Mục lục Trang Mở đầu Chơng Tổng quan nghiên cứu 1.1 Đặc điểm thực vật hệ thống phân loại sen 1.1.1 Đặc điểm thực vật 1.1.2 Hệ thống phân loại 1.2 Nguồn gốc phân bố sen thÕ giíi 1.3 C©y sen thị trờng giới 1.4 Tình hình nghiên cứu sen 1.4.1 Sen y häc cổ truyền (Đông y) 1.4.2 Thành phần hoá học nghiên cứu dợc häc míi vỊ sen 1.5 Vài nét điều kiện tự nhiên - xà hội khu vực nghiên cứu 12 Chơng Đối tợng phơng pháp nghiên cøu 14 2.1 §èi tợng nội dung nghiên cứu 14 2.2 Phơng pháp nghiên cứu 14 2.2.1 Địa điểm phơng pháp thu mÉu 14 2.2.2 Phơng pháp xö lý mÉu 14 2.2.3 Phơng pháp nghiên cứu đặc điểm thực vật 14 2.2.4 Phơng pháp nghiên cứu tiêu hoá sinh 15 Chơng Kết nghiên cứu 16 3.1 Đặc điểm thực vật 16 3.1.1 Một số đặc điểm hình thái giải phẫu thân, lá, hoa, 16 3.1.2 Tỷ lệ đậu 24 3.2 Một số đặc điểm ho¸ sinh 25 3.2.1 Mét số tiêu dinh dỡng ngó sen hạt sen 25 3.2.2 Xác định số thành phần hoá học phận cña sen 26 KÕt luËn kiến nghị 32 Tài liệu tham khảo 33 Phô lôc 36 Mở đầu Sen (Nelumbo nucifera Gaertn.) loài thuỷ sinh sống ao hồ, đầm, dạng thân thảo, nằm sâu dới bùn đất gọi thân rễ, hoa lại nằm mặt nớc vợt lên khỏi mặt nớc nhờ cuống dài Sen loại lâu năm song sinh trởng phát triển chúng mang tính chất chu kỳ năm Vào cuối xuân ấm áp sen bắt đầu nảy chồi từ mấu thân rễ vơn lên mặt nớc Hoa sen nở rộ vào mùa hè đẹp có hơng thơm dịu mát tinh khiết Sang thu đông sen tàn luỵ trở lại dạng tiềm sinh lòng bùn đất Sen loại gắn liỊn víi cc sèng ngêi tõ xa xa H×nh ảnh hoa sen biểu tợng cho tôn giáo, cho cao sáng khiết, thơ ca tâm linh ngời Bên cạnh ý nghĩa mặt tinh thần sen có ý nghĩa thực tế giá trị kinh tế cao Hiếm có loại nh sen mà tất phận sử dụng đợc Về mặt y dợc, Đông y sen loại thuốc quý Các phận sen có tác dụng chữa bệnh Ví dụ nh tâm sen, sen có tác dụng an thần, tâm, hạ huyết áp ; Nhị sen ích thận, chữa băng huyết, hoa sen chống mụn nhọt; Gơng sen có tác dụng cầm máu, táo bón Các hợp chất chiết từ sen ( tanin, flavonoid, ancaloid) có hoạt tính sinh học mạnh, đợc nghiên cứu nhiều tác dụng dợc lý Sen đà góp phần tạo nên đặc sản tiếng: Chè sen, cốm gói sen, trà sen Trong lĩnh vực sen nguồn thực phẩm có hàm lợng dinh dỡng cao Hạt sen giàu protein, tinh bột loại vitamin; Ngó sen giàu chất xơ, củ sen chứa nhiều tinh bột Ngày nay, sen đợc trồng nhiều nớc (đặc biệt châu á) với diện tích lớn Trên thị trờng giới sen đối tợng đợc ý nhiều Đặc biệt thị trờng củ sen, ngó sen hạt sen Sen đem lại giá trị thẩm mỹ cho công trình kiến trúc trồng sen để thởng ngoạn khu du lịch mô hình hấp dẫn khách du lịch Với ý nghĩa thực tế giá trị kinh tế cao, nhng công trình nghiên cứu tổng thể sen cha nhiều Mặc dù Nam Đàn - Nghệ An nơi có nhiều sen song mang tính chất thời vụ, cha có đầu t vốn, kỹ thuật nên hiệu kinh tế thu đợc cha cao so với nơi khác Vì lý trên, đà tiến hành đề tài: "Nghiên cứu số đặc điểm thực vật hoá sinh sen (Nelumbo nucifera Gaertn.) xà Hùng Tiến - huyện Nam Đàn - Nghệ An Mục tiêu đề tài: Chúng tiến hành đề tài với mục tiêu là: Từ việc nghiên cứu số đặc điểm thực vật số tiêu hoá sinh ®Ĩ cung cÊp mét sè dÉn liƯu vỊ c©y sen cho nhà hoạch định sách nông nghiệp, nhằm phát triển sen thêm bớc chất lợng nh số lợng Chơng Tổng quan nghiên cứu 1.1 Đặc điểm thực vật hệ thống phân loại sen 1.1.1 Đặc điểm Thực vật: Cây sen (còn gọi liên hay quỳ, có tên khoa học Nelumbo nucifera Garetn.) dạng thuỷ sinh sống nhiều năm mọc bùn, mấu có rễ Lá mọc từ thân rễ vơn lên