BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH BỘ MÔN CÔNG NGHỆ HÓA HỌC BÁO CÁO CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT THUỐC TRỪ SÂU VIRUS GVHD: Sinh viên thực : Phan Phước Hiền Phan quốc Bảo 13139007 Võ Thanh Liêm 13139073 Trần Đình Trung 13139204 Phan Ngọc Anh 13139004 Nguyễn Thanh Phong 13139125 Nguyễn Hoàng Nhân 13139108 Nguyễn Bảo Ân 13139006 Ngành: Công nghệ kỹ thuật hóa học Niên khóa: 2013-2017 Tháng 11/2015 Báo cáo đề tài CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT THUỐC TRỪ SÂU VIRUS Tác giả Nhóm sinh viên thực MỤC LỤC Trang Trang tựa…………………………………………………………………………………i Mục lục………………………………………………………………………………… ii DANH SÁCH HÌNH VÀ BẢNG Trang Hình Acid nucleic…………………………………………………………………… Hình Cấu tạo virus…………………………………………………………………….3 Hình Ảnh kính hiển vi điện tử quét thể vùi dạng cầu NPV (A), thể vùi (B) dạng hạt (C) Choristoneura fumiferna…………………………………………………….5 Hình Sâu khỏe mạnh (A), sâu bị nhiểm bệnh (B)……………………………….……6 Hình Sự lây nhiểm NPV vào côn trùng…………………………………………….…7 Hình Các bước để phân lặp virus diệt côn trùng…………………………………… 10 Hình Sơ đồ quy trình sản xuất chế phẩm virus………………………………………12 Hình Phương pháp thủ công SX chế phẩm NPV cho nông dân………………….….12 Hình Phương pháp sản xuất NPV phòng thí nghiệm………………………….13 Bảng 1: Các tiêu đánh giá chế phẩm NPV dạng bột……………………………… 17 Bảng Ví dụ loại thuốc trừ sâu virus thương mại đăng ký để kiểm soát dịch hại nước khác nhau…………………………………………………………………………………… 20 TỔNG QUAN VỀ THUỐC TRỪ SÂU VIRUS 1.1 Mở đầu Virus diệt côn trùng nghiên cứu nhiều năm mối quan tâm đặc biệt đến dịch bệnh động vật không xương sống Điều đặc biệt khả sử dụng virus tác nhân chống dịch hại tốt lại không làm ô nhiểm môi trường Virus nhóm vi sinh vật có kích thước bé phải quan sát kính hiển vi điện tử Kích thước lớn virus 400nm, nhỏ 13-20 nm.Vật chủ virus tế bào người, động vật , vi khuẩn côn trùng Virus có khả sinh sản từ phần thành 10-100 phần Quá trình sinh sản virus xảy tế bào Virus cấu tạo tế bào, thành phần hóa học đơn giản Virus gây nhiểm tế bào có khả lan truyền Virus mang loại vật chất truyền acid nucleic, AND, hay ARN 1.2 Lịch sử phát virus diệt côn trùng Lịch sử cổ đại ghi nhận phát bệnh tằm dâu ong người bắt đầu nhân nuôi, dưỡng hai loài côn trùng có ích Năm 384-322 Trước công nguyên Aristotle miêu tả bện ong, người Trung Quốc có quan sát bệnh tằm dâu từ 2700 năm trước công nguyên Năm 1856 Cornalia Maestri mô tả bệnh tằm nghệ - bệnh virus Các tác giả phát thấy thể đa diện thể tằm Bolle (1898) mô tả hòa tan thể đa diện ruột tằm giải phóng hạt Năm 1919 Akkva, Komarek Breidl (1923) phát dịch qua lọc có chất virus gây bệnh, tạo nên thể đa diện côn trùng Người nhìn thấy virus gây bệnh côn trùng Bergold công trình công bố 1943-1947 sau có kính hiển vi điện tử 1.3 Cở sở khoa học virus diệt côn trùng Khi xâm nhập vào thể côn trùng, virus nhân lên nhân chất nguyên sinh tế bào, phá hủy mô làm cho vật chủ chết Những côn trùng