Đang tải... (xem toàn văn)
NUÔI CẤY MÔ VÀ KHẢO SÁT HOẠT TÍNH KHÁNG KHUẨN CỦA DỊCH CHIẾT CÂY GẤC
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH ****************** TƠN TRANG ÁNH NI CẤY MƠ VÀ KHẢO SÁT HOẠT TÍNH KHÁNG KHUẨN CỦA DỊCH CHIẾT CÂY GẤC (Momordica cochinchinensis L Spreng) LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP Thành phố Hồ Chí Minh, Tháng 9/2010 ii BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NƠNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH ****************** TÔN TRANG ÁNH NUÔI CẤY MÔ VÀ KHẢO SÁT HOẠT TÍNH KHÁNG KHUẨN CỦA DỊCH CHIẾT CÂY GẤC (Momordica cochinchinensis L Spreng) Chuyên ngành : Trồng trọt Mã số : 60.62.01 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO LUẬ N VĂ N HỌC THẠC SĨ KHOA NÔN G NGHIỆ TRƯỜNG ĐẠI NƠNG LÂMHỌ TP.CHỒ CHÍ MINH P *********** TƠN TRANG ÁNH Hướng dẫn khoa học: NUÔI CẤY MÔ VÀ KHẢO SÁT TÍNH KHÁNG KHUẨN CỦA TS TRẦN THỊ DUNG CÂY GẤC (Momordica cochinchinensis L Spreng) NUÔI CẤY MÔ VÀ KHẢO SÁT HOẠT TÍNH KHÁNG KHUẨN CỦA DỊCH CHIẾT CÂY GẤC (Momordica cochinchinensis L Spreng) TƠN ThànhTRANG phố HồÁNH Chí Minh Tháng 9/2010 iii Hội đồng chấm luận văn: Chủ tịch: PGS.TS LÊ QUANG HƯNG Đại học Nơng Lâm TP.Hồ Chí Minh Thư ký: TS VÕ THÁI DÂN Đại học Nơng Lâm TP.Hồ Chí Minh Phản biện 1: TS NGUYỄN HỮU HỔ Viện Sinh Học Nhiệt Đới Phản biện 2: TS BÙI MINH TRÍ Đại học Nơng Lâm TP.Hồ Chí Minh Ủy viên: TS TRẦN THỊ DUNG Đại Học Tơn Đức Thắng TP Hồ Chí Minh ĐẠI HỌC NƠNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH HIỆU TRƯỞNG iv LÝ LỊCH CÁ NHÂN Tôi tên Tôn Trang Ánh sinh ngày 02 tháng 02 năm 1973 xã Tịnh Ấn Tây, huyện Sơn Tịnh, tỉnh Quảng Ngãi Con ông Tôn Trang Lục bà Nguyễn Thị Trâm Tốt nghiệp phổ thông trung học Trường Trung học phổ thông Sơn Tịnh I, tỉnh Quảng Ngãi năm 1991 Tốt nghiệp đại học ngành Nơng học hệ qui trường Đại học Nơng Lâm thành phố Hồ Chí Minh năm 1998 Q trình cơng tác: Từ năm 1998 đến năm 2002 làm việc Cơng ty Pouyen, huyện Bình Chánh, thành phố Hồ Chí Minh Từ năm 2002 đến năm 2004 làm việc Trung tâm Tư vấn Nông Lâm nghiệp, Sở Nông nghiệp PTNT Quảng Ngãi Từ năm 2004 đến công tác Bộ môn Công nghệ Sinh học, trường Đại học Nông Lâm thành phố Hồ Chí Minh Tháng năm 2006 theo học cao học ngành Khoa học trồng trường Đại học Nông Lâm, thành phố Hồ Chí Minh Tình trạng gia đình: Chồng: Trần Đình Phong, kết năm 2008 Con: Trần Phương Linh, sinh năm 2008 Địa liên lạc: Bộ môn Công nghệ Sinh học, trường Đại học Nông Lâm thành phố Hồ Chí Minh Điện thoại: Cơ quan: Nhà riêng: Mobil 08 37220295 08 62597786 0986970375 Email: tontrangqn@yahoo.com v LỜI CAM ĐOAN Tơi cam đoan cơng trình nghiên cứu Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa cơng bố cơng trình khác Tơn Trang Ánh vi LỜI CẢM ƠN Để hồn thành luận văn này, xin gửi lời cảm ơn đến: ● Ban Giám Hiệu, phòng Sau Đại Học trường Đại học Nơng Lâm thành phố Hồ Chí Minh tạo điều kiện tận tình hướng dẫn tơi suốt khóa học ● Q thầy tham gia giảng dạy lớp Cao học Trồng trọt 2006, giảng dạy, truyền đạt cho tơi kiến thức vơ q báu ● Bộ môn Công nghệ Sinh học Trường Đại học Nơng Lâm thành phố Hồ Chí Minh tạo điều kiện thuận lợi cho tơi hồn thành khóa học ● ThS Dương Thị Mộng Ngọc, Trung Tâm Sâm Dược Liệu thành