BỘ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ DỰ ÁN SẢN XUẤT THỬ NGHIỆM ĐỘC LẬP CẤP NHÀ NƯỚC BÁO CÁO TỔNG HỢP KẾT QUẢ THỰC HIỆN CỦA DỰ ÁN Tên dự án: "Sản xuất thử nghiệm vắcxin vô hoạt phòng bệnh xuất huyết truyền nhiễm ở thỏ" Mã số: DADL-2006/04 Lĩnh vực: Nông – Lâm – Ngư nghiệp. Họ và tên Chủ nhiệm dự án: TS. Trần Thị Liên Đơn vị chủ trì: Xí nghiệp thuốc thú y Trung ương 7518 24/10/2009 Hà Nội, tháng 12 năm 2008 2 BÁO CÁO TỔNG HỢP KẾT QUẢ THỰC HIỆN I. THÔNG TIN CHUNG VỀ DỰ ÁN 1.Tên dự án: "Sản xuất thử nghiệm vắcxin vô hoạt phòng bệnh xuất huyết truyền nhiễm ở thỏ". Cấp quản lý : Nhà nước. Thuộc chương trình : Dự án sản xuất thử nghiệm độc lập cấp Nhà nước. 2.Chủ nhiệm dự án: TS. Trần Thị Liên 3.Tổ chức chủ trì : Xí nghiệp thuốc thú y Trung ương. Địa chỉ: Đức Thượng – Hoài Đứ c – Hà Nội Số điện thoại: 04.33862381 - 04.33661562 4.Danh sách cán bộ tham gia chính (tên, học vị, chức danh, đơn vị công tác): STT Họ và tên Học vị Chức danh Cơ quan công tác 1 Trần Thị Liên Tiến sĩ Phó giám đốc Xí nghiệp thuốc thú y TƯ 2 Lê Minh Hồng Kỹ sư Giám đốc Xí nghiệp thuốc thú y TƯ 3 Nguyễn Thị Minh Ước Cử nhân Phó giám đốc Xí nghiệp thuốc thú y TƯ 4 Trần Danh Mạc Cử nhân Kế toán trưởng Xí nghiệp thuốc thú y TƯ 5 Nguyễn Đức Thắng Cử nhân Trưởng phòng cung tiêu Xí nghiệp thuốc thú y TƯ 6 Cù Hữu Lương Quản đốc phân xưởng Xí nghiệp thuốc thú y TƯ 7 Nguyễn Hồng Minh Thạc sĩ Phó quản đốc phân xưởng Xí nghiệp thuốc thú y TƯ 8 Nguyễn Kim Lin Kỹ sư Trung tâm nghiên cứu Dê và thỏ Sơn Tây 9 Hoàng Minh Thành Kỹ sư Trung tâm nghiên cứu Dê và thỏ Sơn Tây 3 5.Thời gian thực hiện đã được phê duyệt: Năm bắt đầu :2006 Năm kết thúc : 2008 6. Thời gian kết thúc thực tế (thời điểm nộp báo cáo kết quả): 31/12/2008 7. Kinh phí thực hiện dự án: 7.600 triệu đồng Trong đó : Ngân sách sự nghiệp khoa học : 2.250,00 triệu đồng. Vốn tự có của cơ quan chủ trì : 5.350,00 triệu đồng. II. KẾT QUẢ THỰC HIỆN CỦA DỰ ÁN 1.K ết quả nghiên cứu: a. Hoàn thiện và ổn định các qui trình về giống virus - Đánh giá, bổ sung các chỉ tiêu về giống virus. + Xác định đặc tính của giống. Qua nhiều lần thí nghiệm, chúng tôi đã xác định được các đặc tính của giống virus RHD như sau: − Giống hoàn toàn vô trùng, không phát hiện bất kỳ một loại khuẩn lạc nào trên các môi trường kiểm tra. − Virus giống gây ngưng kết hồng cầu nhóm O của người, không gây ngưng kết hồng cầu ngựa, bò, cừu hoặc hồng c ầu người khác nhóm O. − Khi gây nhiễm virus giống trên thỏ có những biểu hiện triệu chứng lâm sàng và bệnh tích giống với thỏ bị nhiễm bệnh tự nhiên ở các ổ dịch. + Triệu chứng:Sốt, bỏ ăn, ủ rũ, thở gấp, thở ra bọt có nhiều dịch nhầy, có dấu hiệu thần kinh, co giật, kêu rên, chảy nước mắt, nước mũi, xung huyết kết mạ c mắt. + Bệnh tích: Gan sưng to, xung huyết, thận sưng rất to, xung huyết, khí quản, phổi xung huyết, nhiều dịch nhầy, một số cơ quan nội tạng xuất huyết. Kết quả nghiên cứu về giống được tổng hợp trong bảng 1. 