MỤC LỤC Trang ĐẶT VẤN ĐỀ .1 PHẦN 1: TỔNG QUAN .2 1.1 Bệnh đặc điểm sinh học nấm gây bệnh .2 1.1.1 Giới thiệu bệnh 1.1.1.1 Khái niệm 1.1.1.2 Phân loại 1.1.1.3 Các giai đoạn phát triển bệnh 1.1.1.4 Bệnh truyền nhiễm điều kiện quy định phát sinh bệnh 1.1.2 Nấm gây bệnh hại trồng 1.1.2.1 Đặc điểm chung nấm 1.1.2.2 Hình thái sợi nấm 1.1.2.3 Biến thái nấm .6 1.1.2.4 Dinh dưỡng ký sinh trao đổi chất nấm 1.1.2.5 Chu ký phát triển nấm 1.1.2.6 Quá trình xâm nhiễm lan truyền nấm 10 1.1.2.7 Cấu trúc vách tế bào nấm bệnh 11 1.1.3 Đặc điểm sinh học số loài nấm bệnh 12 1.1.3.1 Nấm Fusarium sp .12 1.1.3.2 Nấm Phytophthora sp .14 1.2 Giới thiệu nấm Trichoderma sp 15 1.2.1 Lịch sử nghiên cứu nấm Trichoderma 15 1.2.2 Tiềm sử dụng nấm Trichoderma đất 16 1.2.3 Đặc điểm nấm Trichoderma sp 17 1.2.3.1 Vị trí phân loại 17 1.2.3.2 Hình thái, sinh trưởng hình thành bào tử nấm Trichoderma sp 18 1.2.3.3 Yếu tố môi trường ảnh hưởng đến nấm Trichoderma sp 19 1.2.3.4 Khả đối kháng nấm gây bệnh 19 1.2.3.5 Cơ chế đối kháng nấm gây bệnh nấm Trichoderma .20 1.3 Một số ứng dụng nấm Trichoderma 22 1.3.1 Lĩnh vực bảo vệ thực vật .22 1.3.1.1 Bón vào đất .23 1.3.1.2 Xử lý hát giống 23 1.3.2 Lương thực ngành dệt .24 1.3.3 Chất kiểm soát sinh học .24 1.3.4 Kích thích tăng trưởng trồng 24 1.3.5 Nguồn gen để sử dụng chuyển gen .24 1.3.6 Lĩnh vực xử lý môi trường 25 1.4 Tìm hiểu chế phẩm nấm .25 1.4.1 Các phương pháp lên men tạo chế phẩm sinh học .25 1.4.1.1 Phương pháp lên men xốp tạo chế phẩm nấm Trichoderma .25 1.4.1.2 Phương pháp lên men bề mặt không vô trùng tạo chế phẩm nấm .27 1.4.2 Một số chế phẩm nấm Trichoderma sản xuất ứng dụng giới Việt Nam .28 1.4.2.1 Trên giới .28 1.4.2.2 Ở nước .30 PHẦN 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 31 2.1 Vật liệu 31 2.1.1 Các chủng vi sinh vật dùng nghiên cứu 31 2.1.1.1 Các chủng nấm Trichoderma sp .31 2.1.1.2 Các chủng nấm gây bệnh hại trồng 31 2.1.2 Dụng cụ thiết bị 31 2.1.2.1 Dụng cụ 31 2.1.2.2 Thiết bị .31 2.1.3 Môi trường nuôi cấy 31 2.1.3.1 Môi trường PGA .31 2.1.3.2 Khoáng Crapek 32 2.1.3.3 Môi trường lên men xốp 32 2.2 Phương pháp nghiên cứu 33 2.2.1 Quan sát hình thái nấm 33 2.2.1.1 Quan sát hình thái đại thể 33 2.2.1.2 Quan sát hình thái vi thể 33 2.2.2 Phương pháp đối kháng trực tiếp 33 2.2.2.1 Nguyên tắc 33 2.2.2.2 Cách tiến hành 34 2.2.2.3 Thí nghiệm .34 2.2.2.4 Bố trí thí nghiệm .34 2.2.3 Phương pháp lên men xốp tạo chế