sống sót tiếp tục bị ảnh hưởng giai đoạn nhộng ( nhộng bị thối, ngài vũ hóa bị biến dạng), giai đoạn ngài ( khả đẻ trứng giảm) ảnh hưởng tới hệ sau Nguồn virus tồn đọng tự nhiên lại gây lây nhiểm cho hệ Trên sở khoa học này, virus gây bệnh côn trùng ngày ý nghiên cứu coi nhân tố có triển vọng phương pháp đấu tranh sinh học phòng chống sâu hại trồng tương lại Năm 1923, Tanaka Kaya miêu tả 20 nhóm (họ) virus gây bệnh cho côn trùng Trong họ nghiên cứu nhiều Baculoviridae Reoviridae Đại diện hị Baculoviridae virus đa diện (NPV – Nuclear polyhedrosis viruses) đại diện họ Reoviridae virus đa diện tế bào chất (CPV – Cytoplasmic polyhedrosis viruses) Theo Hukuhara Bonami (1991) CPVs ký sinh côn trùng hay gặp cánh vảnh – Lepidoptera có 201 vật chủ, hai cánh – Diptera – 39 vật chủ Tuy nhiên có CPV sâu Dendrolimus spectabilis sản xuất đăng kí thuốc trừ sau sinh học virus Mặc dù thuốc CPV có hiệu diệt sâu, người ta quan tâm phát triển Baculovirus, lý chủ yếu CPVs công tế bào mô ruột sâu có xu hướng gây nhiểm trùng mãn tính Hơn điều kiện tự nhiên, chúng gây bệnh dịch có tỷ lệ thấp với tỷ lệ thấp ảnh hưởng tới quần thể vật chủ Baculovirus Tuy nhiên chúng nhân nuôi theo quy mô lớn công nghiệp Theo tác giả Granados Federici (1986); Possee (1993); Tanada Kaya (1993), có 600 loài sâu thuộc Lepidoptera, Hymenoptera, Coleoptera, Diptera… vật chủ Baculovirus Do có nhiều nghiên cứu sản xuất thuốc trừ sâu virus Hầu hết Baculovirus thuộc tính chuyên hóa cao, ký sinh loài sâu, chí ký sinh số mô định sâu (Groner,1986), Baculovirus Autographa California (AcMNPV) Baculovirus Autographa falcifera có vật chủ 30 loài côn trùng thuộc cánh vảy – Lepidoptera Những tác động có hại Baculovirus thiên địch ong kí sinh trưởng chưa thành chưa phát tự nhiên (Groner,1990) Vậy tập trung tìm hiểu chủ yếu nhóm Baculovirus với đại diện tiêu biểu nhóm 1.4 Sơ lược hình thái cấu tạo virus diệt côn trùng 1.4.1.Sơ lược chung virus Cấu trúc: Vỏ nhân • Virus có cấu tạo vỏ la Capsid có chất protein • Trong vỏ capsid nhân (Nucleoid) chứa AND ARN Hình thái: virus có cấu trúc hình học, – đến 20 cạnh với nhiều nhóm virus khác Các acid nucleic (AND, ARN) gồm dạng sợi đơn sợi đôi: ADN virrut Sợi đơn ARN virut Sợi đôi Sơi đơn Hình Acid nucleic 10 Sợi đôi 2.2 Nguyên nhân gây bệnh Nguyên nhân thể vùi PIB gây Biết nguyên nhân gây bệnh virus côn trùng trình sản xuất, người sản xuất phải ý để nâng cao việc sản xuất virus tạo nhiều thể vùi PIB đơn vị (g ml) để có hiệu diệt sâu cao 2.3 Cơ chế gây bệnh Hình Sự lây nhiểm NPV vào côn trùng Khi sâu non ăn thức ăn vào ruột có virus lẫn thức ăn virus nhân đa diện đường tiêu hoá virus xâm nhiễm vào thể côn trùng thực qua trình phá huỷ toàn chức ruột sâu Cơ chế gây bệnh mô tả sau: • Khi vật chủ thức ăn có chứa virus thể bọc, virus theo đường tiêu hoá vào ruột • Môi trường kiềm ruột phá tan thể bọc, giải phóng virion Virion xâm nhập qua tế bào thành ruột vào tế bào Tại chúng sử dụng máy 14 tế bào thực trình