khỏi mặt nớc Cuống dài có gai nhỏ, phiến hình lọng to đờng kính 50 cm - 70 cm Gân xếp toả tròn có dạng nan hoa Hoa to có màu trắng hay đỏ hồng, lỡng tính Lá đài từ -5 có màu lục nhạt dễ rụng Nhị nhiều, bao phÊn «, më víi kÏ nøt däc cã trung đới mọc dài thành phần phụ (gạo sen) màu trắng có hơng thơm Nhiều noÃn (tâm bì) rời đựng đế hoa loe thành gơng sen xốp, hình nón lộn ngợc, dẹt Quả sen dạng bế chứa hạt có mầm dày, chồi mầm (tâm sen) gồm non gập vào bên trong, vỏ cứng, nhẵn, màu lục tía [8] Có nhiều cách gọi tên phận khác sen: sen gọi Hà diệp hay liên diệp (Folium Nelumbinis); Hoa sen gọi liên hoa (Flos Nelumbinis); Ngó sen, củ sen gọi liên ngẫu (Rhizoma Nelumbinis); Quả sen gọi liên thạch (Fructus Nelumbinis); Hạt sen gọi liên nhục (Semen Nelumbinis); Gơng sen sau bỏ hạt gọi liên phòng (Receptaculum Nelumbinis); Nhị sen gọi liên tu (Stamen Nelumbinis)[8] 1.1.2 Hệ thống phân loại: Theo Takhtajan(1970) đà xếp chung Sen - Súng chi khác vào họ Sen súng ( Nymphaeaceae) Nhng đến năm 1980, hệ thống phân loại mình, Takhtajan đà xÕp Sen, Sóng thµnh chi vµo hai hä thc riêng biệt Cách phân loại đợc giữ cho tíi ngµy Chi Sen (Nelumbo) thc hä Sen (Nelumbonaceae), Sen (Nelumbonales), lớp mầm (Dicoty leadonea), ngành hạt kín (Angiospermatophyta) Chi Sen có loài lµ Nelumbo nucifera Gaertn vµ Nelumbo lutea Willd ë loµi thứ (Nelumbo nucifera Garetn.) cánh hoa có màu hồng, tập trung chủ yếu Châu á, loài thứ cách hoa lại có màu vàng, phần gốc cánh hoa thờng vàng đậm hơn, phân bố chủ yếu châu Mỹ [38] Ngoài ra, ngày lai ghép nhân tạo, chọn lọc biến dị nên có thêm số loài sen lai ghép nh: - Nelumbo Chawan Basu: Cánh trắng viền cánh có màu hồng tối - Nelumbo angel Wings: Cánh trắng cuộn phía mép, rộng cắt sâu tơi sáng - Nelumbo Perry Super Stas: Cánh hoa có biển đối màu sắc từ màu hồng tối (ngày nở) sang mµu vµng (ngµy thø 2) vµ chun thµnh mµu kem (vµo ngµy thø 3) - Nelumbo Pekinesis Rubra: Lóc míi nở cánh hồng tơi nhng sau ngày thứ chuyển sang màu hồng tối [30] Tại Việt Nam, có mét loµi nhÊt lµ (Nelumbo nucifera Garetn.) nhng thÊy có nhiều dạng sen khác Chúng phân biệt kích thớc, chiều cao lá, hoa Hình thái sen, nhị noÃn, mục đích sử dụng (lấy hoa, lấy hạt hay lấy củ) Theo kết điều tra Dơng Đức Tiến cộng sự, có thĨ kĨ mét sè d¹ng sen nh: - D¹ng sen có hoa to, cánh màu hồng đậm, đơn cánh (Thanh hồng liên) - Dạng sen có hoa to, cánh màu trắng, đơn cánh (Thanh bạch liên) - Dạng sen có hoa to, nhiều cánh, màu hồng tối ( Đại hạ liên) - Dạng có hoa to, đơn cánh màu trắng hồng - Dạng có hoa to, nhiều cánh, trắng để lấy hoa (Kiến liên) - Dạng sen hoa to cánh nhiều có màu trắng phớt hồng dùng để lấy hạt (Sen trắng điểm phấn hay thạch liên) - Dạng sen hoa to, nhị biến đổi thành cánh, màu trắng (Sen trắng cánh hay Bạch diệp liên) - Dạng có hoa to, nhiều cánh, noÃn đặc biệt ( Nguyệt Liên) - Dạng sen lấy củ: Hoa nhỏ, nhiều cánh màu hồng (Thuỵ liên) - Dạng Sen trắng hoa nhỏ, nhiều cảnh (Thái liên) Ngoài có dạng sen khác [ 30 ] Tại Nghệ An, thấy giống sen khác thuéc cïng mét loµi (Nelumbo nucifera Garetn.) lµ gièng sen hoa to nhiều cánh màu hồng giống sen trắng hoa to, nhiều cánh 1.2 Nguồn gốc phân bố Sen giới Sen loại nhiệt đới nhiệt đới phân bố châu lục Âu, á, Mỹ Ranh giới phân bố loµi chÝnh (Nelumbo nucifera Garetn.) vµ Nelumbo lutea Willd rõ ràng Takhtajan (1980) đà rõ rằng: Loài Nelumbo lutea Willd phân bố Châu Mỹ tập trung phía Nam Bắc Mỹ, Trung Mỹ phần phía Bắc Nam Mỹ, kéo sang đảo Haoai đảo Jamaica Còn loài (Nelumbo nucifera Garetn.) phân bố rộng rÃi vùng đất thuộc mảng lục địa cổ Từ Đông Bắc Châu úc đến quần đảo Mailai Philippin, từ phía Nam Nhật Bản Srilanca, đến Đông Nam á, Trung Quốc, Vùng viễn Đông Liên Xô, vùng biển Bantic, đến vùng biển Địa Trung Hải, vùng biển Caspia Tại Caspia có quan ®iĨm ®èi lËp: Quan ®iĨm thø nhÊt cho r»ng loµi sen xuất ngời du nhập tới Quan điểm khác lại cho có mặt sen trớc có sù xt hiƯn cđa ngêi [38] Sen lµ loµi thực vật có biên độ phân bố rộng, ngời ta thấy xuất chúng trongnhững vùng có điều kiện tơng đối khác nhau: Chẳng hạn, châu úc, ấn Độ, Đông Nam á, Đông Nam Trung Quốc, đảo Srilanca, sen phân bố nơi có khí hậu nhiệt đới nóng ẩm, nắng nhiều Còn phía Bắc Trung Quốc vùng Viễn đông Liên Xô, sen lại mọc điều kiện khô, chí băng tuyết vào mùa đông, nhiệt độ thấp Tại ấn Độ vùng Caspia độ cao 1000 m so với mùc níc biĨn vÉn thÊy sù xt hiƯn cđa sen Đây độ cao phân bố sen [38] Nh vậy, sen có địa bàn khả phân bố tơng đối rộng Chúng loài xuất sớm Ngời ta đà tìm thấy hoá thạch hạt sen 5.000 năm tuổi Vân Nam (Trung Quốc), 7.000 tuổi Triết Giang (Trung Quốc ), 1.200 năm tuổi Chi Ba (Nhật Bản ) [32] Vậy đâu nơi phát sinh loài ? Bàn nguồn gèc c©y sen hiƯn vÉn cha cã ý kiÕn thèng nhất, tồn quan điểm khác nhau, đặc biệt nguồn gốc loài Nelumbo nucifera Garetn loài này, quan điểm thứ cho nguồn gốc từ ấn Độ lẽ Nucifera tên Srilanca (trớc thuộc lÃnh thổ ấn Độ) có tên Nelumbo Eeast - India Lotus (Hoa huệ Đông ấn) Tuy nhiên, dựa vào hoá thạch hạt sen tìm thấy nét văn hoá lịch sử Trung Quốc, nhà thực vật học Trung Quốc lại khẳng định loài Nelumbo nucifera Garetn xuất phát từ Trung Quốc Còn loài Nelumbo lutea Willd tác giả điều thống cho loài loại địa Mỹ, xuất phát từ miền Nam nớc Mỹ di c đến miền Trung phía Bắc Nam châu Mỹ, đến đảo Haoai Jamaica [32, 38] Ngày với hoạt ®éng trång trät vµ di c cđa ngêi lµm cho diện tích phân bố loài sen ngày đợc mở rộng 1.3 Cây sen thị trờng giới Hiện nay, sen loài nông nghiệp đợc trọng nhiều nớc đem lại lợi ích kinh tế cao Đặc biệt đợc trông nhiều ấn Độ, Trung Quốc, Nhật Bản, Hàn Quốc, Đài Loan, Đông Nam á, Nga số nớc châu Phi với mục đích sản xuất châu Âu, châu Mỹ, sen đợc trồng nhng không nhiều với mục đích trang trí sản xuất Các sản phẩm từ phần khác sen sử dụng đợc tiêu thụ mạnh châu Đặc biệt củ sen có thị trờng lớn so với phận khác Thống kê số liệu năm 1998 cho thấy diện tích trồng sen sản lợng củ thu hoạch năm số níc tiªu biĨu nh sau: Tªn níc DiƯn tÝch trồng (ha) Sản lợng củ/năm (tấn) Trung Quốc 140.000 3.000.000 Nhật Bản 4.900 71.900 Hàn Quốc 291 9.261 Trung Quốc lµ níc cã diƯn tÝch trång sen lín nhÊt thÕ giới Năm 1997, việc xuất củ sen sang Nhật Bản đà đa cho Trung Quốc 1.803 triệu Yên (tơng đơng 16 triệu đôla) Nhật Bản thị trờng tiªu thơ cđ sen chÝnh trªn thÕ giíi ë NhËt Bản năm tiêu thụ từ 90.00 - 100.000 củ sen Hàng năm phải nhập từ Trung Quốc khoảng 22.000 Gần Việt Nam có hớng xuất củ sen qua Nhật nhng với lợng không đáng kể chiếm 0,33% Một số thị trờng khác là: Đài Loan, năm 1993 tiêu thụ 600 củ sen với giá USD/kg Một trồng sen đem lại lợi ích gấp 20 lần so với trồng lúa úc năm sản xuất đợc 100 củ nhng nhu cầu lại lên tới 1.080 củ phục vụ cho nhà hàng châu úc Năm 1996, Việt Nam bắt đầu xuất củ sen muối sang Nhật, năm 1997 xuất đợc 50 với giá 93 yên/kg (0,8 USD/kg) Việt Nam, Đồng Tháp tỉnh trồng sen lấy hạt lớn