TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH - KTNN ====== PHẠM THỊ HIỀN NGHIÊN CỨU SỰ VẬN TẢI VÀ PHÂN PHỐI THUỐC BERBERIN CỦA MÀNG BACTERIAL CELLULOSE LÊN MEN TỪ NƯỚC VO GẠO ĐỊNH HƯỚNG SỬ DỤNG QUA ĐƯỜNG UỐNG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chuyên ngành: Sinh lý người động vật Người hướng dẫn khoa học TS NGUYỄN XUÂN THÀNH HÀ NỘI, 2016 LỜI CẢM ƠN Em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới TS Nguyễn Xuân hướng dẫn, bảo tận tình, giúp đỡ tạo điều kiện cho em thực hoàn thành tốt khóa luận Em xin chân thành cảm ơn Ban Giám hiệu trường ĐHSP Hà Nội 2, khoa Sinh - KTNN, Trung tâm Hỗ trợ NCKH & CGCN Trường ĐHSP Hà Nội 2, phòng thí nghiệm Sinh lý người động vật, thầy cô tổ môn Động vật, ban bảo vệ tạo điều kiện giúp đỡ em Em xin chân thành cảm ơn giúp đỡ quan tâm động viên bạn bè, gia đình suốt trình hoàn thành khóa luận Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày tháng năm 2016 Sinh viên Phạm Thị Hiền LỜI CAM ĐOAN Để đảm bảo tính trung thực đề tài, xin cam đoan: Đề tài không chép tài liệu có sẵn Đề tài không trùng lặp với đề tài khác Kết thu đề tài tự thân nghiên cứu thực tiễn đảm bảo tính xác trung thực Hà Nội, ngày tháng năm 2016 Sinh viên Phạm Thị Hiền DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT A xylinum: Acetobacter xylinum BC: Bacterial cellulose BH: Berberine hydrochloride OD: Optical density UV - vis: Ultraviolet visible DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Kết nhuộm Gram âm A xylinum Hình 1.2 Công thức cấu tạo BH Sơ đồ 2.1 Quy trình nuôi cấy thu nhận BC 15 Hình 2.1 Đồ thị biểu diễn đường chuẩn BH 16 Hình 3.1 Màng BC môi trường nuôi cấy 21 Hình 3.2 Màng BC xử lý nước 22 Hình 3.3 Màng BC tinh chế 23 Hình 3.4 a,b Màng BC tinh chế độ dày khác 24 Hình 3.5 Màng BC nạp thuốc 25 Hình 3.6 Thời gian giá trị OD345nm thuốc BH giải phóng qua BC môi trường pH độ dày màng khác 28 DANH MỤC BẢNG BIỂU Bảng 2.1 Thành phần khối lượng chất môi trường nuôi cấy màng BC 13 Bảng 2.2 Bảng nồng độ BH giá trị OD345nm 15 Bảng 2.3 Dung dịch đệm đa Britton Robinson 17 Bảng 3.1 Khối lượng thuốc hấp thụ vào màng BC 25 Bảng 3.2 Tỷ lệ thuốc hấp thụ vào màng BC 27 Bảng 3.3 Khối lượng thuốc giải phóng qua màng BC 29 Bảng 3.4 Tỷ lệ thuốc giải phóng qua màng BC 30 Bảng 3.5 Hệ số tương quan (R2), tốc độ giải phóng thuốc (k) giá trị mũ số giải phóng (n) từ môi trường pH độ dày màng khác 32 MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Lí chọn đề tài Mục đích nghiên cứu 3 Nội dung nghiên cứu Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn đề tài 4.1 Ý nghĩa khoa học 4.2 Ý nghĩa thực tiễn CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Đại cương vi khuẩn A xylinum màng BC 1.1.1 Phân loại đặc điểm hình thái A xylinum 1.1.2 Đặc điểm sinh lý, sinh hóa A xylinum 1.1.3 Màng BC vi khuẩn A xylinum 1.2 Thuốc