phố Hồ Chí Minh tận tình giúp đỡ tơi q trình thực đề tài ● Các bạn đồng nghiệp, bạn lớp giúp đỡ động viên suốt thời gian học tập nghiên cứu ● Đặc biệt, xin gửi lời cảm ơn đến TS Trần Thị Dung, trực tiếp hướng dẫn khoa học để tơi hồn thành đề tài ● Bộ Giáo dục Đào tạo cấp phần kinh phí để tơi thực đề tài nghiên cứu ● Cuối xin gửi lời cảm ơn đến Bố Mẹ người thân gia đình tạo điều kiện vật chất, động viên tinh thần giúp có thành ngày hơm vii TĨM TẮT Đề tài “Ni cấy mơ khảo sát hoạt tính kháng khuẩn dịch chiết gấc (Momordica cochinchinensis L Spreng)” tiến hành Bộ môn Công nghệ Sinh học, trường Đại học Nơng Lâm thành phố Hồ Chí Minh từ tháng từ tháng 06 năm 2009 đến tháng năm 2010 phịng thí nghiệm ni cấy mơ, phịng thí nghiệm vi sinh – Bộ mơn Cơng nghệ Sinh học, Phịng Hố lý – Viện Công nghệ Sinh học Môi trường trường Đại học Nơng Lâm thành phố Hồ Chí Minh Các thí nghiệm bố trí theo kiểu đơn yếu tố hoàn toàn ngẫu nhiên, lần lặp lại Kết thu sau: Thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng nồng độ chất điều hoà sinh trưởng đến q trình hình thành mơ sẹo gấc in vitro gồm 13 nghiệm thức 13 loại môi trường có thành phần MS có bổ sung chất điều hòa sinh trưởng 2,4-D (0 -3mg l-1) phối hợp với BA (0,1 – 0,3 mg l-1) Kết đạt được: mơi trường có bổ sung chất điều hòa sinh trưởng 2,4-D (1,0 mg l-1) phối hợp với BA (0,3 mg l-1) thích hợp cho việc tạo mô sẹo từ gấc in vitro (100% mẫu tạo sẹo, trọng lượng tươi (5,18gr), chất lượng sẹo tốt sau tuần ni cấy) Thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng nồng độ chất điều hoà sinh trưởng đến trình hình thành chồi gấc in vitro gồm 13 nghiệm thức 13 loại mơi trường có thành phần MS có bổ sung chất điều hòa sinh trưởng BA (0 – mg l-1), Kn (0 – mg l-1) phối hợp với NAA (0 – 0,2 mg l-1) Kết đạt được: mơi trường có bổ sung BA 2,0 mg l-1 phối hợp với NAA 0,2 mg l-1 cho số chồi cao (16,0 chồi), số nhiều (5,55 lá) sinh trưởng phát triển tốt sau tuần ni cấy Thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng nồng độ chất điều hồ sinh trưởng đến q trình rễ gấc in vitro gồm nghiệm thức loại mơi trường có thành phần viii MS ½ MS có bổ sung chất điều hòa sinh trưởng NAA (0,5 – 1,5 mg l-1) Kết đạt được: mơi trường ½ MS bổ sung NAA (0,5 mg l-1) cho số rễ (8,15 rễ) chiều dài cao (75,78 mm) sau tuần ni cấy Thí nghiệm khảo sát hoạt tính kháng khuẩn dịch chiết từ gấc, thí nghiệm gồm nghiệm thức dịch chiết phận thân, lá, rễ ngoaì tự nhiên, in vitro, mô sẹo đối chứng dung môi ethanol Kết đạt được: dịch chiết rễ gấc tự nhiên có hoạt tính kháng mạnh ba chủng vi khuẩn thử nghiệm so với nghiệm thức cịn lại Thí nghiệm xác định thành phần hố thực vật có cao chiết kháng khuẩn mạnh Sau phân tích sơ thành phần hóa thực vật rễ tự nhiên Kết đạt được: rễ gấc tự nhiên tồn số hợp chất: acid hữu cơ, alkaloid, đường khử, polyuronic, saponin, tinh dầu, saponin triterpenoid; kết hợp phản ứng sinh hóa sắc ký lớp mỏng cho kết quả: saponin triterpenoid chất rễ gấc ngồi tự nhiên Đề tài xây dựng qui trình nhân giống in vitro gấc áp dụng để nhân nhanh giống gấc phục vụ cho sản xuất qui mơ lớn Ngồi ra, việc tìm phận chất có khả kháng khuẩn mạnh rễ gấc ngồi tự nhiên ứng dụng cho nghiên cứu sâu góp phần chiết xuất, tinh chất