nhÊt níc víi diƯn tÝch 750 (1997) Sau trồng tháng bắt đầu thu hoạch gơng sen, kéo dài tháng Năng suất bình quân 30.000 - 45.000 gơng sen/ha với giá 250 - 450 đồng/gơng, lÃi - triƯu ®ång/ha chi phÝ thÊp HiƯn với mức độ tiêu thụ củ sen mạnh, diện tích trồng sen lấy củ ngày đợc mở rộng Đặc biệt tỉnh đồng phía Nam nớc ta, lợi dụng u nắng quanh năm nên việc trồng thu hoạch củ sen không bị gián đoạn, tháng lại thu hoạch lần, lÃi 10 triệu đồng/ha [32] Những điều cho thấy tiềm kinh tế lớn mô hình trồng sen lấy hạt lấy củ xuất Thị trờng nớc Việt Nam sen không mạnh nh số nớc kể trên, song sản phẩm từ sen góp phần cải thiện đời sống cho ngời dân: kg ngó sen giá 20.000 - 30.000 Việt Nam đồng/1kg hạt sen kho giá 40.000 50.000 Việt Nam đồng Hàng năm nhu cầu hạt sen cung cấp cho nhà máy sản xuất bánh cổ truyền, cho lĩnh vực Đông y lớn 10 Nh vậy, sen loài đợc quan tâm ý nông nghiệp thị trờng tiêu thụ Tình hình nghiên cứu sen Sen đợc biết đến từ xa xa ngày sen loài có giá trị cao lĩnh vực y học Tác dụng chữa bệnh sen đà đợc Đông y nghiên cøu tõ c¸c kinh nghiƯm cỉ trun (y häc cỉ truyền) Ngày đợc bổ sung thêm nghiên cứu thành phần hoá học sen tác dụng dợc lý 1.4.1 Sen y học cổ truyền (Đông y): Tổng hợp từ nhiều nguồn tài liệu khác nghiên cứu sen cho thấy, phận sen có tác dụng chữa bệnh: * Hoa sen ( Flos Nelumbinis): Cánh hoa sen tơi đem phơi khô sấy khô 30 - 40oC dïng ng nh níc chÌ Cã vÞ ngät đắng, có tác dụng an thần, trị tê thấp, chống mụn nhọt Tua nhị đực hoa sen sau bỏ hạt gạo đem phơi khô sấy khô 30 - 40 oC, có vị chát tính ấm có tác dụng tâm, cố thận, cầm máu, dùng chảy máu cam, băng huyết, đại diện máu, rong huyết, thổ huyÕt, di tinh, méng tinh G¬ng sen ( Receptaculum Nelumbinis) sau tách hạt phơi khô rang cháy, có vị đắng sáp , đông y sử dụng để trị xuất huyết, đại tiện máu, rong huyết, băng huyết, hạ thai, đẩy thai Quả sen (Fructus Nelumbinis): Dùng để chữa bệnh lị cấm Hạt sen (Semen Nelumbinis): Có vị tính bình có tác dụng tâm, hoả, chủ trị tỳ h, ỉa lỏng, mộng tinh, di tinh, băng huyết, khí h Tâm sen (Embryo Nelumbinis) Có vị đắng, lạnh có tác dụng tâm, an thần, nóng sốt ho máu, số cao, chữa tim đập nhanh hồi hộp, họ huyết áp Lá sen (Folium Nelumbinis) có vị đắng sáp, tính bình có tác dụng thử, thăng dơng huyết Lá sen tơi già nát vắt lấy nớc cho uống có tác dụng chữa say nắng cảm nắng, chữa bệnh béo phì Lá sen khô có tác dụng cầm máu, dùng chữa bệnh cháy máu cam, băng huyết rong kinh Thân rễ sen (Nodus Nelumbinis) non gọi ngó sen, già phình to thành củ gọi củ sen, có vị tính mát có tác dụng cầm máu dùng để trị 28 nấu chè dùng nhiều thuốc cổ truyền Đây hai phận chứa nhiều chất dinh dỡng Chúng đà tiến hành phân tích số tiêu dinh dỡng ngó hạt Kết đợc trình bày bảng Bảng : Một số tiêu dinh dỡng ngó hạt sen Bộ phận Chất xơ (%) Tinh bột (%) Đờng khử (%) Vitamin C (mg%) Chất khô (%) Nớc (%) Ngó sen Trạng thái Hàm lợng Khô 22,00 Khô 22,31 Khô 2,72 Tơi 10,56 Tơi 6,90 Tơi 93,10 Hạt sen Trạng thái Hàm lợng Khô Khô Tơi Tơi Tơi 58,00 4,64 60,72 42,00 58,00 Qua bảng nhận thấy, hàm lợng chất dinh dỡng ngó sen hạt sen cao Trong hàm lợng tinh bột, đờng, vitamin C hạt cao nhiều so với ngó sen Một điều đáng lu ý hàm lợng chất xơ ngó sen đạt 22,00%, tỷ lệ cao Không chất xơ ngó sen dạng xơ dễ tiêu Xét mặt dinh dỡng điều có lợi cho tiêu hoá Dợc sĩ Lê Văn Nhân, dợc sĩ Phan Đức Bình đà phân tích hàm lợng xơ dễ tiêu ngó sen tơi 8%, ngó đà nấu chín 