BH 1.2.1 Cấu trúc 1.2.2 Nguồn gốc 1.2.3 Tính chất vật lý 1.2.4 Tính chất hóa học 1.2.5 Tác dụng dược lý ứng dụng 1.2.6 Chỉ định chống định thuốc BH 1.3 Tình hình nghiên cứu giới Việt Nam 10 1.3.1 Tình hình nghiên cứu thuốc 10 1.3.1.1 Trên giới 1.3.1.2 Ở Việt Nam 1.3.2 Tình hình nghiên cứu màng BC Error! Bookmark not defined 1.3.2.1 Trên giới 1.3.2.2 Ở Việt Nam CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 12 2.1 Đối tượng nghiên cứu 12 2.1.1 Giống vi khuẩn 12 2.1.2 Thuốc BH có xuất sứ từ Sigma - Mỹ 12 2.1.3 Nguyên liệu - hóa chất 12 2.1.4 Thiết bị dụng cụ 12 2.2 Địa điểm nghiên cứu 13 2.3 Phạm vi nghiên cứu 13 2.4 Phương pháp nghiên cứu 13 2.4.1 Phương pháp lên men thu màng BC 13 2.4.2 Phương pháp xử lý màng BC trước hấp thụ thuốc 14 2.4.3 Phương pháp xác định khối lượng BC tạo thành 15 2.4.4 Phương pháp sử dụng đường chuẩn xác định khối lượng thuốc hấp thụ qua màng BC 15 2.4.5 Phương pháp sử dụng đường chuẩn xác định khối lượng thuốc giải phóng qua màng BC 17 2.4.6 Phương pháp xử lý thống kê 18 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 20 3.1 Kết đạt Error! Bookmark not defined 3.1.1 Tạo màng BC tinh khiết 20 3.1.2 Khảo sát khối lượng thuốc hấp thụ vào màng 24 3.1.3 Khảo sát khối lượng thuốc giải phóng qua màng 28 3.2 Kiến nghị Error! Bookmark not defined KẾT LUẬN 33 TÀI LIỆU THAM KHẢO 35 MỞ ĐẦU Lí chọn đề tài Berberine hydrochloride (BH) biết đến chất kháng khuẩn tự nhiên việc điều trị bệnh lý tiêu chảy, viêm đường tiêu hóa vi khuẩn tả, E coli, amip đường ruột 23, 31 Theo vài nghiên cứu gần đây, BH có tác dụng tốt việc điều trị số bệnh mãn tính tiểu đường, viêm khớp, hạ lipid, cholesterol máu, đặc biệt bệnh viêm đại tràng BH sở hữu tính chất dược khác bao gồm tác dụng chống ung thư 23 Tuy nhiên sinh khả dụng đường uống thấp có khả gây tác dụng phụ cho vận chuyển thuốc đường tiêu hóa 23.Trong trình sử dụng bị tác nhân khác gây ảnh hưởng làm giảm hiệu hấp thụ 23 Bacterial cellulose (BC) sản phẩm loài vi khuẩn, đặc biệt chủng Acetorbacter xylinum (A xylinum) 2, 5 BC có cấu trúc đặc tính giống với cellulose thực vật (gồm phân tử glucose liên kết với liên kết β - 1, glucorit) cellulose vi khuẩn khác với cellulose thực vật chỗ: không chứa hợp chất cao phân tử ligin, hemicellulose, peptin sáp nến chúng có đặc tính vượt trội với độ bền sức căng, độ đàn hồi, độ co giãn, khả giữ hình dạng ban đầu, khả giữ nước hút nước cao, bề mặt tiếp xúc lớn bột gỗ thường, bề dày vi sợi lớn 100 nm, bị phân hủy sinh học, có tính tương thích sinh học, tính trơ chuyển hóa, không độc không gây dị ứng 2, 5 Trên giới màng BC ứng dụng nhiều lĩnh vực công nghệ khác nhau: dùng màng BC làm môi trường phân tách cho trình xử lí nước, dùng làm chất mang đặc biệt cho pin lượng cho tế bào, dùng làm chất biến đổi độ nhớt sản xuất sợi truyền quang, làm môi trường chất sinh học, thực