...
Báo cáo kết quả thực hiện đề tài nhánh
Tên đề tài:
Hoàn thiện quy trình nhân nhanh giống
cây trồng rừng năng suất cao bằng công
nghệ nuôicấy mô tếbàothựcvật
cho một số dòng ...
ra rễ trong lọ thông thờng. Việc kết hợp kỹ thuật nuôicấy mô và giâm hom tạo công
nghệ mô - hom này lần đầu tiên đà đợc thực hiện thành công tại Trung tâm nghiên cứu
giống cây rừng.
Phơng ... Điều này có thể giải thích do cây
nuôi cấy mô thân yếu, tếbào mọng nớc, hệ rễ phát triển cha hoàn chỉnh nên trong
môi trờng cát giữ nớc kém cây héo nhanh. Câycấy trong bầu đất đợc giữ ẩm tốt...
... (BA), Kinetin.
•
Kích thích sự phân chia tế bào.
•
Tạo chồi.
•
Được tổng hợp ở rễ.
Các giai đoạn nuôicấy mô TBTV
•
Đưa mẫu nuôicấy lên môi trường nuôicấy thích hợp
(mỗi loài, giống cây trồng ... là môi
trường nuôicấy chồi phổ biến nhất.
•
Môi trường Gamborgs B5 được sử dụng phổ biến
cho canh trường huyền phù tếbào (không chứa
NH
4
).
Môi trường
•
Khi cắt mẫu nuôicấy
ra khỏi cây ... kính.
Lựa chọn mẫu nuôi cấy
Các đặc tính mong
muốn:
•
Dễ tiệt trùng
•
Non
•
Phản ứng tốt với môi
trường nuôi cấy
•
Ngọn (mô phân sinh
đỉnh)
•
Chồi nách
•
Hạt
•
Lá
Các giai đoạn nuôicấy mô TBTV
•
Tiệt...
... trong chúng được sử dụng làm thuốc nhuộm, chất mùi thực phẩm và dược
phẩm (Lee 2001).
2. Nuôicấytếbàothựcvật
Kỹ thuật nuôicấytếbàothựcvật tiêu biểu cho tiềm năng cải thiện các hợp chất ... triển không ngừng của
công nghệnuôicấytếbào ở quy mô lớn. Tuy nhiên, các con đường sinh tổng hợp các hợp
chất thứ cấp mong muốn trong thựcvật cũng như trong nuôicấytếbào ở quy mô lớn là ... trình sản xuất các
chất trao đổi thứ cấp từ các tếbàothựcvậtnuôicấy in vitro. Các kết quả này cũng đã cho thấy
các hệ thống nuôicấytếbàothựcvật có tiềm năng rất lớn cho việc khai thác...
... trong chúng được sử dụng làm thuốc nhuộm, chất mùi thực phẩm và dược
phẩm (Lee 2001).
2. Nuôicấytếbàothựcvật
Kỹ thuật nuôicấytếbàothựcvật tiêu biểu cho tiềm năng cải thiện các hợp chất ... lỏng.
3. Sự tích lũy các hợp chất thứ cấp trong tếbàothựcvật
Sự tiến bộ vượt bậc của côngnghệ sinh học trong nuôicấy mô và tếbàothựcvật giúp
nhân giống các cây trồng có giá trị và ... các hợp chất thứ cấp từ nuôicấytếbàothựcvật
Nguyễn Hoàng Lộc
Viện Tài nguyên, Môi trường và Côngnghệ sinh học, Đại học Huế
1. Các hợp chất thứ cấp thựcvật
Thực vật là nguồn cung cấp...
