... trỡnh t DNA quan tõm ng nghim Phng phỏp ny c thc hin invitro vi s hin din ca enzyme DNA-polymerase S khuch i c thc hin nh cỏc chu trỡnh nhit c lp li PCR II CC THNH PHN CN THIT THC HIN PHN NG ... Biến tính Bắt cặp & kéod i chuỗi 5 5 5 5 Sảnphẩm cuối phản ứng PCR IV LI CH CA PHN NG PCR Thi gian thc hin rt nhanh Ch cn khong gi khuch i trỡnh t DNA vi phng phỏp to d ng ta mt khong tun; ... 45 -60oC, 30-60 giây Phản ứng kéod i chuỗi: 72oC, 60 giây/1kb bước h nh thành chu kỳ Phản ứng PCR tiến h nh khoảng 25 -40 chu kỳ Trong kỹ thuật PCR thông thường người ta thực bước biến tính ADN...
... PCR phát minh sửd ng phương pháp nhân ARN phân tích sau chuyển thành ADN nhờ phiên mã ngược RT – PCR d ng để tách d ng, xây d ng thư viện cADN tổng h p mẫu Kỹ thuật gồm hai phần : Tổng h p ADN ... gồm bước chính: Gây biến tính ADN D ng để tách hai mạch ADN đích Nhiệt độ thườngd ng khoảng 94oC Gắn mồi 12 Hai mạch ADN đích làm lạnh có mặt mồi Các mồi nhận biết gắn vào mạch ADN theo nguyên ... kích thước sảnphẩm PCR Trong trường h p này, bệnh biểu trội nên h u h t người mắc bệnh dh p tử, mang 19 gen bình thường gen đột biến Sảnphẩm PCR thểdh p tử sinh hai đoạn ADN kích thước khác...
... th c ph m Có th chia phương pháp phát hi n VTEC thành nhóm : - Phương pháp vi sinh v t - Phương pháp mi n d ch h c - Phương pháp sinh h c phân t Trư ng ð i h c Nông nghi p H N i - Lu n văn th ... protein không ch u nhi t, kh ch u nhi t c a lo i VT khác khác VT2e ch u nhi t nh t, m t ho t tính hoàn toàn 650C 30 phút VT 2d có kh ch u nhi t cao nh t, không m t ho t tính 750C 60 phút VT1 VT2 nh ng ... Ch n khu n l c ñi n h nh /m u (khu n l c màu h ng cánh sen) Ki m tra ñ c tính sinh h a PCR D ơng tính Âm tính PCR cho t ng khu n l c D ơng tính Âm tính ð nh typ Gi gi ng H nh 2.1: Quy trình phân...
... (23,73%) 3.2.2 H nh ảnh mẫu gen bình thường khảo sát RT-PCR 3,2,1 DRADNATS SUG ng (không có nhi m s c th Philadelphia) ắ ễ i bình th ể ờư H nh M u gen c a ng ờư ủ ẫ Ở h nh thấy diện đường chuẩn: S1, ... 3,2,1 DRADNATS H nh M u có phát hi n nhi m s c th Philadelphia v i s chuy n o n v trí b2a2 SUG 2a2b ị đ ể ự ể ắ ễ ệ ẫ Ở h nh diện 03 đường chuẩn S1, S2, S3 GUS phát đuợc diện nhiễm sắc thể Philadelphia ... 60 bệnh nhân CML xác định chẩn đoán với tủy đồ d ơng tính từ phòng thí nghiệm huyết h c bệnh viện Chợ Rẫy điều trị ngoại trú phòng khám huyết h c bệnh viện Thuốc sửd ng điều trị chủ yếu Hydroxyure...
... thnh phn l mt trỡnh t cho phộp s laih a cựng mt lỳc trờn on ớch khỏc (H nh 3) d C Khue h ủaù c i B A ADN ủớch a H nh K thut ADN nhỏnh s dng on d K thut PCR a thnh phn: Trong k thut ny, hay ... hay cht mu), tớn hiu s c to nh cht ỏnh du hin din sau cựng mỏy khuch i Mỏy khuch i chớnh l mt ADN tng hp ci lc S tng hp ca ADN ci lc c thc hin bng k thut vi phosphoramide, s dng phosphoramide ... thit k cho cỏc sn phm khỏc v kớch thc mi sn phm cú th c xỏc nh nhng khụng quỏ khỏc cho s khuch i ca mt ADN ớch c u tiờn hn so vi s khuch i ca ADN ớch khỏc PCR a thnh phn cú cỏc ADN ớch khỏc...
... Tình h nh nghiên cứu bệnh cầu trùng gà nước giới 2.9.1 Tình h nh nghiên cứu giới Cầu trùng ký sinh trùng đơn bào có h nh thái đa d ng tùy thuộc vào loài cụ thể như: h nh tròn, h nh trứng, h nh ... Đến ký sinh thuộc h thứ hai gọi Schizont Tuỳ theoloài cầu trùng vật chủ h nh thành tiếp h Schizont Schizont 4, …một cách ạt theo cấp số nhân kiểu phản ứng d y chuyền nguyên tử làm cho h ng loạt ... mật…Tại với phân chia h t nhân noãn nang lớn lên nhanh chóng có h nh tròn, h nh oval h nh elip với nhiều nhân gọi thể phân lập thuộc h (Schizont 1) Ở Schizont 1, xung quanh nhân nguyên sinh chất xuất...