4 Bảng 1: Kết quả nghiên cứu về giống virus Xuất huyết truyền nhiễm thỏ. Bệnh tích nội tạng thỏ được gây nhiễm Lô thí nghiệm Số lượng mẫu HA Gan Thận Lách Phổi Khí quản 1 5 + 2 5 + 3 5 + 4 5 + 5 5 + Biến màu, sưng to, xuất huyết, các tiểu thuỳ có hiện tượng thoái hoá Sưng to, xung huyết Xung huyết Thuỷ thũng, xung huyết Có dịch nhầy, thuỷ thũng kèm theo xuất huyết có bọt khí + Xác định độc lực của giống. Giống virus RHD ở dạng đông khô được pha loãng với dung dịch PBS vô trùng thành dãy pha loãng từ 10 -1 - 10 -5 , mỗi nồng độ tiêm cho 10 thỏ khoẻ mạnh, có độ tuổi từ 2 tháng trở lên, hiệu giá kháng thể kháng virus RHD trước khi tiêm là âm tính, theo đường tiêm bắp, mỗi con 1 ml. Sau khi tiêm hàng ngày theo dõi nhiệt độ và những biểu hiện lâm sàng của thỏ, thời gian theo dõi khoảng 6 ngày Kết quả được ghi lại và tính toán theo công thức Reed & Muench xác định liều gây chết thỏ 50% (LD 50 ). Thí nghiệm được tiến hành lặp đi lặp lại nhiều lần. Kết quả được chúng tôi thể hiện trên bảng 2. Bảng 2. Kết quả xác định độc lực của giống. Lô thí nghiệm Số thỏ thí nghiệm (con) Liều gây nhiễm (ml) Đường gây nhiễm Hiệu giá (LD 50 / 1ml) 1 50 1 10 4,0 2 50 1 10 3,6 3 50 1 10 3,8 4 50 1 10 3,7 5 50 1 Tiêm bắp 10 4,1 Hiệu giá trung bình 10 3,84 5 Qua bảng 2 chúng tôi xác định được hiệu giá trung bình của giống virus RHD là 10 3.84 LD 50 / 1 ml + Xác định tính kháng nguyên. Virus giống RHD có tính kháng nguyên ổn định, qua nhiều lần tiếp đời trên thỏ, virus giống RHD vẫn giữ được tính kháng nguyên , có tỷ lệ gây bệnh và tử vong cao, gây ngưng kết hồng cầu người nhóm O. Sau khi vô hoạt đưa vào cơ thể, vắcxin tạo miễn dịch nhanh và kéo dài. + Xác định hiệu giá ngưng kết hồng cầu người nhóm O Phản ứng ngưng kết hồng cầu người nhóm O là phản ứng đầ u tiên được sử dụng để chẩn đoán bệnh Xuất huyết truyền nhiễm ở thỏ. Virus RHD chỉ gây ngưng kết hồng cầu người nhóm O, còn các loại hồng cầu khác, virus gây ngưng kết rất yếu hoặc không gây ngưng kết. Qua các thí nghiệm, chúng tôi đã xác định hiệu giá ngưng kết với hồng cầu người nhóm O cao của virus giống RHD là 1/4096. - Kiểm tra sự ổn định về các đặ c tính sinh học của giống trong những điều kiện khác nhau. Giống virus RHD được giữ ở hai dạng khác nhau: dạng tươi và dạng đông khô, bảo quản ở nhiệt độ -85 0 C. Định kỳ 3, 6, 9, 12 tháng tiến hành kiểm tra các đặc tính sinh học của chúng. Qua kiểm tra đều nhận thấy: Đối với giống tươi sau 6 tháng, giống đông khô sau 1 năm, vẫn ổn định và giữ nguyên các đặc tính sinh học như hồ sơ giống gốc - Lựa chọn phương pháp giữ giống. Qua quá trình kiểm tra các đặc tính sinh học của giống trong những điều kiện khác nhau, chúng tôi đã xác định được phương pháp giữ giống tối ưu đó là: + Giống virus RHD giữ ở dạng đông khô + Giống bảo quản ở -85 0 C theo hệ thống lô giống gốc (Seed lot system) + Một năm cấy chuyển