NGHIÊN CỨU GIÁ THỂ TRỒNG VÀ DINH DƯỠNG SAU IN VITRO CHO CÂY HOA HỒNG MÔN (Anthurium tropical) Phùng Tôn Quyền 1 , Đoàn Duy Thanh 1 , Lê Đức Thảo 1 . Summary A study on substrate and fertilizer regime for Hong mon plantlets (Anthurium tropical) post - invitro A study on substrate and fertilizer regime for Hong mon plantlets (Anthurium tropical) post - invitro showed that seaweed is suitable for growth and development of plantlets with surviving ratio 100% and fertilizer regime with NPK = 1:1:2 (87mg/l KNO 3 + 12mg/l NH 4 NO 3 + 33mg/l NH 4 H 2 PO 4 + solution 20mg/l CaCl 2 and 35mg/l MgSO 4 )) with dose 1 lớt/m 2 substrate/3 days/time. Mixture of coconut fiber + muck + alluvial soil with rate 1:1:1 was good substrate for planting bag. Spraying NPK = 3:1:2 in there ratio NO - 3/ NH 4 + = 3:2 (NH 4 H 2 PO 4 33 (mg/l) + KNO 3 87 (mg/l) + NH 4 NO 3 116 (mg/l) + Ca (NO 3 ) 2 .4H 2 O 34 (mg/l), supplemented 20mg/l CaCl 2 and 35mg/l MgSO 4 ) with dose 1 lớt/m 2 substrate/7 days/time was the best nutrition for Hong mon plants at the first stage of open field. Keywords: Anthurium, plantlets, substrates, coconut fiber, nursery, growth and development. I. ĐẶT VẤN ĐỀ Hồng môn (Anthurium tropical) là một loài hoa được nhiều người ưa chuộng vì đây là một loài hoa đẹp, đa dạng về hình thái, màu sắc, bên cạnh đó hoa Hồng môn còn có đặc tính rất bền và tươi lâu. Ở nước ta hiện nay các nghiên cứu về công nghệ nhân giống in vitro trên cây Hồng môn như: Nhân giống in vitro bằng phương pháp tái sinh cây từ callus, tạo phôi vô tính từ mô lá, lát cắt thân cây[1], nghiên cứu tạo phôi vô tính và hạt nhân tạo đã được công bố và ứng dụng[2]. Để tiếp tục nghiên cứu giai đoạn sau in vitro, từ đó tạo cơ sở xây dựng qui trình sản xuất giống hoa Hồng môn với quy mô công nghiệp, chúng tôi tiến hành nghiên cứu giá thể trồng và dinh dưỡng phù hợp cho cây con. II. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 1. Đối tượng và vật liệu nghiên cứu Vật liệu nghiên cứu là cây con giống Anthurium tropical Red nhập nội từ Hà Lan được nhân giống từ nuôi cấy mô tế bào. Cây có chiều cao 5 - 7 cm, 3 - 5 lá. 2. Phương pháp nghiên cứu - Các thí nghiệm ngoài vườn ươm giai đoạn sau in vitro được thực hiện trong nhà lưới có mái che bằng tấm lợp nhựa tổng hợp hoặc lưới có độ che sáng 50% ánh sáng tự nhiên và đảm bảo nhiệt độ dao động từ 28 - 33 0 C. - Các công thức thí nghiệm được bố trí ngẫu nhiêu với 3 lần nhắc lại. - Các số liệu được xử lý trên chương trình IRRISTAT 5.0. 