Đang tải... (xem toàn văn)
Mục tiêu Hai mục tiêu tổng quát của đề tài là: (1) Xác định và chuẩn hóa được các kỹ thuật di truyền học hiện đại trong phân tích các rối loạn vật chất di truyền trong một sốbệnh ung thư. (2) Ứng dụng các kỹthuật trên trong chẩn đoán và tiên lượng một số bệnh ung thư. Trong đề tài này 3 loại ung thư được chọn lựa đưa vào nghiên cứu là: carcinôm tuyến đại – trực tràng, carcinôm tuyến vú và bệnh bạch cầu với các mục tiêu cụthểtrong từng loại bệnh nhưsau: Trong ung thư ĐTT 1. Xác định tỷlệvà các kiểu đột biến gen p53 ởcarcinôm tuyến ĐTT. 2. Xác định tỷlệbiểu hiện tích tụquá mức protein TP53, Ki67 và EGFR trong carcinôm tuyến ĐTT bằng phương pháp HMMD và mối liên quan giữa sựbiểu hiện protein TP53, Ki67, EGFR và đột biến gen p53với các đặc điểm giải phẫu bệnh của carcinôm tuyến ĐTT. 4 3. Xác định giá trịcủa các xét nghiệm đột biến gen p53, biểu hiện tích tụ quá mức protein TP53 và Ki67 và EGFR trong theo dõi đáp ứng điều trịvà tiên lượng carcinôm tuyến ĐTT. 4. Ứng dụng phương pháp gia hệkết hợp với các kỹthuật xác định đột biến gen p53, tăng biểu hiện protein TP53 trong việc tầm soát phát hiện sớm các trường hợp carcinôm tuyến carcinôm tuyến ĐTT. Trong carcinôm tuyến vú 1. Xác định đặc điểm vềtuổi, bệnh sửgia đình, mô bệnh học theo WHO. 2. Khảo sát sựbiểu hiện gen sinh u HER2 bằng kỹthuật HMMD và FISH. 3. Khảo sát sựbiểu hiện protein và đột biến gen đè nén u p53 bằng kỹ thuật HMMD và giải trình tựgen. 4. Khảo sát đột biến gen BRCA1 bằng kỹthuật giải trình tựgen. 5. Khảo sát sựbiểu hiện Ki67 bằng kỹthuật HMMD. 6. Khảo sát carcinôm tuyến vú có tính gia đình, lập cây gia hệ, tham vấn di truyền. Trong bệnh bạch cầu 1. Xác định đặc điểm lâm sàng, huyết học, sinh học và bất thường NST của nhóm bệnh nhân bệnh bạch cầu đểnghiên cứu bao gồm bạch cầu mạn dòng tủy (BCMDT), bạch cầu cấp dòng tủy (BCCDT) và bạch cầu cấp lymphô (BCCDL) lúc chẩn đoán. 2. Hoàn chỉnh các kỹthuật nuôi cấy - phân tích NST, kỹthuật sinh học phân tửbao gồm FISH và RT-PCR đểchẩn đoán các bệnh lý BCMDT, BCCDT và BCCDL. 3. Ứng dụng kết quảcủa khảo sát trên đểphân nhóm nguy cơ, xác định yếu tố tiên lượng, lựa chọn phác đồ điều trị và đánh giá hiệu quả trong bệnh bạch cầu. 6 CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN
ĐẠI HỌC Y DƯỢC TP. HỒ CHÍ MINH BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG CÁC KỸ THUẬT DI TRUYỀN HIỆN ĐẠI TRONG CHẨN ĐOÁN VÀ TIÊN LƯỢNG MỘT SỐ BỆNH UNG THƯ THƯỜNG GẶP Ở VIỆT NAM CNĐT : NGUYỄN SÀO TRUNG 8782 TP.HCM – 2010 1 ĐẶT VẤN ĐỀ Ung thư ảnh hưởng đến con người ở tất cả mọi lứa tuổi và nguy cơ ung thư tăng dần theo tuổi. Ung thư là nguyên nhân gây tử vong cho 13% (7,6 triệu) người chết trong năm 2007 [239]. Ung thư là bệnh lý do tác động của môi trường với 