KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 8 pptx

... là kỹ thuật tinh chế protein, xác định phân tử lượng protein, phân tích sự thể hiện gen tổng hợp protein trong E. coli và xác nhận protein được tổng hợp in vitro. Phần này chỉ giới hạn trong ... gel phân tách đã hóa rắn thì thực hiện đổ gel tập trung. Nồng độ của gel phân tách phụ thuộc vào độ lớn của protein cần phân tách. Nồng độ acrylamide càng cao thì phân tách được các phân tử ... chuyển trong điện trường về phía anode nhưng với tốc độ khác nhau phụ thuộc vào độ lớn của phân tử (phân tử lượng). Gel SDS-polyacrylamide cấu tạo từ hai phần: gel tập trung và gel phân tách....

KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 10 pdf

... X. Phân tích điều tiết phiên mã nhờ thử nghiệm CAT (CAT assay) 81 1. Thí nghiệm chính: di nạp gen vào tế bào eukaryota 81 2. CAT assay 82 Chương 3. Kỹ thuật phân tích xác nhận phân tử 84 I. Kỹ ... và RNA) 241. Phương pháp quang học 242. Phương pháp định lượng bằng điện di 243. Phương pháp nhỏ giọt định lượng acid nucleic 25Chương 2. Kỹ thuật cơ bản trong tái tổ hợp DNA 26I. Điều chế ... 1 18 2.1. Sử dụng promoter của rDNA của người với pol I 1 18 1 6 8 2.2. Sử dụng hệ pol II với promoter major late Ad 2 1192.3. Điện di trong gel agarose 119VI. Thử nghiệm run-on nhân 1211. Phân...

KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 9 potx

... biết.Có thể nói đây không chỉ là một kỹ thuật mà là một chiến lược tổng quát bao gồm việc vận dụng nhiều kỹ thuật cơ bản trong sinh học phân tử nhằm phân lập ra được đoạn DNA nằm kề đoạn DNA ... Phương pháp tạo thể đột biến nhân tạoĐể phân tích và xác định các miền cơ năng trong phân tử DNA như promoter, enhancer cũng như các miền cơ năng trong phân tử protein (trung tâm hoạt động của ... enzyme B; 7) Điện di phân tách; 8) Di nạp DNA đích vào plasmid mới.A BABA BXV. Phương pháp "vân tay DNA" (DNA finger print) Các kỹ thuật sinh vật học phân tử cũng ảnh hưởng nhiều...

KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 7 docx

... thực hiện phân tích được RNA. Trong S1 mapping mẫu dò DNA chỉ được đánh dấu ở đầu mút, nhưng trong trường hợp riboprobe mapping thì RNA mẫu dò được đánh dấu suốt chiều dài phân tử trong quá ... C). Sau đó, cắt phân tử DNA này một cách đặc hiệu tại vị trí đã đánh dấu. Cuối cùng, điện di sản phẩm phân giải DNA thu được trong gel polyacrylamide. Di động của các đoạn DNA trong điện trường ... và đã clone hóa trong E. coli) đã bị cắt bởi ít nhất hai vị trí trong 50 µl NaOH 1 2 3nối dài mồi được nhận thấy trong gel là DNA sợi đơn, vì vậy cần lưu ý khi so sánh phân tử lượng sản phẩm...

KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 6 pdf

... gel trong nước 5 phút, khi đó thay nước một số lần.6) Ngâm gel trong dịch chứa NaOH 50mM và NaCl 10mM trong 10 phút.7) Ngâm gel 10 phút trong Tris-HCl 0,1M pH 7,5. 8) Ngâm gel 20 phút trong ... thực:ATGCGGTACTTCCGTACGTATAGGCCCGTATGCAAATCGGCCTTCGTT Trong đó, các đoạn lặp là các trình tự giúp ta đọc được toàn bộ độ dài của phân tử DNA. Kỹ thuật giải trình tiến bộ nhất cũng chỉ cho phép xác ... điểm kết thúc với một nucleotide tương ứng. Nếu điện di trong môi trường có thể phân tách các đoạn này theo độ lớn của khối lượng phân tử (sản phẩm ngắn dịch chuyển nhanh hơn sản phẩm dài) và...

KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 5 potx

... rộng kỹ, sau đó thêm mấy giọt chloroform.2) Ủ 1 đêm ở 4 °C.3) Dùng pipet hút SM trên mặt thạch, quay li tâm, lấy nước mặt, cho vào 72Chương 3KỸ THUẬT PHÂN TÍCH XÁC NHẬN PHÂN TỬI. Kỹ thuật ... diện của DNA tương đồng trong mẫu nghiệm, là một trong những phương pháp hữu ích áp dụng trong nghiên sinh học phân tử. DNA mẫu nghiệm có thể là nguyên vẹn. Thêm vào đó, trong nhiều trường hợp, ... thuật trọng yếu và cơ bản của công nghệ DNA tái tổ hợp hay kỹ thuật di truyền học phân tử. Các loại vi khuẩn E. coli có năng lực tăng cao trong thu nhận DNA từ bên ngoài gọi là tế bào chịu di nạp...

KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 4 doc

... v/ph trong 15 giờ ở 15 °C thì RNA 18S sa lắng gần tận đáy ống. Li tâm trong 5 ~ 30% đường với vận tốc 22.000 v/ph trong 16 giờ ở 15 °C thì RNA 28S sa lắng ở tận giữa ống.7) Chuyển từng phân ... đoạn, mỗi phân đoạn 0,4 ml, sang ống Eppendorf (được khoảng 30 phân đoạn). 8) Thêm vào mỗi phân đoạn 40 µl sodium acetate (pH 5,1) 3M và một lượng ethanol bằng hai lần dung lượng mẫu (mỗi phân đoạn), ... rồi đặt vào trong bể ủ 80 oC trong khoảng 30 phút để biến tính DNA.5) Sau khi lai tiền khởi kết thúc, lấy chai hybridization ra khỏi lò lai và rót 62Ủ trong Washing bufferỦ trong Blocking...

KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 3 ppsx

... đánh dấu DNABan đầu, trong kỹ thuật sinh học phân tử việc đánh dấu DNA và RNA để có các mẫu dò (hay dò, probe) dùng để xác nhận sự hiện diện của yếu tố đặc hiệu của sinh vật đích, thường bằng ... các kỹ thuật đánh dấu phi phóng xạ đã phát triển giúp cho việc ứng dụng mẫu dò rộng rải hơn mà không cần các phòng thí nghiệm chuyên biệt cho riêng kỹ thuật phóng xạ. Dưới đây mô tả kỹ thuật ... tế bào tổ chức có nhiều mRNA đích là đương nhiên, trong trường hợp tế bào tổ chức chỉ chứa ít mRNA đích thì việc phân đoạn theo phân tử lượng trong mật độ đường và việc gây cảm ứng tế bào bằng...

KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 2 docx

... ở 80 °C) nhưng khi lẫn với khoảng 20% nước (v/v) thì phenol ở dạng nhũ tương gồm các phân tử phenol ở giữa với các phân tử nước vây quanh. Khi pha hỗn hợp này vào dịch tế bào, các phân tử ... với DNA đã biết nồng độ được pha loãng 26Chương 2KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG TÁI TỔ HỢP DNAI. Điều chế DNA plasmid Trong các thí nghiệm như phân tích gen thường cần lượng lớn plasmid nhưng với ... giấy DEAE (DE 81 )1) Trong khi điện di DNA trong gel agarose (có ethidium bromide trong gel hoặc pha trong dịch đệm điện di), quan sát các băng DNA đích dưới UV khi thấy băng đó đã phân li hoàn...

KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 1 pdf

... HỒNG SƠNGiáo trìnhKỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬNhà xuất bản Đại học Huế2006II. Điện di Phương pháp điện di trong gel (keo) thường được sử dụng để phân li (phân đoạn) DNA, RNA, ... tiệt trùng.3) EDTA 0,5M (pH 8, 0): pha 93,05 g Na2EDTA.2H2O vào trong khoảng 5TS. PHẠM HỒNG SƠNGiáo trìnhKỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬNhà xuất bản Đại học HuếNăm 2006400 ml nước ... thực hiện trong sinh học phân tử. Nhưng quan trọng hơn vẫn là thông qua các bước kỹ thuật cụ thể giúp người học nắm được những điểm cơ bản về nghiên cứu phát triển sinh học phân tử được các nhà...

Xem thêm