chép, phiên mã dịch mã tạo virion • Virion nhảy chồi, thoát khỏi tế bào thành ruột trở thành dạng virus nảy chồi Do lớp bọc từ mang tế bào thành ruột nên virus xâm nhập tiếp vào tế bào thuộc mô khác côn trùng • Virus công vào tất tế bào khác thể vật chủ, tế bào chu trình lại tiếp tục Tuy nhiên, thay tạo virion nảy chồi, virus tạo tập hợp lại, bao protein polyhedrin đặc biệt tạo cấu trúc thể bọc gây tan tế bào Vật chủ bị tiêu diệt giải phóng hàng loạt thể bọc Các thể bọc lại tiếp tục công vào thể Sự nhiễm bệnh sâu thường trải qua ba giai đoạn: • Giai đoạn tiệm ẩn: kéo dài khoảng 12 Đây giai đoạn xâm nhập virus vào bên tế bào Các virus cài vào thụ thể màng nhân tế bào • Giai đoạn tăng trưởng: kéo dài khoảng 12-48 Virus tăng trưởng nhanh giai đoạn Trong nhân tế bào vật chủ, xuất cấu trúc mạng lưới Sau 32 nhân tế bào vật chủ chứa đầy virion • không vỏ Giai đoạn cuối: Ở giai đoạn xảy tạo thành thể vùi, nghĩa virion bao bọc thể protein Giai đoạn kéo dài 2-7 ngày Thời kỳ ủ bệnh côn trùng gây bệnh thường kéo dài từ 3-12 ngày, phụ thuộc vào tuổi vật chủ, nhiệt độ, độ ẩm, điều kiện khác môi trường Việc lây truyền nguồn bệnh virus côn trùng xảy theo hai hướng: • Lây truyền ngang: Nguồn bệnh lây lan cá thể hệ điều kiện phát thành dịch, nguồn virus bám vào trứng vật chủ Khi nở ấu trùng gặm vỏ trứng chui bị nhiễm bệnh • Lây truyền dọc: Là lây truyền bệnh qua trứng phôi Trong invitro xâm nhập NPV vào tế bào mẫn cảm cách vỏ virus hấp thụ bề mặt tế bào virus vào tế bào chất thực bào Các capsit nhân lên tế bào chất tương tác với lỗ rò màng nhân để vào nhân (Nucleoplasm) 15 Trong quần thể sâu hại tự nhiên côn trùng không bị bệnh loại virus gây mà bị nhiễm bệnh hỗn hợp loại virus Thông thường hỗn hợp NPV CPV Có loài côn trùng lúc có tới virus gây bệnh Đến nhiễm bệnh hỗn hợp nhiều loại virus biết 198 loại côn trùng Tác động qua lại virus trình nhiễm bệnh biểu theo ba kiểu: Đồng tác động, tác động không phụ thuộc vào tác động gây nhiễu khác Khi có tương đồng tác động virus chế xuống 50% Điều có ý nghĩa thực tiễn sản xuất Ngược lại tượng tác động nhiễu làm giảm hiệu lực gây bệnh virus làm giảm hiệu chế phẩm, sản xuất chế phẩm cần loại trừ virus có tác động nhiễu Chế phẩm NPV không dùng quần thể sâu hại có bệnh CPV hai nhóm thường có tác động nhiễu lên QUY TRÌNH CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT THUỐC TRỪ SÂU VIRUS 3.1 Giới thiệu Trên giới công nghệ sản xuất chế phẩm virus trừ sâu nhiều nước thực Mỹ, Nga, Pháp, Ấn Độ, Trung Quốc… Ở nước ta có số sở nghiên cứu Viên Bảo vệ thực vật, Viên công nghệ sinh học sản xuất ứng dụng có hiệu số sâu, đặc biệt sâu xanh, số loại sâu gây hại lớn cho trồng kháng với thuốc hóa học bảo vệ thực vật Cơ chế diệt sâu virus thực virus xâm nhập vào thể côn trùng, chúng nhân lên phát triển nhân nguyên sinh chất tế bào Khi virus nhân lên với số lượng lớn, chúng phá hủy tế bào xâm nhập vào tế bào khác, dẫn tới phá hủy mô làm cho côn trùng chết 3.2 Nguyên tắc sản