phẩm hay thay thực phẩm, thiết kế hệ thống vận tải phân phối thuốc nhiều ứng dụng khác 19 Đặc biệt lĩnh vực y học, màng BC ứng dụng làm da tạm thời thay da trình điều trị bỏng, loét da, làm mạch máu nhân tạo, điều trị bệnh tim mạch, làm mặt nạ dưỡng da cho người 9, 19 Amin et al 18 báo cáo việc sử dụng màng BC làm màng bọc cho paracetamol cách sử dụng kĩ thuật phun phủ Kết cho thấy màng BC có khả giữ thuốc giải phóng thuốc chậm lại làm tăng hiệu sử dụng thuốc Ở Việt Nam việc nghiên cứu ứng dụng màng BC quan tâm gần đạt kết bước đầu Đề tài Nguyễn Văn Thanh 5 – Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh 2006 “Nghiên cứu chế tạo màng cellulose trị bỏng từ Acetobacter xylinum” Theo kết nghiên cứu cho thấy màng BC tạo nên từ nguyên liệu rẻ tiền, dễ kiếm, sản xuất quy mô công nghiệp 5 Về mặt tính chất BC có độ tinh lớn nhiều so với loại cellulose khác, phân hủy sinh học, tái chế hay phục hồi hoàn toàn 5 Ngoài BC có độ bền tinh thể cao, sức căng lớn, trọng lượng thấp, khả thấm hút lớn, đường kính sợi nhỏ, chứa nhiều dưỡng chất Đồng thời hàng rào cản oxi sinh vật khác, ngăn cản phân hủy chất tế bào ngăn cản tác động UV, ổn định kích thước hướng, màng BC có ý nghĩa giữ thuốc giải phóng thuốc từ từ 17, 24 Bên cạnh đó, sợi cellulose có cấu trúc mạng hệ thống vận chuyển phân phối thuốc làm tăng sinh khả dụng thuốc, giúp thuốc không bị phá hủy môi trường axít Do đó, cần thiết kế loại thuốc uống vận tải phân phối thuốc để làm tăng độ hòa tan khả dụng sinh học BC 23 Uống đường ưa thích truyền thống để phân phối thuốc So với đường tiêm hệ thống phân phối thuốc, lợi Hình 3.3 Màng BC tinh chế Sau xử lý qua công đoạn hóa học, thu màng có màu trắng đục, độ đàn hồi, khả giữ hình dạng ban đầu Khi sờ vào màng có độ mềm, nhẵn mịn Hình 3.4 a, b màng BC tinh chế với độ dày, mỏng khác 23 a) Màng BC có độ dày 0.7 cm b) Màng BC có độ dày cm Hình 3.4 a, Màng BC có độ dày 0.7 cm a, Màng BC có độ dày cm 3.2 Khảo sát khối lượng thuốc hấp thụ vào màng 24 Màng BC tinh chế, đem sấy 120C để loại bỏ nước thời gian 20 phút Sau đưa màng BC sấy khô vào môi trường thuốc chuẩn bị sẵn Hình 3.5 hình ảnh màng BC nạp thuốc 0.5 Hình 3.5 Màng BC nạp thuốc Vì màng BC có khả hút nước giữ nước cao nên sau đưa màng sấy vào bình tam giác để nạp thuốc thuốc dễ dàng hấp thụ vào màng Lúc nồng độ thuốc bên màng lớn bên màng nên thuốc theo chiều từ vào Sau đo máy quang phổ tử ngoại khả kiến UV - vis 2450, giá trị mật độ quang tương ứng, từ tính khối lượng thuốc BH hấp thụ vào màng BC theo công thức (01) Lặp lại thí nghiệm lần, kết trình bày bảng 3.1 Bảng 3.1 Khối lượng thuốc hấp thụ vào màng BC (n = 3) Thời Độ dày mtrước gian màng y x (mg/ml) loát (mg) msau (mg) 25 loát mhấp thụ (mg) (giờ) BC (cm) 0.5 2.268  4.176 0.0026 2.230 0.0054  4.104 0.0026 1.5 0.5 2.127 0.05  3.908 0.0026 1.345 0.005  2.425 0.0046 