... mở nhiều triển vọng cho sinh h c phân tử với nhiều ứng d ng sinh h c, y khoa, nông nghiệp, kiểm nghiệm vi sinh vật gây bệnh: thực phẩm, bệnh phẩm, mỹ phẩm, nước, phát pháp y Tách d ng sảnphẩm ... (buffer) Thành phần dungd ch phản ứng PCR thường phụ thuộc vào loại enzym ADN polymerase sửd ng PCR, quan trọng ion Mg2+ Ví d , thành phần dungd ch đệm 10X cho phản ứng PCR sửd ng Taq ADN polymerase ... PCR phát minh sửd ng phương pháp nhân ARN phân tích sau chuyển thành ADN nhờ phiên mã ngược RT – PCR d ng để tách d ng, xây d ng thư viện cADN tổng h p mẫu Kỹ thuật gồm hai phần : Tổng h p ADN...
... tiếp tính chất trình tái ADN Nhưng sửd ng theo nhiều cách khác để làm cho việc tách d ng thao tác với ADN dd ng hiệu Đó lý mà em chọn đề tài: "SỬ D NG KĨ THUẬT PCR TRONG SINH H C PHÂN TỬ" ... tách d ng sảnphẩm PCR Số lượng chu kỳ phản ứng PCR Số chu kỳ phản ứng thí nghiệm PCR phụ thuộc vào lượng ADN khuôn ban đầu lượng ADN cần thu sau phản ứng Nói chung, thí nghiêm PCR thường thiết ... thuốc nhuộm phát huỳnh quang, thường gắn vào bazơ đầu 5’ thuốc nhuộm d p tắt, thường gắn vào đầu 3’ Mẫu d thiết kế để lai với vùng sảnphẩm PCR Khi phát xạ, thuốc nhuộm phát quang bị kích thích truyền...
... định 4 C điện di phân tíchsảnphẩm - Phân tíchsảnphẩm khuyếch đại: Sảnphẩm sau khuếch đại điện gel agarose 1,2% điện 110V 30 phút Sau điện đi, sảnphẩm nhuộm dungd ch ethidium bromide 10 phứt, ... ổn định 72°C 10 phút Sảnphẩm PCR giữ ỏ 4 C diện di phân tíchsảnphẩm 2.2.11.Phân tíchsảnphẩm PCR điện di gelagarose Sảnphẩm phản ứng PCR phân tích điện di gel agarose 1,2% dungd ch đệm ... sinh vật thấp mà phương pháp phân tích phát Tại giới h n phát hiện, số lần phân tích cho kết d ơng tính phải lớn h n 50% phương pháp tham chiếu phương pháp thay Xác nhận hiệu lực phương pháp phải...
... 58 H nh 3.3 Thử nghiệm sinh h a khẳng định S aureus 59 H nh 3 .4 Thử nghiệm sinh h a khẳng định B cereus 59 H nh 3.5 Thử nghiệm sinh h a khẳng định C perfringens 59 H nh 3.6 Kết phát ... phương pháp miễn d ch phản ứng kết h p kháng ngun với kháng thể đặc hiệu Tín hiệu phản ứng miễn d ch nhận biết thơng qua ngưng tủa hay kết d nh kháng ngun-kháng thể cách sửd ng kháng thể đánh ... điển h nh Chọn vài khuẩn lạc điển h nh thử tính chất sinh h a - Tính kết d a theosố khuẩn lạc có tính chất sinh h a 2.2.3 Ứng d ng phương pháp ni cấy quy trình, kit PCR để khảo sát nhiễm vi sinh...
... nhân lợng ADN nhỏ lạid u vết sinh h c nh tiến h nh trờng h p Maryland * ADN cổ đại mối quan h tiến hoá Các nhà khoả cổ h c d a vào PCR ứng d ng theo nhiều cách kác hau h u ích, PCR giúp phân ... loại; nhiên sảnphẩmd i cần nồng độ cao Thành phần dNDP 16 Bốn loại nucleotide phản ứng PCR thờng đợc sửd ng d ng deoxynucleotide (dNTPs bao gồm dATP; dGTP; dCTP dTTP) Thờng đợc sửd ng nồng ... kín nh phòng thí nghiệm khiến cho phân tử đợc khuếch đại thoát khỏi ống nghiệm bay lơ lửng không khí bám vào tờng, cửa, thiết bị d ng 24 cụ nhiễm vào phản ứng tiến h nh sau Có thể khấc phục vấn...
... Các thành phần khác phản ứng: dNTP: thườngsửd ng nồng độ 20 -200 µM loại Mg2+: hiệu nhân giảm nhiều tạo sảnphẩm không đặc hiệu Số lượng chu kỳ: không vượt 40 Ứng d ng phương pháp PCR ... promoter, trình tự gắn ribosome… H n chế phương pháp PCR - Ngoại nhiễm: Xử lí: Khử trùng khu vực thao tác Việc thiết lập phản ứng PCR phân tíchsảnphẩm tiến h nh khu vực khác - Nhân không đặc hiệu: ... yếu tố ảnh h ởng đến phản ứng PCR DNA mẫu: - DNA sạch, lượng DNA sửd ng cho PCR có khuynh h ớng giảm (khoảng 100 ng) - Giảm lượng mẫu h n chế sảnphẩm “kí sinh” - PCR thực mẫu không bảo...