KH O SÁT HO T TÍNH LIGNIN Ả Ạ PEROXIDASE, MANGANESE PEROXIDASE, CELLULASE C A CH NG Ủ Ủ PHANEROCHAETE CHRYSOSPORIUM KHI B X LÝ Ị Ử B NG SHOCK NHI T VÀ TIA UVẰ Ệ Nhóm th c hi n: ự ệ GV h ng d nướ ẫ : Th.S H Thiên Hoàngồ 1.NGUY N VĂN HUYỄ 10037011 2. NGÔ TH L HUY NỊ Ệ Ề 10035861 3. NGUY N TH THÙY LINHỄ Ị 10085471 4. H NH T KHÁNHỔ Ậ 10042591 5. LÊ DUY TH NGẮ 10049421 DANH SÁCH NHÓM IV. PH NG PHÁP KH O SÁT HO T TÍNH ƯƠ Ả Ạ C A LIP, MNP VÀ CELLULASE C A Ủ Ủ PHANEROCHAETE CHRYSOSPORIUM B NG Ằ TIA UV. II. KH O SÁT HO T TÍNH C A LiP, MnP Ả Ạ Ủ VÀ CELLULASE THEO TH I GIAN NUÔI Ờ C Y Ấ PHANEROCHAETE CHRYSOSPORIUM I. M Ở Đ UẦ III. PH NG PHÁP KH O SÁT HO T TÍNH ƯƠ Ả Ạ C A LIP, MNP VÀ CELLULASE C A Ủ Ủ PHANEROCHAETE CHRYSOSPORIUM B NG Ằ SHOCK NHI T Ệ Lignin là m t polime phong phú trong t ộ ự nhiên đ c th c v t t ng h p, là m t ngu n ượ ự ậ ổ ợ ộ ồ ch t th m l n trên trái đ t. Lignin t o đ ấ ơ ớ ấ ạ ộ c ng cho t bào th c v t, giúp cho t bào ứ ế ự ậ ế đ ng v t trá nh kh i các xâm nhi m c a vi ộ ậ ỏ ễ ủ sinh v t.ậ I. M đ uở ầ Vi khu n và n m có kh năng sinh ra ẩ ấ ả enzyme phân h y lignin, ch y u là ủ ủ ế n m.ấ  Các enzyme có kh năng phân h y Ligin ả ủ đ c ng d ng trong th c ph m và th c ượ ứ ụ ự ẩ ứ ăn gia súc. ng d ng vào CN s n xu t gi y, t y Ứ ụ ả ấ ấ ẩ tr ng b t gi y b ng ph ng pháp sinh ắ ộ ấ ằ ươ h c bi n tính x s i.ọ ế ơ ợ  ng d ng s lý ch t th i, t y tr ng Ứ ụ ử ấ ả ẩ ắ cellulose và các ch t h u c đ c h i: ấ ữ ơ ộ ạ PAH, PCB, dioxin….  Kh năng chuy n hóa ch t h u c ả ể ấ ữ ơ thành nh ng s n ph m có ích.ữ ả ẩ Nhi u công trình nghiên c u cho th y ề ứ ấ Phanerochaete chrysosporium là lo i vi sinh ạ v t đ c bi t và đ c nghiên c u nhi u do ậ ượ ế ượ ứ ề kh năng phân h y lignin b ng h enzyme ả ủ ằ ệ c a chúng:ủ  Lignin Peroxidase (LiP)  Manganese Peroxidase (MnP)  Cellulase Kh o sát ho t tính h enzyme theo th i ả ạ ệ ờ gian chi u tia UV và nhi t đ gây shock ế ệ ộ nhi tệ a)Nguyên li u:ệ Ch ng n m m c tr ng ủ ấ ụ ắ Phanerochaete chrysosporium t ự nhiên đ c phân l p t thân g ượ ậ ừ ỗ m c.ụ II. KH O SÁT HO T TÍ NH C A LiP, MnP VÀ Ả Ạ Ủ CELLULASE THEO TH I GIAN NUÔI C Y Ờ Ấ PHANEROCHAETE CHRYSOSPORIUM  Loài n m m c tr ng là nhóm n m d t n ấ ụ ắ ấ ị ả thu c nhóm ộ Basidiomycetes, l p ớ Hymenomycetes, b ộ Aphyllomycetes, chi Phanerochaete…  Phanerochaete chrysosporium là lo i n m ạ ấ gây th i tr ng g .ố ắ ở ỗ  Có kh năng phân gi i hoàn toàn Lignin ả ả thành carboxyl và H2O nh vào m t h ờ ộ ệ enzyme ngo i bàoạ Đ c tính c a ặ ủ Phanerochaete chrysosporium là m t lo i vi sinh v t ộ ạ ậ hi u khí nên chúng ta nuôi c y l c trong ế ấ ắ môi tr ng PGB (l ng). ườ ỏ Môi tr ng PGB ( Potatos Glucose ườ Bloth): Thành ph n môi tr ng (g/l):ầ ườ Khoai tây: 200g Glucose: 20g N c c t đ y đ :ướ ấ ầ ủ 1000ml [...]