giống một lần b. Hoàn thiện và ổn định quy trình sản xuất vắcxin 6 - Nuôi cấy virus. + Xác định nồng độ virus thích hợp khi gây nhiễm trên thỏ. Giống virus RHD tươi hoặc đông khô được pha loãng với dung dịch PBS vô trùng ở các độ pha loãng 1/5, 1/10, 1/20 sau đó tiêm cho 10 thỏ khỏe mạnh, có độ tuổi ít nhất từ 2 tháng tuổi trở lên, mỗi thỏ 1 ml theo đường tiêm bắp (Trước khi tiêm hiệu giá kháng thể của thỏ phải là âm tính). Sau khi tiêm hàng ngày theo dõi nhiệt độ thỏ. Kết quả thí nghiệm được trình bày trên bảng 3. Bảng 3. Kế t quả xác định nồng độ virus thích hợp khi gây nhiễm trên thỏ. Số thỏ chết ở các thời điểm sau khi gây nhiễm với các nồng độ pha loãng khác nhau (con) Nồng độ pha loãng virus Số lượng thỏ gây nhiễm (con) 24 giờ 48 giờ 72 giờ 96 giờ 1/5 10 0 7 3 0 1/10 10 0 4 4 2 1/20 10 0 0 2 8 Qua bảng 3, chúng tôi nhận thấy ở nồng độ pha loãng virus 1/5, thỏ nung bệnh và chết tập trung ở thời điểm 48 – 72 giờ (10/10 con). Ở nồng độ pha loãng virus 1/10 thỏ nung bệnh chết ở 48 – 96 giờ sau gây nhiễm. Còn ở nồng độ 1/20, thỏ chết chủ yếu ở 96 giờ sau gây nhiễm. Căn cứ lý lịch giống gốc, chúng tôi đã xác định được nồng độ pha loãng virus 1/5 và tiêm mỗi thỏ 1 ml theo đường tiêm b ắp là thích hợp nhất. + Xác định thời điểm thích hợp để thu hoạch virus Chúng tôi bố trí 5 lô thí nghiệm, mỗi lô 10 thỏ, mỗi thỏ được tiêm 1ml giống virus RHD được pha với dung dịch PBS vô trùng tỷ lệ 1/5 theo đường tiêm bắp. Sau khi tiêm theo dõi nhiệt độ thỏ, những con bị chết được mổ thu hoạch nội 7 tạng như gan, thận, lá lách, phổi và kiểm tra hiệu giá virus ở các cơ quan đó. Kết quả được trình bày trên bảng 4. Bảng 4. Kết quả xác định hiệu giá virus ở một số cơ quan nội tạng của thỏ sau khi chết ở thời điểm 48 giờ và 72 giờ. Hiệu giá virus trung bình ở các cơ quan nội tạng (HA) Gan Lá lách Thận Phổi Lô thí nghiệm 48 giờ 72 giờ 48 giờ 72 giờ 48 giờ 72 giờ 48 giờ 72 giờ 1 1/4096 1/2048 1/512 1/256 1/2048 1/2048 1/256 1/64 2 1/4096 1/4096 1/256 1/128 1/2048 1/1024 1/512 1/128 3 1/4096 1/2048 1/512 1/128 1/2048 1/2048 1/512 1/128 4 1/2048 1/1024 1/512 1/64 1/4096 1/4096 1/1024 1/256 5 1/4096 1/2048 1/512 1/128 1/4096 1/4096 1/1024 1/128 Qua bảng 4, chúng tôi nhận thấy: - Gan là cơ quan có hàm lượng virus cao nhất, sau đó là thận, lá lách và phổi có hàm lượng virus thấp hơn. - Những thỏ chết ở 48-72 giờ có hàm lượng virus tương đương nhau. Như vậy, chúng tôi đã xác định được nội tạng thu hoạch để làm vắcxin là gan và thận và thời điểm thích hợp nhất thu hoạch làm vắcxin là những thỏ chết từ 48 - 72 giờ sau khi gây nhiễm. + Xây dựng phương pháp ti ếp đời trên thỏ. Giống virus RHD dùng làm giống gốc hoặc giống sản xuất được tiếp đời định kỳ trên thỏ như đã nêu ở trên. Khi tiếp đời lựa chọn thỏ khoẻ mạnh, có trọng lượng từ 1,8 - 2 kg, chỉ chọn những thỏ có hiệu giá kháng thể đối với virus RHD âm tính để gây nhiễm virus giống. Sau khi gây