BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI BÁO CÁO KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ĐỀ TÀI NCKH CẤP BỘ PHÁT HIỆN DNA PHÔI THAI TRONG MÁU MẸ BẰNG KỸ THUẬT SINH HỌC PHÂN TỬ NHẰM CHẨN ĐOÁN VÀ ĐÁNH GIÁ MỘT SỐ BỆNH DI TRUYỀN CHỦ NHIỆM ĐỀ TÀI: TS. NGUYỄN THANH THUÝ CƠ QUAN CHỦ TRÌ ĐỀ TÀI: TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI CƠ QUAN CHỦ QUẢN: BỘ Y TẾ THỜI GIAN THỰC HIỆN: 9/2005 – 9/2008 (Quyết định phê duyệt số 3303/QĐ-BYT ngày 9 tháng 9 năm 2005) 7000 14/10/2008 HÀ NỘI - 2008 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI BÁO CÁO KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ĐỀ TÀI NCKH CẤP BỘ PHÁT HIỆN DNA PHÔI THAI TRONG MÁU MẸ BẰNG KỸ THUẬT SINH HỌC PHÂN TỬ NHẰM CHẨN ĐOÁN VÀ ĐÁNH GIÁ MỘT SỐ BỆNH DI TRUYỀN CHỦ NHIỆM ĐỀ TÀI: TS. NGUYỄN THANH THUÝ CƠ QUAN CHỦ TRÌ ĐỀ TÀI: TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI ĐƠN VỊ PHỐI HỢP: VIỆN PHỤ SẢN HÀ NỘI VIỆN NHI QUỐC GIA CƠ QUAN CHỦ QUẢN: BỘ Y TẾ THỜI GIAN THỰC HIỆN: 9/2005 – 9/2008 (Quyết định phê duyệt số 330 /QĐ-BYT ngày 9 tháng 9 năm 2005) Tổng kinh phí thực hiện đề tài : 300 triệu đồ ng Trong đó: Kinh phí SNKH : 300 triệu đồng Nguồn khác (nếu có) : 0 triệu đồng HÀ NỘI - 2008 BẢN TỰ ĐÁNH GIÁ Về tình hình thực hiện và những đóng góp mới của đề tài Khoa học công nghệ cấp Bộ 1. Tên đề tài: “Phát hiện DNA phôi thai trong máu mẹ bằng kỹ thuật sinh học phân tử nhằm chẩn đoán và đánh giá một số bệnh di truyền. 2. Chủ nhiệm đề tài : TS. Nguyễn Thanh Thúy. 3. Cố vấn đề tài : GS. Vũ Triệu An. 4. Cơ quan chủ trì đề tài : Trường Đại học Y Hà Nội. 5. Thời gian thực hiện đề tài: 36 tháng (từ 9/2005−9/2008; đã được phê duyệt số 3303/QĐ−BYT ngày 9/9/2005). 6. Tổng kinh phí thực hiện đề tài: 300 triệu đồng; trong đó kinh phí từ ngân sách là 300 triệu đồng. 7. Tình hình thực hiện đề tài so với đề cương: 7.1. Về mức độ hoàn thành khối lượng công việc: Đề tài đã hoàn thành các nội dung công việc mà đề c ương đã đặt ra về các bước để hoàn chỉnh kỹ thuật, về số lượng mẫu, để đánh giá độ chính xác, tin cậy của kỹ thuật cũng như tiến độ thực hiện của đề tài. Sau đây là bảng thống kê số lượng mẫu khi triển khai thực hiện so với số mẫu tối thiểu mà đề cương đặt ra: TT Nội dung công việc Thời gian dự kiến Thời gian tiến hành Đánh giá 1 Thông qua đề cương 3/2005 8/2005 Hoàn thành 2 Xây dựng quy trình tách DNA và hoàn chỉnh kỹ thuật PCR lồng. 3/2005- 12/2005 8/2005-12/2005 Hoàn thành 3 − Thu thập mẫu và triển khai kỹ thuật PCR lồng để phát hiện DNA phôi thai t rong máu mẹ. − 1 bài báo. 1/2006- 12/2006 1/2006-12/2006 Bài báo đăng ở Tạp chí nghiên cứu Y học-Đại học Y Hà Nội, tập 47-số 2- 5/2007, tr 6-9. Hoàn thành 4 − Triển khai áp dụng kỹ thuật trên v ào xác định NST X và Y của phôi qua các thời kỳ mang thai khác nhau; V à áp dụng trong gia đình có tiền sử b ệnh tật di truyền như: tăng sản t hượng thận bẩm sinh, loạn dưỡng cơ Duchene. − 1 bài báo. 1/2007- 6/2008 Bài báo đăng ở Tạp