Luận văn Nhân giống lan Dendrobium bằng phương pháp gieo hạt in-vitro Khoá luận tốt nghiệp – 2005 Mở đầu PHẦN I: GIỚI THIỆU Trong những năm gần đây với chính sách mở rộng đầu tư về mọi mặt của Nhà nước, đời sống vật chất và tinh thần của người dân ngày càng được cải thiện và nâng cao. Song song với nhu cầu về vật chất thì nhu cầu tinh thần đặc biệt không thể thiếu được. Từ lâu con người đã thích trồng hoa, cây cảnh vừa để trang trí cho đẹp, vừa để giải trí tinh thần. Mỗi người thích trồng một loài hoa khác nhau, việc lựa chọn loài hoa nào thường tuỳ thuộc vào điều kiện khí hậu của vùng đó, vẻ đẹp của hoa, cũng như là hoa đó có dễ trồng và chăm sóc hay không. Hoa lan được nhiều người ưa thích, bởi lẽ hoa lan có cấu trúc kiêu kì và phức tạp, nhất là bộ phận môi có những nét chạm trổ rất tinh vi, lại rất phù hợp với điều kiện khí hậu của Việt Nam, dễ chăm sóc và mỗi người có thể chọn loại hoa lan mình thích tuỳ theo túi tiền của mình mà vẫn thoả mãn được thú vui tao nhã. Phong lan ở nước ta rất phong phú và đa dạng, có nhiều giống khác nhau như: Cattleya, Phalaenopsis, Oncidium, Mokara, Vanda, Dendrobium… chúng đều cho hoa rất đẹp và mang nhiều màu sắc khác nhau. Nó có thể dùng để trang trí, trưng bày, làm đẹp, dùng trong các buổi lễ… hay người ta có thể bán hoa cắt cành-kinh doanh. Trong số đó có lẽ Dendrobium là giống đặc sắc nhất từ màu sắc, dạng hoa cho đến giống loài. Mặc khác, Dendrobium cũng rất dễ trồng, rất siêng hoa và lâu tàn. Do đó nó rất được ưa chuộng và được trồng phổ biến nhất nước ta hiện nay nhằm phục vụ cho nhu cầu cuộc sống. Các nhà trồng lan không ngừng tìm kiếm các giống lan mới để thõa mãn sự hiếu kì của mình hoặc có thể đem bán. Có hai cách để có được giống lan mới. Một là, sưu tập những giống lan hoang dại trong rừng đem về thuần hóa, tạo các điều kiện nhân tạo giống tự nhiên để cây lan có thể ra hóa. Phương pháp này gặp nhiều rủi ro do điều kiện môi trường không thuận lợi cho cây lan phát triển. Hai là, tạo ra những giống lan lai mới, cây lan lai sẽ mang những đặc tính tốt vựơt trội của cả bố mẹ, có thể thỏa mãn được nhu cầu của người thưởng thức lan. Tuy nhiên khi hai cây lan lai với nhau đạt kết quả và tạo trái cần phải kết hợp với phương pháp gieo hạt trong ống nghiệm để hạt lan có thể nẩy mầm dễ dàng. Có như vậy mới có thể kiểm tra kết quả của việc lai hai cây lan. Xuất phát từ nhu cầu thực tiễn, trong phạm vi đề tài này chúng tôi tiến hành nghiên cứu: Nhân giống lan Dendrobium bằng phương pháp gieo hạt in-vitro. SVTH: Nguyễn Vũ thò Hoàng Uyên Trang 1 Khoá luận tốt nghiệp - 2005 Tổng quan tài liệu SVTH: Nguyễn Vũ thò Hoàng Uyên Trang 2 PHẦN II: TỔNG QUAN TÀI LIỆU I. Giới thiệu họ lan: 1.1 Đặc điểm chung: Các họ lan được đánh giá là một trong những loài hoa cao cấp trong vương quốc thảo mộc, bao gồm hơn 25.000 ngàn loài khác nhau, cùng với những loài mới được khám phá và mô tả theo từng năm. Do bởi chúng được phân bố vùng rộng lớn, trải dài từ đường xích đạo cho đến Bắc cực, từ đồng bằng cho đến các vùng núi băng tuyết, các loài lan rất khác biệt nhau: Lan đất (phát triển mọc trong đất kháng nước); thực vật biểu sinh hoặc thực vật phụ sinh (phát triển phía trên mặt đất hoặc sống bám trên các loại thảo mộc khác, thu hút chất dinh dưỡng và nước từ môi trường xung quanh); thực vật phát triển trên mặt đá hoặc ngay cả dưới mặt đất (phát triển dưới bề mặt của môi trường cấy trồng). Những nhà sáng lập ngành Lan học đáng kể là triết gia người Hy Lạp Theophrastus (372-287 trước Công nguyên) và sau này là nhà thực vật học người Thụy Điển Linnaeus (1707-1778). Chính Theophrastus là người đầu tiên sử dụng từ Hy Lạp “Orchis” để chỉ nhóm Lan [4]. 1.2 Đặc điểm hình thái: 1.2.1 Cơ quan dinh dưỡng: Giả hành (thân giả): chỉ xuất hiện trên các loài lan đa thân. Giả hành là bộ phận rất cần thiết cho sự sinh trưởng và phát triển của lan. Giả hành tuy là thân nhưng lại chứa diệp lục, đây là bộ phận dự trữ nhiều chất dinh dưỡng rất cần thiết cho sự phát triển của giả hành mới. Giả hành cũng là cơ quan dự trữ nước[11]. Thân: Thân vẩy giả có nhiều hình dáng khác nhau tùy theo giống lan. Trên thân có đốt, trên mỗi đốt mọc một nhánh lá hoặc lá bao. Thân là cơ quan dự trữ nước và chất dinh dưỡng, mầm hoa và mầm lá đều mọc từ phần gốc của bộ phận thân rễ[12]. Chỉ có các loài đơn thân và một số loài của giống Dendrobium và Epidendrum vừa có giả hành, vừa có thân. Các loài lan có thân thường không có cơ quan dự trữ nước và chất dinh dưỡng[11]. Lá: là cơ quan dinh dưỡng của hoa lan, là xưởng chế tạo chất dinh dưỡng bằng quang hợp. Phiến lá thường có hình lưỡi kiếm dài, số lượng và hình dạng lá khác nhau tùy chủng loại lan khác nhau [12]. Lá có thể mọc đối xứng qua gân chính hay không, lá sát nhau ở gốc hay xếp cách có bẹ úp lên nhau, chia đốt đều đặn, có khi thoái hóa thành vẩy hay phình lên, mọng nước, hình dạng rất khác nhau [11]. Căn hành (thân-rễ): chỉ gặp ở lan đa thân. Căn hành là nơi cấu tạo các cơ quan dinh dưỡng mới, trên căn hành có nhiều mắt sống, chết hoặc Khoá luận tốt nghiệp - 2005 Tổng quan tài liệu SVTH: Nguyễn Vũ thò Hoàng Uyên Trang 3 hưu niên. Mắt lá nơi hình thành cũng mang rất nhiều rễ để nuôi sống cây lan [11]. Rễ: ở lan đa thân, rễ thường được hình thành từ căn hành. các loài đơn thân thì rễ mọc thẳng từ thân và thường xen kẽ với lá. Rễ trên không của các loài lan phụ sinh có một trục chính bao quanh bởi mô không chặt, giống bọt biển bao quanh gọi là mạc. Mạc có thể hấp thụ hơi nước của không khí, cũng như tích trữ nước mưa và sương đọng [11]. 1.2.2 Cơ quan sinh sản: Hoa: tập hợp thành cụm hoa chùm hay bông. Hoa lưỡng tính, đối xứng hai bên. Bao hoa dạng cánh, rời nhau, xếp thành 2 vòng: 3 mảnh vòng ngoài (đài hoa) và 2 mảnh vòng trong (cánh hoa) bé hơn mảnh thứ 3 ở vòng trong. Mảnh này có hình dạng và màu sắc khác hẳn, gọi là cánh môi [13]. Quả: khi khô, mở thành 3-6 mảnh. Hạt rất nhỏ và nhiều, thường không có nội nhũ. Do nhẹ nên hạt dễ phát tán nhờ gió. nhiều loài, trong quả có những lông hút nước dùng để bắn hạt đi. Phôi trong hạt phát triển yếu, không phân hóa thành cơ quan. Hạt muốn nẩy mầm cần có nấm cộng sinh [13]. 