Đang tải... (xem toàn văn)
Nội dung của bài viết trình bày về sử dụng Probiotic trong việc điều trị các bệnh nhiễm khuẩn, đánh giá khả năng làm thay đổi số lượng vi khuẩn sinh hợp chất sulfur bay hơi trên bề mặt lưng lưỡi sau khi ăn sữa chua chứa probiotic trong 2 tuần, so sánh với sữa chua không có bổ sung probiotic.
Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ bản của Số 1 * 2014 Nghiên cứu Y học ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG LÀM THAY ĐỔI SỐ LƯỢNG VI KHUẨN SINH HỢP CHẤT SULFUR BAY HƠI TRÊN BỀ MẶT LƯNG LƯỠI CỦA SỮA CHUA CHỨA PROBIOTIC Võ Mạnh Hùng*, Đặng Vũ Ngọc Mai*, Huỳnh Cơng Nhật Nam* TĨM TẮT Mở đầu: Probiotic đã được sử dụng trong nhiều lĩnh vực y khoa, bao gồm cả việc điều trị các bệnh nhiễm khuẩn. Chúng được cho là có khả năng làm giảm một số nguy cơ gây ra bệnh răng miệng. Một số lồi vi khuẩn trong miệng có khả năng sinh ra các hợp chất sulfur bay hơi trong q trình chuyển hóa, là ngun nhân gây ra mùi khó chịu ở miệng Mục tiêu: Nghiên cứu được thực hiện nhằm đánh giá khả năng làm thay đổi số lượng vi khuẩn sinh hợp chất sulfur bay hơi trên bề mặt lưng lưỡi sau khi ăn sữa chua chứa probiotic trong 2 tuần, so sánh với sữa chua khơng có bổ sung probiotic. Đối tượng ‐ Phương pháp: Nghiên cứu thử nghiệm lâm sàng, ngẫu nhiên, mù đơi, bắt chéo. 15 đối tượng nghiên cứu được chia ngẫu nhiên làm 2 nhóm: nhóm I và nhóm II; và trải qua một quy trình nghiên cứu gồm 4 giai đoạn. Giai đoạn 1 và 3, hai nhóm trải qua thời kỳ rửa trong vòng 1 tuần. Ở giai đoạn 2, nhóm I ăn sữa chua thường (khơng chứa probiotic), nhóm II ăn sữa chua chứa probiotic trong 2 tuần. Đến giai đoạn 4, hai nhóm đổi loại sữa chua. Trước và sau giai đoạn 2 và 4, lấy mẫu mảng bám trên bề mặt lưng lưỡi các đối tượng nghiên cứu, sau đó pha lỗng, ni cấy trong mơi trường thạch chọn lọc. Số lượng vi khuẩn sinh hợp chất sulfur bay hơi trên bề mặt lưng lưỡi được đếm qua số lượng khúm vi khuẩn màu nâu hoặc đen trên bề mặt thạch. Kết quả: Số lượng vi khuẩn sinh hợp chất sulfur bay hơi trên bề mặt lưng lưỡi giảm có ý nghĩa thống kê ở nhóm ăn sữa chua chứa probiotic trong 2 tuần (p = 0,003). Trong khi đó, ở nhóm ăn sữa chua thường, số lượng vi khuẩn sinh hợp chất sulfur bay hơi tăng khơng có ý nghĩa thống kê (p = 0,776). Kết luận: Số lượng vi khuẩn sinh hợp chất sulfur bay hơi trên bề mặt lưng lưỡi giảm có ý nghĩa sau khi ăn sữa chua chứa probiotic trong 2 tuần. Từ khóa: probiotic, VSCs, sữa chua. ABSTRACT THE EFFECT OF PROBIOTIC‐CONTAINING YOGURT ON THE NUMBER OF VOLATILE SULFUR COMPOUNDS‐PRODUCING BACTERIA ON THE DORSAL SURFACE OF TONGUE Vo Manh Hung, Dang Vu Ngoc Mai, Huynh Cong Nhat Nam * Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 18 ‐ Supplement of No 1 ‐ 2014: 347 ‐ 351 Background: The probiotic bacteria are used in many medical indications, including the treatment of disease caused by bacteria. They are thought to reduce the risk of some oral diseases. Some bacteria produce volatile sulfur compounds during their metabolism, which cause oral malodor. Objectives: The aim of the study was to assess the effect of probiotic‐containing yogurt on the number of volatile sulfur compounds‐producing bacteria on the dorsal surface of tongue after 2 weeks of daily eating. Method: A double‐blind, randomized, cross‐over study was performed. 