1 Viện Di truyền Nông nghiệp. III. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 1. Thí nghiệm giai đoạn vườn ươm sau in vitro 1.1. ghiên cứu ảnh hưởng của giá thể đến sự sinh trưởng, phát triển của cây con giai đoạn sau in vitro Sử dụng cây con in vitro có 5 - 6 lá, chiều cao trung bình 5 - 6 cm. Các cây này được trồng vào khay nhựa (200 x 220 cm) có chứa giá thể dày từ 7 - 9 cm với mật độ 50 cây cho một loại giá thể. Giá thể chúng tôi nghiên cứu gồm: Cát (CT1), Rong biển (CT2), Xơ dừa (CT3) và Mùn cưa (CT4). Sau 30 ngày chúng tôi thu được kết quả thể hiện ở bảng 1. Bảng 1. Ảnh hưởng của giá thể tới tỷ lệ sống (%) và sinh trưởng phát triển của cây sau 30 ngày ươm STT Loại giá thể Tỷ lệ sống (%) Tăng chiều cao cây (cm) Tăng số lá (chiếc) Tăng số rễ (chiếc) 1 CT1 (Đ/C) 100 1.2 1.6 1.3 2 CT2 100 1.5 3.3 2.6 3 CT3 100 0.6 1.3 2.0 4 CT4 100 1.1 1.3 1.3 CV(%) 2,3 1,6 LSD 0,05 0,12 0,26 Kết quả thí nghiệm ở bảng 1 cho thấy với cả bốn loại giá thể ươm cây, tỷ lệ sống đều đạt 100%. Giá thể rong biển cho các chỉ số sinh trưởng của cây ươm như tăng chiều cao cây (1,5 cm/cây), tăng số lá (3,3 chiếc/cây), tăng số rễ (2,6 chiếc/cây) là lớn nhất giữa các công thức thí nghiệm, ở giá thể này cây ươm có phiến lá to, màu xanh đậm. Giá thể xơ dừa cho các chỉ số sinh trưởng của cây ươm là tương đối tốt thể hiện ở bộ rễ phát triển tốt hơn các công thức khác (tăng số rễ 2,0 chiếc/cây). Cây ươm trên giá thể mùn cưa sinh trưởng kém, chúng tôi thấy lá có màu vàng nhạt, diện tích lá nhỏ, chiều cao cây thấp, cây con phát triển không đồng đều. Từ những kết quả nghiên cứu và phân tích trên đây cho thấy sử dụng giá thể rong biển cho giai đoạn đưa cây Hồng môn in vitro từ phòng thí nghiệm ra ngoài vườn ươm là tốt nhất. 1.2. ghiên cứu ảnh hưởng của dinh dưỡng tới sự phát triển của cây con giai đoạn vườn ươm Chúng tôi thực hiện nghiên cứu với những cây ươm trên giá thể Rong biển. - CT1 (Đ/C) - Không phun dinh dưỡng. - CT2 - Phun dinh dưỡng A1 (có tỷ lệ NPK là 1 : 1 : 2 tức là 12 mg/l NH 4 NO 3 + 33 mg/l NH 4 H 2 PO 4 + 87 mg/l KNO 3 có bổ sung 20 mg/l CaCl 2 và 35 mg/l MgSO 4 ). - CT3 - Phun dung dịch dinh dưỡng A2 (dung dịch môi trường MS/2). Mỗi công thức trồng 50 cây, phun nước gi Nm cho cây, sau 7 ngày phun dinh dưng, liu lưng 1lít/1m 2 giá th, 3 ngày/1 ln. Sau 30 ngày ươm trong iu kin nhà lưi,  