90-95% bệnh xảy ra do lối sống và môi trường, 5-10% do di truyền. Tất cả các yếu tố di truyền này có thể gây rối loạn chất liệu di truyền trong tế bào. Ung thư đại trực tràng (ĐTT) và ung thưvúđều có thể điều trị và có tiên lượng tươngđối tốt nếu phát hiện bệnh sớm. Tiên lượng và đáp ứng điều trị phụ thuộc rất nhiều yếu tố nhưgiaiđoạn bệnh, loại mô học, độ mô học, các đột biến gen (ras, p53)… [110], [178]. Mức độ tăng sinh tế bào u cũng là một trong những yếu tố tiên lượ ng quan trọng. Ki67 là kháng nguyên căn bản để xác định hoạt động của tế bào u. Kháng nguyên Ki67 biểu hiện trong nhân tế bào u ở pha G1, S, G2, và M của chu trình tế bào, trừ pha nghỉ Go.Nhiều nghiên cứu chứng minh Ki67 là một yếu tố tiên lượng độc lập liên quan đến sống còn của bệnh nhân ung thưĐTT cũng như trong ung thư vú [121], [231]. Bệnh bạch cầu là bệnh lý ác tính của tế bào gốc đa năng đặc trưng bởi sự tăng sinh quá mức tế bào máu làm tích tụ tế bào non trong bạch cầu cấp, hoặc tăng sinh quá mức nhưng có hiện tượng biệt hóa trong bạch cầu mạn, làm suy giảm các dòng tế bào máu bình thường. Bệnh gặp ở mọi lứa tuổi và cả 2 giới, nhưng bạch cầu cấp dòng tủy (BCCDT) và bạch cầu mạn dòng tủy (BCMDT) thường gặp ở người lớn, ngược lại bạch cầu cấ p dòng lymphô (BCCDL) thường gặp ở trẻ em, và đó là 3 thể bệnh thường gặp nhất trong nhóm bệnh lý máu ác tính. Những bất thường nhiễm sắc thể (NST) và các bất thường về gen 2 đặc trưng cho các dạng ung thư máu, có ý nghĩa tiên lượng độc lập, giúp lựa chọn phác đồ điều trị thích hợp và là một dấu ấn để theo dõi điều trị. Hiện nay việc chẩn đoán thường quy các bệnh ung thư chủ yếu dựa vào thăm khám lâm sàng, chẩn đoán hình ảnh, xét nghiệm giải phẫu bệnh. Mặc dù các kỹ thuật này đảm bảo độ chính xác khá cao, giúp chỉ định điều trị phù hợp, nhưng vẫn còn một số hạn chế như sau: (1) Không thể thực hiện ở giai đoạn sớm, khi các khối u chưa có biểu hiện lâm sàng rõ rệt. (2) Không thể phát hiện các đột biến gen, đột biến NST, do đó không cho phép xác định bản chất di truyền của ung thư. (3). Chính vì thế không thể theo dõi, đánh giá hiệu quả điều trị một cách xác thực. Ở Việ t Nam gần đây tại một số khoa/ bệnh viện chuyên khoa ung thư đã bắt đầu ứng dụng một số kỹ thuật chẩn đoán mới, như chẩn đoán bằng hóa mô miễn dịch (HMMD), dấu ấn khối u, xét nghiệm NST đồ, ứng dụng kỹ thuật lai tại chỗ gắn huỳnh quang (FISH). Tuy vậy kết quả chưa ổn định, chưa thể thực hi ện thường quy. Việc ứng dụng các kỹ thuật di truyền tế bào và di truyền phân tử (phân tích DNA, phân tích biểu hiện gen p53…) giúp giải quyết các nhiệm vụ sau đây: - Chuẩn hóa và ứng dụng các kỹ thuật di truyền hiện đại trong chẩn đoán và tiên lượng bệnh ung thư. - Xem xét khả năng ứng dụng kỹ thuật tầm soát / sàng lọc các trường hợp