BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI - - PHÙNG THỊ HOA NGHIÊN CỨU CHIẾT XUẤT CAO ĐẶC GIÀU FLAVONOID TỪ VỎ HẠT ĐẬU XANH KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI - 2019 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI PHÙNG THỊ HOA Mã sinh viên: 1401232 NGHIÊN CỨU CHIẾT XUẤT CAO ĐẶC GIÀU FLAVONOID TỪ VỎ HẠT ĐẬU XANH KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: PGS.TS Nguyễn Thu Hằng NCS.ThS Nguyễn Đình Dũng Nơi thực hiện: Bộ môn Dược liệu HÀ NỘI - 2019 LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, xin bày tỏ lòng kính trọng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS NGUYỄN THU HẰNG (Trưởng môn Dược liệu - Trường Đại học Dược Hà Nội), với cô không người thầy, người giành thời gian, tâm huyết để tận tình bảo, hướng dẫn, động viên khích lệ tơi suốt khoảng thời gian tơi thực đề tài tốt nghiệp mà người truyền cảm hứng cho tơi suốt q trình làm việc môn Nhân đây, xin gửi lời cảm ơn đến: NCS.ThS Nguyễn Đình Dũng người bên hướng dẫn, giúp đỡ động viên tơi để tơi hồn thành khóa luận cách tốt DS Nguyễn Văn Phương người động viên giúp đỡ tơi suốt q trình làm đề tài Tôi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới tồn thể thầy cơ, anh chị kỹ thuật viên Bộ môn Dược liệu - Trường Đại Học Dược Hà Nội tạo điều kiện giúp đỡ tơi q trình hồn thành đề tài Cuối muốn gửi lời cảm ơn chân thành tới người thân u gia đình tơi, anh chị, bạn em sinh viên làm đề tài Bộ môn Dược liệu ủng hộ, cổ vũ khích lệ tơi suốt q trình học tập trường thời gian thực đề tài Tôi xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 19 tháng 05 năm 2019 Sinh viên Phùng Thị Hoa MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Đặc điểm thực vật phân bố loài Vigna radiata (L.) Wilczek 1.2 Thành phần hóa học vỏ hạt đậu xanh 1.3 Tác dụng sinh học vỏ hạt đậu xanh 1.4 Công dụng 1.5 Chiết xuất flavonoid từ vỏ hạt đậu xanh 1.6 Tổng quan cao thuốc từ dược liệu CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 11 2.1 Đối tượng, nguyên liệu thiết bị nghiên cứu 11 2.1.1 Nguyên liệu 11 2.1.2 Dụng cụ thiết bị 11 2.1.3 Hóa chất 12 2.2 Nội dung nghiên cứu 12 2.3 Phương pháp nghiên cứu 12 CHƯƠNG THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 19 3.1 Kết xây dựng thẩm định phương pháp định lượng isovitexin vitexin cao chiết từ vỏ hạt đậu xanh 19 3.2 Kết khảo sát số yếu tố ảnh hưởng đến trình chiết xuất cao đặc giàu flavonoid từ vỏ hạt đậu xanh lựa chọn điều kiện chiết xuất 31 3.3 Kết khảo sát số tiêu kiểm nghiệm cao chiết từ vỏ hạt đậu xanh ……………………………………………………………………………… 36 3.3.1 Mô tả 36 3.3.2 Độ đồng 36 3.3.3 pH 37 3.3.4 Định tính 38 3.3.5 Mất khối lượng làm khô 40 3.3.6 Định lượng 41 3.4 Bàn luận 