chỉ thị phân tử dna
Nghiên cứu ứng dụng chỉ thị phân tử DNA để chọn lọc gen tms2 tạo ra các dòng TGMS mới
... LIệU2.1. Hiện tượng ưu thế lai 2.2. Hệ thống lúa lai hai dòng Khái niệm hệ thống lúa lai hai dòng Ưu điểm của hệ thống lúa lai hai dòng Các phương pháp chọn tạo dòng mẹ lúa lai hai dòng(EGMS). + Phương pháp truyền thống + Chỉ thị phân tử và ứng dụng 2.3. Tình hình nghiên cứu và ứng dụng chỉ thị phân tử trong chọn tạo lúa lai hai dòng Tình hình nghiên cứu và ứng dụng trên thế giới Tình hình nghiên cứu và ứng dụng ở Việt Nam1.2.Mục đích và yêu cầu:1.2.1.Mục đích:Xác định gen tms2 trong tập đoàn các dòng TGMS bằng chỉ thị phân tử. Nghiên cứu di truyền gen tms2. 1.2.2 Yêu cầu : Khảo sát một số đặc điểm nông sinh học của các tổ hợp lai F1Chiết tách AND để tiến hành phản ứng PCRĐánh giá được khả năng hữu – bất dục bằng phương pháp truyền thống của các tổ hợp lai F2.Phát hiện gen tms2 ở các dòng TGMS và thế hệ F2 .PHầN ... PCRBước 6:Cho 600 µl hỗn hợp Chlorofom : Isoamylalcohol(24:1),lắc đều va ly tâm 7 phút với tốc độ 13000 vòng/phút rồi hút phần dung dịch ở trên vào ống eppendorf mới đã đánh dấu tương ứng. Bước 7: Cho 800 µl Ethanol(96%)(hoặc 600 µl Isopropanol),trộn đều và ly tâm 7 phút với tốc độ 13000 vòng/phút.Sau đó đổ phần dung dịch phía trên giữ lại phần kết tủa dưới đáy ống nghiệm. Bước 8: Rửa kết tủa bằng Ethanol 70%,làm khô tự nhiên ở nhiệt độ phòng bằng cách úp ngược ống nghiệm lên giấy thấm. Bước 9:Hòa tan kết tủa bằng 50 µl dung dịch TE rồi bảo quản ở nhiệt độ 20oC+Kiểm tra độ tinh sạch ADN bằng cáchđiện di trên gel agarose 1%.+Tiến hành phản ứng PCR với cặp mồi RM11 cho gen tms2. Bằng việc sử dụng ADN marker (chỉ thị phân tử) thời gian chọn tạo ra các dòng mới được rút ngắn.Các chỉ thị liên kết chặt với các tính trạng kiểu hình.Do đó,chúng ta có thể xác định được các tính trạng dựa trên sự có mặt của các gen mong muốn.Kỹ thuật này không chỉ có độ chính xác cao mà còn xác định được trên một lượng lớn vật liệu nghiên cứu. Để đáp ứng được mục tiêu chọn giống chúng tôi tiến hành đề tài: “Nghiên cứu ứng dụng chỉ thị phân tử DNA chọn lọc gen tms2 để tạo ra các dòng TGMS mới”. ... ĐầU1.1.Đặt vấn đề: Cây lúa (Oryza sativa L.) là một trong ba cây lương thực chủ yếu trên thế giới(lúa mì,lúa gạo,ngô),có tầm quan trọng sống còn với hơn nửa dân số thế giới.Hiện nay với sự gia tăng dân số nhanh và sự giảm dần diện tích đất nông nghiệp đặc biệt là đất canh tác lúa mỗi năm thì vấn đề đảm bảo an ninh lương thực là yêu cầu cấp thiết cần quan tâm trước mắt cũng như lâu dài.Do đó,để tăng năng suất lúa gạo,một trong những hướng đặt ra có hiệu quả cao đó là sử dụng ưu thế lai.3.1.3. Địa điểm nghiên cứu:tại phòng công nghệ sinh học ứng dụng và khu thí nghiệm đồng ruộng khoa nông học – Trường Đại Học Nông Nghiệp Hà Nội . 3.1.4. Thời gian nghiên cứu : Đề tài được thực hiện từ tháng 1/2010 đến tháng 5/2010.Đề cương thực tập tốt nghiệpĐề tài: “ Nghiên cứu ứng dụng chỉ thị phân tử DNA để chọn lọc gen tms2 tạo ra các dòng TGMS mới”Người hướng dẫn : 1.PGS.TS.Phan Hữu Tôn 2.KS.Tống Văn Hải Bộ môn : Công nghệ sinh học ứng dụng Khoa CNSHTrường ĐHNNHà NộiNgười thực hiện : SV.Nguyễn Thị Hồng HạnhLớp :0602 CNSH PHầN...
