2 6 tiêm dna lạ vào tế bào trứng hợp tử của chuột

GIÁO TRÌNH CÔNG NGHỆ SINH học   phần 1

GIÁO TRÌNH CÔNG NGHỆ SINH học phần 1

Ngày tải lên : 07/12/2015, 00:30
... tế bào bò chết sốc điện cao, từ 50-70% 2. 5.3 Phương pháp vi tiêm Đối với tế bào động vật có vú tiêm thẳng DNA vào tế bào (thường hợp tử) hình chụp (hình 2. 6) 15 Hình 2. 6: Tiêm DNA lạ vào tế bào ... bào trứng (hợp tử) chuột 2. 5.4 Phương pháp bắn DNA vào tế bàotế bào thực vật có vách tế bào dày cấu tạo cellulose khó biến nạp Để khắc phục khó khăn người ta dùng phương pháp bắn DNA vào tế bào ... enzyme DNA polymerase I lấp chỗ trống ligase hàn dính DNA lạ với vector tạo nên DNA tái tổ hợp Với phương pháp gắn DNA lạ vào vector chuyển gen 2. 5 Biến nạp DNA tái tổ hợp vào tế bào Sau tạo DNA...
  • 23
  • 696
  • 2
PHƯƠNG PHÁP DÙNG CÁC GIÁ TRỊ TRUNG BÌNH

PHƯƠNG PHÁP DÙNG CÁC GIÁ TRỊ TRUNG BÌNH

Ngày tải lên : 24/10/2013, 14:20
... số mol hỗn hợp phần là: a 4M + xO → 2M O x (1) 2M + 2xHCl → 2MCl x + xH 2 (2) 2M + xH 2SO4 → M (SO4 ) x + xH 2 (3) 6 ⇒ m O2 Từ ĐLBTKL ⇒ n O2 = pư = 7, 68 = 2, 16( g) ax 2, 16 = = 0, 067 5(mol) ↔ ... 0, 4 722 8M Cu + 16, 765 9x M Cu + 35,5x ↔ 0, 527 72M Cu = 16, 765 9x ↔ MCu = 31, 771x (1) Mà: M Cu A − A1 = x = 63 0,73 + A2 0 ,27 = 63 0,73 + (63 + x) 0 ,27 (vì M Cu > 63 ) ⇔ M Cu = 63 + 0, 27 x (2) Từ ... 199 ,22 M = 1 92, 22 → m1 27 = = m 78, 03 2, 89 193 77 Ir 1 92, 22 - 191 ⇒ % 191Ir = 77 1 ,22 100 = 61 % 0,78+1 ,22 Chọn đáp án A II .2. 3 Tính tỷ lệ thể tích hỗn hợp khí: Ví dụ 5: [tự ra] Một hỗn hợp...
  • 18
  • 949
  • 2
Tài liệu Các phương pháp cơ bản của việc xây dựng DNA tái tổ hợp in vitro pptx

Tài liệu Các phương pháp cơ bản của việc xây dựng DNA tái tổ hợp in vitro pptx

Ngày tải lên : 24/12/2013, 07:17
... tạo phân tử DNA tái tổ hợp gồm vector plasmid nhỏ pSC101 E coli DNA ''ngoại lai'' plasmid khác Chính kiện đặt móng mở triển vọng to lớn cho kỹ thuật DNA tái tổ hợp sau Hình Hai phân tử DNA khác ... phân tử DNA tái tổ hợp in vitro nhờ xử lý với DNA ligase Phương pháp nối trực tiếp tổng hợp đầu bổ sung Đối với đoạn DNA tạo cách xử lý enzyme giới hạn cắt thẳng HindII chẳnghạn, việc nối đoạn DNA ... tiếp DNA ligase phage T4 tổng hợp thêm đầu dính vào đầu 3' số nucleotide bổ sung cách sử dụng enzyme end-transferase, sau đoạn DNA nối với DNA ligase vi khuẩn Cơ sở phương pháp kết hợp DNA thực...
  • 5
  • 593
  • 3
Vận dụng một số phương pháp dạy học tích cực trong giảng dạy toán tổ hợp lớp 11 trung học phổ thông nhằm phát huy năng lực học tập của học sinh