42 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 45 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT Ký hiệu Tiếng Việt AOAC Hiệp hội nhà hóa phân tích thống ALT alanin transaminase AST aspartat transaminase Dd dung dịch EtOH Ethanol EtOAc ethyl acetat HPLC sắc ký lỏng hiệu cao HL hàm lượng IL Interleukin KL khối lượng LOD giới hạn phát LOQ giới hạn định lượng MeOH methanol MDA malonyl dialdehyd RSD (%) độ lệch chuẩn tương đối TB trung bình TNF – α yếu tố hoại tử khối u- alpha S diện tích pic SD độ lệch chuẩn SKLM sắc ký lớp mỏng SOD superoxid dismutase DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng Tên bảng Trang 1.1 Cấu trúc hóa học số flavonoid vỏ hạt đậu xanh 3.1 Cách pha dãy dung dịch chuẩn 20 3.2 Kết khảo sát phù hợp hệ thống 24 3.3 Kết khảo sát độ tuyến tính khoảng xác định phương pháp định lượng 25 3.4 Kết khảo sát độ lặp lại isovitexin 27 3.5 Kết thẩm định độ lặp lại vitexin 28 3.6 Kết khảo sát độ isovitexin 29 3.7 Kết khảo sát độ vitexin 30 3.8 Kết xác định giới hạn phát LOD, giới hạn định lượng LOQ phương pháp 31 3.9 Thiết kế thí nghiệm khảo sát nồng độ ethanol thời gian chiết xuất 32 3.10 Tỉ lệ cao thu hàm lượng isovitexin vitexin mẫu cao chiết từ vỏ hạt đậu xanh theo dung môi thời gian chiết xuất 33 3.11 Thiết kế thí nghiệm khảo sát số lần chiết xuất nhiệt độ chiết xuất 34 3.12 Tỉ lệ cao thu hàm lượng isovitexin vitexin mẫu cao chiết từ vỏ hạt đậu xanh theo số lần chiết nhiệt độ chiết 35 3.13 Kết xác định pH mẫu cao chiết từ vỏ hạt đậu xanh 37 3.14 Kết định tính thành phần hóa học mẫu cao chiết từ vỏ hạt đậu xanh phản ứng hóa học 38 3.15 Kết xác định khối lượng làm khô mẫu cao chiết từ vỏ hạt đậu xanh 41 3.16 Kết định lượng isovitexin vitexin mẫu cao chiết từ vỏ hạt đậu xanh 41 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ Hình Tên hình Trang 1.1 Ảnh chụp đậu xanh (Vigna radiata (L.) Wilczek) 2.1 Ảnh chụp mẫu dược liệu vỏ hạt đậu xanh nghiên cứu 11 3.1 Phổ hấp thụ UV-Vis isovitexin, vitexin dung dịch chuẩn hỗn hợp 21 3.2 Sắc ký đồ dung dịch chuẩn hỗn hợp bước sóng 270 nm 335 nm 22 3.3 Sắc ký đồ đánh giá độ đặc hiệu phương pháp định lượng 23 3.4 Đường hồi quy tuyến tính biểu thị mối tương quan nồng độ diện tích pic isovitexin khoảng nồng độ từ µg/ml 150 µg/ml 26 3.5 Đường hồi quy tuyến tính biểu thị mối tương quan nồng độ diện tích pic vitexin khoảng nồng độ từ µg/ml – 150 µg/ml 26 3.6 Ảnh chụp mẫu cao chiết từ vỏ hạt đậu xanh quan sát kính hiển vi vật kính 10 37 3.7 Ảnh chụp sắc ký đồ cao chiết từ vỏ hạt đậu xanh quan sát bước sóng 366nm sau phun thuốc thử NP 40 ĐẶT VẤN ĐỀ Đậu xanh loại lương thực gần gũi quen thuộc với nhân dân ta Ngoài giá trị dinh dưỡng, đậu xanh sử dụng theo kinh