Đang tải... (xem toàn văn)
Bài giảng Huyết thanh học trình bày phản ứng vi ngưng kết (microscopic agglutination test - mat). Để hiểu rõ hơn, mời các bạn tham khảo chi tiết nội dung bài giảng.
HUYẾT THANH HỌC I PHẢN ỨNG VI NGƢNG KẾT (MICROSCOPIC AGGLUTINATION TEST- MAT) - Phản ứng phát kháng thể kháng Leptospira từ động vật nhiễm bệnh - Thời điểm lấy mẫu để chuẩn đoán phản ứng MAT - Diễn tiến bệnh gồm 02 pha: Pha Lepto huyết & Lepto niệu T NGHIỆM ĐỊNH TÍNH Chuẩn bị kháng ngun chuẩn Kiểm tra kháng nguyên trước làm phản ứng MAT (1) Nhỏ giọt ống kháng nguyên (pha loãng theo tỷ lệ 1:2 với dung dòch đệm PPS) lên lame kính (2) Kiểm tra kính hiển vi đen (3) Kháng nguyên đạt yêu cầu - Di động tốt - Nồng độ phù hợp - Không tự ngưng kết Cách tiến hành - Phản ứng MAT phản ứng kháng nguyên sống Leptospira chuẩn với kháng thể huyết XÉT NGHIỆM ĐỊNH TÍNH - Pha loãng huyết (1/50): Cho 100 μl huyết 4,9 ml dung dòch PBS & trộn - Nhỏ 50 μl kháng nguyên từ giếng - 23 -Nhỏ 50 μl huyết pha loãng vào giếng - Ủ nhiệt độ phòng 28C -Nhỏ lên lame kính 10 μl từ giếng đọc kết ngưng kết kính hiển vi đen ➱ Như vậy, độ pha loãng huyết giếng 1/100… Xác định kích thước virus Newcastle Tác động chloroform phá hủy vỏ bọc virus Newcastle TIÊM TRỨNG GIỚI THIỆU 03 ĐƢỜNG TIÊM CƠ BẢN 1) TIÊM XOANG NIỆU MÔ (Allantois) - Chuẩn bị trứng: soi trứng, đánh dấu vị trí đầu phơi - Đường tiêm ngược lại với vị trí đầu phơi - Liều tiêm 0,1 - 0,2ml/trứng - Dùng paraffin bịt lỗ, dùng băng keo Ấp trứng 37C - 24 soi trứng lần đầu, phôi chết loại bỏ trứng (do tạp trùng) Tuy nhiên lƣu ý influenza virus gây chết phôi 18 sau tiêm - Kiểm tra phôi chết vi trùng hay virus + Nước xoang niệu mô trong: phôi chết virus + Nước đục: vi trùng - Newcastle virus cường độc gây chết phôi < 60 - Sau chết, bỏ trứng vào tủ lạnh 06 cho mạch máu khô, thu họach trứng 2) TIÊM MÀNG CAM (KỸ THUẬT TẠO BUỒNG HƠI GIẢ) - Virus đậu - Chuẩn bị trứng có tuổi phơi – 11 ngày - Dùng bóp cao su hút khí từ lỗ - Soi trứng lại, đánh dấu buồng giả - Đục trứng qua vỏ cứng vỏ lụa, tránh đục thủng màng cam (nếu thủng nước trứng chảy ngoài) - Liều tiêm 0,1-0,2ml/trứng, đặt trứng nằm ngang đem ấp - Bệnh tích gây thủy thủng, dày lên, nốt pock màng cam, không làm chết phơi 3) TIÊM TÚI LỊNG ĐỎ - Tuổi phơi 4-6 ngày 6-7 ngày - Để trứng nghiêng 30-45, tránh tiêm vào phôi Thu hoạch nước trứng AI THANK YOU ... chuẩn với kháng thể huyết XÉT NGHIỆM ĐỊNH TÍNH - Pha loãng huyết (1/50): Cho 100 μl huyết 4,9 ml dung dòch PBS & trộn - Nhỏ 50 μl kháng nguyên từ giếng - 23 -Nhỏ 50 μl huyết pha loãng vào... (> 50% xoắn khuẩn ngưng kết) độ pha loãng huyết laø 1/100 XÉT NGHIỆM ĐỊNH LƢỢNG (xác định hiệu giá kháng thể) Sau có kết phản ứng MAT đònh tính, mẫu huyết dương tính với serovar tiến hành đònh... Pha loãng huyết cần đònh lượng với dung dòch đệm từ độ loaõng 1/100, 1/200, 1/400,……, 1/3200 - Thực phản ứng tƣơng tự nhƣ xét nghiệm định tính - Hiệu giá ngưng kết xác đònh độ pha loãng huyết cao