Vận dụng một số phương pháp dạy học tích cực trong giảng dạy toán tổ hợp lớp 11 trung học phổ thông nhằm phát huy năng lực học tập của học sinh

Ngày tải lên : 09/02/2014, 15:46
... 13 28 ,89 20 44,44 20 ,00 6, 67 Đối chứng 14 29 ,79 22 46, 80 19, 16 4 ,25 Bảng 3 .2: Kết kiểm tra đề sau thực nghiệm Kết Giỏi Khá Trung bình Số % lượng Số lượng % Số lượng % 15 Lớp 33,33 22 48,89 14 29 ,79 ... tắc 2. 3 .2. 1 Dạng 1: Đơn sử dụng công thức nhị thức Niutơn với số cụ thể 2. 3 .2. 2 Dạng 2: Tính tổng sử dụng công thức aC a  bC a1 b 2. 3 .2. 3 Dạng 3: Tính tổng sử dụng công thức đạo hàm 2. 3 .2. 4 ... 29 ,79 20 42, 55 10 Yếu Số lượng % 15, 56 2, 22 21 ,28 6, 38 Thực nghiệm Đối chứng Bảng 3.3 : Kết kiểm tra đề sau thực nghiệm Kết Giỏi Khá Trung bình Yếu Số lượng % Số lượng % Số lượng % Số lượng % 16...
  • 13
  • 2.4K
  • 10
Báo cáo nghiên cứu khoa học " Thử nghiệm dự báo lượng mưa ngày bằng phương pháp dùng mạng thần kinh nhân tạo hiệu chỉnh sản phẩm mô hình số " ppt

Báo cáo nghiên cứu khoa học " Thử nghiệm dự báo lượng mưa ngày bằng phương pháp dùng mạng thần kinh nhân tạo hiệu chỉnh sản phẩm mô hình số " ppt

Ngày tải lên : 20/06/2014, 00:20
... ( 060 7 /20 04) Bắc Bộ HRM 6. 585 7.547 9.835 13 .65 4 MTKNT 0.0 02 2.710 3. 563 7.071 HRM 9 .6 92 10 . 26 5 12. 5 16 17.8 72 MTKNT 0 .27 6 2. 577 3 .60 9 8.457 Trung Bộ HRM 3.337 4. 721 6. 065 9.014 MTKNT -0 .28 8 2. 840 ... 20 . 26 5 MTKNT -0 .67 3 2. 823 3.939 6. 4 32 7 .22 0 Bắc Bộ 5 .67 8 9 .28 7 (08 /20 04) Trung Bộ HRM 0.980 4.153 5.384 5.9 42 MTKNT -0.518 3.454 4.4 62 HRM 3. 469 5 .24 9 6. 355 9.730 MTKNT -0.077 2. 824 3.744 9.959 ... 3.4 56 HRM 3.445 4.843 5.759 9.881 MTKNT -0.341 2. 9 12 3 .66 6 6. 090 HRM 6. 179 7 .66 3 9.884 13.898 8.180 5.390 Nam Bộ Kiểm nghiệm 7. 069 Việt Nam MTKNT -0.499 3.007 4.058 HRM 10.3 06 10.704 12. 67 7 20 . 26 5...
  • 10
  • 605
  • 2
vận dụng phương pháp dạy học khám phá vào dạy học chương tổ hợp và xác suất

vận dụng phương pháp dạy học khám phá vào dạy học chương tổ hợp và xác suất

Ngày tải lên : 05/10/2014, 06:34
... a1a2 a3 a4 a5 a6 chọn a1 có cách, chọn a2 có cách, , chọn a6 có cách Vậy theo quy tắc nhân có 66 = 466 56 số b) Gọi số phải tìm là: n  a1a2 a3 a4 a5 a6 a1  a2   a6 chọn a1 có cách, chọn a2 ...  n Khi ta lấy k phần tử A xếp k phần tử theo thứ tự, ta đƣợc chỉnh hợp chập k n phần tử tập hợp A (gọi tắt chỉnh hợp chập k A ) - Tổ hợp: Cho tập hợp A có n (n1) phần tử số nguyên k với 1 ... PPDH khám phá vào dạy học số khái niệm chương tổ hợp xác suất 2. 1.4.1 Vận dụng PPDH khám phá vào dạy học khái niệm hoán vị - chỉnh hợp – tổ hợp a) Khái niệm hoán vị, chỉnh hợp, tổ hợp: Ta biết,...
  • 101
  • 787
  • 5
Vận dụng một số phương pháp dạy học tích cực trong giảng dạy toán tổ hợp lớp 11 trung học phổ thông nhằm phát huy năng lực học tập của học sinh