8,5% [21] Theo Nguyễn Phớc Tuyên, hàm lợng củ sen tơi 6%, củ sen muối 0,6% [32] Hàm lợng tinh bột nguyên liệu khô tuyệt đối ngó sen đạt 22,31%, hạt sen đạt 58,00% Kết mà thu đợc không khác nhiều so với nghiên cứu Đỗ Tất Lợi, Nguyễn Văn Đàn cộng Theo hàm lợng tinh bột hạt sen khô 62% [ 16, 21] Tinh bột hạt sen với hàm lợng cao mà dạng đặc biệt Theo kết nghiên cứu đây, tinh bột sen dạng Inulin dạng có nhiều hoạt tính sinh học [16] Theo Lê Văn Nhân Phan Đức Bình củ sen hàm lợng tinh bột đạt tới 75% [21], hàm lợng tinh bột củ sen (thân sen già phình to thành củ) cao ngó sen (thân non) điều hợp lý Hiệu tích luỹ chất khô hạt sen cao điều thể qua hàm lợng chất khô có hạt tới 52,0%, ®ã ngã chØ ®¹t 6,9% 29 Trong ngã hạt sen có chứa lợng đờng khử nhng không nhiều Hàm lợng đờng khử đạt 2,72% (trong ngó) 4,64% (trong hạt) Điều đáng ý vitamin C hạt sen tơi lại đợc tích luỹ với hàm lợng cao 60,72 mg%, ngó tơi chứa 10,56mg% Một số tác giả đà nghiên cứu hàm lợng vitamin C 55,0mg% (trong cđ sen t¬i); 37,0 mg% (trong cđ sen mi); 44,0 mg% ngã sen t¬i; 27,4 mg% ngã sen nấu chín [21, 32] Vậy lợng vitamin C ngó sen tơi mà thu đợc có thấp so với kết đà công bố [16, 28, 32] Các tác giả rằng, thành phần dinh dỡng nh đà nghiên cứu ngó sen hạt sen có protein 10% (hạt khô); 2,6% (ngó tơi); 2,1% (trong củ sen mi); 1,8% (trong cđ sen t¬i); chÊt bÐo : 1,97% hạt khô; Canxi 45mg% (trong ngó sen tơi), 163mg% (trong hạt sen khô); phốt pho, sắt, Natri, vitaminB1, B2, niacin (B3) 100g ngã sen cung cÊp 66 calo lợng, 100g hạt sen cung cấp 335 calo [ 21] Nh vậy, qua nghiên cứu phân tÝch cho thÊy, xÐt vỊ mỈt dinh dìng ngã sen hạt sen hai phận đáng đợc ý bëi chóng chøa nhiỊu chÊt dinh dìng víi hµm lợng nhìn chung tơng đối cao 3.2.2 Xác định số thành phần hoá học phận sen Trong sen chứa nhiều hợp chất hoá học khác nhau, đặc biệt số chất có ho¹t tÝnh sinh ho¹t cao nh ancaloid, tanin, flavonoid Thành phần hoá học lại thay đổi nhiều tuỳ theo phận Chúng đà tiến hành phân tích định tính định lợng số hợp chÊt ho¸ häc mét sè bé phËn kh¸c sen 3.2.2.1 Hàm lợng tanin Nguyên liệu gơng sen non, gơng già, nhị vỏ sau đà sấy khô đợc chiết rút nớc cất Dịch chiết phận đem thử với thuốc thử Tanin dung dịch FeCl3 tiến hành phân tích định lợng Kết phân tích định lợng tanin số phận sen đợc trình bày bảng Bảng 7: Hàm lợng tanin gơng sen, tua nhị vỏ Các phận Chỉ tiêu phân tích Gơng non Gơng già Nhị Vỏ 30 Mức độ phản ứng với thuốc thử FeCl3 Hàm lợng tanin (%) Xanh đen Xanh đen Xanh đen Xanh đen 9,60 17,04 9,15 6,65 Qua bảng cho thấy, dịch chiết phận nói phản ứng dơng tính với thuốc thử FeCl3 (các phản ứng cho màu xanh đen đặc trng) chứng tỏ phận có tanin Kết định lợng đà thể sai khác hàm lợng tanin phận Gơng sen già có hàm lợng tanin cao (17,04%) thứ đến gơng non (9,60%) thấp vỏ (6,65%) Tanin với số hoạt chất khác có gơng, nhị, hạt tạo nên tính đa dạng sen hoạt chất nên đợc sử dụng đông y để chữa bệnh 3.2.2.2 Định tính hợp chất flavonoid phận sen Flavonoid hợp chất có hoạt tính sinh học cao đợc sử dụng nhiều y dợc ngày Nó có hoạt tính nh vitamin nhóm PP tăng cờng tính bền mao mạch đặc tính quan trọng Theo DS Lê Văn Nhân, DS Nguyễn Đức Bình, flavonoid sen có tính chống ôxi hoá mạnh có khả khử gốc tự Chúng đà tiến hành định tính flavonoid phơng pháp hoá học số phận khác sen: lá, tua nhị, cánh hoa, vỏ quả, gơng già gơng non Chúng sử dụng dung môi cồn 700 để chiÕt ho¹t chÊt Tríc chiÕt, lo¹i t¹p