mi công thc quan sát s lưng cây sng và các ch tiêu sinh trưng ca cây. Kt qu thí nghim ưc th hin  bng 2. Qua bng 2 chúng tôi thy vic phun b sung dinh dưng N PK = 1 : 1 : 2 ã nh hưng rõ rt ti s sinh trưng ca cây con giai on sau in vitro và có hiu qu hơn so vi phun dung dch dinh dưng môi trưng MS/2. Bảng 2. Ảnh hưởng của dinh dưỡng đến sinh trưởng của cây con giai đoạn vườn ươm (sau 30 ngày) STT Công thức Tỷ lệ sống (%) Tăng chiều cao cây (cm) Tăng số lá (chiếc) Tăng số rễ (chiếc) 1 CT1 (Đ/C) 98 0.4 1.0 0.6 2 CT2 100 0.8 1.6 1.6 3 CT3 98 0.6 1.2 1.0 T nhng kt qu nghiên cu và phân tích trên ây, chúng tôi ưa ra kt lun: Phun dinh dưỡng có tỷ lệ NPK là 1:1:2 tức là 12 mg/l NH 4 NO 3 + 33 mg/l NH 4 H 2 PO 4 + 87 mg/l KNO 3 có bổ sung 20 mg/l CaCl 2 và 35 mg/l MgSO 4 ) liều lượng 1 lít/1 m 2 giá thể, chu kỳ 3 ngày/1 lần có hiệu quả tốt. 2. Thí nghiệm giai đoạn vườn trồng 2.1. ghiên cứu ảnh hưởng của giá thể trồng đến sự sinh trưởng của cây giai đoạn trồng Cây con dùng trong thí nghim là nhng cây con 45 ngày tui sau ươm. Mi công thc thí nghim trng 50 cây vi  sâu là 2 - 2,5 cm trong bu. Sau 45 ngày trng chúng tôi thu ưc kt qu  bng 3. Bảng 3. Ảnh hưởng của giá thể trồng đến sinh trưởng của cây giai đoạn trồng (sau 45 ngày) STT Giá thể bầu Tỷ lệ sống (%) Tăng chiều cao cây (cm) Tăng số lá (chiếc) Tăng số rễ (chiếc) 1 CT1 (Đ/C) 100 0,8 1,6 2,0 2 CT2 100 0,6 1,6 1,6 3 CT3 100 1,0 2,3 2,3 4 CT4 100 0,1 0,6 0,3 5 CT5 100 0,2 1,0 0,6 6 CT6 100 0,4 2,0 1,6 7 CT7 100 1,2 2,0 2,6 CV (%) 2,1 LSD 0,05 0,14 Ghi chú: CT1 (/C): Chất nền nông hoá (Viện Nông hoá Thổ nhưỡng); CT2: Đá nghiền; CT3: Đất/phân chuồng với tỷ lệ 1 : 1; CT4: Đá nghiền/phân chuồng/đất với tỷ lệ 1 : 1 : 1; CT5: Vỏ trấu/phân chuồng/đất với tỷ lệ 1 : 1 : 1; CT6: Mùn cưa/phân chuồng/đất với tỷ lệ 1 : 1 : 1; CT7: Xơ dừa/phân chuồng/đất với tỷ lệ 1 : 1 : 1. Từ kết quả ở bảng cho thấy: Cây Hồng môn in vitro trồng trên những bầu với các loại giá thể thí nghiệm đều sinh trưởng và phát triển tốt. Tuy nhiên giá thể khác nhau có ảnh hưởng đến sinh trưởng của cây con. Hỗn hợp giá thể xơ dừa/phân chuồng/đất (CT7) cho các chỉ số sinh trưởng như số rễ, chiều cao cây tốt hơn hẳn so với các công thức còn lại. Cây con trồng ở CT5 và CT6 có hiện tượng bị thối lá, các lá nhỏ và có màu vàng nhạt, khi quan sát rễ thấy có hiện tượng bị thối phần đầu của rễ. Việc lựa chọn hỗn hợp giá thể trong bầu thích hợp là cơ sở để xây dựng phương pháp trồng hoa theo cồng nghệ cao. Như vậy, giá thể hỗn hợp thích hợp nhất để trồng cây Hồng môn giai đoạn vườn trồng cho tỷ lệ sống cao (100%) và cây sinh trưởng phát triển tốt là hỗn hợp xơ dừa/phân chuồng/đất với tỷ lệ 1 : 1 : 1. 