KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 6 pdf

... gel trong nước 5 phút, khi đó thay nước một số lần. 6) Ngâm gel trong dịch chứa NaOH 50mM và NaCl 10mM trong 10 phút.7) Ngâm gel 10 phút trong Tris-HCl 0,1M pH 7,5.8) Ngâm gel 20 phút trong ... 96 1) Thực hiện phản ứng luân nhiệt (tương tự PCR, xem mục XV chương 3) như sau: 95 ºC trong 10 giây, hạ nhanh xuống 50 ºC và duy trì trong 5 giây, nâng nhiệt nhanh lên 60 ºC và duy trì trong ... túi, lần lượt ngâm (trong chậu) trong các dung dịch như sau: -SSC 6 , nhiệt độ phòng, 15 phút, hai lần;-SSC 6 , nhiệt độ phòng, 4 giờ;-SSPE 5×, nhiệt độ lai 3 phút; -SSC 6 , nhiệt độ phòng,...

KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 10 pdf

... pháp quang học 242. Phương pháp định lượng bằng điện di 243. Phương pháp nhỏ giọt định lượng acid nucleic 25Chương 2. Kỹ thuật cơ bản trong tái tổ hợp DNA 26 I. Điều chế DNA plasmid 26 1. Điều ... X. Phân tích điều tiết phiên mã nhờ thử nghiệm CAT (CAT assay) 811. Thí nghiệm chính: di nạp gen vào tế bào eukaryota 812. CAT assay 82Chương 3. Kỹ thuật phân tích xác nhận phân tử 84I. Kỹ ... nhận sự kết bám, khu trú của tế bào của người cho trong cơ thể của người nhận.*Các bước kỹ thuật: 1) Các mẫu DNA (của con, bố hộ tịch và bố sinh học cũng như của mẹ) phải được xử lý như nhau....

KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 1 pdf

... HỒNG SƠNGiáo trìnhKỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬNhà xuất bản Đại học Huế20 06 II. Điện di Phương pháp điện di trong gel (keo) thường được sử dụng để phân li (phân đoạn) DNA, RNA, ... thực hiện trong sinh học phân tử. Nhưng quan trọng hơn vẫn là thông qua các bước kỹ thuật cụ thể giúp người học nắm được những điểm cơ bản về nghiên cứu phát triển sinh học phân tử được các nhà ... quá trình sinh học vi mô đã trở thành cách thức chủ yếu để loài người nhận thức thế giới sinh học. Sinh học phân tử phát triển trên cơ sở kiến thức đa ngành. Có thể nói Sinh học phân tử là kết...

KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 9 potx

... biết.Có thể nói đây không chỉ là một kỹ thuật mà là một chiến lược tổng quát bao gồm việc vận dụng nhiều kỹ thuật cơ bản trong sinh học phân tử nhằm phân lập ra được đoạn DNA nằm kề đoạn DNA ... biết.12345 6 7XIII. Phương pháp tạo thể đột biến nhân tạoĐể phân tích và xác định các miền cơ năng trong phân tử DNA như promoter, enhancer cũng như các miền cơ năng trong phân tử protein ... enzyme B; 7) Điện di phân tách; 8) Di nạp DNA đích vào plasmid mới.A BABA BXV. Phương pháp "vân tay DNA" (DNA finger print) Các kỹ thuật sinh vật học phân tử cũng ảnh hưởng nhiều...

KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 8 pptx

... là kỹ thuật tinh chế protein, xác định phân tử lượng protein, phân tích sự thể hiện gen tổng hợp protein trong E. coli và xác nhận protein được tổng hợp in vitro. Phần này chỉ giới hạn trong ... gel phân tách đã hóa rắn thì thực hiện đổ gel tập trung. Nồng độ của gel phân tách phụ thuộc vào độ lớn của protein cần phân tách. Nồng độ acrylamide càng cao thì phân tách được các phân tử ... nhỏ. Gel 5% acrylamide phân tách được protein có phân tử lượng 60 - 200 kDa, 10% thì 16 đến 70 kDa, 15% thì 12 đến 45 kDa. Ngoài ra, gel có nồng độ cao hơn có thể phân tách các protein nhỏ...

KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 7 docx

... thực hiện phân tích được RNA. Trong S1 mapping mẫu dò DNA chỉ được đánh dấu ở đầu mút, nhưng trong trường hợp riboprobe mapping thì RNA mẫu dò được đánh dấu suốt chiều dài phân tử trong quá ... 2.000 v/ph trong 10 phút, loại bỏ nước mặt. 3) Quay li tâm 16. 000 v/ph (rotor RT 20 Hitachi, Sorvall ) trong 20 phút, lấy phần cặn là phân đoạn nhân tế bào.4) Hòa phân đoạn nhân tế bào trong dung ... C). Sau đó, cắt phân tử DNA này một cách đặc hiệu tại vị trí đã đánh dấu. Cuối cùng, điện di sản phẩm phân giải DNA thu được trong gel polyacrylamide. Di động của các đoạn DNA trong điện trường...

KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 5 potx

... khuẩn E. coli là một trong nhưng kỹ thuật trọng yếu và cơ bản của công nghệ DNA tái tổ hợp hay kỹ thuật di truyền học phân tử. Các loại vi khuẩn E. coli có năng lực tăng cao trong thu nhận DNA ... rộng kỹ, sau đó thêm mấy giọt chloroform.2) Ủ 1 đêm ở 4 °C.3) Dùng pipet hút SM trên mặt thạch, quay li tâm, lấy nước mặt, cho vào 72Chương 3KỸ THUẬT PHÂN TÍCH XÁC NHẬN PHÂN TỬI. Kỹ thuật ... diện của DNA tương đồng trong mẫu nghiệm, là một trong những phương pháp hữu ích áp dụng trong nghiên sinh học phân tử. DNA mẫu nghiệm có thể là nguyên vẹn. Thêm vào đó, trong nhiều trường hợp,...

KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 4 doc

... v/ph trong 24 giờ. 6) Phân đoạn từng 1 ml.7) Từ mỗi phân đoạn lấy một lượng nhỏ mẫu để điện di kiểm tra: lấy 5 µl mẫu hòa vào 10 µl nước và 5 µl dung dịch màu tải mẫu 6 để 10 phút ở 68 °C trong ... rồi đặt vào trong bể ủ 80 oC trong khoảng 30 phút để biến tính DNA.5) Sau khi lai tiền khởi kết thúc, lấy chai hybridization ra khỏi lò lai và rót 62 Ủ trong Washing bufferỦ trong Blocking ... v/ph trong 15 giờ ở 15 °C thì RNA 18S sa lắng gần tận đáy ống. Li tâm trong 5 ~ 30% đường với vận tốc 22.000 v/ph trong 16 giờ ở 15 °C thì RNA 28S sa lắng ở tận giữa ống.7) Chuyển từng phân...

KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 3 ppsx

... đánh dấu DNABan đầu, trong kỹ thuật sinh học phân tử việc đánh dấu DNA và RNA để có các mẫu dò (hay dò, probe) dùng để xác nhận sự hiện diện của yếu tố đặc hiệu của sinh vật đích, thường bằng ... các kỹ thuật đánh dấu phi phóng xạ đã phát triển giúp cho việc ứng dụng mẫu dò rộng rải hơn mà không cần các phòng thí nghiệm chuyên biệt cho riêng kỹ thuật phóng xạ. Dưới đây mô tả kỹ thuật ... lần.395) Quay li tâm 8.000 v/ph trong 2 phút, chuyển lớp mặt sang ống Eppendorf mới. 6) Thêm EDTA 10mM và SDS 10mM cho đủ 0,1% mỗi loại, ủ ở 60 - 65 °C trong 15 phút.7) Thực hiện một lần...

KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 2 docx

... đồng thời với DNA đã biết nồng độ được pha loãng 26 Chương 2KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG TÁI TỔ HỢP DNAI. Điều chế DNA plasmid Trong các thí nghiệm như phân tích gen thường cần lượng lớn plasmid nhưng ... nước (v/v) thì phenol ở dạng nhũ tương gồm các phân tử phenol ở giữa với các phân tử nước vây quanh. Khi pha hỗn hợp này vào dịch tế bào, các phân tử phenol có tính kị thủy nên có khuynh hướng ... tủa gồm nhiều phân tử protein khác nhau. Trong khi đó DNA vẫn tiếp tục là chất tan trong nước và có thể hút sang ống chứa khác.Thao tác loại bỏ protein, lipid và các chất khác tan trong dung...

Xem thêm