chÊt b»ng ete dầu Những công việc đợc tiến hành cách riêng rẽ nguyên liệu phận Dịch chiết thu đợc từ loại nguyên liệu đem định tính Dịch chiết lần lợt cho phản ứng với thuốc thử flavonoit gồm : dung dịch NaOH 20%; axit H2SO4 đặc; bột Magiê axit HCl đặc; dung dịch FeCl3, amoniăc Kết phản ứng đợc trình bày bảng Bảng : Kết định tính Flavonoid ống nghiệm Thuốc thử Đặc trng mức độ phản ứng Lá Nhị Cánh hoa Vỏ Gơng già Gơng non 31 NaOH20% Vàng sẫm Đỏ cam Vàng tơi Đỏ Đỏ sẫm Đỏ sẫm Đỏ thẫm (khi tăng t0) Đỏ sẫm (khi t0 tăng) H2SO4 đặc Không phản Hồng nhạt Đỏ hồng Đỏ cam Đỏ cam Đỏ cam Hồng nhạt Hồng đỏ Đỏ cam Không Đỏ cam ứng Mg /HCl Đỏ hồng đặc phản ứng Đỏ tơi (khi t0 tăng) FeCl3 Xanh đen Xanh ®en Xanh ®en Xanh ®en Xanh ®en Xanh ®en NH4OH Vàng tơi Vàng chanh Vàng tơi Vàng sẫm Vàng sẫm Vàng nhạt Nhận định Flavon Flavon Flavon Flavonol Flavonol Flavanon sơ Flavonol Isoflavonol Flavonol Flavonol Flavanon Chalcon hợp chÊt Chalcon Chalcon Auron flavonoid cã Auron Auron thÓ cã Từ kết thu đợc bảng 8, rót mét sè nhËn xÐt sau : - DÞch chiết phận sen có phản ứng dơng tính với thuốc thử flavonoit mức độ khác Đặc trng mức độ phản ứng thể rõ, màu sắc dễ quan sát mắt thờng - Trong số phản ứng phản ứng với Mg/HCl đặc, NaOH 20%, NH4OH phản ứng đặc trng cho hợp chất flavonoid Phức hợp màu phản ứng biến đổi từ màu vàng -> vàng cam-> đỏ sẫm-> đỏ cam Điều chứng tỏ phận sen chứa nhiều loại hợp chất Từ kết nhận định trên, đến nhận định sơ : flavonoid sen cã thĨ cã c¸c nhãm flavol, flavonol, chalcon, auron, antocianidin, izoflavonol Về mặt định tính kết phù hợp với công trình nghiên cứu đà công bố trớc Võ Văn Chi, Đỗ Tất Lợi, Lê Văn Nhân, Phan Đức Bình [7, 16, 21] 3.2.2.3 Hàm lợng ancaloid toàn phần sen Ancaloid hợp chất đợc quan tâm nhiều nói đến sen Ancaloid tập trung nhiều sen tâm sen 32 Do đà tiến hành phân tích định tính định lợng Ancaloid toàn phần sen tâm sen * Định tính Ancaloid phơng pháp hoá học : Dịch chiết tạo phản ứng định tính theo quy trình : từ bột nguyên liệu -> lắc với dung dịch a xít HCl -> lọc -> kiềm hoá dịch lọc dung dịch amoniắc -> chiết hoạt chất Cloroform -> lắc dịch chiết Cloroform với dung dịch a xít HCl loÃng -> gạn lấy phần a xít để làm phản ứng Dịch chiết thu đợc đem phản ứng với c¸c thc thư cđa ancaloid gåm: thc thư Mayer, thc thử Bouchardat, thuốc thử Dragendorff Kết phân tích thu đợc bảng Bảng : Kết phân tích định tính Ancaloid Phản ứng với thuốc thử Bộ phận Mayer Bouchardat Dragendoff Lá sen Kết tủa trắng Kết tủa nâu Kết tủa đỏ Tâm sen Kết tủa trắng Kết tủa nâu Kết tủa đỏ Qua bảng cho thấy : dịch chiết sen tâm sen có phản ứng dơng tính với thuốc thư chung cđa ancaloid: kÕt tđa ®á víi thc thư Dragendorff, kÕt tđa tr¾ng víi thc thư Mayer, kÕt tđa nâu với thuốc thử Bouchardat Điều chứng tỏ sen tâm sen mà nghiên cứu có chứa ancaloid * Định lợng ancaloid toàn phần Ancaloid toàn phần định lợng theo ba phơng pháp: phơng pháp cân, phơng pháp axit- bazơ, phơng pháp so màu 33 Sau trình bày quy trình định lợng ancaloid theo phơng pháp axit bazơ: Bột nguyên liệu (2g) (lá sen tâm sen) Thấm ẩm amôniăc đặc Chiết hoàn lu cồn 960 Dịch chiết cồn Cất thu dung môi Dịch cặn Hoà tan cặn dung dịch HCl 5% Dịch chiết axit Lọc rửa ete dầu hoả , Kiềm hoá amôniắc đậm đặc Dịch chiết kiềm Lắc víi cloroform DÞch chiÕt cloroform Rưa b»ng níc cÊt DÞch chiết cloroform (có pH trung tính) (Bốc dung môi) Cặn tinh khiết Hoà tan HCl = 0,1 N (tỷ lệ thích