Đang tải... (xem toàn văn)
Luận án giúp phân loại, giúp cho việc nhận biết chính xác các loài thuộc chi Tế tân hiện có ở Việt Nam, phục vụ cho yêu cầu bảo tồn; cung cấp dẫn liệu về hiện trạng, khả năng tái sinh tự nhiên, nhất là khả năng nhân trồng, phục vụ cho yêu cầu bảo tồn nguyên vị, chuyển vị và phát triển trồng thêm một số loài Tế tân đang có nhu cầu sử dụng hiện nay. Luận án nghiên cứu về thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học nhằm bổ sung thêm các dẫn liệu về giá trị nguồn gen và giá trị sử dụng trong việc bảo tồn một số loài thuộc chi Tế tân hiện có ở Việt Nam.
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN SINH THÁI VÀ TÀI NGUN SINH VẬT NGUYỄN ANH TUẤN NGHIÊN CỨU CÁC CƠ SỞ KHOA HỌC NHẰM BẢO TỒN VÀ PHÁT TRIỂN BỀN VỮNG CÁC LỒI Q HIẾM TRONG CHI TẾ TÂN (ASARUM L.) Ở VIỆT NAM TĨM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC Chun ngành: THỰC VẬT HỌC Mã số: 62. 42. 01. 11 HÀ NỘI, 2015 Cơng trình được hồn thành tại: Viện Sinh thái và Tài ngun sinh vật, Viện Hàn lâm KH & CN Việt Nam Viện Sinh thái và Tài nguyên Sinh vật, Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam Người hướng dẫn khoa học: PGS. TS. Trần Huy Thái PGS. TS. Lê Mai Hương Phản biện 1: PGS.TS. Nguyễn Khắc Khôi Phản biện 2: GS. TSKH. Trần Văn Sung Phản biện 3: PGS.TS. Nguyễn Trung Thành Luận án sẽ được bảo vệ trước Hội đồng đánh giá luận án cấp Viện Vào hồi: 09 giờ 00 ngày 07 tháng 07 năm 2015 Có thể tìm hiểu luận án tại: Thư viện Quốc gia Thư viện Viện Sinh thái và Tài ngun Sinh vật MỞ ĐẦU 1. Tính cấp thiết của đề tài Họ Mộc hương (Aristolochiaceae) gồm có 2 phân họ chính là Asaroideae (gồm 3 chi: Saruma, Asarum và Hexastylis) và Aristolochioideae (gồm 7 chi: Asiphonia, Thottea, Isotrema, Pararistolochia, Euglypha, Holostylis và Aristolochia). Trong đó, chi Tế tân (Asarum L.) có khoảng 90 lồi, gồm các cây thân cỏ, phát triển ở các vùng ơn đới của Bắc bán cầu. Phần lớn các lồi phân bố vùng Đơng Á, tại các khu vực Hymalaya đến lục địa Trung Quốc, Đài Loan, Nhật Bản, Hàn Quốc và đảo Sakhalin; Bắc Mỹ và một lồi ở châu Âu (Asarum europaeum). Theo Phạm Hồng Hộ (1999), Nguyễn Tiến Bân (2003) và Võ Văn Chi (2003), chi Tế tân (Asarum L.) ở Việt Nam gồm có 7 lồi (Asarum balansae Franch; Asarum blumei Duch. in DC.; Asarum caudigerum Hance; Asarum glabrum Merr.; Asarum petelotii O.C. Schmidt; Asarum reticulatum Merr. và Asarum wulingense Liang), phân bố chủ yếu ở các tỉnh phía Bắc Việt Nam (Hà Giang, Lào Cai, Lạng Sơn, Tun Quang, Thái Ngun, Phú Thọ, Vĩnh Phúc, Hà Nội, Hà Tĩnh và Quảng Bình). Có 3 lồi được ghi trong Sách Đỏ Việt Nam (1996, 2007) là Asarum balansae Franch.; Asarum caudigerum Hance và Asarum glabrum Merr Trong đó, lồi Biến hóa núi cao ( Asarum balansae) được phân hạng EN A1c,d và là yếu tố đặc hữu Bắc Bộ. Đây là lồi đã xếp hạng ở mức Nguy cấp, có nguy cơ tuyệt chủng ngồi tự nhiên trong một tương lai gần, quần thể của chúng đã suy giảm khoảng 50% do nơi cư trú bị thu hẹp và tình trạng khai thác q mức; lồi Thổ tế tân (Asarum caudigerum) được phân hạng VU A1a,c,d; lồi Hoa tiên (Asarum glabrum) được phân hạng VU A1c.d. Đến nay, những nghiên cứu ở trong nước về các lồi thuộc chi Tế tân (Asarum L.) hầu như chưa có gì đáng kể. Các lồi thuộc chi Tế tân (Asarum L.) đang có nguy cơ lớn sẽ bị tuyệt chủng ngồi thiên nhiên trong một tương lai tương đối gần, quần thể của chúng suy giảm ít nhất khoảng 20%. Nghiên cứu các cơ sở khoa học để bảo tồn, phục hồi và sử dụng bền vững tính đa dạng của các lồi thuộc chi Tế tân (Asarum L.) ở Việt Nam là vấn đề thời sự mang tính cấp thiết có nhiều ý nghĩa khoa học và giá trị thực tiễn cao. Chính vì vậy, chúng tơi đã thực hiện đề tài: “Nghiên cứu các cơ sở khoa học nhằm bảo tồn và phát triển bền vững các lồi q hiếm thuộc chi Tế tân (Asarum L.) ở Việt Nam” 2. Mục tiêu của đề tài Mục tiêu chung: Cung cấp một số dẫn liệu khoa học đặc điểm sinh học, thành phần hóa học cũng như về giá trị sử dụng của một số lồi thuộc chi Tế tân (Asarum L.), nhằm góp phần bảo tồn có hiệu quả các lồi này Việt Nam hiện nay Mục tiêu cụ thể: + Chỉ ra được các đặc điểm nổi bật về hình thái thực vật, cùng với khóa phân loại, giúp cho việc nhận biết chính xác các lồi thuộc chi Tế tân (Asarum L.) hiện có ở Việt Nam, phục vụ cho u cầu bảo tồn + Cung cấp dẫn liệu về hiện trạng, khả năng tái sinh tự nhiên, nhất là khả năng nhân trồng, phục vụ cho u cầu bảo tồn ngun vị (in situ), chuyển vị (ex situ) và phát triển trồng thêm một số lồi Tế tân đang có nhu cầu sử dụng hiện nay + Thơng qua việc nghiên cứu về thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học (in vitro) nhằm bổ sung thêm các dẫn liệu về giá trị nguồn gen giá trị sử dụng việc bảo tồn số loài thuộc chi Tế tân (Asarum L.) hiện có ở Việt Nam 3. Ý nghĩa của đề tài Đề tài góp phần bổ sung và hồn thiện dần về mặt phân loại, bảo tồn và phát triển bền vững các lồi q hiếm thuộc chi Tế tân (Asarum L.) ở Việt Nam 4. Những điểm mới của luận án Bổ sung hai loài Asarum cordifolium C E C Fischer Asarum yunnanense T. Sugaw., Ogisu & C. Y. Cheng cho hệ thực vật Việt Nam Lần đầu tiên nhóm chất isocoumarin được phát hiện từ lồi Tế tân nhẵn (Asarum glabrum); đã phát hiện một hợp chất mới từ lồi Tế tân balansa (Asarum balansae) 1(3hydroxy4metoxyphenyl)propan1,2diol (ABW4.2) và cũng là một phenylpropanoid mới Lần đầu tiên thử