sử dụng điều trị bệnh cho người vi ABSTRACT The study titled “Tissue culture protocol and assessment of antibacterial activity of sweet gourd extract (Momordica cochinchinensis L Spreng)” was carried out at Plant Tissue Culture and Microbiological Laboratories of Department of Biotechnology; Biochemical analytical laboratory, Research institute of Biotechnology and Environment, Nong Lam University Ho Chi Minh City, from June 2009 to September 2010 Single-factor randomized experimental design was applied for the experiments with times of replication, of which results are outlined as follows: Effect of plant growth regulators on callus formation of in vitro sweet gourd was investigated The experiment involved 13 treatments utilizing MS media supplemented with different concentrations of 2,4-D (0-3 mg.l-1) and benzyladenine (BA: 0.1 – 0.3 mg.l-1) The most effective medium for callus formation from the in vitro leaves is MS supplemented with 1.5 mg.l-1 2,4-D and 0.3 mg.l-1 BA Effect of plant growth regulators on shoot formation of in vitro sweet gourd was investigated with 13 treatments utilizing MS supplemented with BA (0 – mg.l-1), Kinetin (Kn: – mg.l-1) and naphthaleneacetamide (NAA: – 0.2 mg.l-1) The treatment containing 2.0 mg.l-1 BA and 0.2 mg.l-1 NAA showed to be the most effective medium for shoot formation after weeks of propagation Effect of plant growth regulators on root formation of in vitro sweet gourd was observed with treatments using MS and half-strenghth MS supplemented with NAA (0.5 – 1.5 mg.l-1) Half-strength MS supplemented with 0.5 mg.l-1 NAA proved to be the effective medium for root generation in the period of weeks Investigation of antibacterial activity of sweet gourd extracts was carried out in treatments with extracts from different parts of both field-grown and in vitro plants such as stem, leaf, root, calli (in case of in vitro plants), and ethanol as the control The obtained results showed that root extract from field-grown sweet gourd had the highest antimicrobial activity on three tested strains of bacteria vii Identification of chemical components contained in the root extract from field-grown plant was performed, which showed the existence of organic acids, alkaloid, polyuronic, saponine, fine oil and saponin triterpenoid Additionally, biochemical tests and thin layer chromatography have revealed that saponin triterpenoid is the main chemical content in roots of sweet gourd in natural conditions Eventually, the protocol for in vitro propagation of sweet gourd was achieved, which can be applied in rapid multiplication for large-scale production of sweet gourd Moreover, the identification of plant part and the chemical content which contribute to the activity against microbes of field-grown sweet gourd is applicable in futher researches on extraction and purification of natural substances for human therapies viii Phụ lục 2: Kết xử lý thống kê số liệu thí nghiệm phần mềm MTATC Phụ lục 2.1 Tỉ lệ tạo mô sẹo gấc in vitro ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 12 2.606 0.217 43.359 0.0000 Within 26 0.130 0.005 Total 38 2.736 Coefficient of Variation = 4.73% Error Mean Square = 0.005000 Error