chí Y học Việt Nam, số 2 tháng 5/2008, tr 13-17 Hoàn thành ¾ Yêu cầu kỹ thuật, chỉ tiêu chất lượng đối với sản phẩm tạo ra, dạng kết quả: Chất lượng cần đạt Số lượng sản phẩm tạo ra STT Tên sản phẩm và chỉ tiêu chất lượng chủ yếu Dự kiến Đạt được Dự kiến Đạt được 1 Phát hiện DNA phôi trong máu mẹ tỷ lệ 1/300 000 tế bào theo các tháng: 3 tháng đầu 3 tháng giữa 3 tháng cuối 75% 80% 80% 90,9% 97,2% 100% 30 mẫu 30 mẫu 30 mẫu 41 mẫu 30 mẫu 31 mẫu 2 Phát hiện DNA phôi ở thời kỳ 3 tháng đầu trong máu các thai phụ trong gia đình có tiền sử bệnh di truyền như: tăng sản thượng thận bẩm sinh, loạn dưỡng cơ Duchene.Tiến hành phát hiện đột biến nếu có thể , chẩn đoán trước sinh không xâm phạm. 3-5 mẫu 3 mẫu 7.2. Về các yêu cầu khoa học và chỉ tiêu cơ bản của sản phẩm KHCN 7.2.1. Đối chiếu với mục tiêu và các sản phẩm đặt ra trong đề cương,đề tài đã hoàn thành đúng theo 2 mục tiêu nghiên cứu. Phương pháp nghiên cứu có tính khoa học và tin cậy. Kết quả nghiên cứu đã trả lời đúng cho mục tiêu nghiên cứu. Đã hoàn chỉnh quy trình phát hiện DNA phôi thai trong máu mẹ bằng kỹ thuật sinh học phân tử không xâm phạm PCR lồng theo các b ước sau: − Các tác giả đã tiến hành hoàn chỉnh việc chiết tách DNA phôi trên 10 mẫu huyết thanh sản phụ lấy khi chuyển dạ đẻ, trong đó 6 sản phụ sinh con trai và 4 sản phụ sinh con gái. Sau khi chiết tách DNA thì lựa chọn cặp mồi để thực hiện kỹ thuật PCR lồng kiểm tra DNA đã chiết tách và phát hiện DNA phôi thai. − Sau đó tiến hành lấy máu 114 sản phụ, trong đó: 45 sản phụ có thai từ 6–12 tuần; 39 sả n phụ có thai từ 12–24 tuần; 30 sản phụ có thai từ 24–36 tuần. − Chiết tách DNA phôi thai từ các mẫu huyết thanh của các thai phụ này. Tiến hành kỹ thuật PCR lồng để phát hiện gen SRY của DNA phôi và đánh giá độ chính xác của kỹ thuật. Kết quả cho thấy độ đặc hiệu là 100%, còn độ nhạy và độ chính xác thay đổi lần lượt như sau: 3 tháng đầu độ nhạy là 81,8% và 90,9%; 3 tháng giữa là 94,4% và 97,2%; 3 tháng cuối là 100%. Kết quả chung củ a các thai phụ từ 6–36 tuần có độ nhạy là 91,4% và độ đặc hiệu là 100%, độ chính xác kỹ thuật là 95,7%. Sau khi hoàn chỉnh kỹ thuật, các tác giả bước đầu ứng dụng phát hiện DNA phôi thai từ máu mẹ theo dõi phát hiện đột biến chẩn đoán trước sinh cho 3 thai phụ của 3 gia đình có tiền sử bị bệnh di truyền: 2 gia đình có tiền sử bị teo cơ Duchenne và 1 gia đình có tiền sử bị tăng sản thượng thận bẩm sinh. Kết quả: 2 trong 3 thai phụ sinh con nữ lành lặn khoẻ mạnh. ¾ Ý nghĩa thực tiễn và hiệu quả của việc ứng dụng kết quả nghiên cứu: Việc hoàn chỉnh kỹ thuật này đã đư a ra một marker mới cho việc sàng lọc gen để thực hiện chẩn đoán trước sinh không xâm phạm, nhất là thai phụ trong gia đình có bệnh di truyền liên kết với giới tính: nếu là các thai nam thì biết trước và xét nghiệm gen học xem thai có bị bệnh hay không, từ đó có kế hoạch huỷ thai sớm nhằm hạn chế tối thiểu những ảnh hưởng tới mẹ. Bên cạnh đó, đối với các thai phụ mang thai nữ thì