Xác định kiểu cách cư trú và gen độc lực của staphylococcus aureus ở nhóm người làm việc tại một số cơ sở dịch vụ ăn ux

160 841 0
Xác định kiểu cách cư trú và gen độc lực của staphylococcus aureus ở nhóm người làm việc tại một số cơ sở dịch vụ ăn ux

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

Thông tin tài liệu

khóa luận, tiểu luận, chuyên đề, đề tài, luận văn

BỘ GIÁO DỤC ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI LÊ KHÁNH TRÂM LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC Hà Nội - 2013 BỘ GIÁO DỤC ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI LÊ KHÁNH TRÂM Chuyên ngành: Vi sinh y học Mã số: 62720115 LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC Người hướng dẫn khoa học: PGS. TS. ĐINH HỮU DUNG PGS. TS. NGUYỄN TRUNG Hà Nội - 2013 Lời cám ơn Để hoàn thành luận án này, tôi đã nhận được rất nhiều sự giúp đỡ của các thày giáo, bạn bè, đồng nghiệp gia đình. Tôi xin bày tỏ lòng kính trọng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Đinh Hữu Dung, PGS.TS. Nguyễn Trung, những người thày đã trực tiếp hướng dẫn tạo điều kiện thuận lợi cho tôi trong quá trình thực hiện luận án. Tôi xin trân trọng cảm ơn PGS.TS. Lê Văn Phủng, Trưởng Bộ môn Vi sinh Trường Đại học Y Hà Nội, PGS.TS. Nguyễn Thị Vinh, TS. Phạm Hồng Nhung, TS. Lê Văn Duyệt, ThS. Văn Đình Tráng hướng dẫn đóng góp cho tôi những ý kiến quý báu trong suốt quá trình học tập, nghiên cứu. Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn CN. Nguyễn Thị Minh Thư, CN. Thị Hồ Vân, KTV. Lê Thị Hải, KTV. Phạm Thị Vinh, những người đã giúp đỡ tận tình trong quá trình thực hiện nghiên cứu. Tôi xin trân trọng cám ơn Ban Giám hiệu, Phòng Đào tạo Sau đại học, các thày giáo Bộ môn Vi sinh, Trường Đại học Y Hà Nội đã trang bị kiến thức, tạo điều kiện, giúp đỡ cho tôi trong thời gian học tập tại trường. Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn tới Ban Giám đốc Bệnh viện Bạch Mai, Ban Lãnh đạo tập thể Khoa Vi sinh Bệnh viện Bạch Mai đã tạo điều kiện động viên tôi học tập tốt. Tôi xin chân thành cảm ơn Ban Giám đốc Tập thể khoa xét nghiệm Bệnh viện Nhiệt đới Trung ương, Trung tâm Y tế Dự phòng Hà Nội, Trung tâm Y tế Quận Đống Đa, các nhân viên của các sở dịch vụ ăn uống tham gia nghiên cứu, đã giúp đỡ tôi thực hiện nghiên cứu, thu thập số liệu phục vụ luận án này. Tôi vô cùng biết ơn những người thân trong gia đình bạn bè thân thiết đã động viên, hỗ trợ tôi cả về tinh thần vật chất trong suốt quá trình học tập, nghiên cứu. Hà Nội, tháng 8 năm 2013 Lê Khánh Trâm CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan, đây là công trình nghiên cứu do tôi chủ trì thực hiện dưới sự hướng dẫn của PGS.TS Đinh Hữu Dung PGS.TS Nguyễn Trung. Các số liệu trong luận án là trung thực kết quả nghiên cứu chưa từng được ai công bố trong bất kỳ công trình nào khác. Tác giả Lê Khánh Trâm MỤC LỤC Lời cam đoan Mục lục Chữ viết tắt Danh mục bảng Danh mục biểu đồ Danh mục hình CHỮ VIẾT TẮT