nghiệm dân gian dạng toàn hạt vỏ hạt để làm thuốc chữa bệnh Hạt đậu xanh để chữa sốt nóng, phiền khát, phù thũng, tả lỵ, mụn nhọt sưng tấy, loét miệng lưỡi, trường hợp ngộ độc [3] Vỏ hạt đậu xanh có tác dụng giải nhiệt, tiêu độc tốt so với hai mầm Tác giả Nguyễn Đình Dũng cộng công bố thành phần chủ yếu vỏ hạt đậu xanh flavonoid, flavonoid isovitexin vitexin [5] Flavonoid chiết từ vỏ hạt đậu xanh có tác dụng bảo vệ tim mạch, bảo vệ tế bào gan, bảo vệ thể chống phóng xạ [7] chống đột biến [26], chống u thực nghiệm [14] Dịch chiết vỏ hạt đậu xanh có tác dụng ức chế emzym xanthin oxidase in vitro [13] Bên cạnh đó, vỏ hạt đậu xanh dược liệu rẻ tiền, dễ kiếm dư phẩm trình sản xuất đậu xanh tách vỏ Do đó, vỏ hạt đậu xanh đánh giá nguồn nguyên liệu giàu flavonoid để nghiên cứu phát triển thuốc điều trị Tác giả Trần Vân Hiền xây dựng quy trình chiết xuất flavonoid từ vỏ hạt đậu xanh [16], nhiên quy trình nhược điểm sử dụng dung mơi hữu độc hại Do đó, việc xây dựng quy trình chiết xuất cao đặc giàu flavonoid sử dụng dung môi an tồn, thân thiện với mơi trường để phát triển thuốc điều trị từ vỏ hạt đậu xanh cần thiết Vì vậy, nhóm nghiên cứu tiến hành đề tài “Nghiên cứu chiết xuất cao đặc giàu flavonoid từ vỏ hạt đậu xanh Đề tài thực với hai mục tiêu sau: Khảo sát số yếu tố ảnh hưởng đến trình chiết xuất cao đặc giàu flavonoid từ vỏ hạt đậu xanh lựa chọn điều kiện chiết xuất Sơ đánh giá số tiêu kiểm nghiệm cao chiết từ vỏ hạt đậu xanh CHƯƠNG TỔNG QUAN Cây đậu xanh có tên khoa học Vigna radiata (L.) Wilczek, họ Đậu (Fabaceae) [41] Tên đồng nghĩa: Phaseolus radiatus Lour non L; Phaseolus mungo Gagnep non L; Phaseolus aureus Roxb.; Vigna aureus (Roxb.) Hepper; Vigna aurea Khôi; Vigna aurea Roxb; Azukia radiata (L.) Ohwi, Cadelium radiatum (L.) S.Y.Hu, Phaseolus aureus Wall., Phaseolus abysissinicus Savi, Phaseolus aureus Zuccagni, Vigna aureus Piper [25], [3] Tên nước ngoài: Green gram, Mung bean (Anh); Haricot mungo (Pháp); Xi dou, Xiao dou (Trung Quốc); Fundou, Bundou (Nhật) [39] Theo hệ thống phân loại Takhtajan năm 2009 [33], chi Vigna thuộc Họ đậu (Fabaceae), Bộ đậu (Fabales) Phân lớp hoa hồng (Rosidae), Lớp ngọc lan (Magnoliopsida), Ngành ngọc lan (Magnoliophyta, Giới thực vật (Plantae) 1.1 Đặc điểm thực vật phân bố loài Vigna radiata (L.) Wilczek Cây thảo sống hàng năm, mọc đứng, phân nhánh, cao từ 50- 60 cm thân cành có rãnh phủ đầy lông mềm Lá kép mọc so le gồm chét, hình trái xoan tam giác, gốc tròn đầu nhọn, mặt màu lục sẫm, mặt màu nhạt, gân tỏa từ gốc, cuống dài 10-15 cm Cụm hoa nhiều màu vàng màu lục mọc thành chùm kẽ lá, đài hình chng ngắn, nhị 9+1 Quả hình trụ mảnh, có lơng bề mặt Hạt hình trụ ngắn, rốn hạt màu trắng hình elip dài (Hình 1.1) Mùa hoa: 3-5, mùa quả: 6-8 Đậu xanh trồng khắp nước nhiệt đới cận nhiệt đới châu Á châu khác Hình 1.1 Ảnh chụp đậu xanh (Vigna radiata (L.) Wilczek) giới Ở Việt Nam, trồng phổ biến khắp nơi 1.2 Thành phần hóa học vỏ hạt đậu xanh Thành phần hóa học vỏ hạt đậu xanh gồm có flavonoid, tanin, acid hữu cơ, đường khử, polysaccharid, thành phần flavonoid [30] Năm 1998, theo tác giả Trần Vân Hiền cộng [17], hàm lượng flavonoid toàn phần vỏ hạt đậu xanh 0,8%, định lượng HPLC cho thấy flavonoid vỏ hạt đậu xanh isovitexin (9,5%) vitexin (90,5%) Năm 2014, từ phân đoạn dịch chiết ethyl acetat vỏ hạt đậu xanh, tác giả Nguyễn Thu Hằng phân lập nhận dạng hai flavonoid quercitrin vitexin [12] Năm 2017, Nguyễn Thị Thu Hà cộng phân lập luteolin, taxifolin catechin từ vỏ hạt đậu xanh [11] Năm 2017, Phạm Thị Thu Hằng cộng phân lập vitexin, isovitexin, luteolin, taxifolin catechin từ vỏ hạt đậu xanh [14] Năm 2018, Nguyễn Đình Dũng cộng định lượng flavonoid vỏ hạt đậu xanh HPLC cho thấy thành phần vỏ hạt đậu xanh isovitexin vitexin [5] Cấu trúc hóa học số flavonoid vỏ hạt đậu xanh trình bày bảng 1.1 Một nghiên cứu thành phần chất vô phương pháp quang phổ phát xạ tác giả Hoàng Quỳnh Hoa [18] cho thấy vỏ hạt đậu xanh có chứa 14 ngun tố vơ Al, Si, Mg, Ca, Ba, Fe, Mn, Ni, Cu, P, Na, K, Sr Ti Nguyên tố K chiếm tỷ lệ nhiều vỏ hạt đậu xanh (5%) Ngồi ra, vỏ hạt đậu xanh có D-chiro-inositol tự [36] 3 Sắc ký đồ mẫu thử S Vitexin 0.0 Isovitexin 0.1 (µAU.s) 11.883 9.158 Volts 0.2 10 12 14 Vitexin 1449349 Isovitexin 1243440 16 Minutes S 11.883 Vitexin 0.0 Isovitexin 0.1 (µAU.s) 9.158 Volts 0.2 10 12 14 Vitexin 1435795 Isovitexin 1234175 16 Minutes Sắc ký đồ mẫu thử 11.892 S 0.0 (µAU.s) Isovitexin Vitexin 0.1 9.167 Volts 0.2 10 12 14 Vitexin 1553610 Isovitexin 1330379 16 Minutes 0.0 Minutes (µAU.s) Isovitexin 0.1 9.167 11.892 S Vitexin Volts 0.2 10 12 14 16 Vitexin 1541053 Isovitexin 1321519 Sắc ký đồ mẫu thử 11.892 S Vitexin 0.0 (µAU.s) Isovitexin 0.1 9.167 Volts 0.2 10 12 14 Vitexin 1731653 Isovitexin 1486366 16 Minutes Vitexin 0.0 (µAU.s) Isovitexin 0.1 S 11.892 9.167 Volts 0.2 10 12 14 Vitexin 1730922 Isovitexin 1488311 16 Minutes Sắc kỹ đồ mẫu thử số S Vitexin 0.05 0.00 (µAU.s) Isovitexin Volts 8.767 11.200 0.10 10 12 Vitexin 1398788 Isovitexin 1208606 14 Minutes Minutes Isovitexin Vitexin 0.00 (µAU.s) 8.758 Volts 0.05 S 11.200 0.10 10 12 14 Vitexin 1415557 Isovitexin 1217617 PHỤ LỤC Sắc ký đồ khảo sát độ lặp lại ngày thứ hai Sắc ký đồ mẫu thử S (µAU.s) Vitexin 1612056 Isovitexin 1384974 S (µAU.s) Vitexin 1520956 Isovitexin 1397974 Sắc ký đồ mẫu thử S (µAU.s) Vitexin 1414160 Isovitexin 1212908 S (µAU.s) Vitexin 1452160 Isovitexin 1290908 Sắc ký đồ mẫu