hạn chế các nguy cơ thăm dò không cần thiết do thai nhi không bị bệnh. Còn đối với các thai phụ trong gia đình có tiền sử tăng sản thượng thận bẩm sinh thì có kế hoạch điều trị sớm đối với các thai nữ để chỉnh hình bộ phận sinh dục ngay từ trong bụng mẹ, và hạn chế các thăm dò không cần thiết đối với các thai nam… 7.2.2. Đề tài đã đăng tải được 2 bài báo trên T ạp chí Nghiên cứu khoa học trường Đại học Y Hà Nội và Tạp chí Y Học Việt Nam: 1. Nguyễn Thanh Thúy, Vũ Triệu An, Nguyễn Duy Ánh. Kết quả bước đầu xác định DNA phôi thai trong máu mẹ bằng kỹ thuật PCR lồng. Tạp chí nghiên cứu Y học−Đại học Y Hà Nội, tập 47, số 2−5/2007, tr 6−9. 2. Nguyễn Thanh Thuý, Nguyễn Duy Ánh. Phát hiện DNA phôi thai từ huyết thanh mẹ bằng kỹ thuật PCR lồng – hướ ng tới một marker mới cho sàng lọc gen. Y học Việt Nam số 2, 5/2008.tr 13-17. 7.2.3. Đề tài đã giúp Sinh viên Ngô Thị Thúy – Lớp Cử nhân KTYH 2004 – 2008: hoàn thành khoá luận “ Phát hiện DNA phôi thai trong huyết thanh thai phụ 3 tháng cuối bằng kỹ thuật PCR lồng”. Đã bảo vệ ngày 5/6/2008 theo QD số 1215/QD –YHN ,khoá luận đạt loại xuất sắc. Ngoài ra, giúp 3 Kỹ Thuật Viên của bộ môn nâng cao kỹ thuật của mình về Sinh học phân tử: − Kỹ sư T ạ Thị Mến: Chiết tách DNA bằng QIAgen Kit và chiết tách DNA phôi. − KTV. Nguyễn Thị Thanh Bình và KTV. Nguyễn Văn Tuất: Làm quen với kỹ thuật Sinh học phân tử và chạy thành thạo điện di phát hiện DNA phôi thai. 7.3. Về tiến độ thực hiện: Theo đúng dự đoán sáng suốt của Hội đồng Khoa học công nghệ tư vấn tuyển chọn, Bộ Y Tế và Hội đồng khoa học đề tài s ử dụng kỹ thuật mới nên có khó khăn về việc hoàn chỉnh kỹ thuật trong quá trình nghiên cứu, nên chủ nhiệm đề tài đã chủ động đi học thêm kỹ thuật tại CHRU Lille Cộng hòa Pháp bằng kinh phí do Cộng hòa Pháp tài trợ. Sau khi triển khai kỹ thuật tại Bộ môn Miễn dịch − Sinh lý bệnh, Trường Đại học Y Hà Nội, cho kết quả tốt thì mới triển khai trên nhóm đánh giá độ tin cậy kỹ thuật và nhóm bệnh nhân. Vì vậy mặc dù khó khăn nhưng đề tài vẫn đảm bảo tiến độ theo đúng kế hoạch vạch ra trong đề cương, và vượt mức một số chỉ tiêu đặt ra như: nhóm đã đánh giá độ tin cậy kỹ thuật thêm 14 sả n phụ và độ tin cậy kỹ thuật cao hơn mức đề cương đặt ra. Nhóm bước đầu áp dụng đạt yêu cầu của đề cương nghiên cứu đặt ra. 8.1. Về những đóng góp mới của đề tài: 8.1. Về giải pháp khoa học – công nghệ: Là một trong những nghiên cứu đầu tiên sử dụng biện pháp không xâm phạm vào việc chẩn đoán trước sinh. Trên cơ sở đó xây dựng quy trình chẩn đoán trước sinh. 8.2. Về phương pháp nghiên cứu: Không 8.3. Những đóng góp mới khác: Đã xây dựng quy trình chẩn đoán trước sinh ứng dụng cho một số bệnh di truyền. Hà Nội, ngày tháng năm 2008 CHỦ NHIỆM ĐỀ TÀI TS. Nguyễn Thanh Thúy DANH SÁCH NHỮNG CÁ NHÂN VÀ ĐƠN VỊ THAM GIA THỰC HIỆN Chủ nhiệm đề tài : TS. Nguyễn Thanh Thuý. Những người tham gia chính: 1. GS.Vũ Triệu An - Cố vấn đề tài. 2. KS. Nguyễn Thị Thanh Bình - Thư ký đề tài. 3. PGS.TS