... lớn sinh vật
bậc cao cần phải có các phương pháp khác tinh vi hơn.
Chuyển genởthựcvật đã phát triển cùng với sự phát triển của
các kỹthuật nuôi cấy mô và tế bào thực vật. Nó đã trở thành ... một kỹthuật đầy triển vọng đối
với cây chuyểngenởthực vật.
Quá trình chuyểngen được thực hiện qua các bước sau :
- Xác định gen liên quan đến tính trạng cần quan tâm.
- Phân lập gen ... Những gen được tạo đưa vào (gen chuyển) có thể
được phân lập từ những loài thựcvật có quan hệ họ hàng hoặc từ
những loài khác biệt hoàn toàn. Thựcvật tạo ra được gọi là thựcvật
“chuyển gen ...
... VIR: hinh thành khối u ởthựcvật
+ vùng chứa gen mà hoá cho việc sao chép plasmid
và chuyển nạp
Các phương pháp
Các phương pháp
Chuyển genởthựcvật
Chuyển genởthựcvật
và ứng dụng
và ... thuộc nhiều vào kiểu gen
thực vật, tần số tạo biến dị soma cao
chuyển genở cây ngô
chuyển genở cây ngô
Chuyển gen gián tiếp
Chuyển gen gián tiếp
Chuyển gen trực tiếp
Chuyển gen trực tiếp
... vẹn, mảnh lá.
chuyển genởthực vật
chuyểngenởthực vật
Hệ thống
Hệ thống
nuôi cấy
nuôi cấy và
tái sinh
tái sinh
in vitro
in vitro
Vectơ chuyển gen
Vectơ chuyển gen
Phương pháp chuyển...
... tèt nghiÖp
MỞ ĐẦU
Hiện nay, trên thế giới việc chuyểngen vào thựcvật đã trở thành kỹthuật
thông dụng trong cải tạo giống cây trồng. Đã có hơn 50 loại gen được chuyển vào
thực vật và có khoảng ... tích phân tử cây chuyểngen chỉ dừng lại
bằng sử dụng kỹthuật PCR. Lai Southern là kỹthuật quan trọng, có giá trị khẳng
định sự có mặt của gen chuyển. Ngoài ra, với kỹthuật này mới có thể đánh ... bộ. Những năm gần đây kỹthuật phi phóng
xạ (non-radioactive) hay kỹthuật đánh dấu lạnh (cold labelling) đang
từng bớc thay thế kỹthuật phóng xạ. Trong đó nổi bật là kỹthuật phát
quang hoá...
... dòng
Plasmid hỗ
trợ gây độc
Nguồn gốc
loại vật chủ
mở rộng
Dòng
vật chủ
Plasmid
hỗ trợ
chuyển gen
Marker
chọn
lọc
của
vi
khuẩn
Biên
T-DNA
Marker
chọn lọc
của
thực vật
Nos /ocs
Vị trí
tạo dòng và chú ... tạo
dòng
(trung
gian)
Plasmid vir
vật chủ liên
hợp
Vùng
tương
đồng
Ori
Plasmid
hỗ trợ
chuyển
gen
Marker
chọn
lọc của
vi
khuẩn
Biên
T-DNA
Marker
chọn lọc
của
thực vật
Nos /
ocs
Vị trí tạo dòng và ... J60-o#"#$&
&
a* [(
J& J*)
11
Công nghệ chuyểngenởThực vật
I. Khái niệm chung
...
... chuyểngen này được gọi là
hệ trans.
Phần 2. CHUYỂNGENỞTHỰCVẬT BẬC CAO
Chương 1. MỞ ĐẦU
1.1. Genom ởthựcvật bậc cao
1.1.1. Đặc điểm bộ máy di truyền tế bào thực vật
Các tính trạng của thực ... ởthựcvật bậc cao. Tế bào thựcvật bậc cao chứa 1 lượng DNA lớn gấp nhiều lần ở vi khuẩn
và nhiều trường hợp còn gấp bội so với lượng DNA ở tế bào người.
DNA thựcvật khác với DNA vi sinh vật, ...
…. của thựcvật được thực hiện theo 1 chương trình xác định trong thông tin di truyền đặc trưng
cho loài.
Tế bào thựcvật khác xa với tế bào động vật và vi sinh vật:
1.Tế bào thựcvật là một...
... kỹthuật tạo giống
truyền thống.
Kỹ thuậtchuyển gen, ghép gen là kỹthuật đưa một gen lạ (một đoạn
ADN, ARN) vào tế bào vật chủ làm cho gen lạ tồn tại ở các plasmid trong tế
Thủy Hồng
2
Kỹ ... tắc sinh học của kỹthuậtchuyểngen
2. Các bước trong kỹthuậtchuyểngen
3. Một số phương pháp chuyểngenởthựcvật
3.1. Các phương pháp chuyểngen gián tiếp
3.1.1. Chuyểngen gián tiếp nhờ ... Nhờ giống
Thủy Hồng
10
Kỹ thuậtchuyểngenthựcvật & ứng dụng
A. MỞ ĐẦU
Một trong các kỹthuật của công nghệ tế bào thựcvật là kỹthuật
chuyển gen. Trước đây, để tạo một giống mới các...
... những giới hạn của kỹthuật tạo giống
truyền thống.