nghiệm hoạt tính sinh học 03 lồi Asarum balansae, Asarum caudigerum và Asarum glabrum Việt Nam: thử hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định, hoạt tính chống oxy hóa và hoạt tính gây độc tế bào. 5. Bố cục của luận án Luận án bao gồm 107 trang, 21 bảng, 31 hình, 3 sơ đồ và 20 phụ lục Luận án gồm các phần: Mở đầu (3 trang); Chương 1: Tổng quan nghiên cứu (12 trang); Chương 2: Đối tượng, nội dung và phương pháp nghiên cứu (16 trang); Chương 3: Kết quả nghiên cứu (73 trang); Kết luận, Kiến nghị (3 trang); Danh mục các cơng trình đã cơng bố của tác giả liên quan đến luận án; Tài liệu tham khảo; Phụ lục CHƯƠNG I: TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU 1.1. VỊ TRÍ PHÂN LOẠI CỦA CHI TẾ TÂN (ASARUM L.) Họ Mộc hương (Aristolochiaceae) gồm có 2 phân họ chính là Asaroideae (gồm 3 chi: Saruma, Asarum và Hexastylis) và Aristolochioideae (gồm 7 chi: Asiphonia, Thottea, Isotrema, Pararistolochia, Euglypha, Holostylis và Aristolochia). Chi Tế tân (Asarum L.) được Linnaeus đặt tên lần đầu tiên vào năm 1753, khi đó, Linnaeus xếp chi Hexastylis thuộc chi Asarum. Đến năm 1825, Rafinesque tách chi Hexastylis từ chi Asarum dựa trên hình thái và cấu tạo của lá. Chi Hexastylis có phiến lá dày và xanh, trong khi chi Asarum có phiến lá mỏng và sớm rụng hơn. Một điểm khác biệt đáng chú ý là, thực tế, thân và hoa của chi Hexastylis khơng có lơng trên bề mặt của chúng, trong khi thân và hoa của chi Asarum có lơng tơ. Ngồi ra, các thùy đài hoa của các lồi trong chi Asarum có xu hướng dài hơn và sắc nét hơn của chi Hexastylis. Như một kết quả của những khác biệt về hình thái, các nhà phân loại học đã cơng nhận Hexastylis và Asarum là hai chi riêng biệt Theo các tài liệu của Takhtajan, Brummitt, Cronquist và Robert F. Thorne, chi Tế tân (Asarum L.) được xếp theo các bậc phân loại khác nhau tùy theo các hệ thống phân loại Các nhà khoa học Việt Nam như Nguyễn Tiến Bân, Nguyễn Nghĩa Thìn, Võ Văn Chi, Vũ Văn Chun có quan điểm giống với hệ thống phân loại Takhtajan (2009), chi Tế tân (Asarum L.) xếp vào họ Aristolochiaceae, bộ Piperales, phân lớp Magnoliidae, lớp Magnoliopsida (Dicotyledons), ngành Magnoliophyta (hình 1.1) 1.2. TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU VỀ CÁC LỒI THUỘC CHI TẾ TÂN (ASARUM L.) Chi Tế tân (Asarum L.) thuộc họ Mộc hương (Aristolochiaceae) được Linnaeus (1753) đặt tên và mơ tả. Trên thế giới, chi Tế tân (Asarum L.) có khoảng 90 lồi, chúng phân bố chủ yếu ở vùng ơn đới của Bắc bán cầu, các khu vực Đơng Á từ Hymalaya đến lục địa Trung Quốc, Đài Loan, Nhật Bản, Hàn Quốc và đảo Sakhalin; Bắc Mỹ và một lồi châu Âu (Asarum europaeum). Việt Nam, hiện tại có 7 lồi (Asarum balansae Franch; A. blumei Duch. in DC.; A. caudigerum Hance; A. glabrum Merr.; A. petelotii O. C. Schmidt; A. reticulatum Merr. và A. wulingense Liang), chúng phân bố chủ yếu ở các tỉnh phía Bắc Việt Nam. Riêng lồi A. wulingense được phát hiện ở miền Trung tại Hà Tĩnh (Hương Sơn, Kéo Nưa) 1.3 NGHIÊN CỨU VỀ THÀNH PHẦN HĨA HỌC CỦA CÁC LỒI TRONG CHI TẾ TÂN (ASARUM L.) Những thơng tin đã có cho biết, các lồi trong chi Tế tân (Asarum L.) thường có chứa tinh dầu với các thành phần chính là metyl eugenol, pinen, myrcen, borneol, safrol, 1,8cineol và asafrol… Ngồi ra, chúng còn chứa hợp chất khác aristolochic acid, secquiterpen, sterol… Li Xianggao (1988) nghiên cứu thành phần hóa học loài A. heterotropoides var. mandshuricum (Maxim) Kitag. và đã xác định được 43 hợp chất trong tinh dầu của thân, lá và rễ. Hàm lượng tinh dầu được chiết suất: thân (2,3%), lá (0,65%) và rễ (4,06%) Zhang và nnk. (2001) đã phân tích thành phần hóa học rễ và thân của lồi Asarum longerhizomatosum C.F. Liang & C.S. Yang bằng các phương pháp sắc ký và quang phổ, đã phân lập được 5 hợp chất từ dịch chiết ethanol asarone; βsitosterol; 2,4,5trimethoxybenzaldehyde; 4(2,4,5 trimethoxyphenyl)3enbutylone và 3βhydroxystigmast5en7one Ở Việt Nam, các cơng trình nghiên cứu về thành phần hóa học của các lồi trong chi Tế tân (Asarum L.) rất hạn chế. 1.4. NGHIÊN CỨU VỀ DƯỢC TÍNH TỪ CÁC LỒI TRONG CHI TẾ TÂN (ASARUM L.) Trong y học dân gian, đa số các loài trong chi Tế tân ( Asarum L.) được sử dụng làm thuốc chữa ho, chữa cảm sốt, cảm lạnh, viêm phế quản, viêm nhiễm răng lợi và tê thấp. Một số loài lại làm tăng sự phát triển u tuyến phổi và ung thư tuyến phổi. 1.5. NGHIÊN CỨU BẢO TỒN CÁC LOÀI TRONG CHI TẾ TÂN (ASARUM L.) Ở VIỆT NAM CHƯƠNG II: VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1. VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU 2.1.1. Đối tượng nghiên cứu Các lồi đại diện của chi Tế tân (Asarum L.) Việt Nam, bao gồm các mẫu khơ lưu giữ tại các phòng tiêu bản thực vật và các mẫu tươi thu được tại Lào Cai (Sa Pa), Hà Giang (Quản Bạ), Tuyên Quang (Na Hang), Vĩnh Phúc (Tam Đảo), Hà Nội (Ba Vì), Hòa Bình (Lạc Sơn), Thanh Hóa (Thường Xn) và Quảng Trị (Hướng Hóa) 2.1.2. Sinh vật và các dòng tế bào ung thư thí nghiệm Các chủng vi sinh vật kiểm định được cung cấp từ phòng Sinh học thực nghiệm Viện Hóa học các hợp chất thiên nhiên, gồm: Vi khuẩn Gr (+); Vi khuẩn Gr (); Nấm men; Nấm mốc Các dòng tế bào ung thư được cung cấp từ phòng Sinh học thực nghiệm Viện Hóa học các hợp chất thiên nhiên, gồm: Dòng Fl, dòng RD, dòng HepG2, và dòng Lu 2.1.3. Hóa chất và thiết bị 2.2. NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 2.2.1. Các nội dung nghiên cứu về sinh học 2.2.2. Nghiên cứu khả năng sử dụng Các nội dung nghiên cứu về hóa học: Các nội dung nghiên cứu thử nghiệm: 2.3. ĐỊA ĐIỂM VÀ THỜI GIAN NGHIÊN CỨU Điều tra, nghiên cứu và khảo sát tại một số tỉnh miền Bắc và miền Trung Việt Nam, như Quản Bạ (Hà Giang), VQG Hồng Liên (Sa Pa, Lào Cai), KBTTN Na Hang (Tun Quang), VQG Tam Đảo (Vĩnh Phúc), VQG Ba Vì (Hà Nội), Lạc Sơn (Hòa Bình), KBTTN Xn Liên (Thường Xn, Thanh Hóa), Hướng Hóa (Quảng Trị) và quần đảo Cát Bà (Hải Phòng) 2.4. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.4.1. Phương pháp điều tra thực vật Điều tra theo tuyến và xác lập các ơ tiêu chuẩn (OTC) 2.4.2. Phương pháp phân loại thực vật và thảm thực vật Phân loại thực vật: Phân loại thảm thực vật: 2.4.3. Phương pháp xác định đặc điểm tái sinh Chất lượng cây tái sinh được tính theo cơng thức: N% = (n 100)/N. 2.4.4. Phương pháp nhân giống vơ tính Xây dựng vườn giống Nhân giống từ hạt: Nhân giống từ hom: Chăm sóc và bảo quản: 2.4.5. Phương pháp nghiên cứu thành phần hóa học của tinh dầu Sắc ký khíkhối phổ (GC/MS): 2.4.6. Phương pháp phân lập các hợp chất 2.4.6.1. Phương pháp chiết tách và phân lập các hợp chất 2.4.6.2. Phương pháp xác định cấu trúc các hợp chất 2.4.7. Phương pháp thử hoạt tính sinh học 2.4.7.1. Đánh giá hoạt tính kháng vi sinh vật (VSV) 2.4.7.2. Đánh giá hoạt tính gây độc tế bào 2.5. XỬ LÝ SỐ LIỆU Bằng phần mềm Microsoft Excel CHƯƠNG III: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 3.1. NGHIÊN CỨU PHÂN LOẠI, ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC VÀ BẢO TỒN CÁC LỒI THUỘC CHI TẾ TÂN (ASARUM L.) Ở VIỆT NAM 3.1.1. Nghiên cứu phân loại và đặc điểm của các lồi thuộc chi Tế tân (Asarum L.) ở Việt Nam 3.1.1.1. Đặc điểm của chi Tế tân (Asarum L.) ở Việt Nam Cỏ nhiều năm, cao từ 2030 cm, có lơng hay nhẵn; thân rễ ngắn, thẳng hoặc thân rễ dài, bò ngang (Asarum cordifolium); lóng dài 25 cm; thân thường phân nhánh và mang nhiều rễ con; thân và rễ thường có mùi thơm đặc biệt. Lá: Thường mọc đơn độc (A. glabrum, A. petelotii ) hay thành cặp (A. caudigerum, A. yunnanense), có lơng hay nhẵn; cuống lá dài; phiến lá hình trứng tròn (A. caudigerum, A. cordifolium), trứng thn (A. balansae, A. yunnanense), hoặc hình trứng tam giác hay hình mác tam giác (A. glabrum, A. petelotii); gốc lá hình tim, hình chữ V, hình tai, hoặc hình tim dạng tai; chóp nhọn; mép nguyên có nhỏ khơng ( A. reticulatum); bề mặt trên của phiến lá có màu sắc đồng nhất hoặc có các vết màu trắng khảm theo đường gân (A. yunnanense) hay dọc theo hai bên của gân chính (A. petelotii); gân hình mạng chân vịt, 57 gân chính, 24 cặp gân phụ (hình 3.1) Lá vảy: Thường có hình mũi giáo hoặc hình trứng thn nhọn đầu, phát triển hàng năm từ 24 lá, 12 lá rụng và hoa phát triển sau cùng (hình 3.2). Hoa: Thường mọc đơn độc phần chót, thành cặp ( A. balansae); cuống hoa dài 25 cm, có lơng tơ (A. cordifolium) hoặc khơng. Đài hợp theo các mức độ khác nhau, các lá đài gắn lại với nhau và tạo thành ống đài rời tạo thành ống đài giả phía bầu ( A. caudigerum, A cordifolium); ống đài hình đấu, hình nhạc, hình chng, hình phễu, hay hình trụ, thường tạo vết hoặc khảm ở mặt trong, hẹp hoặc mở họng (miệng ống đài), họng có hoặc khơng có mấu lồi hẹp; thùy lá đài 3, thẳng, mở rộng, hoặc uốn ngược, chóp thùy đài vuốt nhọn hình kim hoặc khơng vuốt nhọn. Nhị 12; chỉ nhị dài hơn bao phấn; 10 bao phấn hướng ra ngồi, mở dọc. Bầu hạ hoặc trung, 6 ơ; nỗn hồn tồn hợp sinh. Vòi nhụy 6, rời hoặc nối liền thành cột, chóp ngun hoặc xẻ thành 2 thùy; núm nhụy phần chót hoặc phần bên (hình 3.3). Quả: nạc hoặc nang xốp, tách ra khơng đều đặn khi chín. Hạt: thường màu đen lồi lưng, phẳng hoặc tạo nếp ở mặt bụng, với phơi nạc ở đáy (hình 3.4). 3.1.1.2. Khóa định loại và đặc điểm của các lồi thuộc chi Tế tân (Asarum L.) ở Việt Nam 1a. Vòi nhụy hợp lại thành cột, đỉnh vòi nhụy ngun 2a. Lá đài hợp gắn lại ở thành bầu, tạo thành ống đài, thùy của đài khơng có đi ở chóp 3a. Phiến lá 1618 × 911 cm, mặt trên có vệt trắng dọc theo gân; núm nhụy màu trắng A yunnanense 3b. Phiến lá 1423 913 cm, mặt trên khơng có vệt trắng dọc theo gân; núm nhụy có đốm màu tím A. balansae 2b. Lá đài rời gắn lại ở thành bầu (có thời điểm chụm lại nhưng khơng hợp), thùy của đài có đi nhọn ở chóp 4a. Lá hình tim, cỡ 812 × 78 cm; mặt ngồi lá đài màu đỏ, thùy đài cỡ 2,0 × 1,2 cm; có nhọn dài 11,5 cm Bầu trung A cordifolium 4b. Lá hình tim, cỡ 1324 × 1118 cm; mặt ngồi lá đài đỏ nhạt rồi xanh ở phía trên, thùy đài cỡ 2,5 × 1,2 cm; có đuôi nhọn dài 1,53,3 cm Bầu hạ A. caudigerum 1b. Vòi nhụy rời, đỉnh vòi nhụy chẻ 2 hay có khuyết 5a Đài hợp hình ống dài 33,5 cm, thắt lại 1/3 phía trên A. glabrum 5b. Đài hợp hình trụ hay mở rộng dần, khơng thắt lại như trên 6a. Ống đài và mặt dưới của phiến lá phủ lông tơ màu vàng nâu dày đặc, cuống hoa uốn ngược, phủ lơng …………… A. wulingense 6b. Ống đài và mặt dưới của phiến lá nhẵn hay chỉ có lơng thưa ở gân lá; cuống hoa thẳng, thường nhẵn 7a. Ống đài thường nghiêng sang một bên, không cân đối, vùng cổ mảnh, hẹp; bầu trung .