Nguyễn Thị Phượng − Phó chủ nhiệm bộ môn Nhi. 4. ThS. Nguyễn Duy Ánh − Phó giám đốc Viện phụ sản Hà nội. 5. KS. Tạ Thị Mến. 6. KS. Đặng Đức Hiếu. 7. KTV. Nguyễn Vă n Tuất. 8. Sinh Viên Y4 Ngô Thị Thuý. Đơn vị phối hợp nghiên cứu: Đề tài đã nhận được sự phối hợp nghiên cứu của khoa Nội tiết − Chuyển hoá − Di truyền Viện Nhi Trung Ương ; Viện Phụ sản Hà nội. VIẾT TẮT AFP Alpha Feto Protein. ATL1 Gen 216 bp đặc hiệu trên NST X. bp base pair = Cặp base. CK Creatinin kinase. cs Cộng sự. CYP21 Cytochrome 450 protein gene 21. CYP21P Cytochrome 450 protein pseudogene 21. DMD Dychenne Muscular Dystophy = Bệnh loạn dưỡng cơ Duchenne DNA Deoxyribonucleic Acid. dNTP Deoxyribo Nucleic Triphosphate. Exon Đoạn DNA mang thông tin di truyền của gen. FISH Fluorescent In Situ Hybridization = Kỹ thuật lai tại chỗ huỳnh quang. GEq Genome Equivalents = Đương lượng gen. hCG Human Chorionic Gonadotropin. hCYCLO human Cyclophillin gene (7p13). Kb Kilobase. NST Nhiễm sắc thể. OD Optical Density = Mật độ quang học. PCR Polymerase Chain Reaction = Ph ản ứng khuếch đại chuỗi. QF–PCR Quantitative Fluorescent Polymerase Chain Reaction = Kỹ thuật PCR định lượng huỳnh quang. RhD Rhesus D. RNA Ribonucleic Acid. SRY Sex determining Region on the Y chromosome = Vùng quyết định giới tính trên NST Y. TBE Hỗn hợp Tris, Boric acid và EDTA. TDF Testis Determining Factor = Yếu tố quyết định phát triển tinh hoàn. TSTTBS Tăng sản thượng thận bẩm sinh. uE 3 Unconjugated Estriol = Estriol không liên hợp. MỤC LỤC VIẾT TẮT ĐẶT VẤN ĐỀ 1 CHƯƠNG 1:TỔNG QUAN 3 1.1. Vài nét về tình hình chung và lịch sử phát hiện 3 1.2. Nguồn gốc DNA phôi thai trong huyết thanh mẹ 5 1.2.1. Những tế bào thai có nhân lưu hành trong tuần hoàn mẹ 5 1.2.2. Rau thai 7 1.2.3. Sự trao đổi trực tiếp của các phân tử DNA giữa mẹ và thai 8 1.3. Ứng dụng lâm sàng 8 1.3.1. Phát hiện giới tính 9 1.3.2. Chẩn đoán thai lệch bội lẻ 9 1.3.3. Phát hiện các trường hợp mang thai có nguy cơ tiền sản giật 10 1.3.4. Phát hiện những biến chứng khác khi mang thai 11 1.3.5. Xác định tính trạng RhD và bệnh β−thalassemia của thai 11 1.4. Các kỹ thuật phát hiện DNA phôi thai lưu hành trong tuần hoàn mẹ 12 1.4.1. Kỹ thuật PCR thông thường 12 1.4.2. Kỹ thuật PCR lồng 12 1.4.3. Kỹ thuật PCR định lượng 12 1.5. Tình hình nghiên cứu trong và ngoài nước 13 1.5.1. Tình hình nghiên cứu ở ngoài nước 13 1.5.2. Tình hình nghiên cứu ở trong nước 15 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 2.1. Chất liệu nghiên cứu 16 2.2. Đối tượng nghiên cứu 16 2.2.1. Đối tượng để hoàn chỉnh kỹ thuật 16 2.2.2. Đối tượng đánh giá độ chính xác kỹ thuật 16 2.2.3. Đối tượng áp dụng bước đầu 17 2.3. Phương pháp, kỹ thuật nghiên cứu 17 2.3.1. Kỹ thuật nghiên cứu 17 2.3.1.1. Yêu cầu về kỹ thuật 17 2.3.1.2. Chiết tách DNA 17 2.3.1.3. Kiểm tra độ tinh khiết của DNA để đánh giá sơ bộ nồng độ bằng máy quang phổ kế Backman 18 2.3.1.4. Nguyên lý kỹ thuật PCR lồng 18 2.3.1.5. Phát hiện sản phẩm 18 2.3.2. Phương