ác định nồng độ Cx (mg/L) thuốc trừ sâu A hổn hợp, ta thu số liệu bảng sau Tính nồng chất X mẫu STT C (mg/L) SA SIS 0.04 198.000 110.000 0.08 288.000 80.000 0.12 513.000 95.000 CX 400.500 89.000 4.20 Haddad cộng khảo sát hệ số lưu giữ salicylamide caffeine Khi tách hai chất pha tĩnh không phân cực %v/v methanol ksal kcaff 30% 2.4 4.3 35% 1.6 2.8 40% 1.6 2.3 45% 1.0 1.4 50% 0.7 1.1 55% 0.7 0.9 a Giải thích chiều hướng thay đổi k’ hai hợp chất b Nêu ưu điểm sử dụng pha động với thành phần MeOH nhỏ hơn? Có nhược điểm không 11 Bài tập Sắc ký –Phan Thị Xuân, Nguyễn Ngọc Hòa, Lê Thị Ngọc Hạnh - 2019 4.21 Xác định thành phần thuốc viên đa vitamin HPLC với đầu dò UV/Vis diode array UV/Vis detector 5µL mẫu chuẩn chứa vitamin với nồng độ liệt kê bảng tiêm vào máy sắc ký cho tín hiệu liệt kê bảng sau Một viên thuốc đa vitamin nghiền mịn chuyển vào bình tam giác 125mL chứa sẵn 10mL NH3 1% (v/v) dimethyl sulfoxide Sau đánh siệu âm phút, tiêm vào bình 90mL acetic acid đánh siêu âm 400 C phút Dịch chiết lọc qua màng lọc 0,45 µm Tiêm 5µL mẫu vừa xử lý xong vào máy HPLC cho tín hiêu theo bảng sau Tính số mg vitamin viên thuốc có Tên chất vitamin C niacin niacinamide pyridoxine thiamine folic acid riboflavin Chuẩn 170 130 120 150 60 15 10 (ppm) Tín hiệu 0,22 1,35 0,90 1,37 0,82 0,36 0,29 chuẩn Tín hiệu 0,87 0,00 1,40 0,22 0,19 0,11 0,44 mẫu 4.22 Xác định caffeine thuốc HPLC với kỹ thuật đường chuẩn Dung dịch chuẩn caffeine xử lý tiêm vào hệ thống HPLC với vòng loop 10µL Kết liệt kê bảng sau concentration 50 100 150 200 250 (ppm) signal (arb units) 354 16 925 25 218 33 584 42 002 Mẫu xử lý sau: cho viên thuốc vào cốc nhỏ thêm vào 10mL methanol Sau để mẫu hoà tan, chuyển toàn từ cốc vào bình định mức 25mL (kể phần khơng tan) định mức tới vạch methanol Lọc mẫu chuyển 1mL vào bình định mức 10mL, định mức Methanol Lọc mẫu qua màng lọc 0.45µL tiêm vào hệ thống HPLC cho tín hiệu 21469 Tính số mg cafein viên thuốc 4.23 Ohta and Tanaka xác định đồng thời số ion nước Pha động chứa 1,2,4benzenetricarboxylate, chất hấp thu mạnh 270nm Mặt khác Ca2+ Mg2+ có mặt nước mơi trường nồng độ cao tạo phức với 1,2,4 benzenetricarboxylate, gây nhiễu lên phép phân tích a Q trình cần thêm EDTA vào pha động Nêu vai trò EDTA b Một dung dịch chuẩn với nồng độ tín hiệu cho bảng sau Phân tích mẫu nước sơng cho tín hiệu sau Tính nồng độ mẫu Chuẩn mM Ion S peak Speak nước sông NaHCO3 1000 HCO3– 373.5 310.0 NaNO2 0.2 Cl– 322.5 403.1 MgSO4 0.2 NO2– 264.8 3.97 CaCl2, 0.1 NO3– 262.7 157.6 Ca(NO3)2 0.1 Ca2+ Mg2+ 458.9 352.0 734.3 193.6 SO42– 341.3 324.3 4.24 Nồng độ Cl–, NO3–, and SO42– xác định sắc ký ion.Tiêm 50µL chuẩn có nồng độ thành phần tín hiệu tương ứng theo bảng sau Một mẫu nước 12 Bài tập Sắc ký –Phan Thị Xuân, Nguyễn Ngọc Hòa, Lê Thị Ngọc Hạnh - 2019 thải pha lỗng 10 lần tiêm 50µL cho tín hiệu bảng sau Tính nồng độ anion theo ppm Tên thành phần Cl– NO3SO42Ppm chuẩn 10.0 2.00 5.00 Tín hiệu đo chuẩn 59.3, 16.1, 6.08 Tín hiệu đo mẫu 44.2 2.73 5.04 4.25 Cân 2.013-g mẫu đất , xử lý mẫu cách chiết với 20,00 ml methylene chloride Sau lọc để loại hết đất, Lấy 1ml dịch chiết pha loãng thành 10ml với ACN Tiêm 5μl mẫu xử lý vào hệ thống HPLC cho tín hiệu 0,217 ứng với PAH fluoranthene Tiêm μL chuẩn fluoranthene 20ppm vào hệ thống HPLC điều kiện có tín hiệu 0,258 Tính nồng độ fluoranthene mẫu đất 4.26 Xác định kháng sinh enro cipro thịt tôm thực sau Mẫu: Cân 2019.9 mg thịt tôm (sau bóc vỏ, xay nhuyễn) Cho 10ml dung dịch HCOONH4 0.05M, pH= vào vortex, đánh siệu âm để chiết kháng sinh, ly tâm thu dịch chiết, Chiết lại lần thứ hai Toàn dịch chiết loại béo với 10ml hexane Thực loại béo hai lần Hút bỏ lớp hexan 10 mL Dịch chiết sau loại béo áp lên cột chiết SPE rửa giải mL Me: NH3 (85Me: 15NH3) Thổi khơ khí Argon đến dung dịch khoảng 0,3mL Định mức cách cân đến khoảng 1020,05 mg đệm HCOONH4 0.2% Lọc qua màng lọc 0,45μm, đánh siêu âm tiêm vào hệ thống HPLC Chuẩn: Chuẩn pha đệm HCOONH4 0,2%, có số liệu sau Chuẫn Ciprofloxacine ppb 5,10 25,51 S peak 50088 257330 Enrofloxacine 50,81 75,82 5,24 26,21 52,20 78,3 485653 785893 93439 458926 903409 1372170 Mẫu - Diện tích peak ciprofloxacine ; 504618; - Diện tích peak enrofloxacine: 363608 Tính nồng độ pbb cipro enro tôm, 13 ... SO42– xác định sắc ký ion.Tiêm 50µL chuẩn có nồng độ thành phần tín hiệu tương ứng theo bảng sau Một mẫu nước 12 Bài tập Sắc ký –Phan Thị Xuân, Nguyễn Ngọc Hòa, Lê Thị Ngọc Hạnh - 2019 thải pha loãng...Bài tập Sắc ký –Phan Thị Xuân, Nguyễn Ngọc Hòa, Lê Thị Ngọc Hạnh - 2019 4.21 Xác định thành phần thuốc viên đa vitamin HPLC với đầu dò... diode array UV/Vis detector 5µL mẫu chuẩn chứa vitamin với nồng độ liệt kê bảng tiêm vào máy sắc ký cho tín hiệu liệt kê bảng sau Một viên thuốc đa vitamin nghiền mịn chuyển vào bình tam giác 125mL