thử S (µAU.s) Vitexin 1456601 Isovitexin 1248869 S (µAU.s) Vitexin 1456106 Isovitexin 1248956 Sắc ký đồ mẫu thử 10 S (µAU.s) Vitexin 1549913 Isovitexin 1330185 S (µAU.s) Vitexin 1548942 Isovitexin 1330190 Sắc ký đồ mẫu thử 11 S (µAU.s) Vitexin 1727886 Isovitexin 1486366 S (µAU.s) Vitexin 1726854 Isovitexin 1486362 Sắc ký đồ mẫu thử 12 S (µAU.s) Vitexin 1415557 Isovitexin 1220361 S (µAU.s) Vitexin 1415524 Isovitexin 1220350 PHỤ LỤC Sắc ký khảo sát đồ độ Sắc ký đồ mẫu thử với % chuẩn thêm vào 50% S 0.00 (µAU.s) Isovitexin Vitexin 0.05 11.892 9.175 8.408 0.10 Volts 0.15 10 12 14 Vitexin 1106281 Isovitexin 985984 16 Minutes S 0.00 (µAU.s) Isovitexin Vitexin 0.05 11.892 9.175 8.408 0.10 Volts 0.15 10 12 14 Vitexin 1111651 Isovitexin 993165 16 Minutes 0.2 Minutes (µAU.s) Isovitexin 0.0 11.825 9.125 8.375 0.1 Vitexin Volts S 10 12 14 16 Vitexin 1102768 Isovitexin 983019 Sắc ký đồ mẫu thử với % chuẩn thêm vào 50% S 0.00 (µAU.s) Isovitexin Vitexin 0.05 11.892 9.175 8.408 0.10 Volts 0.15 10 12 14 Vitexin 1436377 Isovitexin 1295315 16 Minutes S 0.00 Isovitexin Vitexin 0.05 (µAU.s) 11.892 9.175 8.408 0.10 Volts 0.15 10 12 14 Vitexin 1440103 Isovitexin 1297154 16 Minutes S Minutes (µAU.s) Isovitexin 0.00 0.05 11.892 9.175 8.408 0.10 Vitexin Volts 0.15 10 12 14 16 Vitexin 1433865 Isovitexin 1291019 Sắc ký đồ mẫu thử với % chuẩn thêm vào 50% 0.2 11.825 Vitexin 0.0 (µAU.s) Isovitexin 0.1 9.125 Volts S 10 12 14 Vitexin 1697547 Isovitexin 1531440 16 Minutes Vitexin 0.0 (µAU.s) Isovitexin 0.1 S 11.825 9.125 Volts 0.2 10 12 14 Vitexin 1695892 Isovitexin 1529933 16 Minutes 0.2 11.825 Minutes Isovitexin 0.0 (µAU.s) 9.125 0.1 Vitexin Volts S 10 12 14 16 Vitexin 1698301 Isovitexin 1533395 Sắc ký đồ mẫu thử với % chuẩn thêm vào 100% 11.825 Vitexin 0.0 S Isovitexin 0.1 9.125 Volts 0.2 (µAU.s) 10 12 14 16 Minutes Vitexin 1202056 Isovitexin 1072528 Sắc ký đồ mẫu thử với % chuẩn thêm vào 100% 11.825 S Vitexin 0.0 (µAU.s) Isovitexin 0.1 9.125 Volts 0.2 10 12 14 Vitexin 3762413 Isovitexin 3824957 16 Minutes 0.0 Minutes (µAU.s) Isovitexin 0.1 9.125 11.825 S Vitexin Volts 0.2 10 12 14 16 Vitexin 3776579 Isovitexin 3814073 Sắc ký đồ mẫu thử với % chuẩn thêm vào 150% Vitexin 0.0 (µAU.s) Isovitexin 0.1 S 11.825 9.125 Volts 0.2 10 12 14 Vitexin 3642749 Isovitexin 3747189 16 Minutes 2 Minutes (µAU.s) Isovitexin 0.0 S 11.825 9.125 0.1 Vitexin Volts 0.2 10 12 14 16 Vitexin 3652007 Isovitexin 3753104 PHỤ LỤC Sắc ký đồ khảo sát giới hạn LOD LOQ Sắc ký đồ dung dịch chuẩn Vitexin 0.0 (µAU.s) Isovitexin 0.1 S 11.817 9.117 Volts 0.2 10 12 14 Vitexin 2949779 Isovitexin 2797541 16 Minutes Sắc ký đồ dung dịch chuẩn 2 Vitexin 0.0 (µAU.s) Isovitexin 0.1 S 11.817 9.117 Volts 0.2 10 