Đang tải... (xem toàn văn)
Nghiên cứu thành phần hóa học một loài bình vôi.
4Tạp chí Hóa học, T. 38, số 4, Tr. 4 - 5, 2000 Nghiên cứu thành phần hóa học một loài bình vôi phía bắc Việt Nam Đến Tòa soạn 29-11-1999 Lê Ngọc Liên1, Phạm Gia Điền1, Vũ Đình Hong1, M. Pais21Viện Hóa học, Trung tâm Khoa học tự nhiên v+ Công nghệ Quốc gia 2ICNS-CNRS, Gif sur Yvette-France Summary From the tube of one Stephania species collected in Hoa Binh province the alkaloids crebanin and stephanin have been isolated and characterized. The structures of these compounds were elucidated by spectroscopic analyses and chemical evidence. Chi Stephania (Menispermaceae) đợc dùng lm thuốc chữa bệnh từ lâu đời trong dân gian nh thuốc an thần trên cơ sở 1-tetrahydropalmatin. Việt Nam có nhiều loibình vôi, song phần nghiên cứu thnh phần hóa học của chúng còn cha hon chỉnh. Với mục đích nghiên cứu thnh phần hóa học các loibình vôi ở Việt Nam, chúng tôi đ> tiến hnhnghiên cứu một loi bình vôi thu tại Hòa Bình tháng 3/1999. Mẫu đợc thu giữ tại phòng Công nghệ các hoạt chất sinh học-Viện Hóa học, Trung tâm KHTN v CNQG. Đây l một loại bình vôi có củ nhỏ nặng chừng 2 - 5 kg, vỏ nâu, hơi sần sùi. Khi cắt củ ra có các vết chấm mu tím đỏ, ton bộ mặt cắt có mu tím hồng nhạt. Để lâu mặt cắt chuyển mu nghệ vng. Loại ny nhân dân địa phơng (chủ yếu đồng bo dân tộc) thờng gọi l bình vôi đỏ v sử dụng lm thuốc chữa bệnh đau dạ dy.Mẫu đợc phơi khô, tiến hnh xử lý thu ancaloit tổng. Sắc ký lớp mỏng trong hệ EtOAc : MeOH (9 : 1), thuốc hiện Dragendorff cho thấy thnh phần các ancaloit trong loi bình vôi ny khá đơn giản, hầu nh không có vệt 1-tetrahydropalmatin song có 1 vệt khá lớn với Rf= 0,3, ngoi ra còn 3 vệt nhỏ khác. Từ tổng ancaloit, bằng sắc ký cột, sắc ký lớp mỏng điều chế thu đợc 2 chất sạch v 1 chất còn lẫn chất khác. Một trong ba chất chiếm hm lợng chủ yếu đó l có Rf= 0,3. Cả ba chất đều l tinh thể. Chất I: Rf= 0,3, nhiệt độ nóng chảy 126o-128oC (EtOAc : Hexan). Phổ 1H-NMR cho thấy có một singulet = 2,55 ppm đặc trng cho nhóm N-CH3, hai singulet khác nằm ở vùng 3,8 v 3,9 ppm đặc trng cho hai nhóm OCH3. Hai dublet của 2 proton xuất hiện ở vùng 5,9 v6,08 ppm với J = 1,4 Hz cho phép nghĩ tới một nhóm CH2nằm riêng biệt không có tơng tác với các proton của các cacbon bên cạnh. Ba proton của vòng thơm xuất hiện ở vùng 6,52 - 7,8 ppm dới dạng hai dublet v một singulet chứng tỏ có hai H nằm ở vị trí ortho với nhau trong một vòng thơm (2 dublet) còn 1 H (singulet) nằm ở vòng thơm khác đ> bị thế cả 5 vị trí. So sánh phổ 13C-NMR v DEPT, đồng thời phổ MS với [M]+= 339 khẳng định hợp chất ny l crebanin [1]. Chất ny chiếm lợngchủ yếu trong lợng ancaloit tổng của củ bình vôi đỏ. Chất II: Rf= 0,36. Chất ny cho tinh thể hình phiến mu vng nhạt, nhiệt độ nóng chảy 156o- 157oC (EtOH). Phổ 1H-NMR tơng tự nh của crebanin, chỉ khác ở vùng gần 4 ppm mất đi một singulet đặc trng cho nhóm OCH3.Ngoi ra, ở vùng đặc trng cho nhân thơm còn xuất hiện thêm một dublet kép ở 7,26 ppm (J = 57,9 Hz v 7,9 Hz) đặc trng cho một H nằm giữa hai proton khác trong vòng thơm. Các dữ kiện phổ 13C-NMR v MS với [M]+= 309 đ>khẳng định đó l stephanin [1]. Chất III: Rf= 0,7. Tuy vậy, do lợng