Vận dụng một số phương pháp dạy học tích cực trong giảng dạy toán tổ hợp lớp 11 trung học phổ thông nhằm phát huy năng lực học tập của học sinh

Ngày tải lên : 17/03/2015, 08:20
... d chỉnh hợp chập phần tử 0, 2, 3, Trong trường hợp có A3 = 24 số - Nếu a  a  nên a có cách chọn, số xếp vào vị trí b, c d Mỗi cách chọn số lại xếp vào vị trí lại chỉnh hợp chập phần tử Trong ... nhiệm vụ thực nghiệm sư phạm 66 3 .2 Đối tượng địa bàn thực nghiệm 66 3.3.1 Thời gian thực nghiệm 66 3.3 .2 Nội dung tổ chức thực nghiệm 66 3.4 Kết dạy thực nghiệm ... hai số cho hai vị trí lại chỉnh hợp chập số lại Số số cần tìm là: 4.4 A2 = 72 số Sai lầm: Trong trường hợp a  a có cách chọn số vị trí lại vị trí trường hợp a = số vị trí lại lời giải Lời giải...
  • 104
  • 641
  • 0
ỨNG DỤNG tạo PLASMID tái tổ hợp để NGHIÊN cứu các CHỦNG VI rút RHINO lưu HÀNH tại KHÁNH hòa và BÌNH ĐỊNH năm 2008 2010

ỨNG DỤNG tạo PLASMID tái tổ hợp để NGHIÊN cứu các CHỦNG VI rút RHINO lưu HÀNH tại KHÁNH hòa và BÌNH ĐỊNH năm 2008 2010

Ngày tải lên : 21/08/2015, 11:20
... đ n ki u huy t HRV 56, HRV47, HRV81, HRV67, HRV24, HRV20, HRV49, HRV 12, ch ng HRV-B l i có ki u huy t HRV 92, HRV35, HRV87 HRV-C có tương quan g n v i ch ng NAT001_CA (M ), C 025 Hongkong, NAT 045_CA ... PLoS One, 6( 11):E2 724 7 Heidi E Smuts, Lesley J Workman, Heather J Zar, (20 11), “Human Rhinovirus infection in young African children with acute wheezing”, BMC Infectious Diseases, 11 :65 Heikkinen ... cystic fibrosis”, Emerg Infect Dis, 16( 6): 9 96- 9 Fuji N, Suzuki A, Lupisan S, Sombrero L, Galang H, Kamigaki T, Tamaki R, Saito M, Aniceto R, Olveda R, Oshitani H, (20 11), “Detection of human Rhinovirus...
  • 3
  • 239
  • 1
Sử dụng DNA  tái tổ hợp

Sử dụng DNA tái tổ hợp

Ngày tải lên : 05/11/2012, 09:11
... màng tế bào làm cho DNA xâm nhập tế bào E.coly dễ dàng Giai đọan sốc nhiệt để kých thích chuyển phân tử DNA vào tế bào, môi trƣờng dƣỡng chất đƣợc thêm vào sau cho phép tế bào phục hồi DNA tiến ... trị đo OD số tế bào/ ml theo thời gian nuôi cấy lần Thời gian nuôi cấy Giá Trị OD600 nm Số tế bào/ ml (A) LgA 0. 06 105 5 0.14 X 105 5.5 0. 36 1.3 X 1 06 6.1 0 .6 X 1 06 6.7 1.3 3.5 X 108 8 .6 40 Biểu đồ ... dài tổng hợp DNA đƣợc tiến hành 72oC Mỗi chu kỳ gồm bƣớc đƣợc lập lại nhiều lần Lặp lại n lần Biến tính 72o C 94–95o C Kéo dài 45-56o C Ủ bắt cặp 10 Hình 2. 2 Các chu kỳ phản ứng PCR 2. 3 .6 .2 Các...
  • 74
  • 1K
  • 9
Các bước sản xuất enzyme Protease tái tổ hợp từ chủng Bacillus sp Việt Nam biết trên genbank có một số trình tự mã hóa cho protein của một số loài trong chi Bacillus.