Degrees of Freedom = 26 No of observations to calculate a mean = Duncan's Multiple Range Test LSD value = 0.1604 s_ = 0.04082 x at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 7= 8= 9= 10 = 11 = 12 = 13 = 0.6000 B 1.570 A 1.570 A 1.570 A 1.570 A 1.570 A 1.570 A 1.570 A 1.570 A 1.570 A 1.570 A 1.570 A 1.570 A 90 7= 2= 3= 4= 5= 6= 13 = 8= 9= 10 = 11 = 12 = 1= 1.570 A 1.570 A 1.570 A 1.570 A 1.570 A 1.570 A 1.570 A 1.570 A 1.570 A 1.570 A 1.570 A 1.570 A 0.6000 B Phụ lục 2.2 Trọng lượng tươi mô sẹo sau tuần nuôi cấy ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 12 15.271 1.273 31.141 0.0000 Within 26 1.062 0.041 Total 38 16.333 Coefficient of Variation = 8.46% Error Mean Square = 0.04100 Error Degrees of Freedom = 26 No of observations to calculate a mean = Duncan's Multiple Range Test LSD value = 0.4594 s_ = 0.1169 at alpha = 0.010 x Original Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 7= 8= 9= 10 = 11 = 12 = 13 = 1.127 2.663 1.987 1.953 1.723 2.963 2.407 2.427 2.063 3.507 3.300 2.690 2.250 Ranked Order G CD EF EF F BC DE DE EF A AB CD DE Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 91 10 = 11 = 6= 12 = 2= 8= 7= 13 = 9= 3= 4= 5= 1= 3.507 3.300 2.963 2.690 2.663 2.427 2.407 2.250 2.063 1.987 1.953 1.723 1.127 A AB BC CD CD DE DE DE EF EF EF F G Phụ lục 2.3 Trọng lượng tươi mô sẹo sau tuần nuôi cấy ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 12 5.693 0.474 79.684 0.0000 Within 26 0.155 0.006 Total 38 5.848 Coefficient of Variation = 4.18% Error Mean Square = 0.006000 Error Degrees of Freedom = 26 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 0.1757 at alpha = 0.010 Original Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 7= 8= 9= 10 = 11 = 12 = 13 = 0.7100 1.967 1.723 1.713 1.797 2.077 1.923 1.887 1.750 2.277 2.380 1.973 1.820 Ranked Order G BCD F F DEF B BCDE CDEF EF A A BC CDEF Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 92 11 = 10 = 6= 12 = 2= 7= 8= 13 = 5= 9= 3= 4= 1= 2.380 2.277 2.077 1.973 1.967 1.923 1.887 1.820 1.797 1.750 1.723 1.713 0.7100 A A B BC BCD BCDE CDEF CDEF DEF EF F F G Phụ lục 2.4 Tỉ lệ mẫu tạo chồi AN A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 12 0.869 0.072 1.759 0.1107 Within 26 1.070 0.041 Total 38 1.939 Coefficient of Variation = 14.87% Phụ lục 2.5 Số chồi /mẫu sau tuần nuôi cấy ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 12 168.893 14.074 11.161 0.0000 Within 26 32.786 1.261 Total 38 201.679 Coefficient of Variation = 19.78% Error Mean Square = 1.261 Error Degrees of Freedom = 26 No of observations to calculate a mean = Duncan's Multiple Range Test LSD value = 2.548 s_ = 0.6483 at alpha = 0.010 x 93 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 7= 8= 9= 10 = 11 = 12 = 13 = 2.517 E 6.037 CD 5.773 CD 5.297 CDE 4.817 CDE 4.817 CDE 4.570 DE 9.043 AB 10.46 A 7.483 BC 4.850 CDE 4.063 DE 4.087 DE 9= 8= 10 = 2= 3= 4= 11 = 6= 5= 7= 13 = 12 = 1= 10.46 A 9.043 AB 7.483 BC 6.037 CD 5.773 CD 5.297 CDE 4.850 CDE 4.817 CDE 4.817 CDE 4.570 DE 4.087 DE 4.063 DE 2.517 E Phụ lục 2.6 Số sau tuần nuôi cấy ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 12 3.498 0.291 3.263 0.0056 Within 26 2.322 0.089 Total 38 5.820 Coefficient