chất tách ra quá ít v còn lẫn các chất khác nên chaxác định đợc cấu trúc của hợp chất ny.Theo các ti liệu đ> công bố, các hợp chất I, II có trong các loi bình vôi Stephania bancroftii v Stephania sasakii [1, 2]. Nh vậy, nhiệm vụ đặt ra phải nghiên cứu thêm để xác định tên khoa học cho loi bình vôi đỏ của Hòa Bình. Phần thực nghiệm Thiết bị v hóa chất Phổ khối lợng đợc đo trên máy Kratos MS 50. Phổ NMR proton đợc đo trên máy Bruker AC 250 spectrometer (250 MHz) với TMS lmnội chuẩn, CDCl3l dung môi hòa tan. Phổ 13C-NMR đo trên máy Bruker 75 MHz, dung môi hòa tan l CDCl3.Sắc ký lớp mỏng trên bản silicagel Merck tráng sẵn. Sắc ký cột với chất hấp phụ l silicagel Merck 60 (0,040 - 0,063 mm). Chiết tách v xác định cấu trúc 2,1 kg củ bình vôi đỏ đợc thái mỏng, sấy khô ở nhiệt độ 60oC, xay nhỏ thu đợc 700 g bột khô. 350 g bột củ bình vôi khô đợc chiết bằng Soxhlet với EtOH. Cô khô dịch chiết, xử lý bằng axit HCl 10%. Phần không tan trong axit đợc loại ra bằng cách chiết với ete etylic. Kết tủa ancaloit bằng NH4OH, chiết bằng CH2Cl2thu đợc 4,5 g ancaloit tổng. Sắc ký cột trên silicagel theo tỷ lệ 40 g/ 2,5 g ancaloit tổng với hệ dung môi n-hexan với lợng EtOAc tăng dần 5%, 10%, 50%, 100%, thu đợc crebanin I (Rf= 0,3), stephanin II (Rf= 0,36), III (Rf= 0,7). Crebanin (I) MS m/z: 339 [M]+(65%) 1H-NMR (250 MHz, CDCl3); (ppm) 2,3 (1H, dd, J = 1,45) v 15 Hz, H-7a); 2,45 (2H, m, H-5); 2,55 (3H, s, N-CH3); 3,07 (2H, m, H-4); 3,13 (1H, dd, J = 1,45) v 4,5 Hz, H-6a); 3,7 (1H, dd, J = 4,5) v 14,5 Hz, H-7b); 3,85 (3H, s, OCH3); 3,9 (3H, s, OCH3); 5,9 v 6,08 (2ì1H, 2ìd, J = 1,4 Hz, O-CH2-O); 6,52 (1H, s, H-3); 6,88 (1H, d, J = 9 Hz, H-10); 7,8 (1H, d, J = 9 Hz, H-11). 13C-NMR (75 MHz, CDCl3): 27,01 (C-7); 29,2 (C-4); 44 (N-Me); 53,7 (C-5); 55,9 (O-Me); 62,03 (C-6a); 100,7 (O-CH2-O); 106,9 (C-3); 110,4 (C-10); 116,6 (C-11b); 123 (C-11); 124,7 (C-11a); 126,5 (C-3a); 126,6 (C-6b); 129,8 (C-7a); 142,2 (C-1); 146 (C-2); 146,7 (C-9); 152,1(C-8). Stephanin (II): MS m/z: 309 [M]+(60%) 1H-NMR (250 MHz, CDCl3): (ppm) 2,2 (1H, dd, J = 15 v 15 Hz, H-7a); 2,48 (2H, m, H-5); 2,58 (3H, s-N-CH3); 3,07 (2H, m, H-4); 3,15 (1H, dd, J = 15 v 4,5 Hz, H-6a); 3,67 (1H, dd, J = 4,5 v 15 Hz, H-7b); 3,85 (3H, s, OCH3); 5,9 v 6,07 (2ì1H, 2ìd, J = 1,4 Hz, O-CH2-O); 6,55 (1H, s, H-3); 6,83 (1H, dd, J = 7,9 v 1,1 Hz, H-9); 7,26 (1H, dd, J = 7,9 v 7,9 Hz, H-10); 7,75 (1H, dd, J = 7,9 v 1,1 Hz, H-11). 13C-NMR (75 MHz, CDCl3): 25,9 (C-7); 29,2 (C-4); 44 (N-Me); 53,6 (C-5); 55,5 (O-Me); 61,8 (C-6a); 100,7 (O-CH2-O); 107,5 (C-3); 109,6 (C-9); 116,5 (C-11b); 119,4 (C-11); 123,8 (C-11a); 126,4 (C-3a); 126,9 (C-6b); 127 (C-10); 132,1 (C-7a); 142,7 (C-1); 146,5 (C-2); 156,2 (C-8). Ti liệu tham khảo 1. J. P. Bartley et al. Phytochemistry, 36, 1330 (1994). 2. Jun-Ichi Kunitomo. Phytochemistry, 19, P. 2735 - 2739 (1980). MeOMeHOONOMe33a45789101111a11b6a6bI: CrebaninMeHOONOMeII: Stephanin 6 . nhiều loibình vôi, song phần nghiên cứu thnh phần hóa học của chúng còn cha hon chỉnh. Với mục đích nghiên cứu thnh phần hóa học các loibình vôi ở Việt. 4Tạp chí Hóa học, T. 38, số 4, Tr. 4 - 5, 2000 Nghiên cứu thành phần hóa học một loài bình vôi phía bắc Việt Nam Đến Tòa soạn