pháp nghiên cứu 18 2.3.2.1. Các bước để hoàn chỉnh kỹ thuật 18 2.3.2.2. Đánh giá độ chính xác kỹ thuật 21 2.3.2.3. Bước đầu áp dụng 21 2.4. Địa điểm nghiên cứu 22 2.5. Thời gian nghiên cứu 22 2.6. Đạo đức nghiên cứu 22 2.7. Xử lý số liệu 22 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ 23 3.1. Hoàn chỉnh kỹ thuật 23 3.2. Kết quả của việc chuẩn kỹ thuật 25 3.3. Đối tượng bước đầu áp dụng 28 3.3.1. Phả hệ 1: PTL, 39 tuổi 28 3.3.2. Phả hệ 2: NTNL, 40 tuổi 29 3.3.3. Phả hệ 3: Thai phụ LTH, 32 tuổi, thai 6 tuần 30 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 33 4.1. Bàn luận về hoàn chỉnh kỹ thuật 33 4.2. Bàn luận về độ chính xác kỹ thuật 35 4.2.1. Bàn luận về DNA chiết tách từ huyết thanh thai phụ 35 4.2.2. Bàn luận về độ nhạy và độ đặc hiệu của kỹ thuật 38 4.2.3. Bàn luận về các trường hợp âm và dương tính giả của kỹ thuật41 4.2.4. Bàn luận về thời điểm bắt đầu lấy mẫu 42 4.3. Bàn luận về đối tượng bước đầu áp dụng 43 4.3.1. Về phả hệ 1 và 2 43 4.3.2. Phả hệ 3 44 CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN 47 KIẾN NGHỊ 48 PHỤ LỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO [...]... thuật sinh học phân tử nhằm chẩn đoán và đánh giá một số bệnh di truyền với mục tiêu là: 1 Hoàn chỉnh quy trình chiết tách DNA phôi thai trong máu mẹ, và phát hiện nó bằng kỹ thuật PCR lồng (nested PCR) Đánh giá độ chính xác của kỹ thuật PCR lồng trong nghiên cứu này 2 Bước đầu ứng dụng kỹ thuật đó cho việc chẩn đoán và đánh giá một số bệnh di truyền do biến đổi trong nhân nhằm nâng cao chất lượng sinh. .. Lo và cs là người đầu tiên phát hiện được sự hiện di n của đoạn DNA trên NST Y của thai nhi trong máu ngoại vi của mẹ [54] (trích dẫn của Lo và cs, 1997) Sau đó năm 1990, Camaschella và cs dùng kỹ thuật PCR lồng phát hiện các trình tự DNA phôi thai lấy từ máu ngoại vi của mẹ nhằm chẩn đoán bệnh Hemoglobin của thai [22] Năm 1991, Arinami và cs, Wachtel và cs phát hiện được các trình tự DNA phôi thai. .. thanh mẹ, mở ra một lĩnh vực mới trong y học đó là chẩn đoán trước sinh bằng các kỹ thuật không xâm phạm [54] Hiện tượng này đã thu hút sự quan tâm của các nhà nghiên cứu và nhanh chóng phát triển với nhiều thành tựu mới như: Phát triển kỹ thuật PCR thông thường, PCR lồng và PCR định lượng phát hiện DNA phôi thai tự do trong huyết tương và huyết thanh mẹ; Ứng dụng DNA phôi thai vào chẩn đoán nhiều bệnh. .. các kỹ thuật xâm phạm để chẩn đoán trước sinh, còn các xét nghiệm sàng lọc thì chỉ sử dụng các marker có tính đặc hiệu không cao lắm như ΑFP, hCG, uE3… Chưa tác giả nào áp dụng kỹ thuật chiết tách DNA phôi thai từ huyết thanh mẹ làm tiền đề cho việc chẩn đoán trước sinh bằng các kỹ thuật sinh học phân tử Do vậy, chúng tôi tiến hành nghiên cứu đề tài: Phát hiện DNA phôi thai trong máu mẹ bằng kỹ thuật. .. nhi trong 3 tháng đầu có khả năng đạt độ chính xác cao bằng các kỹ thuật phân tích phân tử dựa trên DNA đã chiết tách từ máu toàn phần hoặc từ huyết tương, huyết