có nguy cơ bị ung thư. - Xây dựng êkip các nhà di truyền học ung th ư để phát triển nghiên cứu và ứng dụng các kỹ thuật di truyền vào chẩn đoán, phát hiện sớm và điều trị ung thư. 3 - Ứng dụng phương pháp gia hệ trong nghiên cứu phát hiện các trường hợp có hội chứng tiền định ung thư di truyền, thực hiện tư vấn, theo dõi, tầm soát phát hiện các trường hợp có nguy cơ bị ung thư. Đề tài “Nghiên cứu ứng dụng các kỹ thuật di truyền hiện đại trong chẩn đoán và tiên lượng một số bệnh ung thư thường gặp ở Việt Nam” thuộ c “Chương trình Khoa học và Công nghệ trọng điểm cấp Nhà nước” giai đoạn 2006-2010, mang mã số KC.10.18/06-10, được phê duyệt và có thời gian thực hiện từ tháng 3 năm 2008 đến tháng 08 năm 2010. Mục tiêu Hai mục tiêu tổng quát của đề tài là: (1) Xác định và chuẩn hóa được các kỹ thuật di truyền học hiện đại trong phân tích các rối loạn vật chất di truyền trong một số bệnh ung thư. (2) Ứng dụng các kỹ thuật trên trong chẩn đoán và tiên lượng một số bệnh ung thư. Trong đề tài này 3 loại ung thư được chọn lựa đưa vào nghiên cứu là: carcinôm tuyến đại – trực tràng, carcinôm tuyến vú và bệ nh bạch cầu với các mục tiêu cụ thể trong từng loại bệnh như sau: Trong ung thư ĐTT 1. Xác định tỷ lệ và các kiểu đột biến gen p53 ở carcinôm tuyến ĐTT. 2. Xác định tỷ lệ biểu hiện tích tụ quá mức protein TP53, Ki67 và EGFR trong carcinôm tuyến ĐTT bằng phương pháp HMMD và mối liên quan giữa sự biểu hiện protein TP53, Ki67, EGFR và đột biến gen p53 với các đặc điểm giải phẫu bệnh của carcinôm tuyến ĐTT. 4 3. Xác định giá trị của các xét nghiệm đột biến gen p53, biểu hiện tích tụ quá mức protein TP53 và Ki67 và EGFR trong theo dõi đáp ứng điều trị và tiên lượng carcinôm tuyến ĐTT. 4. Ứng dụng phương pháp gia hệ kết hợp với các kỹ thuật xác định đột biến gen p53, tăng biểu hiện protein TP53 trong việc tầm soát phát hiện sớm các trường hợp carcinôm tuyến carcinôm tuyến ĐTT. Trong carcinôm tuyến vú 1. Xác định đặc điểm về tuổi, bệnh sử gia đình, mô bệnh học theo WHO. 2. Khảo sát sự biểu hiện gen sinh u HER2 bằng kỹ thuật HMMD và FISH. 3. Khảo sát sự biểu hiện protein và đột biến gen đè nén u p53 bằng kỹ thuật HMMD và giải trình tự gen. 4. Khảo sát đột biến gen BRCA1 bằng kỹ thuật giải trình tự gen. 5. Khảo sát sự biểu hiện Ki67 bằng kỹ thuật HMMD. 6. Kh ảo sát carcinôm tuyến vú có tính gia đình, lập cây gia hệ, tham vấn di truyền. Trong bệnh bạch cầu 1. Xác định đặc điểm lâm sàng, huyết học, sinh học và bất thường NST của nhóm bệnh nhân bệnh bạch cầu để nghiên cứu bao gồm bạch cầu mạn dòng tủy (BCMDT), bạch cầu cấp dòng tủy (BCCDT) và bạch cầu cấp lymphô (BCCDL) lúc chẩn đoán. 2. Hoàn chỉnh các kỹ thuật nuôi cấy - phân tích NST, kỹ thuật sinh học phân tử bao gồm FISH và RT-PCR để chẩn đoán các bệnh lý BCMDT, BCCDT và BCCDL. 