A: Adenine bp: Base pair (cặp bazơ) C: Cytosine DNA: Deoxyribonucleic acid dNTP: Deoxyribonucleotid triphosphate ELISA: Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (Phản ứng miễn dịch gắn enzyme) EFT: Exfoliatin toxin G Guanine MLST: Multi-locus sequence typing (Giải trình tự gen nhiều locus) MRSA: Methicillin resistant Staphylococcus aureus (Tụ cầu vàng kháng methicillin) PCR: Polymerase Chain Reaction (Phản ứng trùng hợp chuỗi) RFLP: Restriction fragment length polymorphism (Kỹ thuật xác định tính đa hình chiều dài đoạn cắt giới hạn) SE: Staphyloccocal enterotoxin (Độc tố ruột của tụ cầu) T: Thymine TNF: Tumor necrosis factor (Yếu tố hoại tử u) TSST: Toxic shock syndrome toxin (Độc tố gây hội chứng shock nhiễm độc) DANH MỤC BẢNG DANH MỤC HÌNH 10 ĐẶT VẤN ĐỀ Staphylococcus aureusmột trong những vi khuẩn hay gặp nhất trên thể người, nó cũng là căn nguyên của nhiều loại nhiễm trùng khác nhau. S. aureus thể gây nhiễm trùng ngoài da, ngộ độc thực phẩm, viêm tủy xương, nhiễm khuẩn huyết…Tùy vào mức độ loại nhiễm trùng mà biểu hiện trên lâm sàng khác nhau. S. aureus là thành viên của hệ vi khuẩn người. Khoảng 30% người khoẻ mạnh mang S. aureus. S. aureus được phát hiện thấy nhiều vùng của thể như da vùng cổ, ngực, bụng, bàn tay…và một số hốc tự nhiên trên thể. Vị trí trú hay gặp nhất của S. aureus là lỗ mũi trước. S. aureus thể trú thường xuyên, không thường xuyên không trú trên thể người. Khi tổn thương da, niêm mạc, sức đề kháng của thể suy giảm thì các nhiễm trùng do S. aureus dễ dàng xuất hiện. Sự mặt số lượng S. aureus trên thể phụ thuộc vào tình trạng vệ sinh, miễn dịch, nhiều yếu tố khác của thể vật chủ cũng như của vi khuẩn [6]. Phần lớn các chủng S. aureus đều một hoặc một số gen độc lực liên quan đến những tình trạng nhiễm trùng bệnh lý khác nhau. Một số gen chịu trách nhiệm sản xuất các độc tố ruột (Staphylococcal enterotoxins-SE), gen liên quan đến hội chứng sốc nhiễm độc (Toxic shock syndrome toxin 1- tsst1), gen mã hóa coagulase gây đông huyết tương . Ngoài ra, nhiều gen khác chịu trách nhiệm việc S. aureus kháng lại nhiều kháng sinh một số kiểu gen của S. aureus cũng liên quan đến những bệnh cảnh lâm sàng đặc thù do vi khuẩn này gây ra [57]. Trên thế giới, ngày càng nhiều nghiên cứu dịch tễ học phân tử của S. aureus mối liên quan giữa các yếu tố độc lực, các kiểu gen cũng như vai trò của các yếu tố này với tình trạng nhiễm trùng kháng kháng sinh của của S. aureus [9]. . ‘ Xác định kiểu cách cư trú và gen độc lực của Staphylococcus aureus ở nhóm người làm việc tại một số cơ sở dịch vụ ăn uống” với hai mục tiêu sau: 1. Xác. 1. Xác định tỷ lệ mang, kiểu cách cư trú của S. aureus ở mũi và tay của nhóm người làm việc tại một số cơ sở dịch vụ ăn uống tại Hà Nội. 2. Xác định sự

Ngày đăng: 24/10/2013, 09:59

Hình ảnh liên quan

Hình 1.1: - Xác định kiểu cách cư trú và gen độc lực của staphylococcus aureus ở nhóm người làm việc tại một số cơ sở dịch vụ ăn ux

Hình 1.1.

