... giữ -800C tới làm biếnnạp2. 3 .2 Biếnnạp plasmid vàotếbàovi khẩn Biếnnạp plasmid vàotếbàoAgrobacteriumtumefaciens phƣơng pháp xung điện Chuẩn bị tếbào A .tumefaciens khả biến cuvet khử ... 1.4 .2 Phƣơng pháp biếnnạpgen đậu tƣơng BiếnnạpgenthôngquavikhuẩnAgrobacterium Đây phƣơng pháp sử dụng vikhuẩnAgrobacterium nhƣ vector sinh học để biếnnạp phần DNA chúng vào hệ gen ... vector sử dụng để biếnnạpgenthôngquavikhuẩnAgrobacteriumtumefaciens 19 1.3.1 Các vector sử dụng biếnnạpgen thực vật 19 1.3 .2 Gen thị gen kháng côn trùng 23 1.3.3 Promoter...
... Hình 2. 3 Sơ đồ quy trình biếnnạpgenvào đậu tương Chuẩn bị vikhuẩnbiếnnạp Chủng vikhuẩn AGL-1 biếnnạp plasmid vector pX2-H mang gen chọn lọc hpt gen thị gfp Trước biến nạp, chủng vikhuẩn ... lâu 1.7 .2 Phương pháp biếnnạpgen đậu tương Chuyển genthôngquavikhuẩnAgrobacterium Đây phương pháp sử dụng vikhuẩnAgrobacterium vector sinh học để biếnnạp phần DNA chúng vào hệ gen thực ... tấn) 20 04 183,8 1,34 24 5,9 20 05 20 4,1 1,43 29 2,7 20 06 185,6 1,39 25 8,1 20 07 187,4 1,47 25 7 ,2 2008 191,5 1,40 26 8,6 20 09 146,4 1,46 21 3,6 (Nguồn: Niêm giám thống kê 20 09, NXB Thống kê Hà Nội, 20 10)...
... vector sử dụng để biếnnạpgenthôngquavikhuẩnAgrobacteriumtumefaciens 19 1.3.1 Các vector sử dụng biếnnạpgen thực vật 19 1.3 .2 Gen thị gen kháng côn trùng 23 1.3.3 Promoter ... nghiên cứu biếnnạpgen 28 1.4 Hệ thống tái sinhbiếnnạpgen đậu tƣơng 29 1.4.1 Hệ thống tái sinh đậu tƣơng 29 1.4 .2 Phƣơng pháp biếnnạpgen đậu tƣơng 31 Chƣơng 2: VẬT ... 36 2. 3 Phƣơng pháp nghiên cứu 37 2. 3.1 Chuẩn bị tếbào khả biến 37 2. 3 .2 Biếnnạp plasmid vàotếbàovi khẩn 37 2. 3.3 Phƣơng pháp tách chiết DNA plasmid từ vi khuẩn...
... 1 .2. 3 Cơ chế phân tử vi c chuyển genthôngqua A tumefaciens 12 1 .2. 4 Tương tác T - DNA genome tếbào thực vật 13 1 .2. 5 Hệ thống vector sử dụng để biếnnạpgenthôngquavikhuẩn A tumefaciens ... công bắn genvào phôi soma tạo đậu tương biến đổi gen [23 , 26 , 27 ] 1.4 .2 Chuyển genthôngquavikhuẩn A tumefaciens Đây phương pháp sử dụng vikhuẩn A tumefaciens vector sinh học để biếnnạp phần ... 32 2.1.5 Địa điểm nghiên cứu 32 2 .2 Phương pháp nghiên cứu 32 2 .2. 1 Quy trình biếnnạpgenvào giống đậu tương 32 2 .2. 2 Sàng lọc, phân tích chuyển gen 35 2. 3...