5 3. Ứng dụng kết quả của khảo sát trên để phân nhóm nguy cơ, xác định yếu tố tiên lượng, lựa chọn phác đồ điều trị và đánh giá hiệu quả trong bệnh bạch cầu. 6 CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN 1.1 Những khái niệm cơ bản về di truyền ung thư - Ung thư là bệnh lý trầm trọng thường gặp nhất của y học, liên quan chặt chẽ với các rối loạn của gen. - Hiểu biết về đặc điểm di truyền trong ung thư giúp truy tìm và phát hiện ung thư sớm, cải thiện đáng kể tỷ lệ tử vong do ung thư. Đột biến diễn tiến đạt đến ung thư phụ thuộc vào các yếu tố: tốc độ đột bi ến, số lượng cá thể trong quần thể, tốc độ sinh sản và ưu thế chọn lọc của cá thể đột biến. Ung thư là bệnh di truyền do đột biến tế bào sinh dưỡng. - Sự biến đổi mối quan hệ giữa các tiền gen sinh ung, gen sinh ung và các gen đè nén u quyết định sự ung thư hóa, sự phát triển khối u. - Sự đột biến gen, đột biến NST (mất đoạn, chuyể n đoạn) là đặc tính phổ biến của tất cả các loại ung thư. Đột biến gen p53 là biến đổi di truyền thường gặp nhất trong ung thư, có ở hơn 50% loại ung thư. - Ở hầu hết các loại ung thư, yếu tố môi trường như virus, phóng xạ, … tác động lên quá trình phân chia tế bào, làm thay đổi chu trình tế bào, gây đột biến vật chất di truyền, làm rối loạn sự chết theo chương trình thúc đẩ y quá trình hình thành tế bào ung thư. - Ung thư là kết quả của một loạt các đột biến tế bào sinh dưỡng, nhưng một số ung thư khác có thể di truyền theo kiểu di truyền trội hoặc di truyền lặn NST thường (carcinôm tuyến ĐTT, ung thư nguyên bào võng mạc…). - Ngày nay người ta đã xác định được nhiều kiểu đột biến gen, đột biến NST đặc hiệu hoặc không đặc hiệu cho các loại ung thư. Các tế bào ung th ư thường thể hiện tính đa dạng, bất thường về kích thước, hình dạng nhân, số lượng và cấu trúc NST: các gen được nhân bản hoặc mất đi, NST bị mất, nhân đôi, hoặc chuyển đoạn với tần xuất cao hơn nhiều so với tế bào bình thường. 7 - Các gen điều hòa bình thường có thể phân chia thành hai nhóm theo tác dụng của sản phẩm của chúng: (1) kích thích tăng số lượng tế bào và / hoặc (2) ức chế. Cách thứ nhất là làm cho các gen bị kích thích trở thành siêu hoạt tính: loại đột biến này trội (chỉ cần một trong hai phiên bản gen thay đổi), allel bị đột biến gọi là gen sinh ung, allel bình thường gọi là tiền gen sinh ung. Cách thứ hai làm mất hoạt tính gen ức chế, đột biến lo ại này thường lặn (phải mất cả hai phiên bản gen mới làm tế bào thoát khỏi ức chế), gọi là gen đè nén u. 1.2.Các loại gen liên quan ung thư Ba loại gen chính có vai trò trong sự hình thành và phát triển của ung thư là gen sinh ung, gen đè nén u và gen sửa lỗi bắt cặp sai [104], [110], [188]. 