0.5 2.126 0.0087  3.907 0.0026 1.345 0.005  2.427 0.0078 0.148  4.176  0.824 0.0054 0.0054  4.104  0.896 0.05  0.005  2.427  2.526 0.148  0.0087  3.907  1.093 0.005  0.005  2.425  2.527 0.0087  0.005  3.908  1.092 0.005   0.0148 Trong đó: mtrước loát = khối lượng thuốc trước loát vào màng (mg) msau loát = khối lượng thuốc sau loát (mg) mhấp thụ = khối lượng thuốc hấp thụ vào màng (mg) Sau so sánh giá trị trung bình, kiểm tra kiểm định công cụ Microsoft Office Excel 2007 23, với định nghĩa trung bình  < 0.05, thấy giá trị p = 0.0289 < 0.05 Ta đưa kết luận bảng 3.1 Qua bảng 3.1, nhận thấy khối lượng thuốc hấp thụ vào màng tăng dần theo thời gian, màng 0.5 cm thời gian 0.824 mg tăng lên 0.268 mg sau 0.5 sau 0.5 khối lượng hấp thụ tăng lên không đáng kể (0.001 mg), nghĩa lúc màng dần ngưng hấp thụ thuốc Tương tự màng cm 0.896 mg 0.5 1.631 mg, tiếp 26 0.5 sau tăng thêm 0.001 mg Vì màng cm tích lớn nên lượng thuốc hấp thụ đo lớn màng 0.5 cm Nhưng tính đơn vị thể tích khối lượng thuốc hấp thụ màng mỏng hấp thụ nhiều Sử dụng công thức tính tỷ lệ BH hấp thụ vào màng (02) tính tỷ lệ thuốc BH hấp thụ vào màng BC Tỷ lệ trình bày bảng 3.2 Bảng 3.2 Tỷ lệ thuốc hấp thụ vào màng BC (n = 3) Thời Độ dày mhấp thụ Thể tích Cường độ gian màng (mg) màng hấp thụ (giờ) (cm) (cm3) (mg/cm3) 0.5 0.824  14.13  0.058  16.48  0.0015 0.0018 0.0015 0.0018 0.896  50.24  0.018  17.92  0.0021 0.014 0.0013 0.0026 1.092  14.13  0.077  21.84  0.0019 0.011 0.026 0.0024 2.527  50.24  0.050  50.54  0.0055 0.019 0.032 0.0034 1.093  14.13  0.077  21.86  0.0092 0.016 0.016 0.0056 2.526 ± 50.24 ± 0.051 ± 51.46 ± 0.0087 0.0015 0.0019 0.0045 1.5 0.5 0.5 EE (%) Sau so sánh giá trị trung bình, kiểm tra kiểm định công cụ Microsoft Office Excel 2007 23, với định nghĩa trung bình  < 0.05, thấy giá trị p = 0.0428 < 0.05 Có thể đưa kết luận bảng 3.2 27 Các kết trung bình nhiều lần lặp lại, qua bảng 3.2, nhận thấy khối lượng thuốc hấp thụ màng BC có độ dày 0.5 cm tốt màng cm, thời gian 1.5 cao 0.007 mg/cm3 Sau khối lượng thuốc bắt đầu giảm nghĩa thuốc bắt đầu giải phóng qua màng BC 3.3 Khảo sát khối lượng thuốc giải phóng qua màng Lần lượt lấy mẫu đo giải phóng thời gian khác 0.5 giờ; giờ; giờ; giờ; giờ, 12 giờ, 24 giờ, thu nồng dung dịch khác tuơng ứng Sau sử dụng máy quang phổ tử ngoại khả kiến UV - vis 2450 để đo, thu giá trị mật độ quang tương ứng Các giá trị mật độ quang đó, đưa vào Microsoft Office Excel 2007 6 để xây dựng đồ thị Kết thu hình 3.6 Hình 3.6 Thời gian giá trị OD345nm thuốc BH giải phóng qua BC môi trường pH độ dày màng khác 28 Từ hình 3.6, nhận thấy giá trị mật độ quang thuốc tăng theo thời gian, tới cao nhất, sau không tăng thêm trì Nghĩa thuốc không giải phóng thêm Áp dụng công thức tính khối lượng thuốc giải phóng qua màng, kết khối lượng thuốc giải phóng qua mốc thời gian trình bày bảng 3.3 