- 20
- 1,350
- 5
Nghiên cứu ứng dụng chỉ thị phân tử DNA để chọn lọc gen tms2 tạo ra cac dòng TGMS mới
... LIệU2.1. Hiện tượng ưu thế lai 2.2. Hệ thống lúa lai hai dòng Khái niệm hệ thống lúa lai hai dòng Ưu điểm của hệ thống lúa lai hai dòng Các phương pháp chọn tạo dòng mẹ lúa lai hai dòng(EGMS). + Phương pháp truyền thống + Chỉ thị phân tử và ứng dụng 2.3. Tình hình nghiên cứu và ứng dụng chỉ thị phân tử trong chọn tạo lúa lai hai dòng Tình hình nghiên cứu và ứng dụng trên thế giới Tình hình nghiên cứu và ứng dụng ở Việt NamStep ... ĐầU1.1.Đặt vấn đề: Cây lúa (Oryza sativa L.) là một trong ba cây lương thực chủ yếu trên thế giới(lúa mì,lúa gạo,ngô),có tầm quan trọng sống còn với hơn nửa dân số thế giới.Hiện nay với sự gia tăng dân số nhanh và sự giảm dần diện tích đất nông nghiệp đặc biệt là đất canh tác lúa mỗi năm thì vấn đề đảm bảo an ninh lương thực là yêu cầu cấp thiết cần quan tâm trước mắt cũng như lâu dài.Do đó,để tăng năng suất lúa gạo,một trong những hướng đặt ra có hiệu quả cao đó là sử dụng ưu thế lai.*Nghiên cứu ưu thế lai của các tổ hợp lai F1 so với bố+Bố trí thí nghiệm: Thí nghiệm được bố trí theo phương pháp khảo sát tập đoàn,các con lai F1 trồng cạnh bố tương ứng.Các tổ hợp lai được bố trí tuần tự không nhắc lại. Ô thí nghiệm được bố trí theo hình chữ nhật,mỗi ô là 5m2.+Các biện pháp kỹ thuật: Làm đất cày bừa Thời vụ: Vụ chiêm xuân 2010 Ngày gieo mạ :01/2010 Ngày cấy: 02/2010 Cấy 1 dảnh/khóm,cây x cây 11cm,hàng x hàng 20cm. Mật đọ cấy 45 khóm/m2. Lượng phân bón cho 1 ha: Phân đạm 120 kg Phân lân 90kg Phân kali 60kg+Kỹ thuật bón phân: Bón lót:100%lân + 30%đạm,bón sau khi bừa. Bón thúc lần 1:50% phân đạm +40% phân kali,bón vào thời kì bắt đầu đẻ nhánh. Bón thúc lần 2:bón hết số đạm,kali còn lại,bón khi lúa làm đòng.Ưu thế lai của các tổ hợp lai so với bố mẹ : Ưu thế lai trung bình H(MP%) = MP (mit parent) là giá trị trung bình của hai bố mẹ . ƯTL trung bình là sự biểu hiện hơn hẳn ở một tính trạng nào đó ở con lai F1 so với giá trị trung bình dó ở hai bố mẹ. Ưu thế lai thực H(BP%) = BP(best parent) là bố hoặc mẹ tốt nhất .Ưu thế lại thực là biểu hiện sự hơn hẳnn ở một tính trạng nào đó của con lai F1 so với giá trị đó của bố hoặc mẹ tốt nhất.Nghiên cứu chỉ thị phân tử nhằm xác định được gen tms2 có trong các dòng TGMS , các tổ hợp F 2. %1001×−MPMPF%1001×−BPBPF3.2. Nội dung và phương pháp nghiên cứu * Nội dung nghiên cứu +) Theo dõi đặc điểm nông sinh học : Các chỉ tiêu nông sinh học :+ Thời gian từ cấy đến bắt đầu trổ(10% số bông thoát khỏi lá đòng).+ Thời gian trổ từ khi bắt đầu trỗ(10% số bông thoát khỏi lá đòng) đến khi kết thúc trổ (85% thoát khỏi lá đòng) .+ Thời gian tự cấy đến chín(85% số hạt chắc màu vàng)+ Tổng thời gian sinh trưởng từ gieo đến khi thu hoạch .