1.2.1 Tiền gen sinh ung và gen sinh ung Các tiền gen sinh ung có vai trò kiểm soát sự sinh sản và biệt hóa của tế bào. Khi một tiền gen sinh ung trở nên hoạt động bất thường, khiến các tế bào tăng trưởng quá đà thoát khỏi sự kiểm soát của cơ thể tạo ra một clôn tế bào tăng sinh, lúc này nó được gọi là gen sinh ung. Gen sinh ung hoạt động theo tính trội, vì vậy chỉ cần đột biến một allel cũng đủ kích hoạt gen sinh ung thư [104]. Gen RAS trên NST số 12 là một ví dụ điển hình. Gen này mã hóa cho một protein gắn kết, hoạt động như “công tắc một chiều” cho sự dẫn truyền các tín hiệu ngoại bào đến nhân và điều hòa sự dẫn truyền tín hiệu tế bào. Khi bị đột biến, gen RAS trở thành gen sinh ung. Đột biến gen RAS được phát hiện trong khoảng 50% trường hợp ung thư đại trực tràng thể ngẫu nhiên và trong các polyp lớn. Sự phát hiện đột biến gen RAS có thể giúp ích cho việc tầm soát và chẩn đoán sớm ung thư ĐTT. 8 Có khoảng 60 tiền gen sinh ung được tìm thấy và mỗi tiền gen sinh ung có thể biến thành gen sinh ung gây một loại ung thư. Phần lớn các gen này được thấy dưới các dạng đột biến khác nhau trong một số loại ung thư. Các kiểu đột biến chuyển tiền gen sinh ung thành gen sinh ung gồm: đột biến điểm, mất đoạn, chuyển đoạn, khuếch đại, xen đoạn NST. Biến đổi xảy ra tại vùng mã hóa protein có th ể tạo ra sản phẩm tăng hoạt tính, còn tại các vùng điều hòa thì có thể làm cho gen được biểu hiện quá mức. Ngoài ra gen cũng có thể được biểu hiện quá mức do có quá nhiều phiên bản sai sót khi nhân bản NST. Với các gen riêng biệt và đáp ứng với các chất sinh ung riêng biệt, có thể có những kiểu bất thường đặc trưng. Nghiên cứu trình tự chuỗi DNA cho thấy trong một số trường hợp chuyển đoạ n, tiền gen sinh ung biến thành gen sinh ung vì đã bị nối vào một gen khác, do đó tạo ra sản phẩm protein bị thay đổi; trong một số trường hợp khác tiền gen sinh ung bị đưa sang một vùng NST khác, sinh ra protein bình thường nhưng với số lượng dư thừa. 1.2.1.1 HER1 (EGFR) Gen EGFR nằm trên nhánh ngắn NST số 7, vị trí 12, mã hóa protein EGFR, là protein xuyên màng có trọng lượng phân tử 170 kD. Protein EGFR còn có tên là HER-1 hay c-ErbB-1 là thụ thể của yếu tố tăng trưởng biểu bì nằm trên bề mặt t ế bào, được kích hoạt khi gắn kết với các ligand đặc hiệu như yếu tố tăng trưởng biểu bì (EGF) hay yếu tố chuyển dạng tăng trưởng anpha (TGF-α) [63]. Khi gắn kết với ligand đặc hiệu, EGFR kích hoạt hàng loạt dòng thác tín hiệu nội bào, dẫn đến hình thành ung thư do kích thích tăng sản quá mức tế bào u, kích thích quá trình xâm nhập, quá trình sinh mạch và di căn của tế bào u, làm tế bào không chết theo lập trình (Hình 1.1). 