1.3 Đặc điểm về phân loại. Orchidaceae là một họ rất lớn thuộc lớp Đơn tử diệp, phân bố khắp nơi trên thế giới [16]. Ở vùng ôn đới, ta gặp nhiều loài sống ở đất như đòa lan; một số loài hoại sinh không diệp lục và sống nhờ vào chất mục nát trong đất; có loài ở Úc Châu có thể sống ngầm dưới đất như nấm. vùng nhiệt đới, ta sẽ gặp nhiều loài phụ sinh sống trên cây khác như Cattleya, Oncidium, Laelia tập trung nhiều ở vùng Trung Mỹ; ở Đông Nam Á đặc sắc nhất là Dendrobium và còn có Cypripedium, Phalaenopsis, Cymbidium có nguồn gốc ở Indonesia. Một số loài lan sống trên đá như thạch lan. Cây lan có thể chia làm hai nhóm [11]: Nhóm đơn thân: đây là nhóm chỉ tăng trưởng về chiều cao làm cây dài ra mãi. Nhóm đơn thân chia làm hai nhóm phụ: - Nhóm phụ lá mọc đối (Sarcanthinae): nhóm này lá được xếp thành 2 hàng mọc đối nhau, lá trên một hàng xen kẻ với lá của hàng kia. Gồm các giống như: Vanda, Aerides, Phalaenopsis… - Nhóm phụ lá dẹp thẳng hay tròn (Campylocentrinae): Papilionanthe, Luisia… Nhóm đa thân: đây là nhóm gồm những cây tăng trưởng liên tục. Căn cứ vào cách ra hoa nhóm này chia thành 2 nhóm phụ: Khoá luận tốt nghiệp - 2005 Tổng quan tài liệu SVTH: Nguyễn Vũ thò Hoàng Uyên Trang 4 - Nhóm ra hoa phía trên như: Cymbidium, Dendrobium, Oncidium… - Nhóm ra hoa ở đỉnh: Cattleya, Laelia, Epidendrum… Ngoài ra còn có một số giống mang tính chất trung gian như: Centropetatum, Phachyphllum, Dichaea… Hình 2.1: Cấu tạo cơ quan sinh sản. a. Cấu tạo hoa chi tiết. b. Quả lan chín. Hình 2.2: Một số giống hoa đẹp của họ Orchidaceae. Khoá luận tốt nghiệp - 2005 Tổng quan tài liệu SVTH: Nguyễn Vũ thò Hoàng Uyên Trang 5 II. Giới thiệu về Dendrobium. 2.1 Nguồn gốc và sự phân bố: Giống lan này được đặt tên vào năm 1799. Chữ Dendrobium có nguồn gốc của chữ Hy Lạp. Dendro có nghóa là cây gỗ, cây lớn; bio là sống, vì tất cả các loài của Dendrobium đều là phụ sinh sống bám trên cây gỗ [16]. Dendrobium rất phong phú về chủng loại, nay lớn thứ nhì của họ Lan với khoảng 1.600 loài phân bố trên các vùng thuộc châu Á nhiệt đới, tập trung nhiều nhất ở Đông Nam Á và Úc châu [16]. Điều kiện sinh thái của Dendrobium cũng rất đa dạng có nhiều loài chỉ mọc và ra hoa ở vùng lạnh, có loài ở vùng nóng, có loài ở trung gian, và cũng có loài thích nghi với bất cứ điều kiện khí hậu nào [11]. 2.2 Vò trí phân loại: Lan Dendrobium thuộc: - Ngành : Angiospermatophyta - Lớp : Liliopsida (Monocotyledones) - Lớp phụ : Liliidae - Bộ : Orchidales - Họ : Orchidaceae - Giống : Dendrobium sp. Hình 2.3: Tổng quan về lan Dendrobium. Khoá luận tốt nghiệp - 2005 Tổng quan tài liệu SVTH: Nguyễn Vũ thò Hoàng Uyên Trang 6 2.3 Đặc điểm về hình thái. Dendrobium là loài đa thân với nhiều giả hành, các giả hành thường mang một thân với nhiều lá mọc xen kẽ, trên thân có rất nhiều mắt ngủ. Căn hành với khoảng cách giữa các mắt ngắn hơn Cattleya. Hoa có thể mọc từ thân thành từng chùm hay từng hoa cô độc [11]. Hoa có màu trắng, vàng đến tím. Thường lá đài sau nằm một mình, 2 lá đài bên dài ra dính lại với nhau ở mép dưới và dính vào đáy của trụ tạo thành một phần dưới chân của trụ phía dưới gọi là cằm. Môi gắn vào cằm, đôi khi kéo dài về phía sau tạo thành cựa, móc hay túi. Môi nguyên hay có thùy, gai, sọc có lông hay không. 