Đang tải... (xem toàn văn)
Khi nhỏ NaOH 1% lên giấy lọc, màu của dược liệu đậm dần là do các nhóm –OH phenol trong phân tử flavonoid (có trong dược liệu) tạo phenolat với NaOH 1% làm tăng màu.Đối với FeCl3 1%, các nhóm –OH phenol trong phân tử flavonoid tạo phức với ion kim loại đa hóa trị Fe3+ cho các phức chất có màu vàhoặc kết tủa, do đó màu của dược liệu cũng đậm dần.
BÁO CÁO THỰC TẬP DƯỢC LIỆU BÀI: DƯỢC LỆU CHỨA FLAVONOID I CƠ SỞ LÝ THUYẾT II DƯỢC LIỆU - Hòe: nụ hoa hòe - Vỏ bưởi: vỏ quả bưởi - Gỗ me: gỗ me - Đậu đen: hạt đậu đen - Rễ tranh: thân ngầm cỏ tranh III TIẾN HÀNH Dược liệu: hoa hòe 1.1 Chiết xuất 3(g) bột nụ hoa hoè cho vào erlen 100ml Thêm 75ml cồn 96% Đậy nút bông, đun cách thuỷ 5’, lắc nhẹ Thu dịch lọc Lọc dịch chiết qua bơng 1.2 1.2.1 Định tính ống nghiệm: Phản ứng nhóm –OH phenol nhân thơm: ống 1: mẫu chứng Ống 3: Ống 2: Lấy ống nghiệm, cho vào ống 1ml dịch lọc Thêm 2-3 giọt Thêm 2-3 giọt FeCl3 1% NaOH 1% Quan sát so sánh với mẫu chứng Cho 1ml dịch chiết vào ống nghiệm lớn có chứa bột Mg 1.2.2 Phản ứng cyaniding Ống 4: Thêm 2-3 giọt chì acetat trung tính Thêm từ từ theo thành ống nghiệm 0,5-1ml HCl đậm đặc Quan sát lát sau lát sau Kết giải thích - Thí nghiệm phản ứng nhóm –OH phenol * Phản ứng với dd NaOH 1% : tạo dung dịch có màu đậm dịch chiết ( màu vàng ) Hiện tượng xảy phản ứng nhóm OH phenol kiềm loãng ( NaOH 1% ) tạo muối phenolat dễ nước làm tăng màu muối => dung dịch tăng màu * Phản ứng với dd FeCl3 1%: tạo sản phẩm tủa mùa vàng đục Sản phẩm tạo khả phản ứng FeCl3 với nhóm OH phenol, tạo phức tủa màu vàng * Phản ứng với chì acetat : phản ứng tạo tủa vàng dung dịch Flavonoid có phản với chì acetat trung tính cho tủa vàng nhạt đến sậm Các flavonoid nhóm ortho- di- OH phenol -Thí nghiệm phản ứng Cyanidin * Ban đầu đưa Mg dịch chiết chưa có tượng xảy Khi cho HCl đặc vào dung dịch tượng xuất mãnh liệt Dung dịch sủi bọt khí, chuyển màu dần từ vàng sang đỏ đậm cách nhanh chóng * Giải thích : dung dịch sản phẩm màu đỏ đậm tác dụng với dd HCl thành phần chủ yếu hoa hoè flavonol Flavonol có phản ứng cyanidin đặc trưng ( Mg + HCl ) tạo dd màu đỏ đậm có vòng γ-pyron bị khử thành nhân pyrilium Dược liệu: Vỏ bưởi 2.1 Chiết xuất Cho dược liệu vào erlen Thêm cồn 96% vào bình Lọc nóng dịch chiết qua bông, thu dịch lọc để làm phản ứng hóa học Đậy nút bơng đun bếp cách thủy phút, lắc nhẹ Flavanon tan dung môi phân cực nên sử dụng cồn cao độ để kéo flavanon khỏi dược liệu Từ thu Flavanon dịch lọc 2.2 Phản ứng định tính 2.2.1 Phản ứng nhóm –OH phenol nhân thơm a Phản ứng màu với dung dịch NaOH 1%: 1ml dịch chiết vào ống nghiệm Đun cách thủy ống nghiệm Cho NaOH 1% Hiện tượng: cho NaOH 1% dịch chiết ta thu dung dịch có màu vàng, sau đun cách thủy màu vàng đậm màu