Bảng 3.3 Khối lượng thuốc giải phóng qua màng BC (n=3) pH Độ dày Thời gian (giờ) 0.5 12 24 0.0247 0.0304  0.038  0.0436 0.0531 0.0512  0.0439  0.017 0.024 0.019 0.017  0.019 0.0493  0.0474 0.016  0.021 0.0626  0.0607 0.014  0.02 0.0629  0.0607 0.021  0.005 0.038  0.0417 0.015  0.009 0.038  0.0361 0.022  0.008 màng (cm) 0.5 0.0361  0.021 6.8 0.5 0.0455  0.011 0.0531  0.025 12 0.5 0.0171  0.019 0.0247  0.025 0.0398  0.0455  0.014 0.02 0.0512  0.0569  0.013 0.02 0.0569  0.0588  0.017 0.016 0.0209  0.0228  0.023 0.017 0.0304  0.0342  0.027 0.019  0.042  0.029 0.0512 0.0531  0.035  0.026 0.0626 0.0664  0.018  0.032 0.0664 0.0683  0.019  0.021 0.0304 0.0398  0.024  0.026 0.0398 0.0398  0.027  0.027 29 Sau so sánh giá trị trung bình, kiểm tra kiểm định công cụ Microsoft Office Excel 2007 23, với định nghĩa trung bình  < 0.05, thấy giá trị p = 0.0373 < 0.05 Ta đưa kết luận bảng 3.3 Qua bảng 3.3, thấy: khối lượng thuốc giải phóng tăng dần thời điểm giờ, màng 0.5 cm từ 0.0247 mg 0.5 tăng thêm 0.0284 mg thời gian pH = 2, màng 0.5 cm pH = 6.8 0.5 0.0455 mg tăng thêm 0.021 mg thời điểm giờ, màng 0.5 cm pH = 12 0.5 0.0171 tăng thêm 0.0227 mg thời điểm Tương tự màng cm từ 0.0361 mg 0.5 tăng thêm 0.017 mg thời gian pH = 2, màng 0.5 cm pH = 6.8 0.5 0.0531 mg tăng thêm 0.0152 mg thời điểm giờ, màng 0.5 cm pH = 12 0.5 0.0247 tăng thêm 0.0151 mg thời điểm Như vậy, khối lượng thuốc giải phóng qua màng 0.5 cm cao màng cm tính đơn vị thể tích màng, cụ thể khối lượng giải phóng cao màng 0.5 cm 0.04699 mg/cm3, màng cm 0.000792 mg/cm3 Từ bảng 3.3, tính tỷ lệ thuốc giải phóng, kết trình bày bảng 3.4 Bảng 3.4 Tỷ lệ thuốc giải phóng qua màng BC (n = 3) pH Độ dày màng Thời gian (giờ) (cm) 0.5 12 24 0.5 15.95  21.69  28.74  34.68  43.14 44.37  45.57 0.019 0.018 0.008 0.016  0.027  0.031 0.004 10.59  21.13  22.66  30.18  32.94 32.95  33.84 0.023 0.015 0.027 0.017  0.045  0.032 6.8 0.5 29.43  35.47  41.58  30 47.77  52.8  0.007 52.99  54.35 0.027 0.022 0.026 0.020 0.024 0.023  0.017 25.93  29.64  32.46  38.08  40.99 40.23  41.26 0.017 0.026 0.025 0.026  0.026  0.027 12 0.5 0.016 11.04  14.46  18.7  27.79  33.93 34.98  33.55 0.025 0.031 0.021 0.001  0.028  0.02 0.005 12.04  16.38  20.34  24.29  26.01 26.8  27.57 0.021 0.012 0.023 0.006  0.009  0.017 0.019 Sau so sánh giá trị trung bình, kiểm tra kiểm định công cụ Microsoft Office Excel 2007 23, với định nghĩa trung bình  < 0.05, thấy giá trị p = 0.0415 < 0.05 Ta đưa kết luận bảng 3.1 Qua hình 3.6 bảng 3.3, bảng 3.4, thấy: khối lượng thuốc giải phóng qua màng BC tăng dần từ 0.5 đến sau bắt đầu có dấu hiệu giảm không đổi khối lượng thuốc không tiếp tục giải phóng Môi trường pH = môi trường giải phóng tốt nhất, với tỷ lệ cao 54.35% độ dày màng 0.5 cm, 41.26% độ dày màng cm Sử dụng công cụ Solver Microsoft Excel [23], để kiểm tra động lực học chế