thanh mẹ [73] Năm 1998, Lo và cs dùng kỹ thuật PCR định lượng phát hiện nồng độ cao của DNA phôi thai trong huyết tương mẹ, sau đó dùng DNA phôi thai trong huyết tương và huyết thanh mẹ để chẩn đoán trước sinh không can thiệp yếu tố Rh và bệnh. .. Thuý và cs báo cáo về kết quả bước đầu xác định DNA phôi thai trong máu mẹ bằng kỹ thuật PCR lồng [7] 12/2007, một số tác giả khác: Nguyễn Thị Trang và cs báo cáo tại Hội nghị chẩn đoán trước sinh về việc sàng lọc trước sinh bệnh loạn dưỡng cơ Duchenne cho một số thai phụ có nguy cơ [8] Trần Văn Khoa và cs đã có kết quả bước đầu về phân tích DNA phôi thai tự do trong máu mẹ [3] Tuy nhiên, các kỹ thuật. .. của DNA phôi thai tự do là 16,3 phút (từ 4–30 phút), do đó DNA phôi thai trong huyết tương mẹ có thể được dùng làm marker để kiểm soát các trường hợp bệnh lý của mẹ và thai [59] Lý do thứ ba là các kỹ thuật PCR để phát hiện DNA phôi thai trong huyết tương mẹ hiện đã có độ nhạy cao: Smid và cs (1999) đã dùng kỹ thuật PCR thông thường phát hiện được trình tự NST Y đặc hiệu của thai trong huyết tương mẹ. .. đưa DNA phôi thai tự do ứng dụng vào chẩn đoán trước sinh không can thiệp trên phạm vi rộng nhằm hạn chế các nguy cơ rủi ro cho mẹ và thai 1.2 Nguồn gốc DNA phôi thai trong huyết thanh mẹ Mặc dù DNA phôi thai trong huyết tương mẹ đã được biết đến với nhiều ứng dụng tiềm năng nhưng lại ít được biết về cơ chế sinh học Có khả năng một trong những nguồn gốc của DNA phôi thai tuần hoàn là các tế bào thai. .. reaction) phát hiện giới tính thai nhi đạt độ nhạy là 90% Kỹ thuật này cũng cho phép phát hiện được DNA phôi thai từ tuần thai thứ 10 cho tới 2 giờ sau khi sinh [38] Năm 2006, Chi và cs chẩn đoán trước sinh bệnh Hemophilia thông qua xác định giới tính thai nhi trước sinh không can thiệp trong 3 tháng đầu bằng siêu âm và phân tích DNA phôi thai tự do [24] Năm 2007, Lo và cs tiến hành nghiên cứu phát hiện. .. việc phát hiện sớm trước sinh bệnh tật di truyền bẩm sinh vẫn được đặt lên hàng đầu Từ trước những năm 1990, chẩn đoán trước sinh sử dụng kỹ thuật sinh học phân tử thường đi từ nguyên liệu là các tế bào của thai nhi được lấy bằng chọc ối, sinh thiết tua rau Nhưng các kỹ thuật xâm phạm này có khả năng gây nguy cơ rủi ro cho cả mẹ và thai như nhiễm trùng ối, chảy máu tử cung và nặng hơn sẽ gây sảy thai . trong máu mẹ bằng kỹ thuật sinh học phân tử nhằm chẩn đoán và đánh giá một số bệnh di truyền với mục tiêu là: 1. Hoàn chỉnh quy trình chiết tách DNA phôi thai trong máu mẹ, và phát hiện nó bằng. ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI BÁO CÁO KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ĐỀ TÀI NCKH CẤP BỘ PHÁT HIỆN DNA PHÔI THAI TRONG MÁU MẸ BẰNG KỸ THUẬT SINH HỌC PHÂN TỬ NHẰM CHẨN ĐOÁN VÀ ĐÁNH GIÁ MỘT SỐ BỆNH DI TRUYỀN. mới của đề tài Khoa học công nghệ cấp Bộ 1. Tên đề tài: Phát hiện DNA phôi thai trong máu mẹ bằng kỹ thuật sinh học phân tử nhằm chẩn đoán và đánh giá một số bệnh di truyền. 2. Chủ nhiệm