15 healthy subjects were randomized into two groups: I and II. They followed over four periods. Periods 1 and 3 were 1‐week wash‐out periods. During * Khoa Răng Hàm Mặt, Đại Học Y Dược TP HCM Tác giả liên lạc: BS. Võ Mạnh Hùng ĐT: 0986969471 Răng Hàm Mặt Email: vomanhhung.rhm@gmail.com 347 Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ bản của Số 1 * 2014 period 2, the subjects in group I were given normal yogurt (non‐probiotic) and the subjects in group II were given probiotic‐containing probiotic for 2 weeks (200g daily). Being cross‐over study, the yogurts were interchanged in the two group in period 4. At the beginning and the ending of the periods 2 and 4, the plaque sample on the dorsal surface of tongue was taken, diluted and cultured on selective bacteria growth media. The number of volatile sulfur compounds‐producing bacteria on the dorsal surface of tongue were counted by the number of black or brown colonies on the media. Results: A statistically significant decrease (p = 0.003) of the number of volatile sulfur compounds‐ producing bacteria on the dorsal surface of tongue was recorded in the group using probiotic‐containing yogurt. While in the group using normal yogurt, a statistically non‐significant increase (p = 0.776) of the number of volatile sulfur compounds‐producing bacteria was recorded. Conclusion: The number of volatile sulfur compounds‐producing bacteria on the dorsal surface of tongue decreased statistically after 2 weeks of daily eating probiotic‐containing yogurt. Keywords: probiotic, VSCs, yogurt. ĐẶT VẤN ĐỀ Một trong những vấn đề răng miệng được quan tâm hiện nay chính là hơi miệng. Ngun nhân chính gây hơi miệng là do vi khuẩn có khả năng sinh ra các hợp chất sulfur bay hơi có mùi trong miệng, chủ yếu là những vi khuẩn trên bề mặt lưng lưỡi. Ngày nay, probiotic cũng như liệu pháp probiotic được các nhà khoa học nhắc tới như một cách thức mới góp phần kiểm sốt một số bệnh răng miệng. Probiotic, hay còn gọi là lợi khuẩn, được định nghĩa là những tổ chức vi sinh vật sống, có khả năng đem lại lợi ích cho sức khỏe con người khi được cung cấp một lượng nhất định(3). Một trong những sản phẩm chứa probiotic thơng dụng chính là sữa chua. Sữa chua đã được chứng minh có ảnh hưởng tốt đến sức khỏe con người thơng qua cơ chế giữ hệ vi sinh vật cân bằng trong ruột hay cơ chế cạnh tranh giữa các vi khuẩn trong sữa chua với các vi khuẩn có hại(2). Sữa chua chứa lợi khuẩn cũng có hiệu quả nhất định lên hệ vi khuẩn trong miệng, giúp cải thiện tình trạng bệnh lý vùng miệng như nha chu, sâu răng, hôi miệng Caglar (2005) đã thực hiện một nghiên cứu ngẫu nhiên, mù đôi, bắt chéo trên 26 đối tượng, sử dụng sữa chua chứa Bifidobacterium animalis trong 2 tuần, cho thấy sữa chua có khả năng làm giảm số lượng 348 Streptococcus mutans và lactobacilli trong nước bọt(1). Đến nay, chưa có một nghiên cứu về khả năng của sữa chua chứa probiotic sản xuất tại Việt Nam làm thay đổi các chỉ số liên quan đến tình trạng hơi miệng. Nghiên cứu được thực hiện nhằm đánh giá khả năng làm thay đổi số lượng vi khuẩn sinh hợp chất sulfur bay hơi trên bề mặt lưng lưỡi sau khi ăn sữa chua chứa probiotic trong 2 tuần, so sánh với sữa chua khơng có bổ sung probiotic với 2 mục tiêu cụ thể sau: ‐ So sánh số lượng vi khuẩn sinh hợp chất sulfur bay hơi trên bề mặt lưng lưỡi trước và sau khi ăn sữa chua chứa và không chứa probiotic trong 2 tuần. ‐ So sánh sự thay đổi số lượng vi khuẩn sinh hợp chất sulfur bay hơi trên bề mặt lưng lưỡi giữa hai nhóm ăn hai loại sữa chua. ĐỐI TƯỢNG ‐ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng nghiên cứu Tiêu chuẩn chọn mẫu: Khỏe mạnh, khơng có bệnh tồn thân; khơng có bệnh vùng miệng (sâu răng, viêm nướu từ trung bình đến nặng, viêm nha chu, các bệnh viêm nhiễm vùng miệng, khơ miệng ); khơng sử dụng kháng sinh trong vòng 1 tháng trước khi tham gia nghiên cứu; khơng mang phục hình, khí cụ chỉnh