vòng (AMP v ) gi là “trn áp phân gii” (cactabolic repressor) AMP v có tác dng kích thích ca AMP v i vi quá trình sao chép mã ca các operon phân gii. Hin tng này ã c nghiên cu nhiu i vi operon lactoza. Theo nhiu tác gi, tác dng kích thích ca AMP v i vi quá trình sao chép mã c thc hin nh mt protein c bit làm trung gian gi là protein nhn AMP v , hay còn gi là protein hot hoá gene phân gii CAP (catabolite gene activator protein). Khi AMP v kt hp vi CAP to thành phc hp có tác dng hot hoá gene promotor làm cho ARN-polymeraza d dàng kt hp vi nó t u quá trình sao chép mã. Nh vy AMP v có tác dng làm tng cng quá trình sao chép. Cng có ý kin cho rng phc hp AMP v -CAP-ARN-polymeraza cho phép bt u quá trình sao chép mã. [...]... ng h p enzyme này + Trong quá trình nuôi c y vi khu n, trong s các ngu n nit vô c thì NH4, H2PO4 là t h n c Các mu i amon và nitrat khác u làm gi m ho t l c enzyme Trang: 15 CÔNG NGH ENZIM GVC: Ths Tr n Xuân Ng ch + i v i x khu n a nhi t Actynomyces Vulgaris U2 thì pepton là ch t c m ng sinh t ng h p enzyme proteaza là t t nh t + Các axit amin có nh h ng rõ r t nh t n quá trình sinh t ng h p enzyme. .. s n ph m thu phân c ng làm t ng áng k sinh t ng h p proteinaza vsv - i v i h vsv sinh t ng h p enzyme pectinaza: ng gi ng nh i v i h vsv sinh t ng h p enzyme proteaza, n u dùng k t h p nit u c và vô c s có tác d ng t t n quá trình sinh t ng h p pectinaza Tuy nhiên, mu i nitrat kim lo i ki m l i ki m hãm enzyme này i v i Asp Niger, ngu n nit t n kém nh t sinh t ng h p pectinaza la NH4H2PO4 i v i Asp... (CuSO4) Các mu i khoáng có Fe, Mn, Zn, B, Mo, Cu nh h ng Trang: 16 CÔNG NGH ENZIM GVC: Ths Tr n Xuân Ng ch n kh n ng sinh t ng h p xenlulaza Trong a s tr ng h p biotin (VTM H) và m t s VTM c ng r t c n thi t cho quá trình sinh t ng h p enzyme Khi l a ch n môi tr ng c n chú ý n c thành ph n nh tính và nh l ng sao cho quá trình sinh t ng h p enzyme mong mu n là cao nh t Mu n v y ng i ta có th s ng m t s... m 2) Ph ng pháp toán h c mô hình hoá th c nghi m: cho phép xác nh nhanh chóng và úng n t l các thành ph n môi tr ng nuôi c y và các y u t công ngh b o m cho ho t ng s ng và sinh t ng h p enzyme cao nh t 2.4.4 Các lo i môi tr ng nuôi c y vi sinh v t sinh t ng h p enzyme : Có th chia làm 2 lo i: môi tr ng t ng h p và môi tr ng t nhiên (ph c h p) - Môi tr ng t ng h p: là môi tr ng bao g m các ch t v i... n nên c s d ng r t nhi u trong công nghi p s n xu t các ch ph m enzyme vi sinh v t - Các nguyên li u d chu n b làm môi tr ng t nhiên bao g m: cám và b t h t c c, c chi t ngô, d ch ép hoa qu , rau, khô d u, bã r u, r ng, s n ph m phân hu n m men bia, tr u, lõi ngô( làm ch t n, t o x p) Khi l a ch n s d ng môi tr ng c n chú ý n các ch t có tác d ng u hoà sinh t ng h p enzyme, c bi t các ch t c m ng B... t s tr ng h p ng i ta ng hoá s b tinh b t tr c khi thanh trùng (b ng ch ph m enzyme amylaza) Khi ó ng maltoza ct o thành là ch t c m ng t t, môi tr ng tr ng b gi m nh t nên d dàng cho quá trình khu y tr n và s c khí -M t s lo i môi tr ng dinh d ng s n xu t ch ph m enzyme amylaza d ng trong CNSX r u etylic nh sau: Trang: 19 CÔNG NGH ENZIM GVC: Ths Tr n Xuân Ng ch +Môi tr ng nuôi c y 40m3 c a Trung Qu... sinh t có ch a enzym c s d ng tr c ti p d i d ng thô không c n tách t p ch t n u chúng không gây nh h ng áng k n s n ph m và quy trình công ngh sau này (Ví : s n xu t r u, n c ch m th c v t, da) C ng có khi ng i ta c n s d ng ch ph m enzym tinh khi t trong công nghi p d t, công nghi p m ch nha, y h c, nghiên c u khoa c Enzym nói chung r t d b gi m ho t tính d i tác d ng c a các tác nhân bên ngoài do ó... dextrinaza ng thích h p nh t là 0,15% -Ion Mg 2+ có tác d ng sinh t ng h p và n nh các enzyme có ho t tính nhi t cao c bi t Ca2+có trong thành ph n c a α-amylaza (trong 1 phân t gam α-amylaza a Asp Oryzae có 20g Ca, c a Bac Subtilis có 4g Ca) Trong môi tr ng nuôi c y Ca2+ nâng cao kh n ng t ng h p α-amylaza, b o v enzyme này kh i s nh h ng c a proteaza -L u hu nh S v i ngu n ch y u là các axit amin... nh ng òi h i công ngh cao, thi t b t ti n, chi phí b o qu n l n n n a m t s loài vi sinh v t nh n m m c không có bào t và m t s lo i vi rút t ra không thích h p khi b o qu n ông khô 2.3.4 Ph ng pháp làm l nh ông trong nit l ng: Khí nit hoá l ng nhi t r t th p -1650C n -1960C nên n u b o qu n vi sinh v t môi tr ng này s r t t t vì gi ng c gi b t bi n trên 10 n m Tuy nhiên ây là l nh c công ngh cao (c... t bi n Asp Oryzae 251-90 lên 16% và ch ng nguyên thu Asp Oryzae 132-63 lên 7 14% Nhi u axit amin l i có tác d ng c ch sinh t ng h p enzyme nh : valin, axit glutamic, izol xin, treonin Nói chung có kho ng 10 axit amin nh v y Axit amin có tác ng kích thích sinh t ng h p enzyme khi trong t bào vsv không t t ng l ng l ng axit amin t do so v i môi tr ng nuôi c y + Ngoài ra, các baz purin nh A (adenin),