... NỘI DUNG
1. CẤY CHUYỂN TẾBÀO LỚP ĐƠN
2. CẤY CHUYỂN TRONG NUÔICẤY HUYỀN PHÙ TẾ BÀO
3. ĐÔNG LẠNH TẾ BÀO
4. GIẢI ĐÔNG TẾ BÀO
5. XÁC ĐỊNH SỐ LƯỢNG TẾ BÀO
6. CHUẨN BỊ TẾBÀO CHO VẬN CHUYỂN
24
... tế bào
Nạp buồng đếm hồng cầu
Đếm tế bào
Tính tổng số lượng tếbào
Nhuộm tếbào để xác định sức sống của tếbào
Tính số lượng tếbào sống
34
CẤY CHUYỂN TRONG NUÔICẤY HUYỀN
PHÙ TẾ ...
lượng tế bào.
29
Sử dụng buồng đếm hồng cầu và thuốc nhuộm trypan blue
NỘI DUNG
1. CẤY CHUYỂN TẾBÀO LỚP ĐƠN
2. CẤY CHUYỂN TRONG NUÔICẤY HUYỀN PHÙ TẾ BÀO
3. ĐÔNG LẠNH TẾ BÀO
4. GIẢI ĐÔNG TẾ BÀO
5....
... huyền phù tế bào)
39
NỘI DUNG
1. CẤY CHUYỂN TẾBÀO LỚP ĐƠN
2. CẤY CHUYỂN TRONG NUÔICẤY HUYỀN PHÙ TẾ BÀO
3. ĐÔNG LẠNH TẾ BÀO
4. GIẢI ĐÔNG TẾ BÀO
5. XÁC ĐỊNH SỐ LƯỢNG TẾ BÀO
6. CHUẨN BỊ TẾBÀO CHO ... của tếbào đông lạnh….
21
NỘI DUNG
1. CẤY CHUYỂN TẾBÀO LỚP ĐƠN
2. CẤY CHUYỂN TRONG NUÔICẤY HUYỀN PHÙ TẾ BÀO
3. ĐÔNG LẠNH TẾ BÀO
4. GIẢI ĐÔNG TẾ BÀO
5. XÁC ĐỊNH SỐ LƯỢNG TẾ BÀO
6. CHUẨN BỊ TẾ ... DUNG
1. CẤY CHUYỂN TẾBÀO LỚP ĐƠN
2. CẤY CHUYỂN TRONG NUÔICẤY HUYỀN PHÙ TẾ BÀO
3. ĐÔNG LẠNH TẾ BÀO
4. GIẢI ĐÔNG TẾ BÀO
5. XÁC ĐỊNH SỐ LƯỢNG TẾ BÀO
6. CHUẨN BỊ TẾBÀO CHO VẬN CHUYỂN
28
CẤY CHUYỂN...
... (duy trì và/hay tăng sinh)
các tế bào, mô và các cơ quan
• Các kiểu nuôicấy mô
– Nuôicấy cơ quan
– Nuôicấy mô
– Nuôicấytế bào
Experimental Methods 2006 5
Nuôi cấy mô
• Các mảnh của mô được ... trong tếbào (like viral DNA)
Experimental Methods 2006 6
Nuôi cấytế bào
• Mô được tách thành tếbào đơn, hầu hết
là bằng enzyme, thành huyền phù tế bào
được nuôicấy in vitro như monolayer hay
nuôi ... Thường chứa kiểu êế bào đơn
– Có thể tăng sinh liên tục trong nhiều thế hệ
– Có hai kiểu dòng tếbào khi nuôi cấy:
• Dòng tế bào
• Dòng tếbào liên tục
Các kiểu nuôicấytế bào
Experimental Methods...
... tượng khác nhau: Vi sinh vật, thựcvật
và động vật do đặc điểm riêng biệt của từng loại tế bào.
1. Tếbào động vật và cơ sở của việc nuôicấytếbào động vật
Tế bào động vật trong cơ thể trưởng ... tếbào cho (tế bào soma) và đem cấy
chuyển vào tếbào trứng chưa thụ tinh đã bị lấy hoặc hủy nhân để tạo nên một tế
bào 2n giống như hợp tử chứa nhân của tếbào soma và tếbào chất của tếbào ...
thuật nuôicấytếbào động vật mới được phát triển mạnh và được ứng dụng vào
nhiều ngành côngnghệ sinh học.[5]
2.1. Môi trường nuôi cấy
Vấn đề quan trọng bậc nhất trong nuôicấytếbào động vật...