xuất thuốc trừ sâu virus Nuôi sâu làm vật chủ để nhân virus virus nhiểm vào tế bào sống Sâu kí sinh nuôi buồng nuôi thức ăn nhân tạo, đến giai đoạn ấu trùng dịch huyền phù virus cấy vào thức ăn để lây nhiểm cho sâu Sau – ngày, ấu trùng chết thu, sấy nhẹ 33 - 35°C đến khô Xác sâu mang nhiều virus nghiền thành bột, thêm dịch sinh lý, trộn lọc Sản phẩm lọc ly tâm lấy cặn chứa virus, thêm nước cất tạo thành dung dịch huyền phù, glycogen vô trùng thêm vào để bảo quản 16 3.3 Phân lập virus diệt côn trùng Phân lập virus từ vật chủ mà virus ký sinh bước quan trọng nghiên cứu chuẩn đoán bệnh cho mục đích đặc biệt cần đến độ tinh khiết cao hạt virus Phương pháp phân lập gồm bước sau: Thu mẩu côn trùng bị bệnh cho vào cối, cho nước cất nước khử ion lần đệm Tris, pH 7.3 – 8.0, nghiền, lọc bỏ bã Lấy dịch lọc ly tâm 500 vòng/phút, bỏ cặn, lấy dịch ly tâm Hình Các bước để phân lặp virus diệt côn trùng 3.4 Phương pháp sản xuất chế phẩm virus Có phương pháp: phương pháp sản xuất in vivo phương pháp sản xuất in vitro 3.4.1.Phương pháp sản xuất in vitro Phương pháp sản xuất in vitro phương pháp nuôi cấy virus mô tế bào Phương pháp nguyên cứu từ năm 1962 Grace thực hiện, sau Goodwin CS phát triển thành kĩ thuật nuôi cấy tế bào (1970) Những dòng tế bào thường gặp tiêu biểu cho loại sâu quan trọng bao gồm Autographa californica, Spodoptera frugiperda Các dòng tế bào tách từ sâu tuổi nhỏ nuôi nồi phản ứng sinh học, có lượng nhỏ môi trường có thành phần gồm huyết 17 thanh, bào thai bò, muối khoáng kháng sinh Các chế độ khác pH, độ thông khí…ảnh hưởng tới sinh trưởng suất tế bào 3.4.2.Phương pháp sản xuất in vivo Phương pháp in vivo phương pháp sản xuất thể ký chủ côn trùng sống Có phương pháp để thu nhận kí chủ: • Tìm kí chủ ( sâu) đồng để sản xuất: tìm vùng có nhiều quần thể sâu nhiểm virus vào quần thể thu cá thể bị nhiểm virus để sản xuất • Nuôi kí chủ (sâu) phòng thí nghiệm: nhân nuôi sâu hàng loạt phòng thí nghiệm sau cho nhiểm virus vào Đây phương pháp phổ biến 3.5 QUY TRÌNH CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT CHẾ PHẨM VIRUS NPV BẰNG PHƯƠNG PHÁP IN VIVO Không giống chế phẩm Bt nấm, NPV phải nhân nhiễm mô tế bào sống thể vật chủ Vì công nghệ sản xuất chế phẩm virus NPV trừ sâu bao gồm khâu quan trọng là: công nghệ sản xuất hàng loạt sâu để làm vật chủ trình tạo sinh khối virus Sơ đồ quy trình sản xuất: Hình Sơ đồ quy trình sản xuất chế phẩm virus 18 Hình Phương pháp thủ công SX chế phẩm NPV cho nông dân Hình Phương pháp sản xuất NPV phòng thí nghiệm 19 3.5.1.Sản xuất giống sâu nhân nuôi hàng loạt Để sản xuất số lượng lớn sâu làm vật chủ người ta tiến hành nghiên cứu chế tạo thức ăn cho sâu vật chủ Mỗi loài sâu có nhu cầu dinh dưỡng khác nên môi trường nhân tạo để nuôi sâu khác Trên sở nghiên cứu môi trường thức ăn nuôi sâu bán tổng hợp, nhà khoa học Việt Nam xây dựng thành công quy trình công nghệ sản xuất hàng loạt sâu vật chủ tạo chế phẩm virus phòng trừ số sâu hại như: sâu xanh, sâu