hợp) Thêm nớc cất, giọt Metyl ®á ChuÈn ®é b»ng NaOH 0,1 N KÕt qu¶ chuÈn độ Từ kết chuẩn độ, đà tính đợc hàm lợng ancaloid toàn phần sen tâm sen đợc trình bày bảng 10 34 Bảng 10: Hàm lợng ancaloid toàn phần sen tâm sen Bộ phận Lá sen Tâm sen Hàm lợng (%) 0,89 1,10 đây, hàm lợng ancaloid toàn phần tính theo nuciferin tâm sen có cao sen nhng không đáng kể (1,10% tâm sen 0,89 % sen) Kết định lợng mà thu đợc phù hợp với tiêu chuẩn đà nêu "Dợc diển Việt Nam III" kết nghiên cứu trớc Võ Văn Chi, Đỗ Tất Lợi, Lê Văn Nhân Phan Đức Bình, Nguyễn Văn Đàn, Phạm Xuân Sinh [ 8, 21, 28] Các tác giả sen cã tíi 15 lo¹i ancaloid nh : nuciferin, nor - nuciferin, roemerin, anonain, coclaurin, anneparin Còn tâm sen với hàm lợng nh có chứa liensinin, izoliensinin, neferin, lotusin, metylcorypalin, nuciferin, bisclaurin Nh vËy, t©m sen sen không chứa hàm lợng lớn ancaloid mà chứa nhiều loại ancaloid khác Đó lý khiến sen tâm sen đợc sử dụng nhiều thuốc ®«ng y víi nhiỊu c«ng dơng 35 KÕt ln đề nghị Kết luận: Kết điều tra cho thấy sen xà Hùng Tiến - Nam Đàn - NghƯ An chØ cã mét gièng lµ gièng sen hoa to, nhiều cánh có màu hồng thuộc loài Nelumbo nucifera Gaertn Các đặc điểm hình thái giải phẩu lá, hoa mang đặc trng cho loài có biến động, tính chất nguyên thuỷ đợc thể cấu trúc hoa Tỷ lệ đậu giống sen cao (đạt 71 %) Hàm lợng số chất dinh dỡng hạt sen ngó sen tơng đói cao.Trong hạt sen chứa 58% tinh bột; 60,72 mg% vitamin C; ngó sen chứa 22% chất xơ Hầu hết phận sen chứa nhiều hợp chất thứ cấp có hoạt tính sinh học cao thc c¸c nhãm ancaloit, flavonoid, tanin thĨ hiƯn qua phản ứng định tính Hàm lợng ancaloid toàn phần tâm sen cao sen (1,10% tâm sen 0,89% sen) Hàm lợng tanin cao gơng sen (9,60 - 17,04%) thứ đến tua nhị (9,15%) thấp cuống sen (6,65%) Các số liệu thu đợc phù hợp với tiêu chuẩn nêu Dợc điển Việt Nam III Đề nghị : Sen loài có giá trị lớn y dợc, kiến trúc thẩm mỹ đặc biệt chúng đối tợng du lịch sinh thái nh đem lại hiệu kinh tế cao Bởi vậy, nên có quy hoạch cụ thể nhằm tận dụng hết tiềm sen : trồng sen khu du lịch, nơi chiêm trũng, vùng nguyên liệu, trồng sen để lấy hạt lấy củ xuất Vì thế, quyền địa phơng cần có kế hoạch hỗ trợ vốn, kỷ thuật nhằm mở rộng diện tích trồng sen địa phơng, góp phần nâng cao đời sống nhân dân Bên cạnh đó, để có hiểu biết sâu sắc sen, cần nghiên cứu sâu khả sinh trởng, thành phần nh hợp chất quý sen địa phơng nh mở rộng nhiều địa phơng khác 36 Tài liệu tham khảo Tài liệu tiƯng ViƯt BƯnh viƯn y häc d©n téc Thanh Hoá (1987), Những khoáng vật làm thuốc, NXN Thanh Ho¸, tr 203 Bé y tÕ Héi Đồng KHKT (1975), Công trình nghiên cứu khoa học y dợc 1974, NXB Y học Hà Nội, tr 194- 196 Phạm Thị Trân Châu cộng (1998), Thực hành hoá sinh học, NXB GD Việt Nam Võ Văn Chi, Dơng Đức Tiến (1978), Phân loại thực vật - thùc vËt bËc cao, NXB KH&KT Hµ Néi Võ Văn Chi (1998), Cây rau làm thuốc, NXB tổng hợp Đồng Tháp Võ Văn Chi (1999), Từ điển thuốc Việt Nam, NXB Y học Hà Nội Nguyễn Đình Chức, Ngô Tuấn Trí (1983), Sách tra cứu hoá sinh, tập 2, NXB KH&KT Hà Nội Dợc ®iĨn ViƯt Nam II - III (2000), NXB Y häc Hà Nội, tr 458 - 494 Quan Thế Dân (2003), "Cây sen làm thuốc", Tạp chí sức khoẻ đời sống, Số 247, tr 23 10 Nguyễn Văn Đàn, Nguyễn Viết Tựu (1985), Phơng pháp nghiên cứu hoá học c©y thc, NXB Y häc TPHCM, 509 tr 11 Ngun Văn Đàn, Vũ Xuân Quang, Ngô Ngọc Khuyến (2000), Sử dụng Đông Y thiết yếu, NXB Y học Hà Nội tr 379 - 387 12 Lê Trần Đức (1987), Trồng