………………………7 A. petelotii 17 Thân thảo Thân rễ nằm ngang, đường kính 45 mm Thân đứng mang 2 lá, cuống lá dài 1024 cm. Lá có phiến dạng hình trứng, trứng thn hay hình mác thn, 1323 × 813 cm; mặt dưới của phiến lá có lơng tơ thưa ở gân lá, mặt trên nhẵn; mép lá có lơng cứng nhỏ; gốc lá có tai hay hình mác, thùy bên phân nhánh, 7 × 6 cm; chóp lá nhọn. Vãy chồi hình trứng mũi giáo, 2 × 1 cm; mép lá vảy có lơng tơ dày. Cuống hoa mọc hướng thẳng lên, dài 35 cm; đài hoa màu tím hoặc tím nhạt; lá đài hợp lại thành ống hình trụ thường nghiêng sang một bên thành bầu và mở rộng dần, hơi hẹp ở vòng miệng; mặt ngồi nhẵn, mặt trong có sọc; thùy lá đài hình trứng, 2,5 × 2 cm, mặt ngồi có 5 đường vân chạy dọc khơng rõ, mặt trong với một nữa bề mặt màu đỏ tía, gần mép thùy màu vàng nhạt. Nhị 12, bao phấn dài 2 mm, trung đới hình lưỡi, vượt lên bao phấn Nhụy 6, vòi nhụy rời; đỉnh vòi nhụy chẻ 2, hình chữ V. Bầu trung. Quả phát triển trong bao hoa tồn tại, màu đỏ tía (hình 3.17) Ảnh Tế tân petelot (Asarum petelotii O.C. Schmidt) chụp tại VQG Tam Đảo (Vĩnh Phúc) Loc. class.: Vietnam. Typus: Petelot 3891 (P) Sinh học và sinh thái: Mùa hoa tháng 45, quả tháng 68. Hạt phát tán gần, nên thấy cây con xung quanh gốc cây mẹ. Phân bố: Lào Cai (Sa Pa) và Vĩnh Phúc (Tam Đảo). Còn có ở Trung Quốc (Vân Nam) Mẫu nghiên cứu: LÀO CAI, NAT13054 (HN); VĨNH PHÚC, NAT12094 (HN); Petelot, 5009, 3891, 5036 (P). Giá trị sử dụng: Rễ và thân rễ của lồi Tế tân petelot ( Asarum petelotii) được dùng làm thuốc ho, chữa viêm họng, hoa ngâm rượu làm thuốc bổ 3.1.1.2.8. Asarum blumei Duch. Tế tân blume Cỏ nhiều năm; thân ngắn, dài 12 cm, mang ít rễ to 1,5 mm, có ít rễ con Lá 2; cuống dài đến 10 cm, khơng lơng; phiến hình tim mũi giáo, to 8 × 4 18 cm, mặt xám lục, mặt ửng nâu, gân đáy 3(5), gân phụ 2 cặp; bìa lá khơng răng. Cuống hoa dài 1,5 cm. Lá đài hợp gắn lại ở thành bầu, tạo thành hình ống, khơng nghiêng, vùng cổ rộng, phồng xung quanh bầu, dài 1,52 cm; thùy lá đài 3, tròn dài, cao 1 cm. Nhị 12; vòi nhụy rời, đỉnh vòi nhụy chẻ 2. Quả nang, bầu 6 ơ. Phân bố: Hà Giang, Lạng Sơn và Vĩnh Phúc. Còn có Malaixia, Nhật Bản (Suruga) (phụ lục 6.8). Hiện tại chúng tơi chưa thu được mẫu của lồi này Mẫu nghiên cứu: Pháp (Pari), P01645370 và P01645371 Giá trị sử dụng: Rễ cây chứa tinh dầu mà thành phần chủ yếu là safrole và eugenol, được dùng làm thuốc chữa viêm phế quản, ho và chữa thủy thũng. Nhân dân thường dùng làm thuốc gây nơn 3.1.1.2.9. Asarum reticulatum Merr. Tế tân mạng Thân nằm rồi đứng, đơn độc hay phân nhánh, nhẵn, đường kính đến 3 mm, có rễ sái vị, ngắn. Lá hình tim thn, như da, cả hai mặt nhẵn, 1317 × 68 cm, nhọn hoặc nhọn dần; gốc lá hình tim, thùy lá ngắn hoặc hơi xòe, hình trứng, tròn, 2,54 × 2,53,5 cm; mép lá có răng nhỏ khơng đều, có lơng tơ; gân chính 3, rõ, lồi ở mặt dưới lá, thêm hai gân mãnh từ gốc thùy lá kéo dài ra, hình mạng lưới thưa rõ phía dưới, khơng dính liền; cuống lá dài 89 cm. Lá đài hợp thành ống ở thành bầu, mở rộng dần, dài 33,5 cm, mặt ngồi nhẵn, gốc gồ lên, rộng 1,8 cm (phần thắt lại), phía cổ họng thắt lại, hướng xuống dưới, thùy hình trứng rộng, tròn, chiều dài khoảng 2 cm; lá vảy hình mũi giáo, nhọn dần, dài khoảng 1,5 cm, mép có ít hoặc nhiều lơng tơ. Nhị 12, chỉ nhị vượt lên bao phấn, bao phấn dài 2 mm; trung đới hình lưỡi, tròn, ngắn. Nhụy 6, vòi nhụy rời; đỉnh vòi nhụy chẻ làm 2, hình chữ V 19 Ảnh Tế tân mạng (Asarum reticulatum Merr.) chụp tại VQG Hoàng Liên (Sa Pa, Lào Cai) Loc. class.: Vietnam: Tonkin: Chapa, 1500 m, 1935 Typus: Petelot 2554 (HT: A). Sinh học và sinh thái: Mùa hoa tháng 34, quả tháng 56. Hạt non phát triển bình thường trong quả, chưa thấy cây cho quả chứa hạt già, quả non thường mọc sát mặt đất và bị thối rữa khi có mưa. Lồi này đa số tái sinh bằng chồi, chưa thấy cây con mọc xung quanh gốc cây mẹ. Cây ưa ẩm, ưa bóng; thường mọc trên đất nhiều mùn dọc theo hành lang khe suối, sườn núi, 2 bên đường mòn trong rừng, dưới tán rừng kín thường xanh ẩm, ở độ cao 1.5001.700 m Phân bố: Mới thấy ở Lào Cai (Can Hồ B, Bản Khoang, Sa Pa) Mẫu nghiên cứu: LÀO CAI, NAT12045, NAT13055 (HN); Petelot 2554 (HNU). Giá trị sử dụng: Dân tộc Dao Đỏ sử dụng cả cây làm thuốc chữa bệnh trĩ và thuốc kháng sinh 3.1.1.3. Một số ghi nhận mới về đặc điểm các lồi thuộc chi Tế tân (Asarum L.) ở Việt Nam 3.1.1.3.1. Đặc điểm hình thái Theo các mơ tả trước đây, trong cấu trúc hoa của các lồi thuộc chi Tế tân (Asarum L.) khơng tồn tại tràng hoa bao hoa, chỉ có lá đài gắn lại với nhau hợp ở thành bầu và tạo thành ống đài hoặc rời và tạo thành ống đài giả phía trên bầu. Khi phân tích cấu trúc hoa ở các lồi Tế tân hoa có đi (Asarum caudigerum), lồi Tế tân lá hình tim (Asarum cordifolium) và lồi Tế tân petelot (Asarum petelotii), chúng tơi phát hiện có sự tồn tại của tràng hoa tiêu biến ở dạng hình kim, dài khoảng 0,3 cm (hình 3.21). Ở các 20 lồi Tế tân vân nam (Asarum yunnanense), Tế tân balansa (Asarum balansae), Tế tân nhẵn (Asarum glabrum) Tế tân mạng (Asarum reticulatum) có phát hiện tràng hoa ở một số ít cá thể 3.1.1.3.2. Mùa ra hoa Qua các đợt khảo sát từ năm 2010 đến năm 2013 tại Lào Cai (Sa Pa), Hà Giang (Quản Bạ), Tun Quang (Na Hang), Vĩnh Phúc (Tam Đảo), Hà Nội (Ba Vì) và Thanh Hóa (Thường Xn) theo các mùa khác nhau trong năm, chúng tơi đã ghi nhận được mùa hoa và mùa quả của các lồi thuộc chi Tế tân (Asarum L.). Kết quả cho thấy, thời điểm ra hoa, quả chín và phát tán hạt theo ghi nhận của chúng tơi thường sớm hơn so với những ghi nhận trước đây. 3.1.1.3.3. Phân bố Qua việc đánh dấu định vị tại các điểm nghiên cứu, chúng tơi đã ghi nhận và xây dựng đai