12 14 Vitexin 2959933 Isovitexin 2805893 16 Minutes Sắc ký đồ dung dịch chuẩn 2 Minutes (µAU.s) Isovitexin 0.0 S 11.817 9.117 0.1 Vitexin Volts 0.2 10 12 14 16 Vitexin 2954258 Isovitexin 2801218 Sắc ký đồ dung dịch chuẩn Vitexin 0.0 (µAU.s) Isovitexin 0.1 S 11.800 9.108 Volts 0.2 10 12 14 Vitexin 2954226 Isovitexin 2810878 16 Minutes Sắc ký đồ dung dịch chuẩn S Vitexin 0.0 Isovitexin 0.1 (µAU.s) 11.800 9.108 Volts 0.2 10 12 14 Vitexin 2953586 Isovitexin 2803464 16 Minutes Sắc ký đồ dung dịch chuẩn 0.0 Minutes (µAU.s) Isovitexin 0.1 9.108 11.800 S Vitexin Volts 0.2 10 12 14 16 Vitexin 2953586 Isovitexin 2798731 PHỤ LỤC Sắc ký đồ khảo sát hàm lượng isovitexin vitexin mẫu cao đặc vỏ hạt đậu xanh Sắc ký đồ mẫu lần 0.15 11.767 S Vitexin 0.05 0.00 (µAU.s) Isovitexin Volts 9.092 0.10 10 12 14 Vitexin 3830488 Isovitexin 3925807 16 Minutes Sắc ký đồ mẫu lần 11.758 Vitexin 0.0 (µAU.s) Isovitexin 0.1 S 9.067 Volts 0.2 10 12 14 Vitexin 3823329 Isovitexin 3957340 16 Minutes Sắc ký đồ mẫu lần Minutes (µAU.s) Isovitexin 0.0 S 11.842 9.133 0.1 Vitexin Volts 0.2 10 12 14 16 Vitexin 3838738 Isovitexin 4030337 Sắc ký đồ mẫu lần 11.875 S Vitexin 0.0 Isovitexin 0.1 (µAU.s) 9.150 Volts 0.2 10 12 14 Vitexin 4227929 Isovitexin 4245797 16 Minutes Sắc ký đồ mẫu lần Vitexin 0.0 (µAU.s) Isovitexin 0.1 S 11.875 9.150 Volts 0.2 10 12 14 Vitexin 3865937 Isovitexin 3976230 16 Minutes Sắc ký đồ mẫu lần 0.2 (µAU.s) Isovitexin 0.0 11.883 9.167 8.408 0.1 Vitexin Volts S 10 12 14 Vitexin 3854602 Isovitexin 3917282 16 Minutes Sắc ký đồ mẫu lần 0.2 11.817 Minutes Isovitexin 0.0 (µAU.s) 9.117 0.1 Vitexin Volts S 10 12 14 16 Vitexin 3841286 Isovitexin 4021226 Sắc ký đồ mẫu lần 2 Vitexin 0.0 (µAU.s) Isovitexin 0.1 S 11.833 9.133 Volts 0.2 10 12 14 Vitexin 3743647 Isovitexin 3989977 16 Minutes Sắc kỹ đồ mẫu lần 0.2 11.825 Vitexin 0.0 (µAU.s) Isovitexin 0.1 9.125 Volts S 10 12 14 Vitexin 3930117 Isovitexin 4038279 16 Minutes 10 Sắc ký đồ mẫu lần 2 Minutes (µAU.s) Isovitexin 0.0 S 11.792 9.108 0.1 Vitexin Volts 0.2 10 12 14 16 Vitexin 3978913 Isovitexin 4016935 ... nghiệm cao chiết từ vỏ hạt đậu xanh 2.3 Phương pháp nghiên cứu 2.3.1 Quy trình chiết xuất dự kiến Dự kiến bước thực quy trình chiết xuất điều chế cao đặc từ vỏ hạt đậu xanh sau: Hạt đậu xanh tách... hưởng đến trình chiết xuất cao đặc giàu flavonoid từ vỏ hạt đậu xanh lựa chọn điều kiện chiết xuất Sơ đánh giá số tiêu kiểm nghiệm cao chiết từ vỏ hạt đậu xanh CHƯƠNG TỔNG QUAN Cây đậu xanh có tên... - cao chiết từ vỏ hạt đậu xanh sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) Nội dung 2: Khảo sát số yếu tố ảnh hưởng đến trình chiết xuất cao đặc giàu - flavonoid từ vỏ hạt đậu xanh lựa chọn điều kiện chiết xuất