CÁC THỬ NGHIỆM SINH HÓA - Sau khi nuôi cấy trên các môi trường chọn lọc, môi trường phân biệt  thu được các khuẩn lạc đơn thuần khiết bằng các kỹ thuật phân lập. - Chủng thuần là yêu cầu cho việc định danh các vi sinh vật. CÁC THỬ NGHIỆM SINH HÓA Việc định danh: - Các đặc điểm về hình thái - Các phản ứng sinh hóa thực hiện bởi các chủng vi sinh vật.  Kết quả:  Vi khuẩn Gram (+) bắt màu tím  Vi khuẩn Gram (-) bắt màu đỏ. CÁC THỬ NGHIỆM SINH HÓA Có ba cách tiếp cận để thực hiện các thử nghiệm sinh hóa dùng cho mục đích định danh 1) Cách truyền thống 2) Sử dụng các bộ kit 3) Dùng thiết bị tự động. CÁC THỬ NGHIỆM SINH HÓA  Các kết quả thử nghiệm sinh hóa của hàng trăm loài vi sinh vật được tổng hợp thành những Bảng sinh hóa định danh vi sinh vật.  Bảng bao gồm các đặc điểm sinh hóa đặc trưng nhất để phân biệt các loài vi sinh vật gây bệnh thường gặp. Mỗi đặc điểm sinh hóa được biểu thị một trị số là tỷ lệ phần trăm thử nghiệm sinh hóa cho kết quả dương tính theo thống kê ở một loài vi sinh vật. CÁC THỬ NGHIỆM SINH HÓA  Các đặc điểm sinh hóa có trị số dao động ở mức 50% không có giá trị trong việc định danh.  Trong thực tế kiểm nghiệm, các kết quả thử nghiệm sinh hóa biểu thị qui ước bằng các ký hiệu như:  (+) : dương tính  (-) : âm tính  (+/-) : khoảng trên 70% là dương tính  (-/+) : khoảng trên 70% là âm tính.  Trong các thử nghiệm này, để đảm bảo chính xác trong việc đọc kết quả, người ta thường thực hiện thử nghiệm trên các chủng đối chứng. 1.Thử nghiệm bằng phép thử catalase 1.1.Nguyên tắc - Các vi sinh vật hiếu khí và kỵ khí tùy tiện chứa chuỗi truyền điện tử có cytochrome đều có enzyme catalase, có khả năng biến dưỡng năng lượng theo phương thức hô hấp với oxy tạo ra H 2 O 2 . - Catalase thủy phân H 2 O 2 thành H 2 O và O 2 , ngăn cản sự tích tụ phân tử có độc tính cao này trong tế bào. - Sự thủy phân H 2 O 2 sẽ giải phóng O 2 được ghi nhận qua hiện tượng sủi bọt khí. 1.Thử nghiệm bằng phép thử catalase . động. CÁC THỬ NGHIỆM SINH HÓA  Các kết quả thử nghiệm sinh hóa của hàng trăm loài vi sinh vật được tổng hợp thành những Bảng sinh hóa định danh vi sinh vật các thử nghiệm này, để đảm bảo chính xác trong việc đọc kết quả, người ta thường thực hiện thử nghiệm trên các chủng đối chứng. 1 .Thử nghiệm bằng phép thử