độ cao phân bố của các lồi thuộc chi Tế tân (Asarum L.) ở Việt Nam (bảng 3.5). Qua bảng 3.5 cho thấy, lồi Tế tân vân nam ( A. yunnanense) mới phát hiện một số ít cá thể độ cao 410 m tại Tun Quang (Na Hang); lồi Tế tân banlansa (A. balansae) mới phát hiện phân bố ở độ cao 200400 m tại Tun Quang (Na Hang), Hà Nội (Ba Vì), Hòa Bình (Lạc Sơn), Thanh Hóa (Thường Xn) và Quảng Trị (Hướng Hóa); lồi Tế tân lá hình tim (A. cordifolium) ở độ cao 1.5001.700 m tại Lào Cai (Sa Pa); lồi Tế tân hoa có đi (A. caudigerum) độ cao 7001.000 m tại Tun Quang (Na Hang) và Hà Giang (Quản Bạ); lồi Tế tân nhẵn (A. glabrum) ở độ cao 9001.100 m tại Lào Cai (Sa Pa), Vĩnh Phúc (Tam Đảo) và Hà Nội (Ba Vì); lồi Tế tân petelot (A. petelotii) ở độ cao 1.0001.600 m tại Lào Cai (Sa Pa) và Vĩnh Phúc (Tam Đảo); lồi Tế tân mạng ( A. reticulatum) ở độ cao 1.5001.700 m tại Lào Cai (Sa Pa). Những ghi nhận về đai độ cao phân bố của các loài thuộc chi Tế tân (Asarum L.) khác biệt so với những ghi nhận trước đây 3.1.2 Kết quả điều tra về vốn tri thức bản địa của cộng đồng trong việc sử dụng các loài thuộc chi Tế tân (Asarum L.) làm thuốc Tế tân balansa (Asarum balansae) + Thuốc tắm: Lấy lá làm thuốc tắm chữa bệnh đau nhức xương khớp + Men rượu: Lá lồi Tế tân balansa (Asarum balansae) kết hợp với các lồi khác làm men rượu, sản xuất rượu ngơ men lá Tế tân lá hình tim (Asarum cordifolium) + Tồn cây sử dụng làm thuốc tắm trị đau lưng, nhiễm trùng vết thương và trị bệnh trĩ Tế tân hoa có đi (Asarum caudigerum) 21 Rễ và thân rễ làm thuốc ho, chữa viêm họng, cảm sốt, cảm lạnh Tế tân nhẵn (Asarum glabrum) + Thuốc tắm: Sử dụng lá làm thuốc tắm chữa trị bệnh đau bụng, đau mắt, thâm mắt, làm tan mộng mắt và trị thấp khớp + Thuốc bổ: Sử dụng hoa ngâm với rượu uống hàng ngày, trị bệnh mất ngủ, đau đầu, thần kinh suy nhược và ăn uống ngon miệng Tế tân mạng (Asarum reticulatum) + Toàn cây được sử dụng điều trị bệnh trĩ: sắc uống điều trị trĩ nội; sắc uống và giã nát đắp điều trị trĩ ngoại (Phụ nữ mang thai và cho con bú khơng được sử dụng) + Làm thuốc kháng sinh: Giã nát đắp điều trị các vết thương, lỡ lt ngồi da, u nhọt + Thuốc tắm: Tồn cây được sử dụng làm thuốc tắm gây ra thai. 3.1.3. Thăm dò khả năng nhân giống và xây dựng mơ hình bảo tồn một số lồi thuộc chi Tế tân (Asarum L.) 3.1.3.1. Lồi Tế tân balansa (Asarum balansae) 3.1.3.1.1. Khả năng tái sinh tự nhiên của lồi Tế tân balansa (Asarum balansae) tại Bản Bung, Na Hang, tỉnh Tun Quang Cây tái sinh có nguồn gốc từ chồi chiếm ưu thế (từ 76,697,5%); cây tái sinh có nguồn gốc từ hạt chiếm tỷ lệ tương đối thấp (từ 2,523,4%) Chất lượng tái sinh không đồng đều giữa các khu vực 3.1.3.1.2 Đặc điểm phân bố loài Tế tân balansa ( Asarum balansae) tại Bản Bung, Na Hang, tỉnh Tuyên Quang trong các cấu trúc thảm thực vật Phân bố theo kiểu rừng Tại Bản Bung, huyện Na Hang, tỉnh Tuyên Quang hầu hết phân bố ở kiểu rừng nhiệt đới thường xanh mưa ẩm trên núi thấp, chủ yếu ở chân và sườn núi. Phân bố theo trạng thái và sinh cảnh Theo trạng thái rừng: Tế tân balansa (Asarum balansae) phân bố tập trung chủ yếu ở trạng thái rừng IIIA2, thuộc vùng lõi của KBTTN Na Hang Về sinh cảnh: Tế tân balansa (Asarum balansae) chủ yếu phân bố trên đất, chúng mọc sát ngay bề mặt đất, nơi đất giàu mùn; độ ẩm, độ xốp và ánh sáng cao; thống khí. Đơi khi thấy xuất hiện trên các hốc đá. Có thể bắt gặp loài Tế tân balansa (Asarum balansae) ở những nơi ẩm ướt, ven 22 các suối, dưới tán rừng cây gỗ nhỏ, chủ yếu hai bên đường mòn đi lại trong rừng Phân bố theo địa hình và đai cao Về địa hình: Phân bố chủ yếu ở dạng địa hình như chân núi, có thể bắt gặp một số ít cá thể ở sườn núi, chưa bắt gặp ở đỉnh núi và dơng núi Về đai cao: Phân bố theo đai cao loài Tế tân balansa ( Asarum balansae) rất rộng, từ 201 m đến 1200 m. Với điều kiện về độ cao này, rất thích hợp cho việc gây trồng tự nhiên, nhằm bảo tồn và sử dụng bền vững lồi biến hóa núi cao (A. balansae) tại khu vực Bản Bung, xã Thanh Tương, huyện Na Hang, tỉnh Tun Quang 3.1.3.1.3 Khả nhân giống loài Tế tân balansa (Asarum balansae) Tại 2 địa điểm ở Bản Bung, Na Hang, tỉnh Tuyên Quang là tại rừng rừng tự nhiên (thung Lung Khăm) và tại vườn ươm (Bản Bung), sau 41 ngày nhân giống, tỷ lệ ra rễ từ hom thân rễ (58,33%81,3%) cao hơn so với hom ngọn (42,5%57%); tỷ lệ ra rễ của hom thân rễ và hom ngọn ở vườn rừng tự nhiên tại thung Lung Khăm (57%81,3%) cao hơn so với vườn ươm tại Bản Bung (42,5%58,33%). Đặc biệt, chưa thấy cây nảy mầm từ hạt. Điều này phù hợp với khả năng tái sinh tự nhiên của loài Tế tân balansa (Asarum balansae) từ chồi trong điều kiện tự nhiên 3.1.3.1.4. Tình trạng Lồi Tế tân balansa (Asarum balansae) được ghi trong Sách Đỏ Việt Nam (2007) với cấp đánh giá EN A1,c,d; B1 +2b,c. và Danh lục thực vật rừng và động vật rừng nguy cấp, quí (nhóm 2A) Nghị Định 32/2006/NĐCP để hạn chế khai thác, sử dụng vì mục đích thương mại. Các điểm phân bố khơng nhiều và cách xa nhau, dễ gặp rủi ro vì cây chủ yếu mọc ven rừng, cạnh lối đi. Tại Hà Nội (Ba Vì), quần thể mọc chủ yếu độ cao từ 400500 m, gần khu vực Đền Trung, tuy nhiên, cây thường mọc rải rác số lượng cá thể khơng nhiều. Tại Tun Quang (Bản Bung, Na Hang), các điểm bắt gặp ở độ cao từ 200 đến 600 m, mật độ phân bố cao hơn, nhưng khơng đồng đều trong khu vực; ngồi ra còn gặp khu vực Hòa Bình (Lạc Sơn), Thanh Hóa (KBTTN Xuân Liên) Quảng Trị (Hướng Hóa). 