of Variation = 13.86% Error Mean Square = 0.08900 Error Degrees of Freedom = 26 No of observations to calculate a mean = Duncan's Multiple Range Test LSD value = 0.6769 s_ = 0.1722 at alpha = 0.010 x 94 Original Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 7= 8= 9= 10 = 11 = 12 = 13 = Ranked Order 1.507 C 2.327 AB 2.253 ABC 2.217 ABC 2.163 ABC 2.070 ABC 2.030 ABC 2.417 AB 2.747 A 2.387 AB 2.207 ABC 1.743 BC 1.967 ABC Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 9= 8= 10 = 2= 3= 4= 11 = 5= 6= 7= 13 = 12 = 1= 2.747 A 2.417 AB 2.387 AB 2.327 AB 2.253 ABC 2.217 ABC 2.207 ABC 2.163 ABC 2.070 ABC 2.030 ABC 1.967 ABC 1.743 BC 1.507 C Phụ lục 2.7 Chiều cao chồi sau tuần nuôi cấy ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 12 5.836 0.486 8.385 0.0000 Within 26 1.508 0.058 Total 38 7.344 Coefficient of Variation = 14.87% Error Mean Square = 0.05800 Error Degrees of Freedom = 26 No of observations to calculate a mean = Duncan's Multiple Range Test LSD value = 0.5464 s_ = 0.1390 at alpha = 0.010 x 95 Original Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 7= 8= 9= 10 = 11 = 12 = 13 = Ranked Order 1.777 ABCD 1.460 BCDEF 1.087 F 1.183 DEF 1.340 CDEF 1.160 EF 1.150 F 1.977 AB 2.110 A 1.757 ABCDE 2.193 A 1.963 AB 1.897 ABC Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 11 = 9= 8= 12 = 13 = 1= 10 = 2= 5= 4= 6= 7= 3= 2.193 A 2.110 A 1.977 AB 1.963 AB 1.897 ABC 1.777 ABCD 1.757 ABCDE 1.460 BCDEF 1.340 CDEF 1.183 DEF 1.160 EF 1.150 F 1.087 F Phụ lục 2.8 Số chồi/mẫu sau tuần nuôi cấy ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 12 447.283 37.274 12.800 0.0000 Within 26 75.710 2.912 Total 38 522.993 Coefficient of Variation = 22.52% Error Mean Square = 2.912 Error Degrees of Freedom = 26 No of observations to calculate a mean = Duncan's Multiple Range Test LSD value = 3.872 s_ = 0.9852 at alpha = 0.010 x 96 Original Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 7= 8= 9= 10 = 11 = 12 = 13 = Ranked Order 2.737 D 8.700 C 6.480 CD 6.287 CD 5.703 CD 6.443 CD 6.037 CD 12.95 AB 16.00 A 9.773 BC 6.163 CD 5.777 CD 5.463 CD Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 9= 8= 10 = 2= 3= 6= 4= 11 = 7= 12 = 5= 13 = 1= 16.00 A 12.95 AB 9.773 BC 8.700 C 6.480 CD 6.443 CD 6.287 CD 6.163 CD 6.037 CD 5.777 CD 5.703 CD 5.463 CD 2.737 D Phụ lục 2.9 Số lá/chồi sau tuần nuôi cấy ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 12 26.188 2.182 12.691 0.0000 Within 26 4.471 0.172 Total 38 30.658 Coefficient of Variation = 12.12% Error Mean Square = 0.1720 Error Degrees of Freedom = 26 No of observations to calculate a mean = Duncan's Multiple Range Test LSD value = 0.9409 s_ = 0.2394 at alpha = 0.010 x 97 Original Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 7= 8= 9= 10 = 11 = 12 = 13 = Ranked Order 1.757 D 3.700 B 3.617 BC 3.430 BC 2.980 BC 3.403 BC 3.253 BC 3.900 B 5.553 A 3.707 B 3.473 BC 3.070 BC 2.623 CD Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 9= 8= 10 = 2= 3= 11 = 4= 6= 7= 12 = 5= 13 = 1= 5.553 A 3.900 B 3.707 B 3.700 B 3.617 BC 3.473 BC 3.430 BC 3.403 BC 3.253 BC 3.070 BC 2.980 BC 2.623 CD 1.757 D Phụ lục 2.10 Chiều cao chồi sau tuần nuôi cấy ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 