Xem tại trang 15 của tài liệu.
Hình 1.2: Tỷ lệ mang S. aureu sở các vị trí khác nhau trên quần thể người bình thường  và trên nhóm người  mang S - Xác định kiểu cách cư trú và gen độc lực của staphylococcus aureus ở nhóm người làm việc tại một số cơ sở dịch vụ ăn ux

Hình 1.2.

Tỷ lệ mang S. aureu sở các vị trí khác nhau trên quần thể người bình thường và trên nhóm người mang S Xem tại trang 19 của tài liệu.
Hình 1.3: Các yếu tố độc lực của Staphylococcus aureus [5] 1.4.2.2. Độc tố gây hội chứng sốc nhiễm độc (Toxic shock syndrome toxin-TSST) - Xác định kiểu cách cư trú và gen độc lực của staphylococcus aureus ở nhóm người làm việc tại một số cơ sở dịch vụ ăn ux

Hình 1.3.

Các yếu tố độc lực của Staphylococcus aureus [5] 1.4.2.2. Độc tố gây hội chứng sốc nhiễm độc (Toxic shock syndrome toxin-TSST) Xem tại trang 22 của tài liệu.
Hình 1.4: Cấu trúc của gen mã hoá coagulase và vị trí của nó  trên nhiễm sắc thể [50] - Xác định kiểu cách cư trú và gen độc lực của staphylococcus aureus ở nhóm người làm việc tại một số cơ sở dịch vụ ăn ux

Hình 1.4.

Cấu trúc của gen mã hoá coagulase và vị trí của nó trên nhiễm sắc thể [50] Xem tại trang 27 của tài liệu.
Hình 1.5: So sánh vị trí cắt của AluI giữa chủng S. aureu sA và chủng S. aureus B, vị trí gắn của các primer 1, 2, 3, 4, trong phản ứng PCR [50]. - Xác định kiểu cách cư trú và gen độc lực của staphylococcus aureus ở nhóm người làm việc tại một số cơ sở dịch vụ ăn ux

Hình 1.5.

So sánh vị trí cắt của AluI giữa chủng S. aureu sA và chủng S. aureus B, vị trí gắn của các primer 1, 2, 3, 4, trong phản ứng PCR [50] Xem tại trang 28 của tài liệu.
Bảng 1.2: Vị trí di truyền của một số gen sinh độc tố ruột của S. aureus [61] - Xác định kiểu cách cư trú và gen độc lực của staphylococcus aureus ở nhóm người làm việc tại một số cơ sở dịch vụ ăn ux

Bảng 1.2.

Vị trí di truyền của một số gen sinh độc tố ruột của S. aureus [61] Xem tại trang 29 của tài liệu.
Hình 1.6: Vị trí nhiễm trùng và các bệnh do S. aureus gây ra [5] - Xác định kiểu cách cư trú và gen độc lực của staphylococcus aureus ở nhóm người làm việc tại một số cơ sở dịch vụ ăn ux

Hình 1.6.

Vị trí nhiễm trùng và các bệnh do S. aureus gây ra [5] Xem tại trang 32 của tài liệu.
Hình 2.1: Sơ đồ phân lập, xác định S. aureus - Xác định kiểu cách cư trú và gen độc lực của staphylococcus aureus ở nhóm người làm việc tại một số cơ sở dịch vụ ăn ux

Hình 2.1.

Sơ đồ phân lập, xác định S. aureus Xem tại trang 52 của tài liệu.
Bảng 2.1: Trình tự các mồi của các gen se [103] - Xác định kiểu cách cư trú và gen độc lực của staphylococcus aureus ở nhóm người làm việc tại một số cơ sở dịch vụ ăn ux

Bảng 2.1.