khoang, sâu keo da láng Dưới số môi trường thức ăn nhân tạo cho sâu xanh Môi trường nuôi cấy thức ăn cho sâu xanh - Bột đậu xanh 52 gam - Benzoat natri 0.6 gam - Axit Benzoit 0.2 gam - Axit Axetic 0.8 ml - Mật ong 0.7 gam - Agar 4.0 gam - Polyvitamin 2.0 ml - Nước nóng 200 ml • Phương pháp nuôi giống Thu sâu đồng nuôi thức ăn nhân tạo, chọn sâu to, chọn • cá thể đực, đồng tiếp tục nuôi lọ thủy tinh hay lọ nhựa để phát triển thành bướm Khi bướm đẻ ta tiến hành thu trứng Sau 3-4 ngày trứng nở thành ấu trùng cho vào thức ăn nhân tạo để nuôi Nuôi tập thể tuổi 1, sang tuổi 3, phải tiến hành tách riêng cá thể sâu ăn thịt lẫn Sâu – tuổi dùng để nhiễm virus Đối với sâu xanh tuổi tốt nhất, cho số lượng thể vùi cao Cần ý yếu tố ảnh hưởng chất lượng sâu : thức ăn nhân tạo, tạp nhiễm vi khuẩn, nhiệt độ, độ ẩm, tỉ lệ đực cái, mật độ quần thể, ánh sáng… 3.5.2.Nhiễm virus Sau nuôi sâu 10 ngày ( tuổi - sâu xanh) chuyển sang phòng thí nghiệm cho nhiễm virus Cách tốt để lây nhiễm virus cho sâu phun dịch virus trộn virus vào thức ăn sâu để sâu ăn bị nhiễm virus Thường dùng nồng độ 10 PIB/ml để nhiễm để đạt tỉ lệ chết 90 – 95%, không dùng nồng độ cao sâu chết 20 sớm làm giảm sản lượng thể vùi, nhiễm nồng độ thấp sâu bị nhiễm làm giảm suất 3.5.3.Nuôi sâu nhiễm virus Nhiệt độ nuôi sâu bị nhiễm virus kiểm soát từ 25°C - 30°C Nếu nhiệt độ kiểm soát không tốt làm giảm suất kéo dài thời gian thu hoạch (Nếu nhiệt độ thấp thời gian nuôi sâu sinh trưởng kéo dài dẫn đến thời gian thu hoạch kéo dài Còn nhiệt độ cao dẫn tới sâu nhanh chết, ảnh hưởng tới suất) Thời gian thu hoạch LT 75-100 ( tức thời gian có tỉ lệ sâu chết 75% 100%) 3.5.4.Thu hồi sản phẩm - Thu sâu chết cho vào dụng cụ chứa - Nghiền sâu cho thêm nước lọc lấy dịch, lọc qua vải để bỏ bã - Ly tâm từ 15 - 20 phút tốc độ 10.000 - 20.000 vòng/ phút, lấy cặn, bỏ dịch (có thể tận dụng dịch ly tâm để pha thuốc bột) Cặn bổ sung bột, chất phụ gia sau sấy khô - Đây giai đoạn tốn nhiều thời gian tốn sản xuất chế phẩm virus Quá trình phối chế: • Dịch thể: Trước tạo thuốc trừ sâu phải kiểm tra đếm số lượng thể vùi Thêm phụ gia, chất bám dính (Cazein), chất chống thối, đóng chai màu tối để chống tia tử ngoại • Dạng bột: đem sấy phun, đông khô, phối chế Hàm lượng ẩm yêu cầu đạt - 10% Ưu điểm thuốc dạng bột bảo quản lâu dạng lỏng 3.5.5.Các chất phụ gia Các chất phụ gia thường sử dụng như: than, mực Ấn Độ, trứng-albumin, mật đường, tăng trắng quang học 21 Một số chất acid boric, chitinase, tăng trắng quang học nhóm stilbene tăng cường hoạt tính baculovirus Hỗn hợp baculoviruses với tăng trắng quang học nhóm stilbene có tiềm tuyệt vời để sử dụng xây dựng sản phẩm chúng nâng cao hoạt động virus nồng độ thấp 0.01 phần trăm, giảm bớt thời gian để giết vật chủ, cung cấp bảo vệ chống lại tia cực tím từ xạ mặt trời • Enzyme chitinase cho vào để phun lên thực vật có tác dụng chống lại nấm kí sinh(tiêu diệt nấm mốc) có hại cho trồng.Chitinase tiêu hóa màng côn trùng trình