2 cánh hoa bên giống như 2 lá đài. Trụ thấp. Phần đực của đỉnh trụ có nắp đậy, nắp gắn vào trụ nhờ 1 chỉ ngắn về phái sau. 4 khối phấn nhỏ dính lại với nhau từng cặp, không vó, không gót. Dendrobium được chia ra làm 2 nhóm theo dạng thân của chúng: - Dạng thòng hay Nobile là dạng thân mềm thường ở vùng hơi lạnh như Đà Lạt. - Dạng đứng hay Phalaenopsis là dạng thân cứng thường sống ở vùng có khí hậu nóng hơn. Cả Dendrobium nobile và Dendrobium phalaenopsis đều có chung đặc điểm trong việc tạo lập các giả hành mới và trong sự biệt hóa chồi sơ khởi ở nách lá dọc theo giả hành; nhưng chúng lại rất khác biệt trong việc trong việc tạo lập chồi hoa. - Dendrobium nobile ra hoa từ chồi sơ khởi của giả hành đã trưởng thành. Như Long tu, Giả hạc chúng chỉ ra hoa với giả hành đã rụng hết lá. - Dendrobium phalaenopsis thì hoa mọc ở giả hành cũ lẫn giả hành mới. giả hành mới, chồi non nhất ở gần ngọn là chồi đầu tiên phát triển thành vòi hoa. Hình dạng của Dendrobium cũng rất biến thiên: - Nhóm có giả hành rất dài và mang lá dọc theo chiều dài của giả hành ấy, thường rụng hết lá khi ra hoa như Long tu (Dendrobium primulinum), Ý thảo (Dendrobium gratio sissimum)… - Nhóm giả hành to ngắn , tận cùng thường có 2-3 lá dai, bền, không rụng. Phát hoa tập trung ở phần này tạo thành chùm đứng hay thòng như: Thủy tiên trắng (Dendrobium farmeri), Thủy tiên vàng (Dendrobium thyrisflorum), Vảy cá (Dendrobium lindleyi)… - Nhóm cá giả hành rất mảnh mai, dài hay ngắn, có lá dọc theo chiều dài của chúng, dai bền không rụng. Hoa thường cô độc ở nách như Hương duyên (Dendrobium revolutum)… Ngoài ra còn có một số loài Dendrobium khác cũng thường được trồng: - Kim điệp (Dendrobium chysotosum var delacuorii): Hoa vàng tươi, môi vàng dưới trung tâm đậm. Khoá luận tốt nghiệp - 2005 Tổng quan tài liệu SVTH: Nguyễn Vũ thò Hoàng Uyên Trang 7 - Nhất điểm hồng (Dendrobium dracoins): Hoa trắng bóng như sáp với môi sọc đỏ ở đáy. - Thạch hộc (Dendrobium crumenatum): Hoa trắng, môi có bớt vàng, thơm nhưng mau tàn, ít hoa nhưng nở rộ cùng lúc. - Giả hạc (Dendrobium anosmum, Dendrobium superbum): Hoa màu hường, có hai bớt đậm màu trắng hay tuyền. Rất thơm [16]. 