Trình tự các mồi của các gen se [103] Xem tại trang 60 của tài liệu.
Bảng 2.3: Chu trình nhiệt của phản ứng PCR dùng cho các cặp mồi SEG - Xác định kiểu cách cư trú và gen độc lực của staphylococcus aureus ở nhóm người làm việc tại một số cơ sở dịch vụ ăn ux

Bảng 2.3.

Chu trình nhiệt của phản ứng PCR dùng cho các cặp mồi SEG Xem tại trang 61 của tài liệu.
Bảng 2.4: Thành phần phản ứng đối với ống chuẩn - Xác định kiểu cách cư trú và gen độc lực của staphylococcus aureus ở nhóm người làm việc tại một số cơ sở dịch vụ ăn ux

Bảng 2.4.

Thành phần phản ứng đối với ống chuẩn Xem tại trang 62 của tài liệu.
Hình 2.2: Kết quả giải trình tự gen sec - Xác định kiểu cách cư trú và gen độc lực của staphylococcus aureus ở nhóm người làm việc tại một số cơ sở dịch vụ ăn ux

Hình 2.2.

Kết quả giải trình tự gen sec Xem tại trang 63 của tài liệu.
Bảng 3.3: Phân bố đối tượng nghiên cứu theo vị trí làm việc - Xác định kiểu cách cư trú và gen độc lực của staphylococcus aureus ở nhóm người làm việc tại một số cơ sở dịch vụ ăn ux

Bảng 3.3.

Phân bố đối tượng nghiên cứu theo vị trí làm việc Xem tại trang 68 của tài liệu.
Bảng 3.5. Phân bố các chủng S. aureus theo các lần và vị trí lấy mẫu ở 53 nhân viên có mẫu dương tính - Xác định kiểu cách cư trú và gen độc lực của staphylococcus aureus ở nhóm người làm việc tại một số cơ sở dịch vụ ăn ux

Bảng 3.5..

Phân bố các chủng S. aureus theo các lần và vị trí lấy mẫu ở 53 nhân viên có mẫu dương tính Xem tại trang 69 của tài liệu.
Bảng 3.8: Tỷ lệ mang S. aureus theo giới - Xác định kiểu cách cư trú và gen độc lực của staphylococcus aureus ở nhóm người làm việc tại một số cơ sở dịch vụ ăn ux

Bảng 3.8.

Tỷ lệ mang S. aureus theo giới Xem tại trang 72 của tài liệu.
Bảng 3.10: Tỷ lệ mang S. aureus theo vị trí làm việc - Xác định kiểu cách cư trú và gen độc lực của staphylococcus aureus ở nhóm người làm việc tại một số cơ sở dịch vụ ăn ux

Bảng 3.10.

Tỷ lệ mang S. aureus theo vị trí làm việc Xem tại trang 73 của tài liệu.
Bảng 3.14: Tỷ lệ mang S. aureu sở tay - Xác định kiểu cách cư trú và gen độc lực của staphylococcus aureus ở nhóm người làm việc tại một số cơ sở dịch vụ ăn ux

Bảng 3.14.

Tỷ lệ mang S. aureu sở tay Xem tại trang 78 của tài liệu.
Bảng 3.18: Tỷ lệ mang S. aureu sở tay theo thâm niên công tác - Xác định kiểu cách cư trú và gen độc lực của staphylococcus aureus ở nhóm người làm việc tại một số cơ sở dịch vụ ăn ux

Bảng 3.18.

Tỷ lệ mang S. aureu sở tay theo thâm niên công tác Xem tại trang 80 của tài liệu.
Bảng 3.22: Tỷ lệ mang S. aureu sở mũi hoặc tay theo vị trí làm việc - Xác định kiểu cách cư trú và gen độc lực của staphylococcus aureus ở nhóm người làm việc tại một số cơ sở dịch vụ ăn ux

Bảng 3.22.