Các bước sản xuất enzyme Protease tái tổ hợp từ chủng Bacillus sp Việt Nam biết trên genbank có một số trình tự mã hóa cho protein của một số loài trong chi Bacillus.

Ngày tải lên : 23/04/2013, 09:34
... qua màng [8] Ngoài ra, Protease hoạt động yếu tố phát triển tế bào ác tính tế bào bình thường tǎng phân chia tế bào, sinh tổng hợp ADN [2] So với Protease động vật thực vật, Protease vi sinh vật ... thuộc chi Clostridium [2] Protease Bacillus ưa kiềm có điểm đẳng điện 11, khối lượng phân tử từ 20 .000-30.000dalton Ổn định khoảng pH 6- 12 hoạt động khoảng pH rộng 7- 12 [2] Chủng Bacillus subtilis ... thấy trọng lượng phân tử enzyme tương đối bé, P-xerin Các P-xerin có trọng lượng phân tử thấp vào khoảng 20 .000 – 27 .000 Dalton Tuy nhiên, có số P-xerin có trọng lượng phân tử lớn enzyme Pelicillium...
  • 18
  • 1.6K
  • 13
Tài liệu Chương 2: Công nghệ DNA tái tổ hợp doc

Tài liệu Chương 2: Công nghệ DNA tái tổ hợp doc

Ngày tải lên : 13/12/2013, 01:16
... đại theo hàm mũ Gen đích Chu kỳ 35 DNA khuôn mẫu 22 = 23 = 24 = 16 23 6 = 68 tỷ Hình 2. 2 Sơ đ phản ứng chuỗi polymerase (PCR) - Kéo dài phân tử (extension) 70-72oC Đây khoảng nhiệt độ tối thích ... Công nghệ sinh học 32 (physical mapping) Sinh tổng hợp cDNA từ mRNA Đoạn DNA tổng hợp dựa khuôn mẫu mRNA gọi cDNA (complementary DNA) ba sau: - (Mg2+ - mRNA-cDNA (khi tổng hợp sợi th coli E ... tập hợp bao gồm đoạn ngắn Các enzyme hạn chế diện hầu hết tế bào vi khuẩn để ngăn cản DNA ngoại lai (của bacteriophage) tiếp quản máy tổng hợp Nhập môn Công nghệ sinh học 36 protein tế bào DNA...
  • 28
  • 915
  • 5
So sánh các hệ thống biểu hiện PROTEIN tái tổ hợp

So sánh các hệ thống biểu hiện PROTEIN tái tổ hợp

Ngày tải lên : 10/04/2014, 22:36
... protein tái tổ hợp độc tế bào chủ, lượng arabinose thêm vào, có protein tái tổ hợp tạo Hiệu ứng dựa vào môi trường nuôi cấy dựa vào tế bào chủ Mỗi tế bào sản xuất protein tái tổ hợp theo kiểu ... hợp khỏi cột borate hòa tan BIỂU HIỆN PROTEIN BẰNG CÁC TẾ BÀO NHÂN CHUẨN Mặc dù tế bào vi khuẩn biểu thành công nhiều protein từ tế bào nhân chuẩn, có trường hợp protein tái tổ hợp biểu tốt tế ... cho tế bào động vật có vú, tế bào nhân chuẩn đột biến enzyme sử dụng cho mục đích chọn lọc Khi đó, plasmid mang hoạt động gene đột biến Phương pháp không thuận tiện sử dụng tế bào nấm men tế bào...
  • 18
  • 2.7K
  • 23
Tạo vaccine tái tổ hợp ứng dụng trong phòng bệnh mủ gan do vi khuẩn edwarwsiella ictaluri gây ra ở cá tra khu vực đồng bằng sông cửu long

Tạo vaccine tái tổ hợp ứng dụng trong phòng bệnh mủ gan do vi khuẩn edwarwsiella ictaluri gây ra ở cá tra khu vực đồng bằng sông cửu long