Giải thích: Với cấu trúc flavanon hợp chất khơng có màu, độ bền vòng dihydropyron flavonon bền flavonoid khác Trong mơi trường kiềm chúng hòa tan mở vòng : Chalcon Khi đun cách thủy, tốc độFlavanon phản ứng xảy nhanh hơn, triệt để nên màu có phần đậm c Phản ứng tạo phức với dung dịch FeCl3 1%: Dịch chiết + FeCl3 1% Hiện tượng: Dung dịch dần chuyển sang màu nâu đen Giải thích : flavanoid tạo phức với FeCl3 tạo dung dịch màu nâu đen d Phản ứng tạo phức với dung dịch chì acetat trung tính 1ml dịch chiết Chì acetat trung tính *Hiện tượng: Cho kết tủa Mẫu cho chì acetat Mẫu *Giải thích: Trong vỏ bưởi có Naringin làchứng flavanone glycoside, có nhóm –OH phenol, cho tác dụng với chì acetat trung tính tạo phức với ion kim loại Pb2+ cho kết tủa ` 1ml dịch chiết + bột kim loại Mg 0,5ml HCl đậm đặc *Hiện tượng: Phản ứng tỏa nhiệt chuyển sang màu đỏ tím *Giải thích: Dưới tác dụng tác nhân khử Mg/HCl vòng γ-pyron flavanon(ol) bị khử thành nhân pyrilium làm cho dung dịch chuyển sang màu đỏ tím Dược liệu: Gỗ me 3.1 Chiết xuất Thêm cồn 96% Cho gỗ me cắt nhỏ vào Lọc nóng dịch chiết qua bơng thu dịch lọc Đậy nút bông,đun bếp cách thủy phút, lắc nhẹ III.2 III.2.1 Phản ứng định tính Phản ứng nhóm –OH nhân thơm Cách tiến hành: lấy 1ml dịch lọc + 2-3 giọt thuốc thử, lắc Kết a.Phản ứng tăng màu với dung dịch NaOH 1% b Phản ứng tạo phức với dd FeCl3 c Phản ứng tạo phức với dd chì acetat: Kết luận: Trong gỗ me có chứa Leucoanthocyanidin có nhóm -OH phenol Các nhóm –OH phenol tạo phenolat với NaOH 1% làm tăng màu dịch chiết; tạo phức với ion kim loại Fe3+ cho màu cam, với Pb2+ cho phức màu nâu đen III.2.2 Phản ứng nhóm leucoanthcyanidin Cho vào ống nghiệm III.2.3 2ml dịch chiết gỗ me Kiềm hóa mơi trường để xem chuyển màu Thêm giọt HCl đậm đặc Đun cách thủy vài phút,lắc Quan sát màu dung dịch so với ống chứng Giải thích: Khi chiết xuất gỗ me, ta thu dịch chiết có chứa dẫn chất leucoanthocyanidin.Chúng dễ chuyển thành anthocyanidin có màu đỏ đun với acid.Ở mơi trường kiềm,anthocyanidin chuyển thành anion quinoid có màu xanh Dược liệu Đậu đen 4.1 Chiết xuất Giã hạt đậu đen, cho vào elen thêm cồn 25% vào vừa đủ Đậy nút đun cách thủy phút, lắc nhẹ Lọc nóng dịch chiết qua bơng, thu dịch lọc 4.2 Phản ứng định tính 4.2.1 Phản ứng nhóm –OH nhân thơm a Phản ứng tăng màu với dung dịch NaOH 1% b Phản ứng tạo phức với dd FeCl3 c Phản ứng tạo phức với dd chì acetat: 4.2.2 Phản ứng nhóm anthocyanidin: Cho vào ống nghiệm riêng biệt ống 1ml dd Đậu đen Ống thứ thêm giọt HCl 1%, ống thứ thêm giọt NaOH 1%, ống thứ để nguyên ta có: Ống thứ 1: Ống thứ 2: Quan sát màu ống: (ống giữa, ống bên phải, ống bên trái) Dược liệu Rễ tranh 5.1 Chiết xuất Lấy dược liệu nghiền cho vào bình nón 100ml, thêm 25ml cồn 96% vào bình Đậy