2.4 Các điều kiện cơ bản để nuôi trồng lan Dendrobium sp.: 2.4.1 Nhiệt độ. Nhiệt độ tác động ở cây lan qua con đường quang tổng hợp, cường độ quang hợp gia tăng theo nhiệt độ, thường nhiệt độ tăng 10% thì tốc độ quang hợp tăng lên gấp đôi. Nhiệt độ còn ảnh hưởng đến sự ra hoa ở một số loài lan như lan Bạch câu Dendrobium crumenatum đòi hỏi giảm nhiệt độ khoảng 5-6 0 C trong vài giây thì 9 ngày sau chúng sẽ nở hoa đồng loạt. 18,5 0 Dendrobium nobile chỉ tăng trưởng mà không ra hoa nhưng chúng sẽ ra hoa khi nhiệt độ hạ xuống 13 0 C hay thấp hơn [16]. Căn cứ vào nhu cầu nhiệt độ, có thể tạm chia Dendrobium thành hai nhóm chính: - Nhóm ưa lạnh sinh trưởng và phát triển tốt ở nhiệt độ lý tưởng là 15 0 C, gồm các giống được lấy từ các vùng cao nguyên ở độ cao trên 1.000m. các loài này nếu được trồng ở nhiệt độ cao hơn hoặc bằng 25 0 C, thì cây vẫn sống, thì cây vẫn sống nhưng hiếm khi ra hoa. - Nhóm ưa nóng, nhiệt độ thích hợp cho các loài của nhóm này là 25 0 C, gồm đa số các giống Dendrobium ở vùng nhiệt đới, và các loài của giống Dendrobium lai hiện đang trồng tại thành phố Hồ Chí Minh và các tỉnh phía Nam… - Ngoài ra, còn có một nhóm Dendrobium trung gian có thể sống ở cả vùng lạnh và vùng nóng, nhưng ở vùng lạnh cây sinh trưởng và ra hoa nhiều hơn như Dendrobium primulinum, Dendrobium farmeri nhiệt độ lý tưởng của các loài này là 20 0 C [11]. 2.4.2 m độ. Các cây lan, nhất là phong lan, sống bám trên các cây cao, chúng lấy nước từ các trận mưa, từ hơi nước trong không khí. Chính ẩm độ quyết đònh sự hiện diện của các loài phong lan [16]. Thông thường ẩm độ tương đối tối thiểu 70% thích hợp cho sự tăng trưởng của nhiều loài. Tuy nhiên ẩm độ lý tưởng vẫn là ẩm độ của vùng bản xứ mà loài lan đó được tìm thấy. Dendrobium cũng như đa số các giống lan khác chỉ phát triển tốt trong không khí ẩm và thoáng. m độ tương đối cần thiết là 40-70%. Cấu tạo giá thể quá ẩm và úng thì bộ rễ sẽ bò thối và biểu hiện là cây con keiki mọc ra từ phần ngọn của thân [11]. Khoá luận tốt nghiệp - 2005 Tổng quan tài liệu SVTH: Nguyễn Vũ thò Hoàng Uyên Trang 8 2.4.3 nh sáng. nh sáng là điều kiện cần thiết cho sự sinh trưởng và phát triển của cây lan thông qua quá trình quang hợp. Đây là yếu tố quyết đònh sự trổ hoa của lan [16]. Dendrobium là giống ưa sáng, có thể trồng trong điều kiện ánh sáng trực tiếp hay khuếch tán. nh sáng hữu hiệu cho giống Dendrobium là 70%. Nếu thừa ánh sáng, cây sẽ bò vàng lá, giả hành bò teo lại, cây xấu đi nhưng cây sẽ thích nghi dần, vẫn ra hoa nhiều và đẹp. Nếu thiếu ánh sáng, cây sẽ bò thoái hóa rõ rệt, cây èo uột và số lượng hoa sẽ ít đi [11]. 2.4.4 Nhu cầu phân bón. Dendrobium thân đứng đòi hỏi dinh dưỡng cao, chúng cần rất nhiều phân bón và có thể dùng nhiều dạng phân bón khác nhau. Còn các loại Dendrobium thân thòng hấp thu phân chậm nên phải dùng nồng độ thật loãng. Các loại phân hữu cơ như: phân heo, bánh dầu khô, phân tôm cá, phân trâu bò khô… có thể dùng rất tốt bằng cách pha loãng với nước rồi tưới, hoặc vò chặt từng viên đặt trên bề mặt giá thể, rễ lan sẽ hấp thụ dần dần các dưỡng chất được phóng thích qua quá trình tưới nước. Các loại phân vô cơ được dùng thường có công thức 30-10-10 dùng 3 lần/tuần với nồng độ 1 muỗng cà phê/4lít. Trong suốt mùa tăng trưởng, ta bón phân 10-20- 30 làm 2 lần/tuần để tạo một sức chòu đựng cho cây trước khi bước vào mùa nghỉ. Trong mùa tăng trưởng nếu cây có nụ hoa, ta thay phân 30-10-10 bằng phân 10-20- 20 với chu kỳ bón như trên cho đến khi hoa tàn. Trong mùa nghỉ hoàn toàn không bón phân cho Dendrobium, hay đúng hơn giảm và không bón phân cho Dendrobium khi cây hoàn tất thời kì tăng trưởng hằng năm của nó. Không nên dùng các loại phân riêng rẽ, thường phân bón được dùng ở dạng hỗn hợp và bổ sung thêm các chất phụ gia là các sinh tố và các nguyên tố vi lượng. 