hái thuốc, NXB Nông nghiệp, tr 209 13 Lê Trần Đức (2000), Cây thuốc Việt Nam, NXB Nông nghiệp 14 Nguyễn Ngọc Kiểng (1996), Thống kê nghiên cứu khoa học, NXB GD Hà Nội, 208 tr 15 R.M Klêin, D.T Klêin (1983), Phơng pháp nghiên cứu thực vật (tài liệu dịch), tập 1, NXB KH&KT Hà Nội, 384 tr 16 Đỗ Tất Lợi (2000), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, NXB Y học, tr 783 - 786 17 Nguyễn Thiện Luân, Lê DoÃn Diên, Phan Quốc Bình (1979), Các loại thực phẩm thuốc thực phẩm chức Việt Nam, NXB Nông nghiệp Hà Nội 18 Chu Văn Mẫn, Đào Hữu Hồ (1999), Giáo trình thống kê sinh học, NXB GD Hà Nội, tr 161 37 19 Nguyễn Văn Mùi (2001), Thực hành hoá sinh học, NXB ĐHQG Hà Nội 20 Lê Quý Ngu, Trần Thị Nh Đức (1999), Dợc tài Đông Y, NXB Thuận Hoá 21.Dợc Sỹ Lê Văn Nhân, Phan Đức Bình (2004), "Nghiên cứu sen", Tạp chí thuốc sức khoẻ, số 253 22.Nguyễn Thị Nhung, Phạm Thanh Kỳ (1998), "Nghiên cứu thành phần hoá học sen", Tạp chí dợc học, tháng 6, tr.13 - 18 23 Nguyễn Thị Nhung, Phạm Thanh Kỳ, Phó Đức Thn (2000), T¸c dơng cđa nuciferin chiÕt tõ l¸ sen lên điện tim điện nÃo đồ thỏ, Tạp chí dợc học, tháng 24 Nguyễn Thị Nhung, Thạm Thanh Kỳ, Trịnh Văn Bảo (2001 ), "Đánh giá khảo nghiệm gây đột biến NST Nuciferin chiết xuất từ sen Nelumbo Nucifera Gaertn.", Tạp chí nghiên cứu Y học, số 25 Tống Đình Quỳ (2002), Giáo trình xác suất thống kê, NXB GD, 216 tr 26 Hoàng Thị Sản (1998), Phân loại thực vật học, NXBGD 27 Phạm Xuân Sinh (2000), Phơng pháp chế biến thuốc cổ truyền, NXB Y học Hà Nội 28 PGS TS Phạm Xuân Sinh (2001), Thuốc cổ truyền phòng trị bệnh huyết áp, NXB Y học Hà Nội 29 Lê Hồng Thiện (2002), "Công dụng hoa sen", Tạp chí Đông Y, số 30 Dơng Đức Tiến cộng (2000), Nghiªn cøu thư nghiƯm trång sen (Nelumbo nucifera Gaertn.) theo phơng pháp đất trũng, Hà Nội 31 Hải Thợng LÃn Ông Lê Hữu Trác (1997), Hải Thợng y tôn tâm lĩnh, tập 2, NXB Y học Hà Nội, tr.523 - 524 32 Nguyễn Phớc Tuyên (2004), Cây sen thị trờng giới, http:// www khuyennong gov.vn/ ktphothong/ trongtrot/sen htm, tr 33 Từ điển bách khoa dợc học (2000), NXB Từ điển bách khoa Hà Nội Tµi liƯu TiÕng anh 34 Asian food Reseach in Proges, http:// www botanik unibonn.de/sytem/planta htm 35 Irffrey B Harborne FRS, Herbert Baxter (1999), The hard book of Natural flavonoid, NXB John wileyson, Ltd, tr 36 Barthlolf W., Neinhuis C (2004 ), Purity of the sacred lotus or escape from contarmnation in Biological surfece,/Univercity Born, Germany, tr1 - 13 Tµi liệu tiếng nga 38 37 Bosicov M.I (1974), Các nông nghiệp có hoạt tính thuốc, NXB Misk 38 Takhtajkan (1980), §êi sèng thùc vËt, tËp cuèn 5, NXB Prosvesenhie Mascosa, tr.190 - 195 39 phô lôc Một số hình ảnh sen hùng tiến - nam đàn - nghệ an 40 ảnh Sen vào đợt tháng tháng 41 ảnh Sen vào đợt tháng tháng 42 Phụ lục bảng số liệu tiêu lá, hạt ... nghiên cứu 2.1 Đối tợng nội dung nghiên cứu Đối tợng nghiên cứu đề tài là: sen trồng xà Hùng Tiến- huyện Nam Đàn- Nghệ An Nội dung nghiên cứu: - Các đặc điểm thực vật: Thân, lá, hoa, - Các đặc điểm. .. nucifera Gaertn. ) xà Hùng Tiến - huyện Nam Đàn - Nghệ An Mục tiêu đề tài: Chúng tiến hành đề tài với mục tiêu là: Từ việc nghiên cứu số đặc điểm thực vật số tiêu hoá sinh để cung cấp số dẫn liệu sen. .. triển sen thêm bớc chất lợng nh số lợng 5 Chơng Tổng quan nghiên cứu 1.1 Đặc điểm thực vật hệ thống phân loại sen 1.1.1 Đặc điểm Thực vật: Cây sen (còn gọi liên hay quỳ, có tên khoa học Nelumbo nucifera