3.1.3.1.5. Mơ hình bảo tồn Trên cơ sở những khảo sát tại khu vực nghiên cứu chúng tơi tiến hành nghiên cứu và đưa ra mơ hình bảo tồn sau đây: Bảo tồn ngun vị: Khoanh ni tự nhiên trên diện tích 200 m2 (với số lượng 900 cây) tại khu vực Lung Khăm (độ cao từ 400 đến 600 m) và trồng mới 200 m2 (800 cây con nhân giống) dưới tán rừng tự nhiên, thuộc 23 Bản Bung, huyện Na Hang, tỉnh Tun Quang. Nhìn chung, tại khu vực khoanh ni và trồng mới, cây sinh trưởng và phát triển tốt. Bảo tồn chuyển vị: Trồng dưới tán rừng trong khu vực vườn rừng của một số hộ tại Bản Bung độ cao 200430 m, diện tích 100 m2 với số lượng 240 cây con đã nhân giống. Cây có đủ độ che sáng và độ ẩm, được chăm sóc tốt nên sinh trưởng và phát triển cũng khá, tỷ lệ cây sống khá cao đạt 50,41% 3.1.3.2. Lồi Tế tân hoa có đi (Asarum caudigerum) 3.1.3.2.1 Khả tái sinh tự nhiên lồi Tế tân hoa có (Asarum caudigerum) tại Bản Bung, Na Hang, tỉnh Tun Quang Kết quả cho thấy, lồi Tế tân hoa có đi (Asarum caudigerum) phân bố tập trung dọc theo đường mòn sườn núi, nơi có độ ẩm cao, độ che thấp Tại các chân núi, ít gặp; đặc biệt, tại các đỉnh và rơng núi, khơng thấy xuất hiện lồi này. Cây chủ yếu tái sinh bằng hạt và chồi 3.1.3.2.2. Đặc điểm phân bố của lồi Tế tân hoa có đi (Asarum caudigerum) tại Bản Bung, Na Hang, tỉnh Tun Quang trong các cấu trúc thảm thực vật Phân bố theo kiểu rừng Kết quả điều tra tại Bản Bung, Na Hang, tỉnh Tun Quang cho thấy, lồi Tế tân hoa có đi (Asarum caudigerum) phân bố kiểu rừng nhiệt đới thường xanh mưa ẩm trên núi thấp, chủ yếu ở sườn và chân núi. Phân bố theo trạng thái và sinh cảnh Theo trạng thái rừng: Lồi Tế tân hoa có đi (Asarum caudigerum) phân bố tập trung chủ yếu ở trạng thái rừng IIIA2, thuộc vùng lõi của KBTTN Na Hang, tỉnh Tun Quang Về sinh cảnh: Lồi Tế tân hoa có đi (Asarum caudigerum) chủ yếu phân bố trên đất, chúng mọc sát ngay bề mặt đất, nơi đất giàu mùn; độ ẩm, độ xốp cao; thống khí; ưa sáng. Đơi khi thấy xuất hiện trên các hốc đá, hay những nơi ẩm ướt, ven các suối, dưới tán rừng cây gỗ nhỏ, chủ yếu ở hai bên đường mòn đi lại trong rừng Phân bố theo địa hình và đai cao Về địa hình: Phân bố chủ yếu ở dạng địa hình sườn núi, có thể bắt gặp một số ít cá thể ở chân núi, chưa bắt gặp ở đỉnh núi và rơng núi Về đai cao: Phân bố về độ cao của lồi Tế tân hoa có đi (Asarum caudigerum) rất rộng, từ 754 m đến 1.800 m. Với điều kiện về độ cao này, rất thích hợp cho việc gây trồng tự nhiên, nhằm bảo tồn và sử dụng bền vững lồi Tế tân hoa có đi (Asarum caudigerum) tại khu vực bản Bung, xã Thanh Tương, huyện Na Hang, tỉnh Tun Quang 24 3.1.3.2.3 Khả nhân giống loài Tế tân hoa có đi (Asarum caudigerum) Tại 2 địa điểm bản Bung là tại vườn rừng tự nhiên (thung Pu Cọ) và tại vườn ươm (Bản Bung), tỷ lệ ra rễ từ hom thân rễ (12,5%87,3%) cao hơn so với hom ngọn (6,67%80,1%). Tỷ lệ ra rễ ở vườn rừng tự nhiên (Pu Cọ) cao hơn rất nhiều so với tỷ lệ ra rễ ở vườn ươm (Bản Bung) Đặc biệt, chưa thấy cây nảy mầm từ hạt. 3.1.3.2.4. Tình trạng Tế tân hoa có đi (Asarum caudigerum) được xếp hạng VU (Sẽ nguy cấp) trong Sách Đỏ Việt Nam (2007) và thuộc nhóm II trong Nghị Định 32/2006/NĐCP của Chính phủ để hạn chế khai thác, sử dụng vì mục đích thương mại. Các ven rừng, hai bên đường mòn trong rừng. Qua các đợt khảo sát, chưa phát hiện lồi Tế tân hoa có đi (Asarum caudigerum) tại Hà Nội (Ba Vì), Vĩnh Phúc (Tam Đảo) và Lào Cai (Sa Pa). Mới chỉ gặp lồi này tại Tun Quang (Na Hang) và Hà Giang (Quản Bạ) với số lượng cá thể khá nhiều, tuy nhiên, phân bố khơng đồng đều giữa các khu vực khác nhau 3.1.3.2.5. Mơ hình bảo tồn Trên cơ sở những khảo sát tại khu vực nghiên cứu chúng tơi tiến hành nghiên cứu và đưa ra mơ hình bảo tồn sau đây: Bảo tồn ngun vị: Khoanh ni tự nhiên (300 cây) và trồng mới (600 cây nhân giống) trên diện tích 200 m2/mỗi nơi, ở độ cao trên 900 m, tại thung Pu Cọ thuộc Bản Bung, huyện Na Hang, Tun Quang; Cây sinh trưởng và phát triển tốt, tỷ lệ sống đạt 80% Bảo tồn chuyển vị: Tại bản Bung ở độ cao 400 m; diện tích 100 m 2 với số lượng 400 cây con đã nhân giống. Tuy được chăm sóc cẩn thận nhưng cây sinh trưởng và phát triển kém, tỷ lệ sống thấp đạt 612% 3.1.3.3. Lồi Tế tân nhẵn (Asarum glabrum) 3.1.3.3.1. Khả năng nhân giống bằng hom Thử nghiệm nhân giống hom thân loài Tế tân nhẵn ( Asarum glabrum) tại VQG Tam Đảo (Vĩnh Phúc) Từ kết quả thu được ở trên cho chúng ta thấy, lồi Tế tân nhẵn ( Asarum glabrum) khi khơng xử lý thuốc (cơng thức đối chứng) cho tỷ lệ ra rễ khơng cao (40%). Tỷ lệ ra rễ của các hom có xử lý thuốc kích thích (IBA, NAA và IAA) đạt từ 77,1% đến 91,4% Thời vụ nhân giống vào mùa xuân và mùa thu là phù hợp cho việc nhân giống. Tỷ lệ ra rễ khá cao cho thấy khả nhân giống hom thân loài Tế tân nhẵn ( Asarum glabrum) này là rất khả thi và có thể thực hiện thành cơng được 3.1.3.3.2. Tình trạng 25 Mặc dù cây bắt gặp ở nhiều điểm phân bố như Lào Cai (Sa Pa), Hà Giang (Quảng Bạ), Hà Nội (Ba Vì) và Vĩnh Phúc (Tam Đảo) nhưng ở mỗi điểm số lượng cá thể không nhiều, các quần thể thường nhỏ và bị phân cắt. Do bị phá rừng làm nương rẫy cũng như do bị khai thác quá mức để sử dụng hay buôn bán qua biên giới, cho nên, nơi sống và số lượng cá thể và kích thước quần thể của lồi bị ảnh hưởng, lồi được ghi trong Sách Đỏ Việt Nam 2007 với cấp đánh giá VU A1,c,d và Danh lục thực vật rừng