Đang tải... (xem toàn văn)
Bài viết nghiên cứu nhằm xác định tỷ lệ nhiễm các típ HPV ở cổ tử cung phụ nữ trong độ tuổi sinh đẻ. Bên cạnh đó, bài viết còn phân tích tổn thương tế bào học cổ tử cung với nhiễm HPV.
TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC XÁC ĐỊNH TÍP HPV VÀ TẾ BÀO HỌC CỔ TỬ CUNG PHỤ NỮ TUỔI SINH ĐẺ Nguyễn Ngọc Hùng1, Nguyễn Thúy Hương1, Vũ Thị Vựng1, Lê Thị Khánh Tâm2 cs Trường Đại học Y Hà Nội, 2Bệnh Viện Hữu Nghị Nhiễm HPV nguy cao gây ung thư cổ tử cung, nguyên nhân gây tử vong bệnh ác tính phụ nữ Xác định típ HPV tổn thương tế bào học đối tượng phụ nữ tuổi sinh đẻ Hải Phòng Kết xác định 48 trường hợp nhiễm HPV (chiếm 24,87%), 23 trường hợp thuộc thể không xác định (11,92%) Trong số 15 trường hợp xác định típ, có 12 trường hợp nhiễm đơn típ, trường hợp nhiễm típ (1,5%) trường hợp nhiễm típ (0,5%) Theo độ nguy cơ, có 12 trường hợp nhiễm típ nguy cao (6,26%), trường hợp nhiễm típ nguy thấp (1,51%) Chẩn đốn tế bào học (TBH) bình thường phù hợp 87,3% Đặc biệt, có trường hợp nhiễm típ nguy cao, trường hợp típ nguy thấp trường hợp nhiễm típ khác chẩn đốn TBH bình thường Còn trường hợp nhiễm típ nguy cao phân bố LSIL (3), cervicitis (3), vaginitis (3) Từ khóa: HPV, tế bào cổ tử cung, phụ nữ tuổi sinh đẻ I ĐẶT VẤN ĐỀ Trước đây, tử vong ung thư vú chiếm tỷ lệ cao nguyên nhân ung thư nữ nay, ung thư cổ tử cung nguyên nhân Một giải pháp hạn chế giảm tỷ lệ ung thư cổ tử cung phát sớm khám định kỳ sàng lọc tế bào học phối hợp định típ giải trình tự gen xác định tip HPV Các chứng liên quan nhiễm vi rút gây u nhú người (HPV) với ung thư dị sản niêm mạc cổ tử cung xác định rõ, đặc biệt nhóm vi rút có nguy cao típ 16 18 [1; 2; 5] Bộ di truyền vi rút chuỗi kép, phân tử AND vòng tạo thành khoảng 7900 cặp base Để đánh giá tổn thương tế bào học với nhiếm típ HPV cộng đồng phụ nữ tuổi sinh đẻ, nghiên cứu nhằm mục tiêu: - Xác định tỷ lệ nhiễm típ HPV cổ tử cung phụ nữ độ tuổi sinh đẻ - Phân tích tổn thương tế bào học cổ tử cung với nhiễm HPV TCNCYH 80 (3) - 2012 II ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP Đối tượng - 193 phụ nữ từ 18 đến 49 tuổi có chồng khám phụ khoa lấy tế bào cổ tử cung nhuộm PAS chẩn đoán phân loại theo mức độ tổn thương (SIL, AGUS, cervicitis, vaginitis) chẩn đốn định típ HPV giải trình tự gen - Xác định genotype HPV: thực Trung tâm kiểm sốt phòng bệnh Hàn Quốc, Viện sức khỏe Quốc gia (Korea Centers for Disease Control & Prevention National Institute of Health) - Mẫu DNA HPV dương tính sử dụng để xác định genotype kỹ thuật microarray, geneSQUARE giải trình trình tự gen sau dòng hóa Vùng L1của HPV khuyếch đại gắn trực tiếp vào vector tách dòng pCR®II (TOPO TA cloning kit, Invitrogen) Sau trình biến nạp tạo tế bào khả biến, DNA plasmid gắn sản phẩm PCR tách chiết Kit GenElute TMP lasmid Miniprep (Sigma-Aldrich), giải trình 207 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC trình tự theo phương pháp dye terminator cy- Genotype HPV phân loại sau: cle máy 310 ABI Prism (Applied Biosystems) Kết giải trình tự so sánh với típ nguy cao, nhóm nhiễm đa típ nguy cao, type nguy thấp típ khơng phân loại genotype HPV GenBank âm tính [5] III KẾT QUẢ Kết chẩn đoán tế bào học Trong 163 trường hợp chẩn đoán nhuộm PAP smear trình bày bảng sau Bảng Kết chẩn đốn TBH (163 trường hợp) Bình thường