Ngày tải lên : 04/07/2014, 15:22
... a=v&pid=gmail&attid=0.1&thid=137e381afba52e55&mt=application/pdf&url=https://m ail.google.com/mail/u/0/?ui%3D2 % 26 ik%3Db 220 d03e4d % 26 view%3Datt % 26 th %3D137e381afba52e55 % 26 attid%3D0.1 % 26 disp%3Dsafe % 26 realattid %3Df_h3dqibz90 % 26 zw&sig=AHIEtbR1S9-HcTw0gdJms8Wb_Qk7JJnjFw&pli=1 ... Thị Thoa Thúy Thủy Tạ Thị Thu Trang MSSV 1 029 8741 1 020 0 721 1 024 65 81 1 028 2341 1 0 26 1151 1 0 26 3841 1 025 2351 Tp HCM, tháng năm 20 12 MỤC LỤC I 4.1 4 .2 II III ĐẶT VẤN ĐỀ Nguyên nhân gây ... lipase, ) làm tế bào vùng viêm bị hủy hoại dẫn đến hoại tử Lúc quan sát thấy tế bào tách rời nhau, nhân tế bào co lại vỡ vụn, cuối tế bào bị tiêu hủy Khi cá bệnh nặng, tổn thương lan rộng làm...
  • 14
  • 543
  • 0
TIỂU LUẬN AN TOÀN SINH HỌC : Phân tích khả năng chuyển đoạn DNA tái tổ hợp của sinh vật chuyển gen ( Động vật, thực vật và vi sinh vật) sang hệ vi sinh vật ở người và vật nuôi

TIỂU LUẬN AN TOÀN SINH HỌC : Phân tích khả năng chuyển đoạn DNA tái tổ hợp của sinh vật chuyển gen ( Động vật, thực vật và vi sinh vật) sang hệ vi sinh vật ở người và vật nuôi

Ngày tải lên : 14/07/2014, 09:50
... đoạn ngắn DNA từ môi trường bên ngoài để đưa vào môi trường bên vi khuẩn, nhờ đó sảy tái tổ hợp Cơ chế: bào nhận - Sự tiếp xúc DNA lạ với tế bào nhận Sự xâm nhập DNA vào tế bào nhận ... nhập DNA vào tế bào nhận Sự liên kiết DNA vào tế bào nhận Sự liên kết DNA lạ với đoạn DNA tương đồng nhiễm sắc thể tế Sự nhân lên nhiễm sắc thể DNA biến nạp Muốn thực biến nạp cần có ... ứng Mặt dù đoạn DNA nào có trọng lượng phân tử tương ứng đêu có khả xâm nhập vào tế bào, tế bào, có đoạn DNA các chủng vi khuẩn gần gũi mới có thể gắn vào hệ gen tế bào nhận Ngày...
  • 12
  • 679
  • 0
Giáo trình DNA tái tổ hợp part 2 pdf

Giáo trình DNA tái tổ hợp part 2 pdf

Ngày tải lên : 31/07/2014, 23:20
... DNA tái tổ hợp 20 0 Vector tạo dòng (cloning vector) Phân tử DNA mạch kép có khả tự chép tế bào vật chủ Có thể gắn vào phân tử đoạn vài đoạn DNA khác nguồn tạo nên phân tử DNA tái tổ hợp dùng để ... đặc hiệu, tạo nhiều virus, lan truyền từ tế bào sang tế bào khác Virus dạng sống cấu trúc tế bào, có khả xâm nhập vào tế bào sống xác định sinh sản bên tế bào Giống tất cá sinh vật khác, virus có ... với plasmid tiếp hợp Plasmid không tương hợp (incompatible plasmid) plasmid tồn với vài hệ tế bào vật chủ, sau trình phân chia tế bào, số chúng bị thải loại Muốn tương hợp tế bào vật chủ, plasmid...
  • 18
  • 415
  • 0
Giáo trình DNA tái tổ hợp part 4 pps