... 31 2. 1.5 Địa điểm nghiên cứu 32 2 .2 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 32 2.3 Ph-ơng pháp nghiên cứu 32 2.3.1 Biếnnạp plasmid vàotếbào E.coli phƣơng pháp sốc nhiệt 32 2.3 .2 ... 1.4.4 Cơ chế phân tử vi c chuyển gen 11 1.4.5 Tương tác T-DNA genome tếbào thực vật 13 1.5 Hệ thống vector sử dụng để biếnnạpgenthôngquavikhuẩnAgrobacteriumtumefaciens ... rễ tạo hoàn chỉnh 47 Bảng 3.3 Kết lựa chọn chủng vikhuẩn thích hợp cho biếnnạpgen 48 Bảng 3.4 Ảnh hưởng mật độ vikhuẩnbiếnnạp đến hiệu biếnnạpgen 53 Bảng 3.5 Ảnh hưởng phương thức...
... 1 .2. 3 Cơ chế phân tử vi c chuyển genthôngqua A tumefaciens 12 1 .2. 4 Tương tác T - DNA genome tếbào thực vật 13 1 .2. 5 Hệ thống vector sử dụng để biếnnạpgenthôngquavikhuẩn A tumefaciens ... công bắn genvào phôi soma tạo đậu tương biến đổi gen [23 , 26 , 27 ] 1.4 .2 Chuyển genthôngquavikhuẩn A tumefaciens Đây phương pháp sử dụng vikhuẩn A tumefaciens vector sinh học để biếnnạp phần ... 32 2.1.5 Địa điểm nghiên cứu 32 2 .2 Phương pháp nghiên cứu 32 2 .2. 1 Quy trình biếnnạpgenvào giống đậu tương 32 2 .2. 2 Sàng lọc, phân tích chuyển gen 35 2. 3...
... thương, tếbào bị thương tiết hợp chất polyphenol thu hút tếbàovikhuẩn A tumefaciensvikhuẩn xâm nhập vào chỗ bị thương gây u Cáctếbàovikhuẩn không xâm nhập vàotếbào thực vật mà chuyển nạp ... khả biếnnạpgenvikhuẩnAgrobacteriumvào mầm [16] b Cơ chế phân tử vi c chuyển genthôngqua A tumefaciens Điều kiện cho vi c chuyển T-DNA vào thực vật trước hết tếbào bị thương Khi tếbào ... 2.2 .2 Nghiên cứu quy trình chuyển genvào mơ sẹo phơi hóa 44 2.2 .2. 1 Chuẩn bị dung dịch khuẩnbiếnnạp .44 2.2 .2. 2 Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ cefotaxime đến khả loại khuẩn thừa tái sinh...
... t [2] 2.2 .2 Phương pháp chuy n gen gián ti p Phương pháp chuy n gen gián ti p, ñây gen ñư c chuy n vào t bào th c v t qua m t sinh v t trung gian, thư ng vi khu n, virus Chuy n gen nh virus Virus ... ng gen vir tăng giá tr pH dao ñ ng t 5 ,2- 5,8 Nhi t ñ thích h p cho s c m ng gen vir t 21 -25 oC, nhi t ñ cao làm gi m ch c c a gen vir [2] , [7] Hình 2. 3: Cơ ch lây nhi m c a A tumefaciensvào t bào ... a phương pháp chuy n gen b ng virus [2] Phương pháp chuy n genthôngquavi khu n Agrobacterium DNA ñư c chuy n vào t bào th c v t nh ch truy n đ c trưng c a lồi vi khu n Agrobacterium làm môi...
... riêng, vi c tạo cá thể mang genquantâm yếu tố cần có, song biểu gen cá thể mang chúng yếu tố quan trọng định đến hiệu quả trình biếnnạpThơng thường, biểu genquantâm cá thể biếnnạpgen phụ ... Cơng nghệ, Tập 29 , Số (20 13) 17 -29 4 .2 Khả biếnnạpgen kháng sâu (Cry IAc) vàodòng ngơ HR9 vụ hè thu 20 07 -20 08 Từ kếtbiếnnạp vụ đông xuân 20 07 -20 08, định sử dụng hệ thốngbiếnnạp (M) dòng ... đặc biệt biếnnạpgenthôngquavikhuẩnAgrobacterium khả sống sót mức độ tái sinh hoàn chỉnh mẫu biếnnạp sau trải qua giai đoạn nuôi cấy chọn lọc quan trọng, định đến hiệu trình biếnnạp Nhuộm...