và động vật rừng nguy cấp, q hiếm (nhóm 2A) trong Nghị Định 32/2006/NĐCP để hạn chế khai thác, sử dụng vì mục đích thương mại 3.1.3.3.3. Mơ hình bảo tồn Trên cơ sở những khảo sát tại khu vực nghiên cứu chúng tơi tiến hành nghiên cứu và đưa ra mơ hình bảo tồn sau đây: Bảo tồn ngun vị: Khoanh ni tự nhiên tại khu vực ven đường núi Rùng Rình (độ cao trên 1.000 m), thuộc thị trấn Tam Đảo, Vĩnh Phúc (VQG Tam Đảo) diện tích 200 m2 với số lượng 80 cây (trung bình khoảng 4.000 cây/ha). Số lượng cây khơng nhiều nhưng sinh trưởng và phát triển tốt. Tại xã Thái An, Quản Bạ, Hà Giang với diện tích 100 m dưới tán rừng khu vực chân núi độ cao 1.100 m, với số lượng 600 cây. Cây sinh trưởng và phát triển tốt. Bảo tồn chuyển vị: Trồng cây dưới tán rừng khu vực Vườn thực vật tại Ban quản lý VQG Tam Đảo độ cao 200 m; diện tích 150 m với số lượng 500 cây con đã nhân giống. Tuy trồng dưới tán với độ ẩm và độ che sáng hợp lý, chăm sóc cẩn thận, nhưng cây sinh trưởng và phát triển chậm, tỷ lệ sống đạt 60% 3.2. THÀNH PHẦN HĨA HỌC CỦA MỘT SỐ LỒI THUỘC CHI TẾ TÂN (ASARUM L.) Ở VIỆT NAM 3.2.1. Thành phần hóa học chủ yếu trong tinh dầu của một số lồi thuộc chi Tế tân (Asarum L.) Hàm lượng tinh dầu của lồi Asarum balansae đạt 0,02% (theo ngun liệu khơ khơng khí). Tinh dầu là chất lỏng màu vàng chanh, có mùi thơm nhẹ và nặng hơn nước. Tinh dầu từ lồi Aarum balancae chứa 18 hợp chất, đó, thành phần hóa học tinh dầu là elemicin (71,53%) và trans isoelemicin (19,85%) Hàm lượng tinh dầu của lồi Asarum yunnanense đạt 0,16% (theo ngun liệu khơ khơng khí). Thành phần hóa học chính của tinh dầu là Emethyl isoeugenol (47,39%); Cisβelemene (5,94%), bicyclogermacren (4,58%) Myristicine (4,26%); δelemene (4,90%) 26 Hàm lượng tinh dầu loài Asarum reticulatum đạt 0,002% (theo ngun liệu khơ khơng khí). Thành phần hóa học chính của tinh dầu là myristicine (59,06%); dilapiole (17,67%). Các hợp chất khác có tỷ lệ nhỏ là elemicine (2,29%) và 2caren (2,1%) Hàm lượng tinh dầu của lồi Asarum cordifolium đạt 0,22% theo ngun liệu khơ khơng khí. Thành phần hóa học chính của tinh dầu là elemicin (84,38%) và methyl eugenol (3,63%) Ở lồi Tế tân nhẵn (Asarum glabrum), hàm lượng tinh dầu từ phần trên mặt đất của cây đạt 0,36% (theo ngun liệu khơ khơng khí). Thành phần chính là: safrol (chiếm 42,24%), apiole (27,11%) và myristicin (6,13%) 3.2.2. Nghiên cứu phân lập và xác định cấu trúc các hợp chất từ một số lồi thuộc chi Tế tân (Asarum L.) ở Việt Nam 3.2.2.1. Nghiên cứu phân lập và xác định cấu trúc các hợp chất từ lồi Asarum glabrum Từ lồi Asarum glabrum, chúng tơi đã phân lập và xác định cấu trúc được 02 hợp chất: 1) Hợp chất AS1: có cấu trúc 3methyl8hydroxy3,4 dihydroisocoumarin6O Dglucopyranoside 6' HO 4' HO HO 3' O 5' 2' OH 1' O 11 10 OH O HO HO HO O O OH O O OH O 2) Hợp chất AS3: có cấu trúc 3methyl6methoxy3,4 dihydroisocoumarin8O Dglucopyranoside 3.2.2.2. Phân lập và xác định cấu trúc hóa học các hợp ch ất từ lồi Asarum balansae Từ lồi Asarum balansae, chúng tơi phân lập và xác định cấu trúc được 05 hợp chất 1) Hợp chất ABW4.2: có cấu trúc là threo1(3hydroxy4 methoxyphenyl) propan1,2diol 27 5' 6' OH 4' O 1' 2' 3' HO HO ABW4.2 2) Hợp chất ABW3.1: có cấu trúc là kaempferol 7OαL rhamnopyranoside 3) Hợp chất ABW6.3: có cấu trúc Naringenin5,7diO D glucopyranoside 4) Hợp chất ABW1.3: kaempferol 3OβD glucopyranoside 5) Hợp chất ABW1.4.2: kaempferol 3OβD galactopyranoside ABW3.1 ABW1.3 3' O Rha 2' 1' O 10 OH O 6' ABW1.4.2 OH OH OH 4' 5' HO O HO O O OH OH O Glu O OH O Gal 3.3 KẾT QUẢ THỬ NGHIỆM HOẠT TÍNH SINH HỌC 3.3.1. Hoạt tính kháng vi sinh vật Bảy dịch chiết thơ (AS1, AS3, ASMe, ABMe, AB.W1.3, AB.W4.2 và AB.W6.3) và các phân đoạn của 3 lồi Asarum glabrum, A. balansae và A. caudigerum được thử hoạt tính kháng loại vi sinh vật kiểm định (VSVKĐ) trên các phiến vi lượng 96 giếng. Kết quả cho thấy, có 3 mẫu thể hiện hoạt tính kháng yếu đối với các VSVKĐ là ASMe và ABMe. 3.3.2. Hoạt tính gây độc các dòng tế bào ung thư 3 lồi thuộc chi Tế tân (Asarum L.) đều khơng biểu hiện hoạt tính gây độc dòng tế bào ung thư 3.3.3. Hoạt tính chống oxy hóa 2 mẫu ký hiệu ABW3.1 và ABW oxy hóa trên hệ DPPH 28 4.2 có biểu hiện hoạt tính chống KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN 1. Đề tài mơ tả chi tiết đặc điểm sinh học, sinh thái, phân bố và cơng dụng của 7 lồi đã biết thuộc chi Tế tân (Asarum L.) ở Việt Nam, trong đó, đã bổ sung 2 lồi Tế tân vân nam (Asarum yunnanense) và Tế tân lá hình tim (Asarum cordifolium) cho hệ thực vật Việt Nam, nâng tổng số lồi thuộc chi (Asarum L.) ở Việt Nam lên 9 lồi 2. Tái sinh tự nhiên: Các lồi Tế tân chủ yếu tái sinh bằng chồi, tái sinh bằng hạt chiếm tỷ lệ nhỏ; cây thường mọc ven đường mòn trong rừng, gần suối, độ ẩm và ánh sáng cao 3. Nhân giống và bảo tồn: Đã nghiên cứu khả năng nhân giống các lồi Asarum balansae, A. glabrum và A. caudigerum. Cây ra rễ từ hom thân chiếm tỷ lệ cao; chưa thấy hạt nãy mầm trong phòng thí nghiệm Có thể bảo tồn (ngun vị) bằng mơ hình khoanh ni tự nhiên và trồng mới dưới tán rừng tại khu vực vườn rừng các lồi Asarum balansae ở bản Bung, Na Hang (Tun Quang), A. glabrum ở VQG Tam Đảo (Vĩnh Phúc) và A. caudigerum Na Hang (Tun Quang). Nhìn chung cây sinh trưởng và phát triển tốt. Việc bảo tồn (chuyển vị) bằng việc trồng mới dưới tán rừng tại khu vực vườn rừng lồi Asarum balansae