hình; khơng hút thuốc; khơng dị ứng với sữa và các sản phẩm từ sữa. Chun Đề Mắt – Tai Mũi Họng – Răng Hàm Mặt Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ bản của Số 1 * 2014 Trong suốt thời gian thực hiện nghiên cứu, loại trừ các đối tượng sử dụng kháng sinh, đồ uống có cồn; có điều trị các bệnh tồn thân hay bệnh răng miệng. Mẫu nghiên cứu cuối cùng gồm 15 sinh viên khoa Răng Hàm Mặt, độ tuổi từ 18‐24. Phương pháp nghiên cứu Thiết kế nghiên cứu: nghiên cứu thử nghiệm lâm sàng, ngẫu nhiên, mù đơi, bắt chéo. Quy trình nghiên cứu: Nghiên cứu gồm 2 lần thử nghiệm với 1 thời kỳ rửa trước lần thử nghiệm đầu tiên và 1 thời kỳ rửa xen kẽ 15 đối tượng được chia ngẫu nhiên làm 2 nhóm: nhóm I gồm 8 người, nhóm II gồm 7 người. Giai đoạn 1: là thời kỳ rửa trước lần thử nghiệm đầu tiên 7 ngày trước khi lấy mẫu lần 1, các đối tượng được cung cấp một tờ cẩm nang hướng dẫn, bàn chải khơng có mặt chải lưỡi và kem đánh răng khơng có chất kháng khuẩn, khơng sử dụng thêm các biện pháp vệ sinh răng miệng khác như nước súc miệng, chải lưỡi. Lần lấy mẫu 1: Kể từ lần chải răng cuối cùng tối hôm trước đến buổi sáng lấy mẫu, các đối tượng không vệ sinh răng miệng, không ăn, khơng uống bất kì loại nước nào trừ nước lọc. Các đối tượng được lấy mẫu mảng bám trên bề mặt lưng lưỡi. Dùng bàn chải răng vô khuẩn đặt trên lưng lưỡi, sao cho đầu bàn chải ở đỉnh V lưỡi, ấn bàn chải nhưng không kéo bàn chải di chuyển. Hòa lượng mảng bám dính trên bàn chải vào 20ml dung dịch nước cất vơ trùng đựng trong ống nghiệm. Chuyển các mẫu vào phòng xét nghiệm vi sinh. Nghiên cứu Y học Các đối tượng được nhận sữa chua và ăn mỗi ngày 2 lần, mỗi lần 1 hộp, khối lượng 100g, sau bữa trưa và bữa tối trong 14 ngày tiếp theo. Các hộp sữa chua được che nhãn hiệu bằng decal để đối tượng nghiên cứu khơng biết đang ăn loại sữa chua nào. Nhóm I ăn sữa chua thơng thường, nhóm II ăn sữa chua chứa probiotic. Lần lấy mẫu 2: thực hiện vào buổi sáng sau khi kết thúc 14 ngày ăn sữa chua. Cách thực hiện tương tự lần lấy mẫu 1. Giai đoạn 3: là thời kỳ rửa xen kẽ Tất cả các đối tượng nghiên cứu lặp lại quá trình rửa tương tự giai đoạn 1. Lần lấy mẫu 3: thực hiện vào buổi sáng sau khi kết thúc 7 ngày của giai đoạn 3. Giai đoạn 4: là lần thử nghiệm lần thứ 2 Thực hiện tương tự giai đoạn 2, trong đó 2 nhóm nghiên cứu đổi loại sữa chua đã ăn trong giai đoạn 2. Lần lấy mẫu 4: thực hiện vào buổi sáng sau khi kết thúc 14 ngày của giai đoạn 4. Qui trình trong phòng xét nghiệm vi sinh Pha lỗng mẫu với tỉ lệ 1/5. Lấy 50μl dung dịch đã pha loãng cấy dàn trải lên đĩa thạch chứa môi trường nuôi cấy chọn lọc vi khuẩn sinh hợp chất sulfur bay hơi. Ủ trong mơi trường yếm khí ở 370C trong 7 ngày. Sau thời gian ủ, đếm số khúm vi khuẩn có màu nâu hoặc đen mọc trên mặt đĩa thạch. Tính ra số đơn vị tạo khúm trên mỗi đơn vị thể tích. KẾT QUẢ Số lượng vi khuẩn sinh hợp chất sulfur bay hơi trước và sau khi ăn mỗi loại sữa chua Giai đoạn 2: là lần thử nghiệm đầu tiên Bảng 1: Số đơn vị tạo khúm (x105 CFU/ml) trung bình của hai nhóm trước và sau khi ăn hai loại sữa chua. Loại sữa chua n Trước (x 105 CFU/ml) Sau (x 105 CFU/ml) p Sữa chua thường 15 52,73 ± 41,46 64,20 ± 111,92 00,776* Sữa chua probiotic 15 64,07 ± 40,07 19,07 ± 12,65 0,003* (*) Test Wilcoxon. Răng Hàm Mặt 349 Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ bản của Số 1 * 2014 Nghiên cứu Y học Đối với nhóm ăn sữa chua thường, số lượng vi khuẩn sinh hợp chất sulfur bay hơi tăng, sự thay đổi này khơng có ý nghĩa thống kê. Đối với sữa chua probiotic, số lượng vi khuẩn sinh hợp chất sulfur bay hơi giảm, sự thay đổi này rất có ý nghĩa thống kê (p