SIL I AGUS Viêm CTC (Cervicitis) viêm âm đạo (Vaginitis) Tổng số n 55 12 18 74 163 % 33,7 7,4 2,5 11,0 45,4 100 Kết cho thấy số có kết bình thường chiếm 33,7% Số lại có biểu tổn thương nội biểu mơ gai độ thấp chiếm 7,4%, viêm chợt: 2,5%; viêm cổ tử cung 11% viêm âm đạo đến 45,4% Kết định nhóm HPV Bảng Kết chẩn đốn phân loại típ HPV theo nhóm nguy (n = 193) Bình thường Nguy thấp Nguy cao Khơng phân loại Tổng số n 155 11 23 193 % 80,3 2,1 5,7 11,9 100 Trong số nhiễm HPV nhóm nguy cao, có trường hợp nhiễm típ (típ 16; 39; 68) thuộc loại nguy cao; hai trường hợp nhiễm típ: mơt trường hợp nhiễm típ 18 52; trường hợp thứ nhiễm típ 18 58 Cả típ thuộc nhóm nguy cao Bảng cho thấy, trường hợp nhiễm đơn típ nguy cao có trường hợp, típ 18 39 có trường hợp, chiếm 1,52% Ba trường hợp nhiễm đa típ nguy cao, có trường hợp nhiễm típ: 16; 39; 68 Kết chẩn đốn phối hợp TBH phân típ HPV Bảng cho thấy, số chẩn đốn TBH bình thường có trường hợp chẩn đốn nhiễm HPV thuộc nhóm khác nhau, đặc biệt có trường hợp nhiễm típ nguy cao Đồng thời, số viêm cổ tử cung viêm âm đạo, có đến trường hợp nhiễm loại HPV nguy cao Như vậy, việc chẩn đốn định típ HPV có ý nghĩa quan trọng việc xác định tổn thương trường hợp viêm cổ tử cung âm đạo 208 TCNCYH 80 (3) - 2012 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC Bảng Sự phân bố genotype HPV phụ nữ bình thường Hải phòng TT Genotype HPV Típ n % 16 0,5 18 1,52 39 1,52 51 0,5 52 0,5 16; 39; 68 0,5 16; 58 1,04 11 1,04 61 0,5 23 11,9 Nhiễm típ nguy cao Nhiễm đa típ nguy cao Típ nguy thấp Khơng phân loại Âm tính 155 80,3 Tổng số 193 100 Bảng Kết định típ HPV tế bào học Kết chẩn đoán định típ gen HPV Kết chẩn đốn tế bào học (TBH) BT LSIL AGUS Cervicitis Vaginitis TS Bình thường n1 48 13 59 131 % 87,3 66,7 75,0 72,2 79,5 84,4 Nguy cao (HR) n2 3 10 % 1,8 25 16,7 4,1 6,1 Nguy thấp (LR) n3 1 % 1,8 25 1,4 1,8 Típ khác (Others) n4 11 19 % 9,1 8,3 11,1 14,9 11,7 n 55 12 18 74 163 % 100 100 100 100 100 100 Tổng số IV BÀN LUẬN Ung thư cổ tử cung có xu hướng tăng cao trở thành nguy cao TCNCYH 80 (3) - 2012 nguyên nhân gây tử vong ung thư nữ giới Việc áp dụng biện pháp nhằm phát hiện, chẩn đốn sớm có ý nghĩa quan 209 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC trọng điều trị, giảm tỷ lệ ung thư cổ tử cung có ý nghĩa quan trọng Phương pháp phổ biến áp dụng rộng rãi khơng Việt Nam mà nước giới kể nước phát triển tế bào học Đây phương pháp đơn giản, chi phí thấp cho kết nhanh Tuy nhiên, tồn số hạn chế phụ thuộc chủ quan, kinh nghiệm người đọc đánh giá kết V KẾT LUẬN Áp dụng giải trình tự gen HPV xác định nguyên nhân gây tổn thương cổ tử cung giúp chẩn đốn xác, hạn chế trường hợp dương tính âm tính giả TÀI LIỆU THAM KHẢO Hoàng Thị Thanh Huyền, Tạ Thành Đồng thời, nhiều trường hợp có yếu tố Văn (2011) Đánh giá số yếu tố liên quan đến tỷ lệ nhiễm HPV gái mại dâm Tạp nguy cao khó phát sớm tế chí Nghiên cứu Y học 74(3): 387 - 391 bào học virus HPV nhiễm, tổn thương vào người đánh giá Vì vậy, vấn đề phối hợp Naotake Akutsu, Hiroshi Takahashi et al (1996) p53- dependent and independent transactivation by E6 protein of human papillomavirus type 16 J of general chẩn đoán tế bào học với kỹ thuật sinh Virology 77: 459 - 463 mức độ phân tử mà chưa gây tổn thương hình thái học phụ thuộc chủ quan học phân tử - chẩn đốn gen - có