giải phóng BH, liệu thu từ thí nghiệm phân tích hình thành số k 23 khác như First order, Higuchi, Hixson – Crowell Korsmeyer – Peppas Phương trình sử dụng là: First order: Ln (Q0 - Qt) = k1t Higuchi: Qt = kHt1/2 Hixson – Crowell: Q01/3 = kHCt 31 Korsmeyer – Peppas: Qt = k KP Giá trị thu biểu bảng 3.5 kết lặp lại thí nghiệm lần Bảng 3.5 Hệ số tương quan (R2), số tốc độ giải phóng thuốc (k) giá trị số mũ giải phóng (n) từ môi trường pH độ dày màng khác pH 6.8 12 Độ dày BC (cm) 0.5 cm cm 0.5 cm cm 0.5 cm First order k1 0.054  0.0163 0.033  0.005 0.101  0.01 0.05  0.0015 0.032 R2 0.6287 0.5343  0.005 0.6168 cm  0.0078  0.0273 Higuchi kH 12.811 Hixson 0.7645  0.0032  0.2194 R2 0.5034 9.975 0.0348  16.19  0.0628 0.01058  0.6558 0.0015 0.0032 kHC 0.014  0.004 0.009  0.001 R2 0.6152  12.533  0.5735 0.7038  0.038 0.029  0.002 0.7764  0.0017  0.6328 0.0063 0.0027 9.682  0.14 8.067 0.0241  0.024   0.0438  0.7489  0.8072 0.7456 0.0056 0.0041 0.013  0.009 0.009  0.002 0.007 Crowell   0.0005  0.008 Korsmeyer kKP peppas 23.763 n 0.9105  0.0071  0.0404 R2 0.4891 21.667 0.8253  0.0035  0.0356  0.05255 36.606 0.08549  0.0042  0.0569  0.06094 30.212 0.08977  0.0055  0.0286  0.05628 17.16 0.08693  0.0069  0.0145  0.06273 17.05  0.0163  0.08792 0.0037 0.0051 0.0029 0.0037 0.0025 0.0008 0.239  0.0782 0.167  0.027 0.149  0.0575 0.12  0.0369 0.26  0.0839 0.181   0.0219 Bảng 3.5 bảng phân tích chế giải phóng thuốc động lực học khuếch tán 23 Phương trình First order 23 đại diện cho hệ thống nơi mà tỷ lệ giải phóng thuốc phụ thuộc vào nồng độ thuốc hệ thống, mô hình Higuchi giả định việc phát hành loại thuốc gây chủ yếu chế khuếch tán, mô hình Korsmeyer – Peppas 23 cung cấp nhìn bên sâu sắc vào loại chế khác Trong trường hợp nghiên cứu thí nghiệm này, thấy mô hình thích hợp mô hình Higuchi 23 với n < 0.43, R2 > 80% 23 32 Ở môi trường pH khác nhau, trương nở vật liệu không giống Điều tạo điều kiện cho thuốc dễ dàng hay bị cản trở hấp thụ vào màng giải phóng qua màng BC Qua bảng 3.5, ta thấy n < 0.43, mô hình vận chuyển khuếch tán qua trung gian giải phóng thuốc Có thể giá trị n nhỏ liên quan đến khuếch tán thuốc hay nói cách khác khuếch tán liên quan tới trương nở màng ảnh hưởng môi trường pH phần thân tính chất bên vật liệu BC, phần nhỏ độ tan hay nhiều thuốc Kiểm tra kiểm định công cụ Microsoft Office Excel 2007 6, thấy giá trị p = 0.038 < 0.05 Bảng 3.5 cho thấy tốc độ giải phóng thuốc qua màng BC phụ thuộc vào độ dày màng, màng có độ dày cao tốc độ giải phóng chậm ngược lại màng mỏng có tốc độ giải phóng nhanh Ngoài ra, phụ thuộc vào môi trường pH Theo kết khảo sát, môi trường pH = 6.8 màng 0.5 cm tốt với số k1 = 0.101, kH = 16.19, kHC = 0.029, kKP = 36.606, môi trường pH = số k nhỏ hơn, cụ thể k1 = 0.054, kH = 12.811, kHC = 0.014, kKP = 23.763, môi trường pH = 12 nhỏ với k1 = 0.032, kH = 9.682, kHC = 0.009, kKP = 17.16 Như vậy, qua kết khảo sát, nhận thấy trương nở màng môi trường pH ảnh hưởng tới khả hấp thụ giải phóng thuốc màng BC Độ dày màng BC 0.5 cm pH = 6.8 điều kiện tốt để thuốc hấp thụ giải phóng qua màng BC KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 33 KẾT LUẬN Sau thời gian nghiên cứu, thu kết sau: Nuôi cấy thu nhận màng BC từ vi khuẩn A Xylinum lên men môi trường nước gạo, thời gian ngày Khảo sát lượng thuốc BH hấp thụ giải phóng qua màng BC độ dày 0.5 cm pH = 6.8 tốt với giá trị tương ứng là: Khối lượng hấp thụ 0.0773 mg/cm3, tỷ lệ hấp thụ 21.84% Khối lượng giải phóng 0.0664 mg/cm3, tỷ lệ giải phóng 54.35% KIẾN NGHỊ Sử dụng màng BC vi khuẩn A xylinum để tạo hệ thống vận chuyển thuốc BH, làm giảm ảnh hưởng tác nhân gây thuốc BH, với độ dày đề nghị màng 0.5 cm môi trường pH = 6.8 Tiếp tục nghiên cứu thuốc BH số lượng mẫu lớn hơn, sử dụng mức độ thể Tiếp tục tiến hành nghiên cứu môi trường loại thuốc khác 34 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng việt Bộ Y tế (2002), Dược điển Việt Nam III, Nhà xuất Y học Hà Nội, tr 33 - 35, 178 - 179 phụ lục (PL - 75, 76) Đặng Thị Hồng Phân lập, tuyển chọn nghiên cứu số đặc tính sinh học vi khuẩn Acetobacter xylinum chế tạp màng sinh học (BC) Luận án thạc sỹ Sinh học Đại học Sư phạm Hà Nội, 2007 Đỗ Tất Lợi (1999), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, Xuất lần thứ VIII, Nhà xuất Y học, tr 195 Hồ Đắc Trinh, Viện dược liệu, chiết Berberin clorid vàng đắng dung dịch acid sulfuric loãng, Tạp chí Dược học, 1983 – Bộ Y tế xuất bản, tr 19 Huỳnh Thị Ngọc Lan, Nguyễn Văn Thanh Nghiên cứu đặc tính màng cellulose vi khuẩn từ Acetobacter xylinum sử dụng làm màng trị bỏng Tạp chí Dược học số 361/2006, trang 18 - 20 Chu Văn Mẫn Ứng dụng tin học sinh học Nhà xuất Đại học Quốc gia Hà Nội, 2003 Đinh Thị Kim Nhung Nghiên cứu số đặc điểm sinh học vi khuẩn Acetobacter ứng dụng chúng lên men axetic theo phương pháp chìm Luận án phó tiến sỹ khoa học sinh học, 1996 Nguyễn Đức Lương (2000), Công nghệ Vi sinh vật tập – - 3, Nhà xuất Đại học Quốc gia TP Hồ Chí Minh Nguyễn Thị Nguyệt Nghiên cứu vi khuẩn Acetobacter xylinum cho màng Bacterial Cellulose làm mặt nạ dưỡng da Luận án thạc sỹ sinh học Đại học Sư phạm Hà Nội, 2008 35 10 Ngô Văn Thu (2011), “Bài giảng dược liệu”, tập I, Trường đại học Dược Hà Nội 11 Nguyễn Liêm - Chiết xuất Berberin áp lực nóng - Tạp chí Dược học, 1980, Bộ Y tế xuất bản, tr 10 12 Nguyễn Văn Mã, La Việt Hồng, Phương pháp nghiên cứu sinh lý học Thực vật – Nhà xuất Đại học Quốc gia Hà Nội 13 Phan Quốc Kinh - Nghiên cứu Alcaloid chiết xuất từ thuốc Việt Nam – ĐH Dược khoa Hà Nội, 1971, tr 10, tr 42 14 Phạm Thanh Kỳ cộng (1998), “Bài giảng dược liệu”, tập II, Trường đại học Dược Hà Nội 15 Trần Công Khánh - vàng đắng – Tạp chí Dược học – số – 1983, BYT xuất