Kỹ thuậtchuyển gen, ghép gen là kỹthuật đưa một gen lạ (một đoạn
ADN, ARN) vào tế bào vật chủ làm cho gen lạ tồn tại ở các plasmid trong ...
chuyển genởthựcvật là phương pháp hiệu quả và phổ biến nhất hiện nay
nhờ vào khả năng gắn gen ngoại lai vào hệ genthựcvật một cách chính xác
và ổn định.
Sự chuyểngenởthựcvật dùng ... plasmid có khả năng
thâm nhập vào tế bào thựcvật (mang các gen vir). Plasmid thứ nhất mang
gen chọn lọc ởthựcvật và gen sẽ được ghép vào bộ genthực vật. Khi
plasmid này được đưa vào chủng...
... nhị
thể cùng với T-DNA của A.rhizogenes vào genome thựcvật (Shalin, 1986;
Simpson, 1986). Các gen này khi chuyển vào genome thựcvật được định vị ở
giữa các trình tự biên của vector nhị thể. ... các vị trí giống như LoxP hoặc FRT trong genome động vật.
2. Các vector sử dụng để chuyểngenởthựcvật
2.1. Các vector biến nạp vào tế bào thựcvật sử dụng Agrobacterium
2.1.1. Sự gây ra ... đọc mở, tương tự với các
khung đọc mở đã được tìm thấy ở genome của eukaryote. Chúng có promoter và
các yếu tố polyadenine hóa cần thiết để thực hiện chức năng khi chuyển vào trong
genome thực...
... bao gồm cả vi sinh vật. Thuật ngữ GMP (genetically modified plant)-
thực vật biến đổi gen và GMA (genetically modified animal)- động vật biến đổi
gen cũng được sử dụng.
Trong thực tế, các đoạn ... hạt, gen có khả năng sản xuất những loại
protein mới, gen chịu hạn, gen bất thụ đực, gen kháng thuốc diệt cỏ
2
Chương 1
Các vector sử dụng trong công nghệ
chuyển genở động vật và thực vật
... chuyểngen ra đời đã cho phép khắc phục
những trở ngại nói trên. Nó cho phép chỉ đưa những gen mong muốn vào động
vật, thựcvật để tạo ra những giống vật nuôi, cây trồng mới , kể cả việc đưa
gen...
... VITRO
CÂY KHOAI TÂY PHụC Vụ
CHọN TạO GIốNG MớI BằNG KỹTHUậTCHUYểNGEN V DUNG HợP Tế BO TRầN
Study on Potato In - vitro Regeneration System for
Gene Transfering and Protoplast Fusion
inh Trng ... một số
dòng khoai tây nhập nội, tạo cơ sở cho kỹ
thuật chuyểngen v dung hợp tế bo trần
trong tạo giống khoai mới với năng suất chất
lợng cao.
2. VậT LIệU V PHƯƠNG PHáP
NGHIÊN CứU
2.1. ...
1. ĐặT VấN Đề
Khoai tây l một trong bốn cây lơng
thực quan trọng, đợc xếp sau lúa, ngô v
khoai lang ở nớc ta. Khoai tây vừa l cây
lơng thựcthực phẩm, vừa l cây rau có giá
trị xuất khẩu.
Các...
... các tế bào con.
2. Ðộng vật (Thực vật) chuyển gen
Ðộng vật (Thực vật) chuyểngen là động vật (thực vật) có gen ngoại lai
(gen chuyển) xen vào trong DNA genome của nó.
Gen ngoại lai này phải được ...
3. Genchuyển
Gen chuyển (transgene) là gen ngoại lai được chuyển từ một cơ thể
sang một cơ thể mới bằng kỹthuật di truyền.
Các genchuyển được sử dụng để tạo động vật, thựcvậtchuyểngen ... trong việc tạo ra nhiều
thực vật, động vậtchuyển gen. Ở động vật, không chỉ đối với động vật mô hình
(chuột), vật nuôi (bò, lợn, dê, cừu, thỏ, gà, cá ) mà cả những loài động vật
khác như khỉ, muỗi...
... Agrobacterium kể trên.
1.4 Kỹthuật đĩa lá (Leaf disk technique)
Để thực hiện việc chuyểngen nhờ vi khuẩn người ta sử
dụng kỹthuật đĩa lá. Tạo các đĩa lá của thựcvật cần chuyểngen
sau đó xử lý các ...
vết thương đồng thời chúng cũng hoạt hóa các genở vùng vir
của plasmid hoạt động.
acetosyringone
Quy trình chuyểngen vào thựcvật bằng kỹthuật đĩa lá nhờ vi khuẩn
A.tumefaciens
...
2.3 Kỹthuật sử dụng súng bắn gen
Đây là phương pháp phổ biến được áp dụng thành công để
chuyển gen trực tiếp vào thực vật. Nguyên tắc là phải tạo một
luồng...
... Những gen ngoại lai được sử
dụng để biến nạp vào cá là gen hormone sinh trưởng (GH) người, gen GH bò, gen GH cá, gen
δ-crystalline gà, gen ß-galactosidase vi khuẩn, gen kháng hygromycin, gen α-globin, ... thể động vật. Ðộng vậtchuyển
gen còn được sử dụng để nghiên cứu trong di truyền học phát triển ở động vật có vú.
2. Trong nông nghiệp và công nghiệp thực phẩm
Công nghệ chuyểngen động vật ra ... Bên cạnh các gen hormone sinh trưởng, một số các gen khác cũng đã được
chuyển vào cừu như gen mã hoá yếu tố đông máu IX , gen α1-antitripsin, gen cysE, gen cysK.
2. 5. Dê chuyển gen
Một thử...