T ng h p hóa h c và sổ ợ ọ ử d ng các đo n oligonucleotit ụ ạ Các đo n ADN có trình t xác đ nh kíchạ ự ị th c ng n đ c s d ng nhi u trongướ ắ ượ ử ụ ề các nghiên c u khác nhau c a di truy nứ ủ ề h c phân t , ch ng h n nh s d ngọ ử ẳ ạ ư ử ụ làm m i trong các ph n ng PCR, hayồ ả ứ dùng làm m u dò trong các ph ng phápẫ ươ lai phân t .ử Các đo n trình t này th ng đ c t ngạ ự ườ ượ ổ h p theo ph ng pháp hóa h c và đ cợ ươ ọ ượ g i là các đo n oligonucleotit. Ph ngọ ạ ươ pháp hóa h c đ c s d ng ph bi nọ ượ ử ụ ổ ế nh t đ c ti n hành trên b m t c ngấ ượ ế ề ặ ứ s d ng máy t đ ng. Ti n ch t đ t oử ụ ự ộ ề ấ ể ạ nên các nucleotit l n l t g n v i đo nầ ượ ắ ớ ạ oligonucleotit theo tr t t nh t đ nhậ ự ấ ị đ c g i là các h p ch tượ ọ ợ ấ phosphoamidine (xem hình minh h a ).ọ Ph n ng kéo dài chu i oligonucleotitả ứ ỗ di n ra b ng vi c g n thêm ti n ch tễ ằ ệ ắ ề ấ nucleotit m i vào phía đ u 5’, nh v yớ ầ ư ậ ng c chi u v i ph n ng kéo dài chu iượ ề ớ ả ứ ỗ ADN s d ng enzym ADN polymerase. ử ụ Ph ng pháp t ng h p hóa h c có hi uươ ổ ợ ọ ệ qu và đ chính xác cao khi ti n hànhả ộ ế t ng h p các phân t ADN m ch đ n cóổ ợ ử ạ ơ đ dài t i 30 nucleotit. V i các thi t bộ ớ ớ ế ị t ng h p oligonucleotit hi n nay, m tổ ợ ệ ộ ng i nghiên c u có th d dàng t ngườ ứ ể ễ ổ h p b t c m t trình t ADN ng n nàoợ ấ ứ ộ ự ắ đ n gi n b ng cách gõ và nh p trình tơ ả ằ ậ ự nucleotit mong mu n vào ph n m mố ầ ề máy tính đi u khi n máy t ng h p tề ể ổ ợ ự đ ng. Tuy v y, khi phân t ADN đ cộ ậ ử ượ t ng h p có kích th c l n thì đ chínhổ ợ ướ ớ ộ xác c a trình t và đ đ ng đ u c a s nủ ự ộ ồ ề ủ ả ph m t o thành gi m đi do các l i cẩ ạ ả ỗ ố h u mang tính k thu t. Th c t , cácữ ỹ ậ ự ế phân t ADN có trình t dài h n 100ử ự ơ nucleotit khó có th đ c t ng h p b ngể ượ ổ ợ ằ các ph ng pháp hóa h c mà đ m b oươ ọ ả ả đ c s l ng và ch t l ng mongượ ố ượ ấ ượ mu n.ố Các đo n oligonucleotit kích th c ng nạ ướ ắ ngoài các ng d ng làm m i ph n ngứ ụ ồ ả ứ PCR hay làm m u dò nh đ c nêu ẫ ư ượ ở trên, còn có th đ c s d ng cho nhi uể ượ ử ụ ề m c đích khác trong nghiên c u diụ ứ truy n h c phân t . Ch ng h n nh cácề ọ ử ẳ ạ ư đo n oligonucleotit k t c p sai v i m tạ ế ặ ớ ộ đo n ADN đ c tách dòng có th đ cạ ượ ể ượ dùng đ t o ra m t đ t bi n đ nh v trí.ể ạ ộ ộ ế ị ị Ph ng pháp này, g i là ph ng phápươ ọ ươ gây đ t bi n đ nh v trí, đ c th c hi nộ ế ị ị ượ ự ệ nh sau: m t trình t nucleotit nh t đ như ộ ự ấ ị đ c ti n hành lai v i m t phân đo nượ ế ớ ộ ạ ADN, đây đo n oligonucleotit đ c sở ạ ượ ử d ng làm m i còn phân đo n ADN đíchụ ồ ạ đ c dùng làm khuôn. Trong đo n ADNượ ạ s i kép hình thành s có m t v trí k tợ ẽ ộ ị ế c p sai, và theo nguyên t c PCR, cácặ ắ phân đo n ADN đ c t o ra trong cácạ ượ ạ ph n ng v sau đ u mang đ t bi n t iả ứ ề ề ộ ế ạ v trí k t c p sai.ị ế ặ Các đo n oligonucleotit cũng có thạ ể đ c s d ng theo cách t ng t nhượ ử ụ ươ ự ư v y đ t o nên m t đi m c t gi i h nậ ể ạ ộ ể ắ ớ ạ m i trong m t phân t ADN, đ r i sauớ ộ ử ể ồ đó đi m c t gi i h n này đ c s d ngể ắ ớ ạ ượ ử ụ đ cài đo n ADN đích vào gi a m tể ạ ữ ộ trình t mã hóa và m t trình t không mãự ộ ự hóa, ho c sau m t trình t promoter hayặ ộ ự v trí g n c a ribosom, v.v ị ắ ủ Nh v y, rõ ràng trong các nghiên c u diư ậ ứ truy n h c phân t , vi c các đo nề ọ ử ệ ạ oligonucleotit có th đ c t ng h p theoể ượ ổ ợ m t trình t b t kỳ có nhi u ý nghĩa ngộ ự ấ ề ứ d ng quan tr ng trong vi c xác đ nh vàụ ọ ệ ị khu ch đ i các đo n ADN đ c hi u, đế ạ ạ ặ ệ ể gi i mã trình t ADN, cũng nh trongả ự ư các nghiên c u t o đ t bi n đi m xácứ ạ ộ ế ể đ nh v trí, hay s d ng cho công nghị ị ử ụ ệ ADN tái t h p.ổ ợ . h p hóa h c và sổ ợ ọ ử d ng các đo n oligonucleotit ụ ạ Các đo n ADN có trình t xác đ nh kíchạ ự ị th c ng n đ c s d ng nhi u trongướ ắ ượ ử ụ ề các nghiên. ổ ợ ằ các ph ng pháp hóa h c mà đ m b oươ ọ ả ả đ c s l ng và ch t l ng mongượ ố ượ ấ ượ mu n.ố Các đo n oligonucleotit kích th c ng nạ ướ ắ ngoài các ng