phẩm Trichoderma 35 2.2.3.1 Mục đích 35 2.2.3.2 Tiến hành thực nghiệm môi trường lên men xốp .35 2.2.3.3 Cách tiến hành 36 2.2.4 Phương pháp đếm số lượng bào tử gam chế phẩm 36 2.2.4.1 Nguyên tắc 36 2.2.4.2 Cách tiến hành 36 2.2.4.3 Đọc tính toán kết 37 PHẦN 3: KẾT QUẢ VÀ BIỆN LUẬN 38 3.1 Hình thái nấm Trichoderma sp .38 3.2 Khả đối kháng trực tiếp nấm Trichoderma sp 38 3.2.1 Khả đối kháng nấm Trichoderma chủng T40 với nấm Phytophthora sp 38 3.2.2 Khả đối kháng nấm Trichoderma (T40) với nấm Fusarium sp 40 3.2.3 Khả đối kháng nấm Trichoderma chủng T14 với nấm Phytophthora sp 42 3.2.4 Khả đối kháng nấm Trichoderma (T14) nấm Fusarium sp 44 3.3 Kết lên men xốp .46 3.3.1 Số lượng bào tử chủng thu nhận sau – 10 ngày nuôi cấy phương pháp lên men xốp .46 3.3.2 Tỷ lệ sống sót bào tử sau sấy 47 PHẦN 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .48 4.1 Kết luận 48 4.2 Kiến nghị 48 TÀI LIỆU THAM KHẢO .49 DANH SÁCH CÁC HÌNH Hình 1.1: Cơ quan sinh trưởng, vòi hút dạng biến thái chủ yếu tản nấm Hình 1.2: Nấm Fusarium sp 12 Hình 1.3: Nấm Phytophthora sp 14 Hình 1.4: Nấm Trichoderma sp .18 Hình 1.5: Nấm Trichoderma sp quấn lấy sợi nấm gây bệnh 20 Hình 1.6: Cơ chế hoạt động nấm Trichoderma sp 21 Hình 2.1: Thí nghiệm đối chứng trực tiếp .35 Hình 2.2 : Phương pháp pha loãng mẫu theo dãy thập phân 38 Hình 3.1: Hình thái khuẩn lạc Trichoderma sp (40X) 39 Hình 3.2 : Khả đối kháng nấm Trichoderma chủng T40 với nấm Phytophthora 40 Hình 3.3: Khả đối kháng nấm Trichoderma chủng T40 với nấm Fusarium 41 Hình 3.4: Khả đối kháng nấm Trichoderma chủng T14 với nấm Phytophthora 43 Hình 3.5: Khả đối kháng nấm Trichoderma chủng T14nấm Fusarium 44 Hình 3.6: Chế phẩm Trichoderma thô 45 DANH SÁCH CÁC BẢNG Bảng 3.1: Đường kính (mm) khuẩn lạc nấm Trichoderma nấm gây bệnh 44 Bảng 3.2: Số lượng bào tử Trichoderma môi trường nuôi cấy .45 ... 3: KẾT QUẢ VÀ BIỆN LUẬN 38 3.1 Hình thái nấm Trichoderma sp .38 3.2 Khả đối kháng trực tiếp nấm Trichoderma sp 38 3.2.1 Khả đối kháng nấm Trichoderma chủng T40 với nấm Phytophthora... Phytophthora sp 38 3.2.2 Khả đối kháng nấm Trichoderma (T40) với nấm Fusarium sp 40 3.2.3 Khả đối kháng nấm Trichoderma chủng T14 với nấm Phytophthora sp 42 3.2.4 Khả đối kháng nấm. .. : Khả đối kháng nấm Trichoderma chủng T40 với nấm Phytophthora 40 Hình 3.3: Khả đối kháng nấm Trichoderma chủng T40 với nấm Fusarium 41 Hình 3.4: Khả đối kháng nấm Trichoderma chủng