... T-DNA vàotếbào thực vật tiếp cận với gen chủ cách an toàn Như vậy, thực chất có hệ thống chuyển genvikhuẩn đất vào trồng tồn tự nhiên acetosyingone Bộ genvikhuẩn Ti Plasmid Vikhuẩn đất A .tumefaciens ... genqua biotest Quy trình chuyển genvào thực vật kỹ thuật đĩa nhờ vikhuẩn A .tumefaciens Quy trình chuyển gen nhờ vikhuẩn A .tumefaciens 1- Thiết kế vector mang gen 2- Nhân dòng vector nhờ vi ... khuẩn E.coli 3- Chuyển vector mang genbiếnnạp từ E.coli sang A .tumefaciens 4- Lây nhiễm A .tumefaciens chứa genbiếnnạp với tế bào, mơ thực vật để tiến hành q trình chuyển gen sang mơ, tế bào...
... Nghiên cứu quy trình biếnnạp hiệu nhất, có: • Xác định chủng vikhuẩn có khả chuyển gen hiệu • Xác định mật độ quang (OD) dung dịch khuẩn thích hợp • Xác định thời gian biếnnạp thích hợp • Nghiên ... Xuất phát từ thực tế thời gian thực tập tốt nghiệp, tiến hành thực đề tài “Bước đầu xây dựng quy trình chuyển gen gus vào giống đậu tương ĐT26 thơngquavikhuẩnAgrobacteriumtumefaciens ♦ Mục ... tương 23 00 nghìn (20 09) [11], đứng thứ hai toàn Châu Á sau Indonesia Bên cạnh đó, trồng biến đổi gen nói chung đậu tương biến đổi gen nói riêng phủ Vi t Nam cho phép trồng rộng rãi năm 20 11 Xuất...
... chuyển nạpgen Chitinase vàotếbào cà chua thực thôngquavi khuÈn Agrobacteriumtumefaciens nhiễm vàotếbào bị thương phân chia mạnh môi trường giàu auxin Khi vi khuNn Agrobacteriumtumefaciens ... lại vi khuNn, kháng sinh Hygromicin kháng sinh thị để chọn lọc tếbào mô biếnnạp b ghiên cứu khả tái sinh cà chua biến đổi gen Căn vào tính chất tác động lên callus loại kháng sinh bổ sung vào ... thực sở vi khuNn Agrobacteriumtumefaciens nhiễm vàotếbào phân chia mạnh môi trường nuôi cấy, vi khuNn Agrobacteriumtumefaciens tiết chất transzeatin giúp cho trình biếnnạpgen thực Các tác...
... sinh in vitro thôngqua tái sinhquansinh dư ng 1 .2. 2 Tái sinh in vitro thôngqua phát sinh callus 1.3 Vi khu n A tumefaciens hi n tư ng bi n n p gen 1.3.1 Gi i thi u chung v vi khu n A tumefaciens ... nghi p iv 2.2 N i dung nghiên c u 29 2. 2.1 Nghiên c u nuôi c y tái sinh in vitro gi ng ñ u cove 29 2.2 .2 Nghiên c u xác ñ nh nh hư ng c a m t s thơng s c a quy trình chuy n gen ñ u cove 2. 2.3 30 ... s , 20 09; Mahamune c ng s , 20 11) ho c có s l thu c cao vào t ng gi ng (Zambre c ng s , 1998; Mohamed c ng s , 1993) 1 .2. 1 Tái sinh in vitro thôngqua tái sinhquansinh dư ng Ni c y đ nh sinh...
... 27 2.2 Phương pháp nghiên cứu 27 2. 2.1 29 2.2 .2 29 2. 2.3 Tạo dịch huyền phù 30 Số hóa Trung tâm Học liệu - ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn/ v 2. 2.4 Nhiễm ... quy trình chuyển gen hiệu xây dựng cho mầm lúa, lúa mì [26 ], [28 ], [ 32] Chuyển genvào phơi non ngơ dòng A188 thôngquavikhuẩn A .tumefaciens [ 32] Năm 20 02, Frame cs chuyển genvào phơi non dòng ... sang tếbào thực vật nên gọi TDNA Vùng B có liên quan đến tái sinh Vùng C có liên quan đến tiếp hợp Vùng D vùng độc có chứa gen vir, giữ vai trò quan trong vi c chuyển T-DNA vào hệ gen nhân tế bào...