biến thái lột xác làm cho virut xâm nhập tốt hơn.Nó có khả kìm hãm sinh trưởng số loài côn trùng gây hại (ve bét) ấu trùng nhặng • Mật đường:kiểm soát pH tăng hoạt tính sinh học đất,kiểm soát nitơ vô Chất hợp lực: chất có tác động với chất khác,khi hỗn hợp làm tăng độ độc hoạt chất.Bản thân chúng phải chất có trung tâm hoạt động,trong cấu trúc phân tử có nhiều nối đôi ,nối ba hay thân chúng có tác động độc lý 3.5.6.Kiểm tra chất lượng sản phẩm - Kiểm tra nồng độ thể vùi - Hoạt tính sinh học - Độ ẩm (dạng bột) - Thử sinh học 3.5.7.Đóng gói - Đóng chai ( thuốc nước), đóng gói (thuốc bột) - Nhãn chai, gói cần ghi rõ hoạt tính, ngày sản xuất, hạn sử dụng, hướng dẫn sử dụng Lưu ý: Bước thu hồi sản phẩm quy trình SX quan trọng dịch virus SX để dùng công nghệ đơn giản, việc thêm chất phụ gia để phun Còn yêu cầu bảo quản lâu dài phải có hệ thống kho lạnh để bảo quản phải tạo chế phẩm dạng bột Lúc cần lượng để làm khô chế phẩm Liều dùng cho chế phẩm virus NPV: Trên giới: dùng khoảng 2,4.1012 PIB/ha Ở Việt Nam: dùng 1.1012 – 2.1012PIB/ha 3.6 CÁC CHỈ TIÊU ĐÁNH GIÁ CHẾ PHẨM NPV DẠNG BỘT 22 Chế phẩm NPV cần đảm bảo yêu cầu kỹ thuật sau: Các tiêu Đơn vị tính Kích thước hạt 78μm Độ thủy phần 7% Độ bám dính đồng Độ pH Lượng PIB/mg chế phẩm 85 – 90% 1.5x107 Bảng 1: Các tiêu đánh giá chế phẩm NPV dạng bột − Kiểm tra chất lượng chế phẩm: Kiểm tra nồng độ thể vùi hoạt tính sinh học − Đóng gói sản phẩm: Đóng chai, đóng gói, dán nhãn ghi rõ ngày SX, hoạt lực, hạn sử dụng, hướng dẫn sử dụng − Các tiêu cần đạt sản phẩm: • Chế phẩm dạng dịch thể: 107 – 108 PIB/ml, thời gian bảo quản – 12 tháng, hiệu diệt sâu 70 – 100% sau – 10 ngày phun • Chế phẩm dạng bột: 108 – 109 PIB/gram, hàm lượng chất khô – 10%, thời gian bảo quản 24 tháng, hiệu diệt sâu 70 – 100% sau – 10 ngày phun − Cách sử dụng: Hoà thuốc vào bình phun bình thường với liều lượng 1,0 1,2 kg/ha 3.7 CÁC CHẾ PHẨM VIRUS TRỪ SÂU Chế phẩm virus NPV sâu xanh: SX theo quy trình công nghệ thử nghiệm áp dụng đồng ruộng trừ sâu xanh thuốc Sơn La, Hà Nội, Đồng Nai, Sông Bé, Ninh Thuận,… cho kết phòng trừ tốt Chế phẩm virus sâu xanh với OMĐ tác nhân sinh học quan trọng hệ thống phòng trừ tổng hợp sâu hại Do chế phẩm có giá thành cao người nông dân chưa quen sử dụng nên phạm vi sử dụng hạn chế Chế phẩm virus sâu đo xanh đay: chưa tìm môi trường thức ăn nhân tạo nuôi sâu Do đó, để có sâu vật chủ nhân virus phải nuôi thức 23 ăn tự nhiên Vì chế phẩm virus sâu đo đay SX theo phương pháp thủ công Chế phẩm virus NPV sâu róm thông: Chế phẩm SX theo phương pháp thủ công Hiệu trừ sâu chế phẩm đạt tới 55,2 – 83,3% Chế phẩm áp dụng thành công phòng trừ sâu róm thông Thanh Hóa Sử dụng chế phẩm thuốc hóa học tỉ lệ kí sinh tự nhiên số ong ký sinh sâu róm thông tăng lên Ngoài chế phẩm kể có chế phẩm virus NPV sâu keo da láng SX theo phương pháp thủ công Chế phẩm sử dụng rộng rãi Ninh Thuận, Lâm Đồng,… mang lại hiệu kinh tế cao Bảng liệt kê số chế phẩm đăng kí sử dụng số nước giới: Côn trùng vật chủ Adoxophyes orana (Fisher von Roessherstamm) • Adoxophyes sp Agrotis segetum(Denis Schiffmuller) • Cydia pomonella(Linnaeus) • • Cây trồng (virut Tên thương mại GV) Táo Capex Thụy Sỹ Chè - Agrovir Nhật Bản Đức,TQ Táo, lê Carpovirusine CYD-X Granusal Virin-GyAp Madex Cây sắn • Erinnyis ello(Linnaeus) • • • • Homona magnanima Diakonoff Chè Phthorimaea operculella(Zeller) Khoai Pieris rapae(Linnaeus) tây Plodia interpunctella(Hubner) • Plutella xylostella(Linnaeus) Bắp cải Hạnh nhân, nho khô Bắp cải 24 Quốc gia Pháp Mỹ Đức Nga CH Czech Brazil Nhật Bản PTM Baculovirus - Peru,Ai Cập, Tunisia, Trung Quốc Mỹ Trung Quốc Anagrapha falcifera(Kirby)* Virut NPV Cây bông, rau, ăn quả, đậu tương • Autographa california(Speyer)* Bắp cải, bông, cảnh • • - Mỹ Baculoriron, Baculovirus nitral, Coopervirus, Protégé VPN 80 Brazil Anticarsia gemmatalis(Hebner) Buzura suppresalis(Guenee) • Helicoverpa armigera(Hubner) • Helicoverpa zea(Boddie) • Heliothis virescens(Fabricius) • Hyphantria cunea(Drury) • Mamestra brassicae(Linnaeus) • Lymantria dispar(Linnaeus) • • Neodiprion locontei(Fitch) Neodiprion sertifer(Geofroy) • Orgiya psedotsugata(McDummough) Chè,cây tung Cây bông, cà chua Virin-HS Cây Cây Elcar,Gemstar Cây rừng, dâu tằm Elcar Bắp cải Virin-ABB Cây rừng Mamestrin Virin-EKS Gypchek Disparvirus Cây rừng Virin-ENSH Lecont virus Guatemala TQ Nga Mỹ Mỹ Nga Pháp Nga Mỹ Canada Nga TQ Mỹ, Canada Monisarmiovirus Virox Phần Lan Ukraina TB BIocontrol Virtuss Mỹ 25 Canada Bảng Ví dụ loại thuốc trừ sâu virus thương mại đăng ký để kiểm soát dịch hại nước khác TÀI LIỆU THAM KHẢO PGS.TS Nguyễn Xuân Thành 2003 Giáo trình công nghệ vi sinh vật sản xuất nông nghiệp xử lý môi trường nhà xuất nông nghiệp Hà Nội http://svdanang.com/@f/ http://baigiang.violet.vn/present/show/entry_id/4196004# http://thuviensinhhoc.com/index.php?option=com_content&view=article&id=489:ng-dng-chphm-sinh-hc-phc-v-cho-cay-trng-hng-i-ung-n-ca-phat-trin-nong-nghip-sinh-thai-bnvng&catid=38:travel-tips&Itemid=872 http://www.baomoi.com/Info/Trien-vong-cua-nen-nong-nghiep-sach/79/4381739.epi 26 http://sokhoahoccn.angiang.gov.vn/xem.asp?maidtt=2032&maidmuc=24 http://www.vietlinh.vn/langviet/toilamnd/caygi/cayanqua/c_7tts.htm Nguồn: Thông tin KH&CN Lâm Đồng, 3/1999 HẾT 27 28 ... nhóm thường có tác động nhiễu lên QUY TRÌNH CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT THUỐC TRỪ SÂU VIRUS 3.1 Giới thiệu Trên giới công nghệ sản xuất chế phẩm virus trừ sâu nhiều nước thực Mỹ, Nga, Pháp, Ấn Độ, Trung... lặp virus diệt côn trùng 3.4 Phương pháp sản xuất chế phẩm virus Có phương pháp: phương pháp sản xuất in vivo phương pháp sản xuất in vitro 3.4.1.Phương pháp sản xuất in vitro Phương pháp sản xuất. .. TRÌNH CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT CHẾ PHẨM VIRUS NPV BẰNG PHƯƠNG PHÁP IN VIVO Không giống chế phẩm Bt nấm, NPV phải nhân nhiễm mô tế bào sống thể vật chủ Vì công nghệ sản xuất chế phẩm virus NPV trừ sâu