... PHANEROCHAETE CHRYSOSPORIUM BẰNG SHOCK NHIỆT và CHIẾU UV I. PHƯƠNG PHÁP  SHOCK NHIỆT 1. Nguyên liệu  Chủng nấm mục trắng Phanerochaete chrysosporium 2. Phương pháp PHƯƠNG PHÁP KHẢO SÁT HOẠT TÍNH CỦA LIP, MNP VÀ  XENLULASSE CỦA  PHANEROCHAETE CHRYSOSPORIUM BẰNG SHOCK NHIỆT Shock nhiệt là sự thay đổi nhiệt độ  đột ngột tăng cao hoặc hạ thấp so  với nhiệt độ phát triển tối ưu của sinh vật Phương pháp Shock nhiệt đối với ... Khảo sát hoạt tình của Cellulase.   Ở nhiệt độ 50oC thì hoạt tính hầu  như không thay đổi Ở nhiệt độ 60oC khi sock nhiệt ở  thời gian là 90 phút thì hoạt tính của Cellulase đạt giá trị cao nhất là  0.6UI/ml. cao gấp 2 lần so với hoạt tính không được sock nhiệt Khảo sát hoạt tình của Cellulase.   Ở nhiệt độ 70oC hoạt tính của cellulose có  chiều hường giảm dần Biểu đồ thể hiện sự thay đổi hoạt tính của Cellulase  ... Shock nhiệt đối với  PHANEROCHAETE CHRYSOSPORIUM Thực hiện ở 3 mức nhiệt độ 50, 60 và 70 độ C Khảo sát hoạt tính của LiP  Ở nhiệt độ 50oC hoạt tính của LiP chưa có sự thay  đổi bức phá cao, nếu tăng thời gian shock nhiệt lên  thì hoạt tính của LiP tăng dần Khảo sát hoạt tình của LiP  Ở nhiệt độ 60oC hoạt tính LiP đạt cực  đại ở thời gian là 120 phút (0.077UI/ml)  khi tăng dần thời gian shock nhiệt lên tới 180 phút thì hoạt tính của LiP ... ngày nuôi cấy lắc. Ta thu chế phẩm có hoạt tính LiP cao nhất là từ ngày thứ 5 đến ngày thứ 7 Hoạt tính của MnP và Cellulase đạt  đươc mức cao nhất là ngày thứ 7 Vậy qua kết quả khảo sát hoạt tính LiP, MnP  và Cellulase theo thời gian nuôi cấy lắc  Phanerochaete chrysosporium,  nhận thấy thu  được ngày thứ 7 sẽ cho hoạt tính của 3 loại  Enzyme ở mức cao nhất  PHƯƠNG PHÁP KHẢO SÁT HOẠT TÍNH  CỦA LIP, MNP VÀ CELLULASE CỦA   PHANEROCHAETE CHRYSOSPORIUM ... lên tới 180 phút thì hoạt tính của LiP  giảm chỉ còn 0.021UI/ml So với mẫu chuẩn khi chưa shock nhiệt là 0.033UI/ml Khảo sát hoạt tình của LiP  Ở nhiệt độ 70oC hoạt tính LiP cao nhất  trong thời gian 15 phút là 0.5UI/ml và sau đó giảm dần, khi tăng thời gian lên  tới 90 phút thì hoạt tình chỉ còn  0.018UI/ml Biểu đồ thể hiện sự thay đổi hoạt tính của LiP  Shock nhiệt đối với  PHANEROCHAETE CHRYSOSPORIUM Khảo sát hoạt tình của MnP ... chiếu tia UV trong vòng 45 phút 5. Kết Quả  Tia UV có tác dụng làm  tăng hoạt tính của cellulase,  không  có tác động rõ đối với hoạt tính LiP  