Giáo trình DNA tái tổ hợp part 4 pps

Ngày tải lên : 31/07/2014, 23:20
... polymorphic DNA) : STS (sequence-tagged site): STS primer thiết kế sở trình tự RAPD markers 56 Magnesium 2+ pol 2+ - 2+ 2+ hiệu 2+ (Mg 2+ pol ribonucleotide triphosphate (dNTPs) -20 o 10 20 -20 0 Enzyme ... pmol/ L) 2, 5 L Primer-R (10 pmol/ L) 2, 5 L Thêm H2 40 L 53 Taq pol: 10 L Taq pol (5 units/ L) L Thêm H2 20 L Enzyme hạn chế 5’ DNA biết Enzyme hạn chế Y X 3’ 3’ 5’ Tạo vòng DNA ligase PCR X 3 .6 Sơ ... PCR SM: Chuẩn kích thước DNA 1, 2, 3, 5: Các khác 55 , genomic dài (20 -24 mer) DNA không h t 50% GC 3’ - o C cho GC (Ta) nhiệt độ nóng chảy (Tm) C cho AT 5o o 4-6o Tm Ta 20 oligonucleotide: Ta...
  • 18
  • 426
  • 0
Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 2 potx

Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 2 potx

Ngày tải lên : 05/08/2014, 19:22
... nghệ DNA tái tổ hợp : 37 - -acrylamide) - 1 TBE - 10% ammonium persulphate silicon lúc để miếng đệm 2. 4) 35  3,5% 5,0% 8,0% 12, 0% 20 ,0% 11 ,6 16, 6 26 ,6 40,0 66 ,6 67 ,6 62 , 7 52, 7 39,3 12, 7 5 ... tách DNA loại gel vào (B 2. 3), kích thước điện tích DNA tách DNA polyac Acrylamide (% w/v) ch (nucleotide) 3,5 1.000 -2. 000 5,0 80-500 8,0 60 -400 12, 0 40 -20 0 15,0 25 -150 20 ,0 6- 100 20 cm - DNA ... thích hợp với gel 2% Công nghệ DNA tái tổ hợp 27 A B C 2 Hình 2. 3 Điện di mẫu DNA giống nồng độ agarose khác A: 1%, B: 1,5% C: 2% - - Nhìn chung, DNA plasmid mạch vòng dịch chuyển nhanh DNA plasmid...
  • 25
  • 392
  • 4
Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 4 pot

Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 4 pot

Ngày tải lên : 05/08/2014, 19:22
... tính 2. 3 Biến nạp vector tái tổ hợp vào vi khuẩn /tế bào vật chủ Sau tạo vector tái tổ hợp mang gen ngoại lai, việc biến nạp vào tế bào vật chủ Trong trường hợp tế bào vật chủ thường Công nghệ DNA ... nạp đắt tiền Công nghệ DNA tái tổ hợp 83 2. 3 .2 Hóa biến nạp Đây phương thức kinh điển để biến nạp DNA plasmid vào tế bào E coli Các tế bào ủ dung dịch CaCl2 để trở thành tế bào khả biến giúp cho ... tế bào nhỏ Thể tích dịch tế bào khoảng 20 µL cho hiệu suất khoảng 109 thể biến nạp - Phương pháp chuẩn bị tế bào biến nạp đơn giản, không sử dụng kỹ thuật phức tạp tốn thời gian Hơn nữa, tế bào...
  • 30
  • 378
  • 1
Tiểu luận môn Sinh Học Phân Tử DNA TÁI TỔ HỢP & ỨNG DỤNG CỦA NÓ

Tiểu luận môn Sinh Học Phân Tử DNA TÁI TỔ HỢP & ỨNG DỤNG CỦA NÓ

Ngày tải lên : 26/06/2015, 08:29
... nhân sơ 11 III .2 Tế bào chủ nhân chuẩn 12 III .2. 1 Tế bào nấm men (Saccharomyces cerevisiae) . 12 III .2. 2 Các tế bào chủ thực vật 13 III .2. 3 Các tế bào chủ động vật ... NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP 21 V.1 Công nghệ DNA tái tổ hợp với nghiên cứu gen 21 V .2 Công nghệ DNA tái tổ hợp với y-dược học .22 V .2. 1 Sản xuất chế phẩm y-sinh học công nghệ DNA tái tổ hợp ... phân tử DNA invitro hệ thống tế bào vật chủ để đưa DNA tái tổ hợp vào tế bào chủ nhằm nhân lên với số lượng lớn tế bào chủ Mỗi tế bào chủ phân bào tạo nên dòng tế bào chứa gen cần thiết, tách...
  • 30
  • 1.9K
  • 18

Xem thêm