+ Chiều cao cây (cm) cuối cùng : đo từ mặt đất đến mút đầu bông dài nhất không kể râu .+ Chiều dài lá đòng : đo từ gối lá đến đầu mút lá , đo vào giai đoạn chín sáp. + Chiều rộng lá đòng. + Góc độ lá đòng .+ Chiều dài bông : đo từ cổ bông đến hết bông vào thời kì chín chắc . Chỉ tiêu các yếu tổ cấu thành năng suất:+ Tổng số nhánh(số nhánh max)+ Số nhánh hữu hiệu /khóm : đến toàn bộ số nhánh trổ thành bông .+ Tổng số hạt/bông. + Số hạt chắc/bông+ Khối lượng 1000 hạt .+ Số bông hữu hiệu/khóm: đến toàn bộ số bông có từ 10 hạt chắc trở lên + Năng suất lý thuyết được tính theo công thức :NSLT = A x B x C x mật độ/đơn vị diện tích(g) Trong đó: A: số bông hữu hiệu/khóm B: số hạt chắc/bông C: khối lượng 1000 hạtPHầN ... TE3.1.3. Địa điểm nghiên cứu:tại phòng công nghệ sinh học ứng dụng và khu thí nghiệm đồng ruộng khoa nông học – Trường Đại Học Nông Nghiệp Hà Nội . 3.1.4. Thời gian nghiên cứu : Đề tài được thực hiện từ tháng 1/2010 đến tháng 5/2010. Bằng việc sử dụng ADN marker (chỉ thị phân tử) thời gian chọn tạo ra các dòng mới được rút ngắn.Các chỉ thị liên kết chặt với các tính trạng kiểu hình.Do đó,chúng ta có thể xác định được các tính trạng dựa trên sự có mặt của các gen mong muốn.Kỹ thuật này không chỉ có độ chính xác cao mà còn xác định được trên một lượng lớn vật liệu nghiên cứu. Để đáp ứng được mục tiêu chọn giống chúng tôi tiến hành đề tài: “Nghiên cứu ứng dụng chỉ thị phân tử DNA chọn lọc gen tms2 để tạo ra các dòng TGMS mới”.PHầN...
- 20
- 981
- 3
ứng dụng chỉ thị phân tử adn xác định gen phục vụ chọn tạo giống lúa thơm
... thơm sử dụng chỉ thị L05 và chỉ thị BADH2 chỉ thị L05 và chỉ thị BADH2 Kết quả sử dụng chỉ thị phân tử L05 và BADH2 trong Kết quả sử dụng chỉ thị phân tử L05 và BADH2 trong phân loại các ... xuấtCác chỉ thị phân tử là RG 28 (F và R), RM342 (F và R), Các chỉ thị phân tử là RG 28 (F và R), RM342 (F và R), L05 (F và R) và chỉ thị BADH2 gồm 4 mồi EAP, ESP, L05 (F và R) và chỉ thị BADH2 ... cao; chỉ thị phân tử nhưng độ chính xác không cao; chỉ thị phân tử BADH2 đã phân biệt chính xác 100% các giống lúa BADH2 đã phân biệt chính xác 100% các giống lúa thơm và không thơm. Đây là chỉ...
- 28
- 1,106
- 7
Ứng dụng chỉ thị phân tử AND xác định gene phục vụ chọn tạo giống lúa thơm
... diện trong hìnhỨng dụng chỉ thị phân tử AND xác định gene phục vụ chọn tạo giống lúa thơmCác chỉ thị phân tử là RG 28, RM342, L05 và chỉ thị BADH2 gồm 4 mồi EAP, ESP, IFAP và ... Có thể thấy việc sử dụng chỉ thị BADH2 đã xác định được toàn bộ các giống lúa thơm có mang gen thơm fgr với các giống lúa không thơm. Điều đó cho thấy chỉ thị phân tử BADH2 có độ tin cậy và ... bằng hệ thống chụp và phân tích hình ảnh Gel Doc 2000.Ứng dụng chỉ thị phân tử AND xác định gene phục vụ chọn tạo giống lúa thơmKết quả sử dụng chỉ thị phân tử BADH2 để xác định...