và làm giảm hoạt tính của MnP:  Hoạt tính cellulase đạt   1.51UI/ml (gấp 5 lần so  với ban đầu là 0.28UI/ml) dưới tác động của tia UV trong 30 phút  Hoạt tính LiP đạt được  0.0485UI/ml (ban đầu là   0.0328UI/ml) dưới tác động của tia UV trong 30  phút  Hoạt tính MnP của   Phanerochaete ... II) PHƯƠNG PHÁP KHẢO SÁT HOẠT TÍNH CỦA LIP, MNP VÀ  CELLULASE CỦA  PHANEROCHAETE CHRYSOSPORIUM BẰNG TIA UV 1. Nguyên liệu   Chủng nấm  mục  trắng  Phanerochaete chrysosporium được  Phòng  sinh  học  phân  tử  trường  Đại học Khoa học tự nhiên phân lập từ thân gỗ mục 3. Nguyên tắc của phương  pháp  Tia UV là tia tử ngoại có bước sóng trung gian (giữa  ánh sáng nhìn thấy được và tia X). Tác dụng của tia ...  Sau đây là các đồ thị biểu thị sự thay đổi hoạt tính của LiP, MnP,  cellulasse theo thời gian khi được chiếu trên tia UV  Qua  đồ  thị trên ta nhận thấy rằng  tia UV có  ảnh hưởng  đến hoạt tính LiP của Phanerochaetechrysosporium  Sau đó cho lượng vi sinh vật này vào môi trường PGB và nuôi cấy  lắc   Nếu  Phanerochaete chrysosporium chịu  tác  động  của tia UV trong  30  phút  thì  hoạt tính LiP  đạt  được ... Khảo sát hoạt tình của MnP  Ở nhiệt độ 50oC hoạt tính của MnP  thay đổi không đáng kể Ở nhiệt độ 60oC thì MnP đạt cực  đại tại thời điểm 60 phút, tăng gấp  đôi so với khi không sock nhiệt (từ  60UI/ml tăng lên 120UI/ml) Khảo sát hoạt tình của MnP  Ở nhiệt độ 70oC thì hoạt tính của MnP  giảm rất thấp chỉ 0.45UI/ml ở thời gian là  15 phút và ở 60 phút là 0.15UI/m Biểu đồ thể hiện sự thay đổi hoạt tính của MnP   Khảo sát hoạt tình của Cellulase.  ... 30  phút,  hoạt tính đạt  1.51UI/ml,  tăng  khoảng  5  lần  so  với  ban  đầu  là    (0.28UI/ml).    Nhưng    nếu    thời  gian  chiếu UV  tăng  lên  đến  45  phút  thì   hoạt   tính cellulase giảm  xuống  gần  bằng 0  (0.1025UI/ml)   Vậy  nếu  Phanerochaete chrysosporium chịu  tác  động  của tia UV thì  chỉ  có  hoạt tính của LiP  và cellulase tăng  còn  MnP  sẽ  giảm  và bằng 0  . KH O SÁT HO T TÍNH LIGNIN Ả Ạ PEROXIDASE, MANGANESE PEROXIDASE, CELLULASE C A CH NG Ủ Ủ PHANEROCHAETE CHRYSOSPORIUM KHI B X LÝ Ị Ử B NG SHOCK NHI T VÀ TIA UV Ệ Nhóm th c hi n:. KH O SÁT HO T TÍNH ƯƠ Ả Ạ C A LIP, MNP VÀ CELLULASE C A Ủ Ủ PHANEROCHAETE CHRYSOSPORIUM B NG Ằ TIA UV. II. KH O SÁT HO T TÍNH C A LiP, MnP Ả Ạ Ủ VÀ CELLULASE THEO TH I GIAN NUÔI Ờ C Y Ấ PHANEROCHAETE. O SÁT HO T TÍNH ƯƠ Ả Ạ C A LIP, MNP VÀ CELLULASE C A Ủ Ủ PHANEROCHAETE CHRYSOSPORIUM B NG SHOCK NHI T và CHI U UV Ệ Ế I. PH NG PHÁP ƯƠ SHOCK NHI TỆ 1. Nguyên li uệ  Chủng nấm mục trắng Phanerochaete