bản, tr 16 Viện dược liệu (2004), “Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam”, tập I, tập II, Nhà xuất khoa học kỹ thuật Tài liệu tiếng anh 17 Almeida, I.F., et al Màng cellulose vi khuẩn hệ thống phân phối thuốc, 2013 18 Amin MCIM, Ahmad N, et al (2012), “Bacterial cellulose film coating as drug delivery system: physicochemical, thermal and drug release properties”, Sain Malaysiana, 41(5), 561 - 19 Brown E Bacterial cellulose/Themoplastic polymer nanocomposites Master of sience in chemical engineering Washington state university, 2007 20 Dieter klemm, Dieter Schumann, Ulrike Udhardt, Silvia Marsch, Bacterial synthesized cellulose – artificial blood vessels for microsurgery Vol 26, Inssue 9, Progress in polymer science, 2001, p 1561 – 1603 36 21 Jun Yin, Huili Xing, and Jianping Ye, Efficacy of Berberine in Patients with Type Diabetes, May 2009 22 Jun Yin, Jianping Ye, Weiping Jia Effects and mechanisms of Berberine in diabetes treatment, August 2012 23 Lin Huang, Xiuli Chen, Thanh Nguyen Xuan, Huiru Tang, Liming Zhang and Yang Nano- cellulose 3D - networks as controlled- release drug carriers, 2013 24 Lina Fu, Yue Zhang, Chao Li, Zhihong Wu, Qi Zhuo, Xia Huang, Guixing Qui, Ping Zhou and Guang Yang skin tissue repair materials from bacterial cellulose by a multilayer fermantation method, 2012 25 Martindal 34 (2005), volume II, p 1659 26 Pharmacopoeia of the peoples repuplic of China (2005), volume III, p 94 - 96 27 Ryan Bradley, ND, MPH and Bill Walter, ND, Berberine in Diabetes, April 2012 28 Thesis Homles, Bacterial cellulose, Department of Chemical and process Engineering University of Canterbury Christchurch, New Zealand, 2004, p - 65 29 Trovatti E et al (2011), “Biocellulose membranes as supports for dermal release of lidocaine”, Biomacromolecules, 12, 4162 - 4168 30 Trovatti E et al (2012), “Bacterial cellulose membranes applied in topical and transdermal delivery of lidocaine hydrochloride and ibuprofen: in vitro diffusion studies”, Int J Pharm, 435 (1), 83 - 87 Tài liệu trang web 31 http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23182757 32 Cây thuốc quý (2007), Berberin, www thuốc quý Info.vn 33 Wikipedia (2007), berberin, http://en.wikipedia.org 37 ... phóng qua màng BC thuốc BH, định chọn đề tài: Nghiên cứu vận tải phân phối thuốc Berberin màng Bacterial cellulose lên men từ nước vo gạo định hướng sử dụng qua đường uống Mục đích nghiên cứu. .. trình sử dụng Nội dung nghiên cứu Tạo màng BC từ chủng A xylinum Thiết kế hệ thống vận tải phân phối thuốc qua màng BC định hướng sử dụng qua đường uống Xây dựng đồ thị đường chuẩn BH từ xác định. .. nghiên cứu Tạo màng BC từ chủng A xylinum Thiết kế hệ thống vận tải phân phối thuốc qua màng BC định sử dụng qua đường uống để tăng cường giải phóng kéo dài thuốc, tăng hàm lượng thuốc hấp thụ