nhiễm 48 - 72 giờ, những thỏ chết được mổ thu hoạch 8 gan, thận và kiểm tra các đặc tính về giống sau đó đông khô và bảo quản ở nhiệt độ -85 0 C. - Vô họat kháng nguyên và bổ sung chất bổ trợ. Trên cơ sở sản xuất các lô vắcxin thử nghiệm trong ba năm 2006 - 2008, chúng tôi đã xác định được hoá chất, nồng độ hoá chất để vô hoạt kháng nguyên, xác định được dung môi bổ trợ, nồng độ dung môi để bổ xung vào vắc xin: + Dung dịch Formalin là hoá chất thích hợp nhất để vô hoạt virus RHD. + Nồng độ Formalin 0,2% ở nhiệt độ 37 0 C trong thời gian 72 giờ được khuấy liên tục trên máy khuấy từ sẽ có khả năng làm vô hoạt hoàn toàn virus RHD nhưng vẫn giữ được tính kháng nguyên của nó. + Chất bổ trợ: Keo phèn được sản xuất tại Xí nghiệp thuốc thú y TU là chất bổ trợ thích hợp đối với vacxin RHD, loại keo phèn này đã được sử dụng để bổ sung vào vacxin Tiêu chuẩn hạt keo bao gồm: Hàm lượng clorua không vượt quá 0,3% Hàm lượng sunfat không vượt quá 0,2 – 0,3% Hàm lượng kim loại nặng không vượt quá một phần vạn Hàm lượng sắt không vượt quá 0,03% Độ pH từ 6,8 – 7,2 Sức hút có độ hấp phụ màu là đỏ Congo 0,077% Hàm lượng Al 2 O 3 phải đạt từ 4,2 – 5,6% + Tỷ lệ chất bổ trợ keo phèn trong vắcxin là 15%. + Kiểm tra độ an toàn của chất bổ trợ keo phèn (Al(OH) 3 ) trên thỏ, chuột lang và chuột bạch cho thấy: chất bổ trợ keo phèn rất an toàn đối với cả 3 loại động vật trên. Theo dõi sau 14 ngày số động vật trên đều khỏe mạnh, phát triển bình thường. c. Hoàn thiện và ổn định quy trình kiểm nghiệm vắcxin. - Kiểm tra độ vô hoạt của virus trong vắcxin Huyễn dịch virus RHD sau khi được vô hoạt bằng Formalin 0,2% ở 37 0 C/ 72 giờ đã được lấy mẫu và tiến hành kiểm tra độ vô hoạt trên thỏ. 9 Chọn 10 thỏ khoẻ mạnh, trọng lượng 1,8 - 2 kg, có hiệu giá kháng thể âm tính với virus RHD, tiêm mỗi con 2 ml huyễn dịch virus RHD vô hoạt, 10 thỏ đối chứng không tiêm, theo dõi thỏ 14 ngày. Kết quả kiểm tra vô hoạt của các lô vắc xin thử nghiệm trong 3 năm 2006 – 2008 được thể hiện trên bảng 5 Bảng 5. Kết quả kiểm tra vô hoạt các lô vắc xin RHD thử nghiệm trong ba năm từ 2006 – 2008. Số thỏ sống sau khi theo dõi 14 ngày STT Lô vắc xin RHD Ngày kiểm tra Lô thí nghiệm (con) Lô đối chứng (con) Kết quả 1 01 29.03.06 10/10 10/10 Đạt 2 02 10.04.06 10/10 10/10 Đạt 3 03 27.04.06 10/10 10/10 Đạt 4 04 14.05.06 10/10 10/10 Đạt 5 05 18.06.06 10/10 10/10 Đạt 6 06 21.07.06 10/10 10/10 Đạt 7 07 21.08.06 10/10 10/10 Đạt 8 08 15.09.06 10/10 10/10 Đạt 9 09 30.10.06 10/10 10/10 Đạt 10 10 20.11.06 10/10 10/10 Đạt 11 11 27.01.07 10/10 10/10 Đạt 12 12 11.02.07 10/10 10/10 Đạt 13 13 21.03.07 10/10 10/10 Đạt 14 14 23.05.07 10/10 10/10 Đạt 15 15 02.07.07 10/10 10/10 Đạt 16 16 10/10 10/10 Đạt 17 17 10/10 10/10 Đạt Từ kết quả bảng 5 cho thấy: Qua kiểm tra 17 lô vắc xin RHD thử nghiệm sản xuất trong ba năm từ 2006 – 2008 với quy trình xử lý hoá chất như trên, các 10 lô vắc xin đã sản xuất