2.2. ghiên cứu ảnh hưởng của tỷ lệ dinh dưỡng (PK) tới sinh trưởng, phát triển của cây con giai đoạn vườn trồng Những cây trồng trên hỗn hợp bầu xơ dừa/phân chuồng/đất được chúng tôi dùng làm vật liệu cho thí nghiệm này, mỗi công thức trồng 50 cây. Sau 7 ngày trồng chúng tôi bắt đầu phun dung dịch dinh dưỡng. + CT1 (đối chứng): Không phun dinh dưỡng + CT2: Tỷ lệ NPK là 1 : 1 : 2 (1g/bầu) tương đương với 12 mg/l NH 4 NO 3 + 33 mg/l NH 4 H 2 PO 4 + 87 mg/l KNO 3 có bổ sung 20 mg/l CaCl 2 và 35 mg/l MgSO 4 + CT3: Tỷ lệ NPK là 3 : 1 : 2 tương đương với 127 mg/l NH 4 NO 3 + 33 mg/l NH 4 H 2 PO 4 + 87 mg/l KNO 3 bổ sung 20 mg/l CaCl 2 và 35 mg/l MgSO 4 + CT4: Tỷ lệ NPK là 5 : 1 : 2 tương đương với 243 mg/l NH 4 NO 3 + 33 mg/l NH 4 H 2 PO 4 + 87 mg/l KNO 3 bổ sung 20 mg/l CaCl 2 và 35 mg/l MgSO 4 Thực hiện chế độ tưới phun dinh dưỡng (7 ngày/lần) liều lượng 1 lít/m 2 giá thể, sau 45 ngày chúng tôi thu được kết quả thể hiện ở bảng 4. Bảng 4. Ảnh hưởng của tỷ lệ dinh dưỡng (PK) đến sinh trưởng của cây giai đoạn vườn trồng (sau 45 ngày) STT Dinh dưỡng Tỷ lệ sống (%) Tăng chiều cao cây (cm) Tăng số lá (chiếc) Tăng số rễ (chiếc) 1 CT1 (Đ/C) 95 0,5 1,3 1,3 2 CT2 98,2 1,1 2,0 2,3 3 CT3 94,5 2,0 2,3 3,6 4 CT4 83,5 1,7 2,3 3,0 CV(%) 3,2 1,6 2,0 LSD 0,05 2,3 0,18 0,37 Qua s liu  bng 4, cho thy gia các công thc dinh dưng khác nhau u có nhng nh hưng rõ rt n kh năng sinh trưng và phát trin ca cây trng. Kt qu theo dõi cho thy t l sng ca cây thay i gia các công thc thí nghim. Khi s dng dung dch  CT2 t l sng là 98,2%, t l này gim dn  CT3 (94,5%) và  CT4 (83,5%). c bit  CT3 nhng cây sng có b r rt dài, to kho, nhưng  CT4 thì li rt nhiu r ph. iu này chứng tỏ nồng độ NH 4 NO 3 cao có thể đã gây những ức chế sinh trưởng cho cây làm tỷ lệ cây sống giảm tuy nhiên nó lại có ảnh hưởng rất lớn tới sự phát triển của bộ rễ. Về đặc điểm của cây giai đoạn vườn trồng chúng tôi thấy ở CT2, CT3 các cây có màu xanh đậm, cây mập, khoẻ lá to và dày còn ở CT1, CT4 cây có hiện vàng lá, thân cây nhỏ. Từ những kết quả nghiên cứu và phân tích, chúng tôi đưa ra kết luận: Cây con in vitro giai on u ca vưn trng, ưc trng trên hn hp bu xơ da/phân chung/t phun dinh dưỡng (NPK) thích hợp là 3 : 1 : 2 (127 mg/l NH 4 NO 3 + 33 mg/l NH 4 H 2 PO 4 + 87 mg/l KNO 3 bổ sung 20 mg/l CaCl 2 và 35 mg/l MgSO 4 ) liều lượng 1 lít/m 2 giá thể 7 ngày/lần. 2.3. ghiên cứu ảnh hưởng của itơ dạng O 3 - /H 4 + đến sự sinh trưởng, phát triển của cây giai đoạn trồng Sau khi đã xác định được chế độ bón phân và tỷ lệ dinh dưỡng (NPK) thích hợp cho sự phát triển của cây Hồng môn in vitro giai đoạn vườn trồng. Chúng tôi thực hiện thí nghiệm xác định tỷ lệ Nitơ dạng NO 3 - /NH 4 + đến phát triển của cây. Mỗi công thức trồng 50 cây, sau 7 ngày trồng chúng tôi tiến hành phun dung dịch dinh dưỡng có tỷ lệ N : P : K là 3 : 1 : 2 và tỷ lệ NO 3 - /NH 4 + thí nghiệm theo 5 công thc sau: - CT1: NO 3 - /NH 4 + = 3 : 1 (NH 4 H 2 PO 4 33 (mg/l) + KNO 3 87 (mg/l) + NH 4 NO 3 64 (mg/l) + Ca (NO 3 ) 2 .4H 2 O 183 (mg/l)) - CT2: NO 3 - /NH 4 + = 3 : 2 (NH 4 H 2 PO 4 33 (mg/l) + KNO 3 87 (mg/l) + NH 4 NO 3 116 (mg/l + Ca (NO 3 ) 2 .4H 2 O 34 (mg/l)) - CT3: NO 3 - /NH 4 + = 3 : 3 (NH 4 H 2 PO 4 33 (mg/l) + KNO 3 28.5 (mg/l) + NH 4 NO 3 150 (mg/l + K 2 SO 4 42.6 (mg/l)) - CT4: NO 3 - /NH 4 + = 2 : 3 (NH 4 H 2 PO 4 33 (mg/l) + NH 4 NO 3 138 (mg/l) + K 2 SO 4 74 (mg/l) + (NH 4 ) 2 SO 4 123 (mg/l)) - CT5: NO 3 - /NH 4 + = 1 : 3 (NH 4 H 2 PO 4 33 (mg/l) + NH 4 NO 3 88 (mg/l) + K 2 SO 4 74 (mg/l) + (NH 4 ) 2 SO 4 41 (mg/l)) Tất cả các CTcó bổ sung 20 mg/l CaCl 2 và 35 mg/l MgSO 4 . Liều lượng phun 1 lít/m 2 giá thể và phun 7 ngày/lần. Sau 45 ngày, ở mỗi công thức quan sát số lượng mẫu sống và tiến hành đo đếm các chỉ số sinh trưởng của cây. Kết quả thí nghiệm được thể hiện ở bảng 5. Bảng 5. Ảnh hưởng của tỷ lệ O 3 - /H 4 + đến phát triển của cây con giai đoạn trồng (sau 45 ngày) STT Dinh dưỡng Tỷ lệ sống (%) Tăng chiều cao cây (cm) Tăng số lá (chiếc) Tăng số rễ (chiếc) 1 CT1 100 0,8 2,3 1,0 2 CT2 100 1,4 2,3 1,6 3 CT3 100 1,4 1,3 0,3 4 CT4 100 0,3 0,3 0,3 5 CT5 100 0,3 0,3 1,0 CV(%) 3,5 3,1 2,4 LSD 0,05 0,34 0,34 0,42 T¹p chÝ khoa häc vµ c«ng nghÖ n«ng nghiÖp ViÖt Nam 6 Qua bng 5, cho thy t l gia NO 3 - /NH 4 +  các công thc dinh dưng khác nhau có nh hưng rõ rt n kh năng sinh trưng ca cây giai on vườn trồng. CT2 với tỷ lệ Nitơ dạng NO 3 - /NH 4 + = 3 : 2 cho cây sinh trưởng và phát triển tốt nhất. IV. KẾT LUẬN VÀ Đ N GHN 1. Kết luận 1. Giá th rong bin thích hp cho sinh trưng ca cây Hng môn sau in vitro. T l cây sng là 100%. 