12 10.273 0.856 6.978 0.0000 Within 26 3.190 0.123 Total 38 13.462 Coefficient of Variation = 12.48% Error Mean Square = 0.1230 Error Degrees of Freedom = 26 No of observations to calculate a mean = Duncan's Multiple Range Test LSD value = 0.7957 s_ = 0.2025 at alpha = 0.010 x 98 Original Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 7= 8= 9= 10 = 11 = 12 = 13 = Ranked Order 3.090 BCD 2.110 E 2.227 DE 2.470 BCDE 2.587 BCDE 2.553 BCDE 2.493 BCDE 3.303 ABC 2.813 BCDE 3.013 BCDE 4.017 A 3.370 AB 2.450 CDE Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 11 = 12 = 8= 1= 10 = 9= 5= 6= 7= 4= 13 = 3= 2= 4.017 A 3.370 AB 3.303 ABC 3.090 BCD 3.013 BCDE 2.813 BCDE 2.587 BCDE 2.553 BCDE 2.493 BCDE 2.470 BCDE 2.450 CDE 2.227 DE 2.110 E Phụ lục 2.11 Số rễ/ chồi sau tuần nuôi cấy ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 6.562 0.937 137.016 0.0000 Within 16 0.109 0.007 Total 23 6.671 Coefficient of Variation = 4.58% Error Mean Square = 0.007000 Error Degrees of Freedom = 16 No of observations to calculate a mean = Duncan's Multiple Range Test LSD value = 0.1995 s_ = 0.04830 at alpha = 0.010 x 99 Original Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 7= 8= 1.160 2.190 1.987 1.533 1.187 2.690 2.263 1.430 Ranked Order E B C D E A B D Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 6= 7= 2= 3= 4= 8= 5= 1= 2.690 2.263 2.190 1.987 1.533 1.430 1.187 1.160 A B B C D D E E Phụ lục 2.12 Chiều dài rễ sau tuần nuôi cấy ANALYSIS OF VARIANCE TABLE ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 4158.031 594.004 1108.640 0.0000 Within 16 8.573 0.536 Total 23 4166.604 Coefficient of Variation = 3.54% Error Mean Square = 0.5360 Error Degrees of Freedom = 16 No of observations to calculate a mean = Duncan's Multiple Range Test LSD value = 1.746 s_ = 0.4227 at alpha = 0.010 x Original Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 7= 8= 6.480 32.48 20.24 15.80 6.597 43.00 33.14 7.667 E B C D E A B E Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 100 6= 7= 2= 3= 4= 8= 5= 1= 43.00 33.14 32.48 20.24 15.80 7.667 6.597 6.480 A B B C D E E E Phụ lục 2.13 Số rễ/chồi sau tuần nuôi cấy ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 132.669 18.953 276.885 0.0000 Within 16 1.095 0.068 Total 23 133.765 Coefficient of Variation = 6.47% Error Mean Square = 0.06800 Error Degrees of Freedom = 16 No of observations to calculate a mean = Duncan's Multiple Range Test LSD value = 0.6219 s_ = 0.1506 at alpha = 0.010 x Original Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 7= 8= 1.367 5.853 4.850 2.520 1.520 8.150 6.003 2.110 Ranked Order F B C D EF A B DE Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 101 6= 7= 2= 3= 4= 8= 5= 1= 8.150 6.003 5.853 4.850 2.520 2.110 1.520 1.367 A B B C D DE EF F Phụ lục 2.14 Chiều dài rễ sau tuần nuôi cấy ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 10547.605 1506.801 105.139 0.0000 Within 16 229.303 14.331 Total 23 10776.908 Coefficient of Variation = 10.21% Error Mean Square = 14.33 Error Degrees of Freedom = 16 No of observations to calculate a mean = Duncan's Multiple Range Test LSD value = 9.028 s_ = 2.186 at alpha = 0.010 x