- 23
- 1,187
- 1
chọn giống dựa trên chỉ thị phân tử ( MAS)
... +MgCl2 +dNTPS +Taq +Primers + DNA templateTHERMAL CYCLING Định nghĩa:Chọn lọc dựa trên chỉ thị phân tử (Marker assisted selection- MAS) là sử dụng chỉ thị DNA liên kết chặt với locus mục ... thể lưỡng bộ ( NST theo các cặp) có 2 allel của một gen, mỗi allel có nguồn từ một bố mẹ• Chỉ thị phân tử không xem xét như các gen bình thường khi chúng không có ảnh hưởng sinh học mà xem xét ... BREEDINGPhương pháp chọn lọc kiểu hình trên cơ sở DNA markers DNA extractions DNA EXTRACTIONSLEAF SAMPLINGPorcelain grinding platesHigh throughput DNA extractions “Geno-Grinder”Mortar and pestlesWheat...
- 78
- 8,188
- 57
Sử dụng chỉ thị phân tử Microsatellite đánh giá đa dạng di truyền các dòng keo lá tràm (Acacia auriculiformis)
... trình bày ở bảng 4.1. Bảng 4. 1 Tỷ số OD và hàm lƣợng DNA của thịt bò, heo, cừu Chỉ tiêu DNA thịt bò (X± SD) DNA thịt heo (X± SD) DNA thịt cừu (X± SD) Xác xuất thống kê Tỷ số OD 1,93 ... hỏi phải biết trình tự nucleotid của đoạn DNA cần khuếch đại, hay ít nhất cũng phải biết trình tự hai đầu của phân tử DNA. Chỉ khuếch đại những phân tử DNA có kích thƣớc nhỏ hơn 3 kb, tốt nhất ... chỉ chứa thịt bò nhƣng kết quả kiểm tra lại phát hiện có lẫn thịt gia cầm; các mẫu thịt bò tƣơi kết quả kiểm nghiệm lại cho dƣơng tính với thịt hƣơu và thịt ngựa; thịt bò viên lại có chứa thịt...
- 70
- 881
- 6
Nghiên cứu ứng dụng chỉ thị phân tử phát hiện gen quy định hàm lượng amylose ở lúa
... nghiên cứu3.2.1. Đánh giá các chỉ tiêu chất lượng gạo của một số giống lúa địa phương: nhiệt hoá hồ, độ bền gel, và hàm lượng amylose.3.2.2.Sử dụng chỉ thị phân tử phát hiện gen quy định hàm ... hành thực hiện đề tài “Nghiên cứu ứng dụng chỉ thị phân tử phát hiện gen quy định hàm lượng amylose ở lúa”Mục đích và yêu cầu- Khảo sát đánh giá một số chỉ tiêu cơ bản liên quan đến hàm lượng ... lúa gạo ở mức phân tử, đặc biệt hàm lượng amylose. Hiểu rõ bản chất cấu trúc chức năng của các yếu tố quy định sự hình thành và biến đổi của amylose trong hạt gạo ở cấp độ phân tử sẽ cho phép...
- 11
- 970
- 2
Ứng dụng chỉ thị phân tử ADN xác định gene phục vụ chọn tạo giống lúa thơm
... và không mang gen thơm.+ Chỉ thị phân tử L05 có thể phân biệt được giữa các giống lúa thơm và không thơm, nhưng độ chính xác không cao.+ Chỉ thị phân tử BADH2 đã phân biệt chính xác 100% các ... cậy của các chỉ thị phân tử liên kết với gen quy định mùi thơm fgr đã được tiến hành trên 40 dòng, giống lúa thơm và không thơm cho thấy:+ Các chỉ thị phân tử RG28, RM342 không phân biệt được ... bằng chỉ thị RG28 và RM342 kết quả cho thấy: Đối với chỉ thị RG28 và RM342, các sản phẩm điện di ADN của các giống không cho sự đa hình. Điều này cho thấy, sử dụng chỉ thị RG28 và RM342 chưa phân...
- 23
- 995
- 4
Nghiên cứu ứng dụng chỉ thị phân tử phát hiện gen quy định hàm lượng amylose ở lúa
... hành thực hiện đề tài “Nghiên cứu ứng dụng chỉ thị phân tử phát hiện gen quy định hàm lượng amylose ở lúa”Mục đích và yêu cầu- Khảo sát đánh giá một số chỉ tiêu cơ bản liên quan đến hàm lượng ... lúa gạo ở mức phân tử, đặc biệt hàm lượng amylose. Hiểu rõ bản chất cấu trúc chức năng của các yếu tố quy định sự hình thành và biến đổi của amylose trong hạt gạo ở cấp độ phân tử sẽ cho phép ... nghiên cứu phân biệt các alen trên locus gen waxy cũng như việc xác định tác 91 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12có độ phân huỷ trong kiềm cao, nhiệt độ hoá hồ thấp, chỉ có giống 10115 có độ phân huỷ...
