... của DNA lạ với tếbào nhận
- Sự xâm nhập của DNA vào tếbào nhận
- Sự liên kết của DNA lạ với đoạn tƣơng đồng của nhiễm sắc thể tếbào nhận
- Sự đồng hóa phân tửDNA lạ vào DNA của tếbào ... biến nạp plasmid vào tếbàovikhuẩn 38
4.2 TáchchiếtDNA plasmid 40
4.2.1 TáchchiếtDNA plasmid 40
3
PHẦN 2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU
2.1 Hiện tƣợng biến nạp ở vikhuẩn
2.1.1 Giới thiệu ... hạn ở vikhuẩn 13
Hình 3.1 Phản ứng tạo đầu bằng (blunt-end) cho đoạn DNA 35
Hình 4.1 Biến nạp plasmid vào tếbàovikhuẩn ở thể tích 10:1.5 38
Hình 4.2 Biến nạp plasmid vào tếbàovi khuẩn...
... của tếbào chủ. Trƣớc
hết, biến nạp plasmid vào tếbào chủ, sau đó nuôi cấy tếbào chủ trên môi trƣờng chọn
lọc thích hợp thu nhận sinh khối tế bào. Quá trình táchchiết plasmid từtếbào chủ ... vào tếbàovikhuẩn
Sơ đồ 3.2 Quy trình biến nạp plasmid vào tếbàovi khuẩn.
Nhân sinh khối, táchchiết
plasmid,kiểm tra
Màng tếbào ... thiện đƣợc quy trình táchchiết plasmid từ
vi khuẩn E.coly biến nạp, kết quả táchchiết không còn lẫn DNA genome và các tạp
DC 1 2 3 4 5
1 2 DC 3 4 5
DNA
plasmid
3.0kb
DNA
plasmid
3.0kb...
... thiện đƣợc quy trình táchchiết plasmid từ
vi khuẩn E.coly biến nạp, kết quả táchchiết không còn lẫn DNA genome và các tạp
DC 1 2 3 4 5
1 2 DC 3 4 5
DNA
plasmid
3.0kb
DNA
plasmid
3.0kb ... màng tếbàovikhuẩn bị phá vỡ bởi các tác
nhân phá màng. Sau khi màng tếbào bị vỡ , dƣới tác dụng của SDS protein của tếbào
sẽ bị biến tính. Nhờ vậy mà DNA sẽ tránh đƣợc sự phân hủy của DNAse. ... quá trình táchchiết plasmid. ChiếttáchDNA plasmid còn lẫn DNA
của bộ gen là do khi thêm dung dịch III vào để lâu nên cả DNA plasmid và DNA của
bộ gen đều hoàn tính. Qua kết quả táchchiết trên...
... của tếbào chủ.
Trƣớc hết, biến nạp plasmid vào tếbào chủ, sau đó nuôi cấy tếbào chủ trên môi
trƣờng chọn lọc thích hợp thu nhận sinh khối tế bào. Quá trình táchchiết plasmid từtế
bào ... nạp plasmid vào tếbàovikhuẩn
Vi khuẩn E. coli sau khi xử lí CaCl
2
sẽ làm cho màng tếbào trở nên khả nạp
giúp cho DNA xâm nhập tếbào E.coli dễ dàng ... DNA vào vikhuẩn
E.coli DH5α và kiểm tra 26
3.4.3 Tăng sinh vikhuẩn E.coli DH5α trên môi trƣờng LB 27
3.4.4 Chuẩn bị tếbào khả nạp 27
3.4.5 Biến nạp plasmid pBluescript vào tếbàovi khuẩn...
... nạp plasmid vào tếbàovikhuẩn
Hình 4.1 Biến nạp plasmid vào tếbàovikhuẩn ở thể tích 10:1.5
(A) Biến nạp với tỷ lệ tếbào khả nạp và ... và biến nạp vào vi khuẩn.