2.4.5 Sâu bệnh và các vấn đề khác. Vì lan Dendrobium cần được bón nhiều loại phân hữu cơ khác nhau và môi trường sơ dừa sẽ mục nát sau một thời gian ngắn được trồng. Đây là 2 nguyên nhân gây ra nhiều sâu bệnh hại. Một loại rệp dính màu vàng, kích thước rất bé thường xuất hiện trên bề mặt lá. Loại này gây tác hại trên cây qua việc hút nhựa. Đối với các loài côn trùng cắn phá Dendrobium thì loại trừ chúng tương đối dễ dàng bằng Serpa, Bassa, nồng độ 1/500. Mặc dù Dendrobium là cây kháng bệnh rất mạnh, tuy nhiên cây vẫn bò nấm và virus tấn công nếu điều kiện vệ sinh quá kém. Nguy hiểm nhất là bệnh khô thân gần gốc giả hành do một loài virus thâm nhập làm cho các giả hành bò khô và chết. Có thể ngừa bệnh bằng cách nửa tháng xòt Topsil, Zineb, Benomyl với nồng độ 1/400 [11]. Khoá luận tốt nghiệp - 2005 Tổng quan tài liệu SVTH: Nguyễn Vũ thò Hoàng Uyên Trang 9 Hình 2.4: Một số dạng hoa đẹp của giống Dendrobium. [...]... mía) [11] VI Mục đích gieo hạt lan Dendrobium trong ống nghiệm Hình 2.5: Quả lan Dendrobium Các nhà trồng lan không ngừng tìm kiếm các giống lan mới để thõa mãn sự hiếu kì của mình hoặc có thể đem bán Có hai cách để có được giống lan mới Một là, sưu tập những giống lan hoang dại trong rừng đem về thuần hóa, tạo các điều kiện nhân tạo giống tự nhiên để cây lan có thể ra hóa Phương pháp này gặp nhiều rủi... giống lan quý cần phải bảo vệ thì phương pháp gieo hạt trong ống nghiệm giúp bảo tồn giống, nhân nhanh số lượng cây mà vẫn đảm bảo được tính ổn đònh di truyền SVTH: Nguyễn Vũ thò Hoàng Uyên Trang 15 Khoá luận tốt nghiệp – 2005 Download» http://Agriviet.Com Vật liệu – Phương pháp PHẦN III: VẬT LIỆU – PHƯƠNG PHÁP I Vật liệu và điều kiện gieo hạt trong ống nghiệm 1.1 Mẫu quả gieo hạt Vật liệu là quả lan. ..Khoá luận tốt nghiệp - 2005 III Download» http://Agriviet.Com Tổng quan tài liệu Các phương pháp nhân giống 3.1 Nhân giống ngoài thiên nhiên 3.1.1 Nhân giống vô tính a Tách bụi: đây là phương pháp đã được các nghệ nhân sử dụng đối với các giống lan đa thân như Cattleya, Dendrobium, Cymbidium, Paphiopelium…ở Cattleya, Dendrobium, và những giống tương tự: ở mỗi gốc của giả... Rhizoctonia lanugiosa giúp cho hột nẩy mầm ở Oncidium, Odontoglossum và Miltonoa [16] 3.2 Nhân giống trong phòng thí nghiệm Trong phòng thí nghiệm lan Dendrobium được chúng tôi nhân giống bằng phương pháp gieo hạt in-vitro Trong thiên nhiên, vì hột lan quá nhỏ, không chứa chất dự trữ và chỉ có một phôi chưa phân hóa, nên không thể phát triển theo một phương cách bình thường được và vì vậy mà việc cho hột lan. .. Khoá luận tốt nghiệp – 2005 II Download» http://Agriviet.Com Vật liệu – Phương pháp Hướng đi của đề tài Đối với đề tài, chúng tôi hướng mục đích nhân giống lan Dendrobium lai bằng phương pháp gieo hạt in-vitro nhằm: - Cung cấp giống lan mới cho các phòng nuôi cấy mô - Tạo ra cây con khỏe, sạch bệnh, để trồng ra vườn ươm - Kiểm tra kết quả lai Với thời gian quá ngắn, từ nguyên liệu ban đầu là quả lan, ... phát triển thành cây lan trưởng thành là vấn đề khó khăn Người trồng lan đã tìm nhiều cách gieo hạt nhưng không thành công Năm 1922, Knudson ở Mỹ, thành công trong việc thay thế nấm bằng đường ở môi trường thạch để gieo hạt [16] Phương pháp này có nhiều ưu điểm như: IV Kết hợp với kỹ thuật lai giống tạo ra nhiều giống lan mới cung cấp cho thò trường Giúp bảo tồn các loài lan quý, và nhân nhanh số lượng... loài lan phụ sinh, protocorm thường xanh, và vì thế nó có thể tự tổng hợp được một ít thức ăn [22] b Khử trùng trái lan Việc khử rùng trái lan có thể thực hiện theo hai phương pháp: - Quả lan sau khi mổ ra, hạt thu được trước khi đem gieo cần tuyển chọn các hạt chắc, các hạt lép không thụ tinh cần phải loại bỏ đi bằng cách đem ly tâm trong nước cất; các hạt lan tốt sẽ lắng phía dưới ống nghiệm, hạt. .. được gạn bỏ đi Các hạt tốt được tiếp tục khử trùng bằng Hypochlorite de calcium 10% Sau đấy, cho hạt lan và nước khử trùng vào ống nghiệm, vừa đủ phủ kín hạt lan, lắc mạnh, đều và để yên trong vòng 10 phút, sau đó đổ nước khử trùng ra bằng ống hút, và tiếp tục rửa hạt lan 3 lần bằng nước cất vô trùng Cuối cùng hạt lan đã khử trùng sẽ được gieo vào các bình chứa môi trường - Khi quả lan đã được cắt trên... Các công trình ngiên cứu gieo hạt lan trong ống nghiệm 5.1 Trong nước: Dương Công Kiên và cộng sự nghiên cứu lai tạo và gieo hạt lan Dendrobium trong ống nghiệm [8] 5.2 Ngoài nước: Năm 1844, Neumann, một người Pháp làm vườn, đã làm nẩy mầm một số hột lan bằng cách rải đại các hột lan trên các cục đất ở quanh gốc của các cây lan lớn Năm 1899, Noel Bernard, nhà thực vật người Pháp, đã khám phá ra bí mật... cho cây lan phát triển Hai là, tạo ra những giống lan lai mới, cây lan lai sẽ mang những đặc tính tốt vựơt trội của cả bố mẹ, có thể thỏa mãn được nhu cầu của người thưởng thức lan Tuy nhiên khi hai cây lan lai với nhau đạt kết quả và tạo trái cần phải kết hợp với phương pháp gieo hạt trong ống nghiệm để hạt lan có thể nẩy mầm dễ dàng Có như vậy mới có thể kiểm tra kết quả của việc lai hai cây lan Đối . Luận văn Nhân giống lan Dendrobium bằng phương pháp gieo hạt in-vitro Khoá luận tốt nghiệp – 2005 Mở đầu PHẦN I: GIỚI THIỆU Trong. tài này chúng tôi tiến hành nghiên cứu: Nhân giống lan Dendrobium bằng phương pháp gieo hạt in-vitro. SVTH: Nguyễn Vũ thò Hoàng Uyên Trang 1 Khoá luận tốt nghiệp - 2005 Tổng quan tài liệu. của giống Dendrobium. Khoá luận tốt nghiệp - 2005 Tổng quan tài liệu SVTH: Nguyễn Vũ thò Hoàng Uyên Trang 10 III. Các phương pháp nhân giống. 3.1 Nhân giống ngoài thiên nhiên. 3.1.1 Nhân