Tỷ lệ mang S. aureu sở mũi hoặc tay theo vị trí làm việc Xem tại trang 82 của tài liệu.
Kết quả ở hình 3.2 cho thấy, các chủng có 3 sản phẩm cắt có kích cỡ - Xác định kiểu cách cư trú và gen độc lực của staphylococcus aureus ở nhóm người làm việc tại một số cơ sở dịch vụ ăn ux

t.

quả ở hình 3.2 cho thấy, các chủng có 3 sản phẩm cắt có kích cỡ Xem tại trang 84 của tài liệu.
Hình 3.1: Kết quả điện di các sản phẩm thu được sau PCR vòng 2 xác định gen coagulase - Xác định kiểu cách cư trú và gen độc lực của staphylococcus aureus ở nhóm người làm việc tại một số cơ sở dịch vụ ăn ux

Hình 3.1.

Kết quả điện di các sản phẩm thu được sau PCR vòng 2 xác định gen coagulase Xem tại trang 85 của tài liệu.
M: Marker, NC: Chứng âm, Các số và chữ ký hiệu khác là mã số các chủng S. aureus - Xác định kiểu cách cư trú và gen độc lực của staphylococcus aureus ở nhóm người làm việc tại một số cơ sở dịch vụ ăn ux

arker.

NC: Chứng âm, Các số và chữ ký hiệu khác là mã số các chủng S. aureus Xem tại trang 85 của tài liệu.
Bảng 3.26: Tỷ lệ chung mang gen mã hóa độc tố ruột của S. aureus - Xác định kiểu cách cư trú và gen độc lực của staphylococcus aureus ở nhóm người làm việc tại một số cơ sở dịch vụ ăn ux

Bảng 3.26.

Tỷ lệ chung mang gen mã hóa độc tố ruột của S. aureus Xem tại trang 88 của tài liệu.
được minh họa bằng các hình 3.3, 3.4, 3.5 và 3.6. - Xác định kiểu cách cư trú và gen độc lực của staphylococcus aureus ở nhóm người làm việc tại một số cơ sở dịch vụ ăn ux

c.

minh họa bằng các hình 3.3, 3.4, 3.5 và 3.6 Xem tại trang 90 của tài liệu.
Hình 3.3: Kết quả điện di sản phẩm PCR gen seb của một số chủng S. aureus - Xác định kiểu cách cư trú và gen độc lực của staphylococcus aureus ở nhóm người làm việc tại một số cơ sở dịch vụ ăn ux

Hình 3.3.

Kết quả điện di sản phẩm PCR gen seb của một số chủng S. aureus Xem tại trang 90 của tài liệu.
Hình 3.4: Kết quả điện di sản phẩm PCR gen sei của một số chủng S. aureus - Xác định kiểu cách cư trú và gen độc lực của staphylococcus aureus ở nhóm người làm việc tại một số cơ sở dịch vụ ăn ux

Hình 3.4.

Kết quả điện di sản phẩm PCR gen sei của một số chủng S. aureus Xem tại trang 91 của tài liệu.
Hình 3.6: Kết quả điện di sản phẩm PCR gen sec        của một số chủng S. aureus - Xác định kiểu cách cư trú và gen độc lực của staphylococcus aureus ở nhóm người làm việc tại một số cơ sở dịch vụ ăn ux

Hình 3.6.

Kết quả điện di sản phẩm PCR gen sec của một số chủng S. aureus Xem tại trang 92 của tài liệu.
Hình 3.5: Kết quả điện di sản phẩm PCR gen seg của một số chủng S. aureus - Xác định kiểu cách cư trú và gen độc lực của staphylococcus aureus ở nhóm người làm việc tại một số cơ sở dịch vụ ăn ux

Hình 3.5.

Kết quả điện di sản phẩm PCR gen seg của một số chủng S. aureus Xem tại trang 92 của tài liệu.

Từ khóa liên quan

Tài liệu cùng người dùng

  • Đang cập nhật ...

Tài liệu liên quan