Original Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 7= 8= 12.59 56.09 33.44 31.21 16.53 75.78 52.51 18.39 Ranked Order D B C C D A B D Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 102 6= 2= 7= 3= 4= 8= 5= 1= 75.78 56.09 52.51 33.44 31.21 18.39 16.53 12.59 A B B C C D D D Phụ lục 3:Kết xử lý số liệu thí nghiệm phần mềm excel Phụ lục 3.1 Đường kính vịng vơ khuẩn đối chứng ethanol ba chủng vi khuẩn thử nghiệm Loại vi khuẩn TB PS ĐLC SS 0,0 0,0 0,0 0,0 0,00 0,00 0,00 5,8 7,0 5,9 6,2 0,46 0,67 0,39 0,4 1,2 0,7 0,7 0,14 0,37 0,21 1: Escherichia coli; 2: Salmonella typhimurium; 3: Staphylococcus aureus Phụ lục 3.2 Đường kính vịng vơ khuẩn dịch chiết gấc tự nhiên ba chủng vi khuẩn thử nghiệm Loại vi khuẩn TB PS ĐLC SS 0,0 0,0 0,0 0,0 0,00 0,00 0,00 8,3 9,4 9,3 9,0 0,37 0,61 0,35 0,2 0,7 1,0 0,6 0,26 0,51 0,29 1: Escherichia coli; 2: Salmonella typhimurium; 3: Staphylococcus aureus Phụ lục 3.3 Đường kính vịng vơ khuẩn dịch chiết thân gấc tự nhiên ba chủng vi khuẩn thử nghiệm Loại vi khuẩn TB PS ĐLC SS 0,7 1,0 0,7 0,8 0,04 0,19 0,11 4,6 6,0 5,0 5,2 0,54 0,74 0,43 0,0 0,7 0,3 0,3 0,11 0,34 0,19 1: Escherichia coli; 2: Salmonella typhimurium; 3: Staphylococcus aureus Phụ lục 3.4 Đường kính vịng vơ khuẩn dịch chiết rễ gấc ngồi tự nhiên ba chủng vi khuẩn thử nghiệm Loại vi khuẩn TB PS ĐLC SS 5,7 7,5 5,9 6,3 0,94 0,97 0,56 9,3 10,3 13,0 10,9 3,58 1,89 1,09 5,2 5,8 6,2 5,7 0,25 0,50 0,29 1: Escherichia coli; 2: Salmonella typhimurium; 3: Staphylococcus aureus 103 Phụ lục 3.5 Đường kính vịng vơ khuẩn dịch chiết gấc in vitro ba chủng vi khuẩn thử nghiệm Loại vi khuẩn TB PS ĐLC SS 0,2 0,3 0,0 0,2 0,03 0,17 0,09 5,8 6,8 5,5 6,0 0,48 0,69 0,4 4,2 4,0 5,4 4,6 0,60 0,78 0,45 1: Escherichia coli; 2: Salmonella typhimurium; 3: Staphylococcus aureus Phụ lục 3.6 Đường kính vịng vơ khuẩn dịch chiết thân gấc in vitro ba chủng vi khuẩn thử nghiệm Loại vi khuẩn TB PS ĐLC SS 0,0 0,2 0,0 0,1 0,02 0,13 0,07 8,1 7,0 5,6 6,9 1,63 1,28 0,73 2,3 2,7 3,3 2,8 0,26 0,51 0,29 1: Escherichia coli; 2: Salmonella typhimurium; 3: Staphylococcus aureus Phụ lục 3.7 Đường kính vịng vô khuẩn dịch chiết rễ gấc in vitro ba chủng vi khuẩn thử nghiệm Loại vi khuẩn TB PS ĐLC SS 2,4 2,5 3,2 2,7 0,20 0,45 0,26 3,2 3,8 3,6 3,5 0,08 0,29 0,17 3,5 3,0 3,0 3,2 0,07 0,26 0,15 1: Escherichia coli; 2: Salmonella typhimurium; 3: Staphylococcus aureus Phụ lục 3.8 Đường kính vịng vơ khuẩn dịch chiết mơ sẹo in vitro ba chủng vi khuẩn thử nghiệm Loại vi khuẩn TB PS ĐLC SS 5,0 3,3 2,7 3,7 1,44 1,20 0,69 2,8 2,6 3,0 2,8 0,05 0,23 0,13 0,2 0,7 0,0 0,3 0,12 0,34 0,19 1: Escherichia coli; 2: Salmonella typhimurium 104 ... trình rễ gấc in vitro 3.2.2 Nội dung 2: Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn dịch chiết từ gấc xác định thành phần hố thực vật có cao chiết có tác dụng kháng khuẩn Thí nghiệm 4: Khảo sát hoạt tính kháng. .. gấc in vitro 63 xi 4.2 Nội dung 2: Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn xác định thành phần hố thực vật có cao chiết có tác dụng kháng khuẩn 66 4.2.1 Thí nghiệm 4: Khảo sát hoạt tính kháng. .. kháng khuẩn dịch chiết thô từ gấc 66 4.2.1.1 Khả kháng khuẩn dịch chiết từ lá, thân, rễ gấc tự nhiên 66 4.2.1.2 Khả kháng khuẩn dịch chiết từ lá, thân, rễ, mô sẹo gấc