đều cho kết quả kiểm tra vô hoạt. Tất cả số thỏ kiểm tra (cả thí nghiệm, cả đối chứng) đều khoẻ mạnh, phát triển bình thường, không có bất kỳ biểu hiện lâm sàng nào của bệnh RHD. - Kiểm tra vô trùng vắcxin RHD Các lô vắc xin RHD đã sản xuất trong 3 năm (2006 – 2008) đều được kiểm tra vô trùng theo quy trình như sau: + Lấy mẫu Vắcxin được lấy m ẫu theo TCN 160-92 "Vắcxin thú y - Quy trình lấy mẫu và sử dụng mẫu trong kiểm nghiêm". Mỗi lô vắcxin lấy 1% số thành phẩm của mỗi lô (Tối thiểu 3 mẫu, tối đa 10 mẫu). + Kiểm tra vi trùng − Cấy huyễn dịch vắc xin vào các môi trường qui định (Thạch máu, nước thịt, nước thịt gan yếm khí, thạch nấm), mỗi loại môi trường cấy 2 ống. Các môi trường ở trên được chế theo qui định thông dụ ng để phát hiện các vi khuẩn dung huyết, hiếu khí, yếm khí và nấm có trong vắcxin. − Lượng vắcxin cấy kiểm tra bằng 1 đến 2 % dung tích môi trường. − Môi trường đã cấy kiểm tra đem bồi dưỡng trong tủ ấm 37 0 C, theo dõi 7 ngày. Riêng môi trường nấm để ở nhiệt độ phòng (25 - 30 0 C). Kết quả kiểm tra vô trùng các lô vắc xin thử nghiệm được thể hiện trên bảng 6. [...]... được quy trình giữ giống, bảo quản và sử dụng giống trong sản xuất vắc xin - Xây dựng được quy trình sản xuất vắc xin xuất huyết truyền nhiễm ở thỏ với quy mô lớn (4 – 8 triệu liều vắc xin/ 3 năm) - Xây dựng được quy trình kiểm nghiệm vắc xin xuất huyết truyền nhiễm ở thỏ - Xây dựng được quy trình bảo quản, sử dụng vắc xin xuất huyết truyền nhiễm ở thỏ 3 Ý nghĩa thực tiễn và khả năng ứng dụng kết quả khoa... nuôi thỏ sạch để cung cấp thỏ làm nguyên liệu cho sản xuất và phục vụ kiểm nghiệm vắcxin vô hoạt Xuất huyết truyền nhiễm + 01 phòng thí nghiệm để mổ thỏ sau gây nhiễm virus + Đã đầu tư được một số thiết bị, máy móc để phục vụ cho việc sản xuất vacxin xuất huyết truyền nhiễm ở thỏ như: − 01 máy xiết nút nhôm bán tự động, − 01 máy bơm chân không, − 01 cối xay để nghiền gan, thận trong sản xuất vacxin,... họat virus trong vắcxin - Vắcxin an toàn tuyệt đối khi sử dụng 3 liều đối với thỏ - Vắcxin đạt tiêu chuẩn vô trùng, an toàn, hiệu lực khi kiểm nghiệm trên thỏ - Vắcxin xuất huyết truyền nhiễm thỏ đã được thử nghiệm tại một số cơ sở chăn nuôi đều cho kết quả tốt 2 Ý nghĩa khoa học của kết quả nghiên cứu - Đã xác định được các đặc tính sinh học của chủng virus giống xuất huyết truyền nhiễm thỏ - Xây dựng... án thành công, Xí nghiệp thuốc thú y Trung ương đã hoàn thiện được quy trình sản xuất vắc xin xuất huyết truyền nhiễm ở thỏ từ khâu giống đến khâu hoàn thiện sản phẩm cuối cùng Trên cơ sở đó, Xí nghiệp sẽ mở rộng quy mô sản xuất với số lượng lớn đáp ứng đầy đủ nhu cầu về vắc xin phòng 22 bệnh xuất huyết truyền nhiễm cho đàn thỏ trong cả nước với chất lượng cao đảm bảo các chỉ tiêu kỹ thuật của Nhà nước... đường tiêm, liều tiêm vắcxin cho thỏ + Khẳng định lại liều tiêm vắcxin cho thỏ Bố trí 4 lô thỏ thí nghiệm, mỗi lô 10 con thỏ khoẻ mạnh, 2 tháng tuổi + Lô thí nghiệm 1: Tiêm 0,5 ml vắcxin sử dụng theo đường tiêm bắp + Lô thí nghiệm 2: Tiêm 1 ml vắcxin sử dụng theo đường tiêm bắp + Lô thí nghiệm 3: Tiêm 1,5 ml vắcxin sử dụng theo đường tiêm bắp + Lô thí nghiệm 4: Không tiêm vắcxin làm đối chứng Sau 7... hành khi dịch cúm gia cầm hoành hành do đó việc ấp nở vịt con bị cấm, số lượng đàn vịt bị giảm do đó làm ảnh hưởng đến khả năng tiêu thụ sản phẩm, số lượng sản phẩm tiêu thụ chưa đạt với yêu cầu mong muốn của cơ quan chủ trì dự án 2 Sử dụng kinh phí Dự án sản xuất thử nghiệm vắc xin xuất huyết truyền nhiễm ở thỏ thuộc chương trình Dự án sản xuất thử nghiệm độc lập cấp Nhà Nước có thu hồi 60% kinh phí... vụ sản xuất cũng như nhu cầu kinh doanh của Xí nghiệp, do đó vácxin sau khi sản xuất sẽ được kiểm tra chất lượng ngay tại Xí nghiệp và cũng đã gửi mẫu các lô vắcxin đại diện kiểm nghiệm tại Trung tâm kiểm nghiệm Trung ương 1 Chúng tôi cũng đã cho thử nghiệm vácxin ngay trên trại thỏ của Xí nghiệp và thử nghiệm ở một số cơ sở nuôi thỏ khác theo một quy trình sử dụng như sau: + Tiêm miễn dịch vácxin... dõi thỏ sau khi tiêm vắcxin 18 Sau khi được tiêm vắcxin RHD với liều và đường tiêm đã khẳng định, thỏ được theo dõi trong vòng 3 tuần Tất cả thỏ đều khoẻ mạnh, phát triển bình thường, không có con nào có biểu hiện lâm sàng của bệnh RHD - Khẳng định nhiệt độ và thời gian bảo quản vắcxin Vắcxin RHD là vắcxin vô hoạt có chất bổ trợ là keo phèn (Al(OH)3), do đó vắcxin phải được bảo quản ở nhiệt độ 2 - 80C,... bảng 14 cho thấy, sau 1 năm bảo quản ở nhiệt độ 2 - 80C, vắcxin vẫn tạo miễn dịch cho thỏ và có tỷ lệ bảo hộ 90 - 95% Theo tiêu chuẩn OIE, vắc xin vẫn đạt tiêu chuẩn hiệu lực Như vậy, chúng tôi đã xác định được hạn sử dụng vắcxin là 12 tháng kể từ khi xuất xưởng e Thử nghiệm vácxin tại cơ sở Là một dự án được triển khai nghiên cứu và sản xuất ngay trong điều kiện sản xuất của Xí nghiệp thuốc thú y Trung... sử dụng và bảo quản vắcxin - Khẳng định lại độ tuổi và thời gian tiêm phòng vắcxin Chúng tôi tiến hành kiểm tra kháng thể của những thỏ con đẻ ra từ thỏ mẹ đã được tiêm phòng vắcxin RHD ở các lứa tuổi khác nhau − Nhóm 1: 10 thỏ 1 tháng tuổi − Nhóm 2: 10 thỏ 1,5 tháng tuổi − Nhóm 3: 10 thỏ 2 tháng tuổi Các nhóm thỏ được lấy máu ở các thời điểm 0 ngày, 5 ngày, 10 ngày, 15 ngày, chắt huyết thanh và kiểm . 1.Tên dự án: " ;Sản xuất thử nghiệm vắcxin vô hoạt phòng bệnh xuất huyết truyền nhiễm ở thỏ& quot;. Cấp quản lý : Nhà nước. Thuộc chương trình : Dự án sản xuất thử nghiệm độc lập cấp Nhà. ÁN SẢN XUẤT THỬ NGHIỆM ĐỘC LẬP CẤP NHÀ NƯỚC BÁO CÁO TỔNG HỢP KẾT QUẢ THỰC HIỆN CỦA DỰ ÁN Tên dự án: " ;Sản xuất thử nghiệm vắcxin vô hoạt phòng bệnh xuất huyết truyền nhiễm. tra vô hoạt của các lô vắc xin thử nghiệm trong 3 năm 2006 – 2008 được thể hiện trên bảng 5 Bảng 5. Kết quả kiểm tra vô hoạt các lô vắc xin RHD thử nghiệm trong ba năm từ 2006 – 2008. Số thỏ