47
Kết quả trên có thể là đã biến nạp hoàn toàn plasmid tái tổ hợp vào vikhuẩn
hoặc những khuẩn lạc màu trắng trên là do các tếbàovikhuẩn bị đột biến ... những khuẩn lạc màu xanh từ đĩa petri cấy sang môi trƣờng LB lỏng có
chứa kháng sinh. Chọn những ống có vikhuẩn phát triển tiến hành chiếttách plasmid
theo quy trình sau
Bƣớc 1: Hút dịch vi khuẩn...
... cho tếbào có hình dạng ổn định.
- Bảo vệ tếbàovi khuẩn:
Giúp tếbàovikhuẩn đề kháng với các lực tác
động từ bên
ngoài,ví dụ: Vikhuẩn Gram dương chịu được áp suất
thẩm
thấu (Ptt) từ ... lớp vỏ nhầy thay đổi tuỳ
từng loại vi khuẩn.
+ Chức năng:
- Góp phần bảo vệ tếbàovikhuẩn (bảo vệ tếbàovi
khuẩn tránh bị tổn
thương khi gặp khô hạn, giúp cho vikhuẩn đề kháng
mạnh hơn ...
*Thành tếbào (Cell – wall): Chiếm 25 – 30% khối
lượng khô của tế
bào. Thành tếbào có kích thước khác nhau tuỳ từng
loại vi khuẩn, đa số các vi
b. Nguyên sinh chất (Cytoplasm) /Tế bào chất...
... kép (ở Xạ khuẩn Streptomyces có thể gặp nhiễm sắc thể
dạng thẳng). NST ở vikhuẩn Escherichia coli dài tới 1mm (!), có khối lượng
Cấu trúc tếbàovikhuẩn
1. Thành tếbào :
Thành tếbào (cell ... là bộ phận chứa đựng
thông tin di truyền của vi khuẩn.
*
Thể nhân trong tếbàovikhuẩn Escherichia coli.
Ngoài NST, trong tếbào nhiều vikhuẩn còn gặp những ADN ngoài
NST. Đó là những ... bọc suốt chiều dài sợi, như ở trường
hợp chi Bdellovibrio hay vikhuẩn tả Vibrio cholera.
Tiên mao và khuẩn mao ở vikhuẩn
ribosom vikhuẩn so với ribosom 80S ở các sinh vật nhân thật...
... của người và động vật).
Khuẩn mao ở vikhuẩn E.coli
Bài 3 Cấu trúc tếbàovikhuẩn
1. Thành tếbào :
Thành tếbào (cell wall) giúp duy trì hình thấi của tế bào, hỗ trợ sự chuyển động của ...
Tiên mao và khuẩn mao ở vikhuẩn
Tiên mao ở VK Gram dương Tiên mao ở VK Gram âm
*
Thể nhân trong tếbàovikhuẩn Escherichia coli.
Ngoài NST, trong tếbào nhiều vikhuẩn còn gặp ... bằng tiếng Vi t)
Ribosom ở vikhuẩn
Thành tếbàovikhuẩn Gram âm
2- Màng sinh chất:
Màng sinh chất hay Màng tếbào chất (Cytoplasmic membrane, CM) ở vi
khuẩn cũng tương tự như ở các...
... Vách tếbàovikhuẩn Gram (-).
vii
vii
2.2.2 Cấu tạo vch tếbào Gram (-) 13
2.3 Vikhuẩn – tc nhân phòng trừ sinh học 14
2.4 Vikhuẩn Pseudomonas fluorescens 15
2.4.1 Phân loại vikhuẩn ... xúc DNA lạ với tếbào nhận.
- Sự xâm nhập của DNA vào tếbào
nhận.
- Sự liên kết của DNA lạ với đoạn
DNA tƣơng đồng của nhiễm sắc thể tế
bào nhận.
- Sự đồng hóa phân tửDNA lạ vào
DNA ... truyền những DNAtừvikhuẩn cho sang một vikhuẩn nhận
nhờ một Prophage. Prophage xâm nhập vào hệ gen của vikhuẩn cho. Sau đó xảy ra sự
tch bất bình thƣờng ra khỏi hệ gen của vi khuẩn, chúng...