Đang tải... (xem toàn văn)
Giới thiệu chung về sắc kíNguyên tắc cơ bảnPhân loại sắc kí
GIỚI THIỆU CHUNG VỀ SẮC KÝ • Tswett (1903) sử dụng để tách các chất màu trong cỏ cây • Ngày nay, tách tất cả mọi hợp chất có màu/ không, MW nhỏ/lớn CÁC NGUYÊN TẮC CĂN BẢN • Tách hỗn hợp gồm nhiều loại hợp chất ra riêng thành từng loại đơn chất, dựa vào tính ái lực khác nhau của những loại hợp chất đó đối với một hệ thống (hệ thống gồm 2 pha: pha động và pha tĩnh) • Việc tách 2 hợp chất nào đó ra riêng có đạt được kết quả tốt hay không là tùy vào hệ số phân chia (partition coefficient) • Bất kỳ 1 hợp chất nào khi được đặt vào 1 hệ thống gồm 2 pha (lỏng – lỏng, rắn – lỏng,…), lúc đạt đến trạng thái cân bằng, hợp chất đó sẽ phân bố vào mỗi pha với 1 tỷ lệ nồng độ cố định, tỷ lệ này thay đổi tùy vào các tính chất động học của hợp chất và của 2 pha == m S C C K Nồng độ của hợp chất trong pha tĩnh Nồng độ của hợp chất trong pha động • Hệ số phân chia K: Kể tên một số loại sắc ký đã biết Phân loại sắc ký theo bản chất của 2 pha sử dụng Pha động Pha tĩnh Tên gọi của kỹ thuật sắc ký Chất lỏng Chất rắn sắc ký lỏng – rắn (Sắc ký cột, Sắc ký lớp mỏng) Chất lỏng Chất lỏng sắc ký lỏng – lỏng (HPLC với cột nhồi pha đảo C18 Chất khí Chất rắn sắc ký khí – rắn (Sắc ký khí) Chất khí Chất lỏng sắc ký khí – lỏng (sắc ký khí) • Pha tĩnh: phân tách nhờ tính chất hấp thu – Chất rắn: aluminum, silica gel đã được xử lý • Nạp nén vào cột (sắc ký cột) • Tráng thành lớp mỏng, phủ lên bề mặt tấm kiếng, nhôm, hoặc nhựa (sắc ký lớp mỏng) – Chất lỏng: tẩm lên bề mặt chất mang rắn • Pha động: – Chất khí: khí mang (sắc ký khí) – Chất lỏng: dung môi giải ly (SK giấy, SK lớp mỏng, SK cột) Phân loại sắc ký theo bản chất hiện tượng xảy ra trong quá trình tách chất • Sắc ký phân chia (partition chromatography) – Mỗi hợp chất sẽ có hệ số phân chia khác nhau giữa pha tĩnh và pha động • Sắc ký hấp thu (adsorption chromatography) – Các hợp chất khác nhau sẽ có mức độ hấp thu khác nhau lên bề mặt pha tĩnh Phân loại sắc ký theo bản chất hiện tượng xảy ra trong quá trình tách chất (tt) • Sắc ký trao đổi ion (ion exchange chromatography) – Hợp chất nào có mang điện tích ngược dấu với điện tích của hạt nhựa (pha tĩnh) sẽ bị hạt nhựa bắt giữ lại trong cột • Sắc ký lọc gel (gel filtration chromatography, size exclusion chromatography)! – Tách chất dựa vào MW: theo thứ tự MW lớn ra khỏi cột trước . GIỚI THIỆU CHUNG VỀ SẮC KÝ • Tswett (1903) sử dụng để tách các chất màu trong cỏ cây