nút bơng đun bếp cách thuỷ vòng phút, lắc nhẹ 5.2 Phản ứng định tính 5.2.1 Phản ứng nhóm –OH phenol nhân thơm a) Cho 1ml dịch lọc chiết vào ống nghiệm với 2-3 giọt NaOH 1%: Hiện tượng: Dịchdịch chiếtchiết xuấtqua hiệnbông, hạt lửng,dịch làmlọc vẫntrong, đục dung Lọc nóng thulơđược màu dịch • Giải thích: thành phần củasáng dịch chiết gồm cồn, glucose, fructose vàng loại acid hữu Acid hữu chứa thành phần tham gia phản ứng xà phòng hố với NaOH thuốc thử, tạotủ li ti lơ lửng dung dịch b) Phản ứng với dung dịch FeCl3 1%: Cho ml dịch chiết vào ống nghiệm với 2-3 giọt FeCl3 % • Hiện tượng: Dung dịch có kết tủa màu nâu đỏ • Giải thích: Fe 3+ thuốc thử kết hợp với nhóm OH- cồn thành phần dịch chiết tạo thành kết tủa Fe(OH)3 màu nâu đỏ c) Phản ứng với dung dịch Chì Acetat: Cho 1ml dịch chiết vào ống nghiệm với 2-3 giọt chì acetat • Hiện tượng: Dịch chiết có màu đỏ cam Kết tủa lơ lửng dung dịch Giải thích: Chì bị đẩy khỏi muối chì acetat tạo thành chì hydroxyd, chì hydroxyd khơng bền, chuyển tiếp thành chì oxid có màu đỏ 5.2.2 Phản ứng Cyanidin: Cách tiến hành: • • Cho 1ml dịch chiết bột Mg kim loại vào ống nghiệm Thêm từ từ vào thành ống nghiệm 0,5-1ml dung dịch HCl đặc Phản ứng tăng màu với dung dịch NaOH 1%: Hiện tượng: Sủi bọt khí, toả nhiệt Sau phản ứng ngừng lại, màu dịch chiết trong, có màu khơng thay đổi • Giải thích: Acid HCl đặc nhỏ vào không tác dụng với thành phần dịch chiết mà tác dụng với bột Mg thêm vào tạo thành phản ứng acid-kim loại hoà tan Mg, khí H2 tạo nhiệt • Đjnh tính giấy lọc Cắt giấy lọc & kẻ bảng theo mẫu Dùng pipet Pasteur nhỏ vào ô giọt dịch chiết loại dược liệu, để khô tự nhiên Lặp lại nhiều lần Nhỏ riêng biệt loại thuốc thử NaOH 1%, FeCl3 1% vào ô dòng tương ứng chúng (nhỏ cho thuốc thử nằm gọn dịch chiết) Để khô tự nhiên, quan sát mắt thường Sau quan sát đèn UV 365nm Giải thích: -Khi nhỏ NaOH 1% lên giấy lọc, màu dược liệu đậm dần nhóm –OH phenol phân tử flavonoid (có dược liệu) tạo phenolat với NaOH 1% làm tăng màu -Đối với FeCl3 1%, nhóm –OH phenol phân tử flavonoid tạo phức với ion kim loại đa hóa trị Fe3+ cho phức chất có màu và/hoặc kết tủa, màu dược liệu đậm dần ... 1% lên giấy lọc, màu dược liệu đậm dần nhóm –OH phenol phân tử flavonoid (có dược liệu) tạo phenolat với NaOH 1% làm tăng màu -Đối với FeCl3 1%, nhóm –OH phenol phân tử flavonoid tạo phức với... HCl thành phần chủ yếu hoa hoè flavonol Flavonol có phản ứng cyanidin đặc trưng ( Mg + HCl ) tạo dd màu đỏ đậm có vòng γ-pyron bị khử thành nhân pyrilium Dược liệu: Vỏ bưởi 2.1 Chiết xuất Cho dược. .. thứ 1: Ống thứ 2: Quan sát màu ống: (ống giữa, ống bên phải, ống bên trái) Dược liệu Rễ tranh 5.1 Chiết xuất Lấy dược liệu nghiền cho vào bình nón 100ml, thêm 25ml cồn 96% vào bình Đậy nút bơng