- 12
- 717
- 0
SỬ DỤNG CHỈ THỊ PHÂN TỬ MICROSATELLITE ĐÁNH GIÁ ĐA DẠNG DI TRUYỀN CÁC DÕNG KEO LÁ TRÀM
... phép phân tách các phân tử DNA sợi đôi, kích thƣớc 300-10.000 bp. Các nồng độ agarose khác nhau cho phép tăng hiệu quả phân tách các nhóm phân tử có kích thƣớc khác nhau. Bảng 2.2: Sự phân ... DNA thì mối quan tâm hàng đầu là thu nhận đƣợc các phân tử này ở trạng thái nguyên vẹn tối đa, ít bị phân hủy do các tác nhân cơ học (phân tử bị gãy do nghiền, lắc mạnh) hay hoá học (phân tử ... vào giữa các base của phân tử DNA và phát huỳnh quang dƣới tia tử ngoại. Điều này cho phép phát hiện vị trí các đoạn DNA trên gel. Đối với gel polyacrylamide: Các phân tử DNA thƣờng đƣợc đánh...
- 64
- 874
- 3
Nghiên cứu chỉ thị phân tử SSR (simple sequence repeats) trong chọn giống lúa
... thị nh: chỉ thị hình thái, chỉ thị sinh hoá và chỉ thị phân tử ADN. Những chỉ thị này từ lâu đ là những công cụ hữu hiệu trong chơng trình chọn giống. 2.3.1. Chỉ thị hình thái Chỉ thị hình ... các chỉ thị phân tử thì chỉ thị SSR đợc đánh giá là có nhiều u điểm so với các chỉ thị khác, có khả năng cho đa hình cao, có bản chất đồng trội, di truyền theo quy luật Menden. Sử dụng chỉ thị ... Khái niệm về chỉ thị di truyền 25 2.4. Một số chỉ thị phân tử ứng dụng trong nghiên cứu đa dạng di truyền thực vật 31 2.5. Tình hình nghiên cứu đa dạng di truyền sử dụng chỉ thị phân tử SSR trong...
- 120
- 1,536
- 4
Nghiên cứu chỉ thị phân tử SSR (simple sequence repeats) trong chọn giống lúa
... triển của cá thể, nên các chỉ thị Protein và Isozym hạn chế về mặt ứng dụng. 2.3.3. Chỉ thị phân tử ADN 2.3.3.1. Các chỉ thị phân tử ADN Chỉ thị phân tử ADN là những chỉ thị có bản chất đa hình ... thị nh: chỉ thị hình thái, chỉ thị sinh hoá và chỉ thị phân tử ADN. Những chỉ thị này từ lâu đ là những công cụ hữu hiệu trong chơng trình chọn giống. 2.3.1. Chỉ thị hình thái Chỉ thị hình ... các chỉ thị phân tử thì chỉ thị SSR đợc đánh giá là có nhiều u điểm so với các chỉ thị khác, có khả năng cho đa hình cao, có bản chất đồng trội, di truyền theo quy luật Menden. Sử dụng chỉ thị...
- 120
- 1,252
- 3
Tìm thêm: hệ việt nam nhật bản và sức hấp dẫn của tiếng nhật tại việt nam xác định các nguyên tắc biên soạn khảo sát các chuẩn giảng dạy tiếng nhật từ góc độ lí thuyết và thực tiễn khảo sát chương trình đào tạo gắn với các giáo trình cụ thể điều tra đối với đối tượng giảng viên và đối tượng quản lí điều tra với đối tượng sinh viên học tiếng nhật không chuyên ngữ1 khảo sát thực tế giảng dạy tiếng nhật không chuyên ngữ tại việt nam khảo sát các chương trình đào tạo theo những bộ giáo trình tiêu biểu xác định mức độ đáp ứng về văn hoá và chuyên môn trong ct phát huy những thành tựu công nghệ mới nhất được áp dụng vào công tác dạy và học ngoại ngữ mở máy động cơ rôto dây quấn các đặc tính của động cơ điện không đồng bộ đặc tuyến hiệu suất h fi p2 đặc tuyến dòng điện stato i1 fi p2 động cơ điện không đồng bộ một pha sự cần thiết phải đầu tư xây dựng nhà máy thông tin liên lạc và các dịch vụ phần 3 giới thiệu nguyên liệu từ bảng 3 1 ta thấy ngoài hai thành phần chủ yếu và chiếm tỷ lệ cao nhất là tinh bột và cacbonhydrat trong hạt gạo tẻ còn chứa đường cellulose hemicellulose chỉ tiêu chất lượng 9 tr 25