ý nghĩa hết Ledy Horto dos Santos Oliveira, sức quan trọng chẩn đoán sớm nguy Eliane de Vasconcelos Machado Rodrigues gây ung thư cổ tử cung et al (2003) HPV 16 detection in cervical lesions, physical state of viral DNA and changes Việc chẩn đoán tế bào học đơn giản cho kết nhanh có hạn chế độ xác không phụ thuộc kỹ thuật lấy bệnh phẩm mà phụ thuộc khách quan nhiều vào người đọc Với kết trên, số chẩn đoán tổn thương nội biểu mơ gai độ thấp có 25% chẩn đốn nhiễm típ vi rút nguy cao có đến 66,7% bình thường Như vậy, kết thấp so với kết điều tra thống kê khu vực in p53 gene Sao Paulo Medical Journal 2003 121(2): 67-71 Gary M Clifford, Rashida K Rana, Silvia Franceschi at al (2005) Human papillomavirus genotype distribution in low-grade cevical lesion: comparison by geographic region and with cervical cancer Cancer epidemiol Biomarkers Prev; 14(5) 1157 - 1164 Mark Schiffman, Gary Clifford and khác Khu vực châu Á: 67,1%; cao Franco M Buonaguro (2009) Classification of weakly carcinogenic human papillomavirus Bắc Mỹ: 80,1%; thấp Nam trung types: addressing the limits of epidemiology at Mỹ: 59,1% [4] Về típ vi rút, thống kê chung the borderline Infectious Agents and Cancer, 4:8 doi:10.1186/1750-9378-4-8 nước 26,6% nhiễm típ 16 thứ hai típ HPV31 11,7% [2] Kết nghiên cứu cao thuộc típ 16 típ 18 chiếm 4/15 (26,7%) trường hợp nhiễm HPV 210 Munoz N, Bosch FX, de sanjosé S et al (2003) Epidermiologic classification of human papillomavirus types associated with cervical cancer N Engl J Med 348, 518 - 527 TCNCYH 80 (3) - 2012 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC Summary IDENTIFICATION OF HPV TYPES AND CERVICAL CYTOLOGY AMONG REPRODUCTIVE AGED WOMEN The human papiloma virus (HPV) infection is the high risk of cervical cancer which is a common cause of deaths due to cancers among women The objective of the study is to identify HPV types and cervical cytology among reproductive aged women Results showed that there were 48 women with positive HPV (24.87%) Among them there were 23 cases were not identified by types (11.92%) Among 15 identified cases, there were 12 cases with single type, cases with two types and one case with three types (0.5%) By level of risks, there were 12 cases with high risk (6.26%), three cases with low risk (1.51%) The cytological diagnosis was normal (87.3%) Particularly, there was one case with HPV high risk, one case with HPV low risk and cases with other types but cytological diagnosis shown no diseases The remaining cases with high risks were distributed in LSIL (3),cervicitis (3) and vaginitis (3) Key Words: HPV, cervical cytology, reproductive aged women TCNCYH 80 (3) - 2012 211 ... Nhiễm típ nguy cao Nhiễm đa típ nguy cao Típ nguy thấp Khơng phân loại Âm tính 155 80,3 Tổng số 193 100 Bảng Kết định típ HPV tế bào học Kết chẩn đốn định típ gen HPV Kết chẩn đoán tế bào học (TBH)... trọng việc xác định tổn thương trường hợp viêm cổ tử cung âm đạo 208 TCNCYH 80 (3) - 2012 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC Bảng Sự phân bố genotype HPV phụ nữ bình thường Hải phòng TT Genotype HPV Típ n %... nhiễm HPV thuộc nhóm khác nhau, đặc biệt có trường hợp nhiễm típ nguy cao Đồng thời, số viêm cổ tử cung viêm âm đạo, có đến trường hợp nhiễm loại HPV nguy cao Như vậy, việc chẩn đốn định típ HPV