9 Hình 1.1: EGFR và các đường truyền tín hiệu Các con đường hoạt hóa tín hiệu nội bào đã được biết đến như: - MAPK - protein kinase hoạt hóa mitogen. - PI3K/Akt. - Con đường Phospholipase C (PLC). - Con đường qua trung gian RAS. Con đường qua trung gian RAS phức tạp và liên quan đến cơ chế kháng thuốc kháng EGFR (Gefitinib hoặc Erlotinib, Cetuximab và Panitumumab) khi có đột biến gen KRAS. Ở người có ba gen RAS mã hóa ba protein cùng tên H-RAS, K-RAS và N-RAS. Ba gen RAS nằm trên ba NST hoàn toàn khác nhau. Đột biến gen RAS sẽ khởi động dòng thác tín hiệu nội bào bất hoạt tác dụng của thuố c. Bản thân đột biến gen này cũng là một yếu tố tiên lượng độc lập đối với bệnh nhân đang điều trị Cetuximab. Trong ung thư ĐTT, tỷ lệ gen KRAS bị đột biến lên tới 50% và thường tại vị trí codon 12 và 13. Tăng sinh Xâm nhập Di căn Không chết theo lập trình Sinh mạch máu Nhân Bào tương Ngoài tế bào Bắt cặp và kết nối với li g and Các thụ thể tyrosine kinase khác [...]... mới được chẩn đoán và khoảng 57.000 trường hợp tử vong ở Hoa Kỳ năm 1993 Tại Việt Nam, ung thư ĐTT là một trong những ung thư thường gặp nhất Theo ghi nhận ung thư quần thể của Bệnh viện Ung bướu năm 1995-1998, ung thư ĐTT ứng hàng thứ 3 ở nữ giới với xuất độ chuẩn là 9.0, một tỷ lệ rất đáng chú ý Ở nam giới, ung thư ĐTT cũng thư ng gặp vào hàng thứ 4 với ASR là 12,4 Ung thư ĐTT thư ng gặp ở nam hơn... biệt, nhiều công trình nghiên cứu về cơ chế di truyền phát sinh khối u, về những đột biến kiểu gen của các loại ung thư đã được công bố Từ các nghiên cứu cơ bản, nhiều kỹ thuật di truyền học mới đã được ứng dụng để chẩn đoán chính xác loại ung thư và góp phần vào việc theo dõi, tiên lượng di n tiến bệnh ung thư cũng như đánh giá hiệu quả điều trị bệnh nhân ung thư Nghiên cứu về di truyền tế bào bằng phương... 1.3.2 Nghiên cứu ứng dụng kỹ thuật di truyền phân tử Nhiều tác giả ở nhiều trung tâm di truyền khác nhau đã ứng dụng các kỹ thuật di truyền phân tử để khảo sát các đột biến gen và những thay đổi của biểu hiện gen với các kỹ thuật PCR, RT – PCR, Real – time PCR, kỹ thuật phát hiện đa hình đơn nucleotid SNP, kỹ thuật giải trình tự Tương tự, trong carcinôm tuyến vú, nếu cùng không được điều trị hóa chất, bệnh. .. biểu hiện Ki67 được đánh giá thông qua chỉ số Ki67 Chỉ số Ki67 là tỷ lệ phần trăm tế bào dương tính với Ki67 Đối với một số u, tỷ lệ tăng sinh tế bào xác định bằng tỷ lệ dương tính với Ki67 có liên quan đến độ mô học của u và di n tiến lâm sàng Ki67 có giá trị trong tiên lượng sống còn và tái phát trong một số ung thư 1.3 Nghiên cứu di truyền ung thư Có thể nói nghiên cứu về di truyền ung thư đã được các. .. giai đoạn ung thư: ở bệnh nhân bị ung thư, dấu ấn khối u liên quan tới kích thư c của khối u, mức độ và giai đoạn của ung thư * Tiên lượng khả năng tái phát: cho tới nay, ích lợi lớn nhất của các dấu ấn khối u là phát hiện sớm khả năng tái phát và di căn * Theo dõi hiệu quả của thuốc