ở bản Bung, Na Hang (Tun Quang) là có khả quan, cây sinh trưởng phát triển khá, tuy nhiên việc bảo tồn lồi Asarum glabrum tại vườn thực vật Tam Đảo thuộc VQG Tam Đảo và ở KBTTN Bát Đại Sơn và loài Asarum caudigerum Na Hang (Tun Quang) còn chưa tốt, cây đạt tỷ lệ sống thấp, cây sinh trưởng và phát triển chậm. 4. Thành phần hóa học của tinh dầu: Thành phần hóa học chính của tnh dầu loài Asarum reticulatum là myristicin (59,06%) dilapiol (17,67%); loài Asarum balansae là elemicin (71,53%) và transisoelemicin (19,85%); loài Asarum cordifolium là elemicin (84,38%) và methyl eugenol (3,63%); loài Asarum yunnanense là Emethyl isoeugenol (47,39%), cisβ elemen (5,94%), bicyclogermacren (4,58%), myristicin (4,26%) δ elemen (4,90%); lồi Asarum glabrum là safrol (42,24%), apiole (27,11%) và myristicin (6,13%). Đây là các dẫn liệu mới về thành phần hóa học của tinh dầu các lồi thuộc chi Tế tân (Asarum L.) ở Việt Nam 5. Hoạt tính sinh học: Hai mẫu, ký hiệu ABW3.1 và ABW4.2 của lồi A. balansae có biểu hiện hoạt tính chống oxy hóa trên hệ DPPH. Dịch 29 chiết ASMe (A glabrum) có tác dụng kháng vi khuẩn Gram (+) E. coli và nấm mốc A. niger; dịch chiết ABMe (A. balansae) có tác dụng kháng vi khuẩn Gram (+) là E. coli, P. aeruginosa; Gram () là S. aureus và nấm mốc A niger; Gram () S aureus nấm mốc A niger, F. oxysporon 6. Thành phần các hợp chất hóa học: Từ dịch chiết metanol của cây Asarum glabrum hai hợp chất isocoumarin đã được phân lập. Cấu trúc của chúng được xác định là 3methyl6metoxy3,4dihydroisocoumarin8 O Dglucopyranoside (AS1) 3methyl8hydroxy3,4 dihydroisocoumarin6O Dglucopyranoside (AS3) dựa vào các phương pháp phổ kết hợp. Đây là lần đầu tiên nhóm chất isocoumarin được phát hiện từ chi Tế tân (Asarum L.) Từ dịch chiết metanol của lồi Asarum balanse, đã phân lập được 5 hợp chất: 1(3hydroxy4metoxyphenyl)propan1,2diol (ABW4.2); 4 flavonoid glycoside keampferol 7OαLrhamnopyranoside (ABW3.1); naringenin5,7diO Dglucopyranoside (ABW6.3); kaempferol 3OβD glucopyranoside (ABW1.3) kaempferol 3OβD galactopyranoside (ABW1.4.2) Hợp chất 1(3hydroxy4metoxyphenyl)propan1,2diol (ABW4.2) được xác định là một phenylpropanoid mới. 7. Tri thức bản địa: Trong dân gian, số loài thuộc chi Tế tân (Asarum L.) được sử dụng làm thuốc. Rễ, thân rễ và lá của đa số các loài thuộc chi Tế tân (Asarum L.) được dùng làm thuốc chữa ho, viêm phế quản, làm thuốc tắm trị đau nhức xương khớp, làm thuốc tắm trị đau lưng, nhiễm trùng vết thương và trị bệnh trĩ, chữa viêm họng, cảm sốt và cảm lạnh, đau bụng, đau mắt, thâm mắt, làm tan mơng mắt, trĩ nội, trĩ ngoại, rửa các vết thương, lỡ lt ngồi da, u nhọt; dùng làm thuốc tắm gây ra thai; Hoa ngâm rượu làm thuốc bổ trị bệnh mất ngủ, đâu đầu, thần kinh suy nhược và ăn uống ngon miệng KIẾN NGHỊ Tiếp tục nghiên cứu khả năng nhân giống từ hạt của các lồi nói trên; Nghiên cứu phân lập và xác định cấu trúc hóa học của lồi A. glabrum; tiếp tục nghiên cứu mơ hình chuyển vị lồi A. glabrum và A. caudigerum 30 DANH MỤC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ CỦA TÁC GIẢ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN Trần Huy Thái, Nguyễn Thị Hiền, Đỗ Thị Minh, Nguyễn Anh Tuấn, 2010. Thành phần hóa học của tinh dầu hoa tiên (Asarum glabrum Merr.) ở Hà Giang, Việt Nam. Tạp chí Sinh học, 32(1): 9496 Nguyễn Anh Tuấn, Trần Huy Thái, 2012. Đặc điểm sinh thái phân bố Biến hóa núi cao (Asarum balansae Franch.) tại Bản Bung, huyện Na Hang, tỉnh Tuyên Quang Tạp chí Sinh học, 34(1): 7581 Nguyễn Anh Tuấn, Trần Huy Thái, JennChe Wang, ChangTse Lu, 2012. Bổ sung lồi Asarum cordifolium C.E.C Fisher (Họ Mộc hương Aristolochiaceae) cho hệ th ực v ật Việt Nam. Tạp chí Sinh học, 34(2): 197200 Nguyễn Anh Tuấn, Trần Huy Thái, JennChe Wang, ChangTse Lu, 2012 Bổ sung loài Asarum yunnanensis T. Sugaw., Ogisu & C.Y Cheng (Họ Mộc hương Aristolochiaceae) cho hệ thực vật Việt Nam. Tạp chí Sinh học, 34(4): 441445 31 Tran Huy Thai, Ophélie Bazzali, Tran Minh Hoi, Nguyen Anh Tuan, Félix Tomi, Joseph Casanova, Ange Bighelli, 2013 Chemical composition of the essential oils from two Vietnamese Asarum species: A. glabrum and A. cordifolium. Natural Product Communications, 8(2): 235238 Trần Huy Thái, Nguyễn Thị Hiền, Trần Minh Hợi, Nguyễn Anh Tuấn, Nguyễn Tiến Đạt, Nguyễn Thị Hải, 2013 Thành phần hóa học của tinh dầu một số lồi trong chi Hoa tiên (Asarum L.) ở Việt Nam. Tạp chí Sinh học, 35(1): 5560 Nguyễn Anh Tuấn, Trần Huy Thái, 2013. Đặc điểm hình thái, sinh thái phân bố loài thổ tế tân (Asarum caudigerum Hance) Bản Bung, huyện Na Hang, tỉnh Tun Quang. Tạp chí Nơng nghiệp và Phát triển nơng thơn, 222(15): 108114 ... nhiều ý nghĩa khoa học và giá trị thực tiễn cao. Chính vì vậy, chúng tơi đã thực hiện đề tài: Nghiên cứu các cơ sở khoa học nhằm bảo tồn và phát triển bền vững các lồi q hiếm thuộc chi Tế tân (Asarum L.) ở ... CHƯƠNG III: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 3.1. NGHIÊN CỨU PHÂN LOẠI, ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC VÀ BẢO TỒN CÁC LỒI THUỘC CHI TẾ TÂN (ASARUM L.) Ở VIỆT NAM 3.1.1. Nghiên cứu phân loại và đặc điểm của các lồi thuộc chi Tế ... chúng suy giảm ít nhất khoảng 20%. Nghiên cứu các cơ sở khoa học để bảo tồn, phục hồi và sử dụng bền vững tính đa dạng của các lồi thuộc chi Tế tân (Asarum L.) ở Việt Nam là vấn đề thời sự mang tính cấp thiết có