... ðiểm ñáng chú ý
trong côngnghệ này là thay vì thổi khí vào nồi
phản ứng, dịch lỏng nuôicây ñược bơm vào nồi và
hút ra theo chu kỳ ngắn, nhờ vậy mô và tếbàothực
vật có ñủ oxy và chất dinh ... autotrophic
technology) trong nuôicấy mô thực vật, ñặc biệt
trong vi nhân giống, gần ñây ñược nghiên cứu
nhiều ñể hạ giá thành và tự ñộng hóa quá trình nuôi
cấy.
Trên cơ sở nghiên cứu tỷ ...
giống ở qui mô công nghiệp.
Việc nghiên cứu tự ñộng hóa ñược tiến hành với
từng công ñoạn của côngnghệ vi nhân giống và
mức ñộ thành công phụ thuộc vào tính phức tạp
của từng công ñoạn:
-...
... tiêu số đốt (đạt 4 đốt với mẫu nuôicấy là chồi ngọn) và số lá (đạt 7,7 lá với mẫu nuôicấy là
chồi ngọn). Trong mối tương tác giữa môi trường nuôicấy và mẫu nuôicấy (AxB) cho thấy có sự
khác ... 24,7-
26,5mm (với mẫu nuôicấy là chồi ngọn) và 14,2-20,0mm (với mẫu nuôicấy là đốt thân) (bảng 1).
Kết quả nghiên cứu về môi trường nuôi cấy, MS và WPM cho nhận xét, trên môi trường nuôicấy
MS chiều ... nuôicấy và sự thông gió đến nhân nhanh cây
giá tỵ invitro
Bảng 6.
Ảnh hưởng của thể tích bình nuôicấy và thông gió đến nhân nhanh
cây giá tỵ in vitro
Bình nuôi
cấy
(A)
Mẫu nuôi
cấy...
... tiêu số đốt (đạt 4 đốt với mẫu nuôicấy là chồi ngọn) và số lá (đạt 7,7 lá với mẫu nuôicấy là
chồi ngọn). Trong mối tương tác giữa môi trường nuôicấy và mẫu nuôicấy (AxB) cho thấy có sự
khác ... 24,7-
26,5mm (với mẫu nuôicấy là chồi ngọn) và 14,2-20,0mm (với mẫu nuôicấy là đốt thân) (bảng 1).
Kết quả nghiên cứu về môi trường nuôi cấy, MS và WPM cho nhận xét, trên môi trường nuôicấy
MS chiều ... nuôicấy và sự thông gió đến nhân nhanh cây
giá tỵ invitro
Bảng 6.
Ảnh hưởng của thể tích bình nuôicấy và thông gió đến nhân nhanh
cây giá tỵ in vitro
Bình nuôi
cấy
(A)
Mẫu nuôi
cấy...
... kỹ thuật cơ bản phòng thí nghiệm nuôicấy mô và tếbào thực. vật
(chuẩn bị làm môi trường, nuôicấycây trong ống nghiệm, trồng cây
ngoài vườn ươm …).
3. Các công việc đã thực hiện và kết ... việc đã thực hiện và kết quả thu được.
3.1.Phương pháp pha hóa chất trong nuôicấy mô và tếbàothực vật
- Hóa chất: chuẩn bị theo danh sách, kiểm tra tên hóa chất, hãng
sản ... đích
Giúp học sinh nắm vững phương pháp pha một số hóa chất cần thiết
sử dụng trong nuôicấy mô và tếbào tực vật như: MS, các chất kích
thích sinh trưởng…
3.1.2. Nguyên lý
Hóa chât sau khi pha...