2. N ng  dinh dưng có t l N PK thích hp cho cây con giai on vưn ươm là: 1 : 1 : 2 (12 mg/l N H 4 N O 3 + 33 mg/l N H 4 H 2 PO 4 + 87 mg/l KN O 3 có b sung 20 mg/l CaCl 2 và 35 mg/l MgSO 4 ) liu lưng 1 lít/1 m 2 giá th, chu kỳ 3 ngày/1 ln. 3. Hn hp giá th bu thích hp nht là hn hp: Xơ da/phân chung/t vi t l 1 : 1 : 1. 4. Giai on u ca vưn trng phun dung dch dinh dưng N PK = 3 : 1 : 2 vi t l N i tơ dng N O 3 - /N H 4 + = 3:2 (N H 4 H 2 PO 4 33 (mg/l) + KN O 3 87 (mg/l) + N H 4 N O 3 116 (mg/l) + Ca (N O 3 ) 2 .4H 2 O 34 (mg/l) b sung 20 mg/l CaCl 2 và 3 5mg/l MgSO 4 ) liu lưng 1 lít/1 m 2 giá th, 7 ngày/1ln cho cây hoa Hng môn giai on u sinh trưng và phát trin là tt nht. 2. Đề nghị ng dng kt qu nghiên cu trên cho sn xut cây Hng môn in vitro  giai on v- ưn ươm và giai on u ca vưn trng. Các nghiên cu trên ây ca chúng tôi mi ch dng li  giai on u ca vưn trng.  có các kt lun y  trong vic trng cây hoa Hng môn  vưn trng,  ngh cn nghiên cu tip các giai on sau. TÀI LIU THAM KHO 1 Chu Bá Phúc, Lê Huy Hàm, guyễn Khánh Vân, Đỗ ăng Vịnh, 1999. Áp dng phương pháp nuôi cy mô  nhân nhanh các loi Hng môn (Anthurium andreanum). Hội nghị CNSH toàn quốc, Hà Nội. Tr 1056 - 1061. 2 Đoàn Duy Thanh, guyễn Huy Thuần, guyễn Thanh Toàn, Đỗ ăng Vịnh, 2003. “Một số kết quả nghiên cứu tạo phôi vô tính ở cây Hồng môn Anthurium andreanum”, Viện Di truyền Nông nghiệp. Hội nghị Sinh học toàn quốc, Hà Nội. 3 Dufour L. 2002. “Optimization of Anthurium andreanum mineral nutrition in soilless culture under Tropical conditions”. In: Plant nutrition. Vol.92. Springer Netherlands. T¹p chÝ khoa häc vµ c«ng nghÖ n«ng nghiÖp ViÖt Nam 7 4 Higaki T and Imamura JS., 1985 (a). Volcanic Black Cinder as medium for growing Anthuriums. HortScience, Vol. 20 (2), April 1985. 5 Marco Van Hert., 1998. Cultivation Guide Anthurium. Global know - how for growers around the Globe Anthura B.V., Holland gười phản biện: Trần Duy Quý . tôi tiến hành nghiên cứu giá thể trồng và dinh dưỡng phù hợp cho cây con. II. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 1. Đối tượng và vật liệu nghiên cứu Vật liệu nghiên cứu là cây con giống. NGHIÊN CỨU GIÁ THỂ TRỒNG VÀ DINH DƯỠNG SAU IN VITRO CHO CÂY HOA HỒNG MÔN (Anthurium tropical) Phùng Tôn Quyền 1 , Đoàn Duy Thanh 1 , Lê. QUẢ VÀ THẢO LUẬN 1. Thí nghiệm giai đoạn vườn ươm sau in vitro 1.1. ghiên cứu ảnh hưởng của giá thể đến sự sinh trưởng, phát triển của cây con giai đoạn sau in vitro Sử dụng cây con in vitro