điều trị chống ung thư * Các loại dấu ấn khối u Ở Việt Nam, chẩn đoán ung thư chủ yếu nhờ vào khám lâm sàng, kỹ thuật hình... thiếu máu Tuy nhiên, không có triệu chứng nào chuyên biệt cho chẩn đoán ung thư 34 ĐTT Đôi khi các triệu chứng này được phát hiện, ung thư đã ở giai đoạn tiến triển và điều trị khó khăn Trong một số nghiên cứu, những người lớn hơn 40 tuổi có triệu chứng đi cầu ra máu, khi được nội soi đại tràng nếu phát hiện ung thư, thư ng ung thư còn ở thành đại tràng (Duke A và B) 1.4.4.2 Thăm khám trực tràng bằng... phát hiện trong lúc phẫu thuật , và một phần nhờ vào dấu ấn khối u Mức độ đóng góp của dấu ấn khối u trong chẩn đoán còn phụ thuộc vào tính đặc hiệu của dấu ấn khối u đối với loại ung thư tương ứng Vì vậy cần chú ý một số các đặc điểm sau: Dấu ấn khối u âm tính không có nghĩa là không bị ung thư Có những u lành tính hay những bệnh không phải ung thư cũng có dấu ấn khối u tăng, vì vậy việc chẩn đoán ung. .. đến 30%, còn đa số các đột biến khác thì xảy ra trong khoảng từ exon 4 đến exon 8 Đã có nhiều nghiên cứu về vai trò của các đột biến trên gen p53 trong ung thư ĐTT và người ta nhận thấy, tỷ lệ đột biến trên gen p53 ở những khối u giai đoạn sớm tương đối thấp, nên đã hạn chế việc sử dụng p53 để sàng lọc và phát hiện ung thư dựa trên kỹ thuật phân tử * Các biến đổi gen p53 Các nghiên cứu trước đây [106],... Theo số liệu thống kê của IARC năm 2009, đa số các đột biến gen p53 cũng xảy ra trong vùng exon 5-8 (Hình 1.5, 1.6) Tuy nhiên, tỷ lệ đột biến xuất hiện trong và ngoài vùng exon 5-8 cũng khác nhau, tùy thuộc vào loại ung thư Đột biến ngoài vùng exon 5-8 xuất hiện nhiều ở ung thư bàng quang (28%), ung thư gan (24%) và xuất hiện ít hơn ở ung thư đầu mặt (2%), ung thư tế bào tạo máu ác tính (2%) Vì thế, tỷ... Đa số các KRAS bị đột biến liên quan đến ung thư ĐTT đều xảy ra ở ba vị trí codon đặc hiệu, đó là ở các vị trí 12, 13 và 60 Các đột biến này ức chế hoạt tính của GTPase, do đó liên tục tạo ra thể RAS hoạt động KRAS bị đột biến được tìm thấy đến 40-50% trong các trường hợp ung thư đại tràng rải rác và ung thư dạng tuyến, điều đó cho thấy nghiên cứu các đột biến có thể đóng vai trò quan trọng chẩn đoán . thuật di truyền học hiện đại trong phân tích các rối loạn vật chất di truyền trong một số bệnh ung thư. (2) Ứng dụng các kỹ thuật trên trong chẩn đoán và tiên lượng một số bệnh ung thư. Trong. nguy cơ bị ung thư. Đề tài Nghiên cứu ứng dụng các kỹ thuật di truyền hiện đại trong chẩn đoán và tiên lượng một số bệnh ung thư thường gặp ở Việt Nam thuộ c “Chương trình Khoa học và Công. ĐẠI HỌC Y DƯỢC TP. HỒ CHÍ MINH BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG CÁC KỸ THUẬT DI TRUYỀN HIỆN ĐẠI TRONG CHẨN ĐOÁN VÀ TIÊN LƯỢNG MỘT SỐ BỆNH UNG THƯ THƯỜNG GẶP Ở