Header Page of 161 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC  LÝ THỊ LẸ TÁI SINH PHÔI SOMA CÂY MÍT (Artocarpus heterophyllus Lam) Luận Văn Kỹ Sư Chuyên Ngành: Công Nghệ Sinh Học Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 9/2006 Footer Page of 161 Header Page of 161 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC  TÁI SINH PHÔI SOMA CÂY MÍT (Artocarpus heterophyllus Lam) Luận Văn Kỹ Sƣ Chuyên Ngành: Công Nghệ Sinh Học Giáo viên hƣớng dẫn PGS TS TRẦN VĂN MINH Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 9/2006 Footer Page of 161 Sinh viên thực LÝ THỊ LẸ KHÓA: 2002 - 2006 Header Page of 161 MINISTRY OF EDUCATION AND TRAINING NONG LAM UNIVERSITY, HCMC FACULTY OF BIOTECHNOLOGY  REGENERATING THE SOMATIC EMBRYO OF ARTOCARPUS HETEROPHYLLUS LAM GRADUATION THESIS MAJOR: BIOTECHNOLOGY Professor PhD TRAN VAN MINH HCMC, 09/2006 Footer Page of 161 Student LY THI LE TERM: 2002 - 2006 Header Page of 161 Lời cảm ơn Em xin gửi lời cảm ơn đến quý thầy cô môn Công nghệ sinh học trường đại học Nông Lâm, người truyền đạt cho em kiến thức quý báu suốt bốn năm ngồi giảng đường Đại Học tạo nhiều điều kiện học tập cho em Em xin chân thành cảm ơn TS Trần Văn Minh hướng dẫn tạo điều kiện cho em thực tập hoàn thành tốt đề tài tốt nghiệp em biết ơn cô Bùi Thị Tường Thu, Th.s Trần Văn Định, chị Nguyễn Thị Kim Uyên, chị Trương Thị Hảo, toàn thể nhân viên viện bạn thực tập viện Em xin chân thành cảm ơn PGS.TS Trần Thị Dung, trưởng môn Công Nghệ Sinh Học, Đại Học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh giới thiệu em với thầy Trần Văn Minh, để tạo điều kiện cho em hoàn thành năm học đại học Em chân thành cám ơn tất bạn lớp Công Nghệ Sinh Học khoá 28 giúp đỡ em nhiều qua trình học tập thời gian làm đề tài tốt nghiệp Sinh viên thực Lý Thị Lẹ Footer Page of 161 iii Header Page of 161 TÓM TẮT LÝ THỊ LẸ, Đại Học Nông Lâm TP.Hồ Chí Minh Tháng 9/2006 “TÁI SINH PHÔI SOMA CÂY MÍT” Hội đồng hướng dẫn: PGS.TS TRẦN VĂN MINH Đề tài thực phòng thí nghiệm trọng điểm Quốc gia Công nghệ tế bào thực vật phía Nam Viện Sinh học Nhiệt đới Tp Hồ Chí Minh Từ tháng đến tháng 8/2006 Cây mít có nhiều công dụng, có giá trị dinh dưỡng giá trị kinh tế cao, chưa sử dụng tiềm năng, nguồn cung ứng cho xuất hạn chế Với đề tài này, mong muốn tạo nguồn giống mít với số lượng lớn, chất lượng đồng đều, để phục vụ cho nhu cầu sản xuất người Mẫu thí nghiệm:chồi mít PTN Gồm thí nghiệm: - Thí nghiệm 1: Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến phát sinh tế bào soma Mục đích: tìm môi trường thích hợp để nuôi cấy phát sinh tế bào soma - Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng loại mẫu nuôi cấy đến phát sinh tế bào soma Mục đích: nhằm xác định loại mẫu cấy cho tỉ lệ phát sinh tế bào soma tốt - Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến tăng sinh khối tế bào soma Mục đích: tìm môi trường thích hợp làm tăng sinh khối tế bào soma - Thí nghiệm 4: Nuôi cấy tế bào soma môi trường lỏng Mục đích: tìm môi trường lỏng thích hợp cho tăng sinh khối tế bào soma - Thí nghiệm 5: Tái sinh tế bào soma Mục đích: tìm môi trường tốt cho phát sinh chồi - Thí nghiệm 6: Nhân chồi mít Mục đích: tìm môi trường tốt cho nhân chồi mít - Thí nghiệm 7: Nuôi cấy phát sinh rễ Mục đích: xác định môi trường tốt cho phát sinh rễ mít Kết qủa thảo luận:Sử dụng phần mềm MSTATC để tính toán phân tích số liệu Footer Page of 161 iv Header Page of 161 Mục lục Lời cảm ơn iii Tóm tắt iv Mục lục v Danh mục hình ix Danh mục bảng x Danh mục chữ viết tắt xi Chƣơng MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích mục tiêu 1.2.1 Mục đích 1.2.2 Mục tiêu 1.3 Giới hạn đề tài 1.4 Nội dung nghiên cứu Chƣơng TỔNG QUAN 2.1 Giới thiệu chung mít 2.1.1 Phân loại nguồn gốc phân bố 2.1.1.1 Phân loại 2.1.1.2 Nguồn gốc phân bố 2.1.2 Đặc điểm sinh học mít 2.1.2.1 Đặc tính hình thái 2.1.2.2 Khí hậu 2.1.2.3 Đất trồng 2.1.2.4 Đặc điểm sinh trưởng phát triển mít 2.1.2.5 Loài gây hại bệnh tật Footer Page of 161 v Header Page of 161 2.1.3 Đặc điểm lâm học mít 2.1.3.1 Sự trồng trọt 2.1.3.2 Mùa màng 2.1.3.3 Sản lượng 10 2.1.3.4 Thu hoạch dự trữ 10 2.1.4 Ý nghĩa kinh tế giá trị dinh dưỡng 10 2.1.5 Tình hình sản xuất mít Việt Nam giới 13 2.2 Kỹ thuật nuôi cấy mô tế bào thực vật 14 2.2.1 Khái niệm 14 2.2.2 Ứng dụng kỹ thuật nuôi cấy mô 15 2.2.3 Vai trò chất điều hòa sinh trưởng 14 2.2.3.1 Auxin 16 2.2.3.2 Cytokinin 17 2.2.3.3 Gibberellin 18 2.2.4 Nuôi cấy phát sinh phôi soma 19 2.2.4.1 Phôi vô tính 19 2.2.4.2 Ý nghĩa nuôi cấy mô phôi vô tính 19 2.2.4.3 Sự hình thành phôi vô tính 20 2.2.4.4 Cơ chế phát sinh phôi vô tính 20 2.2.4.5 Các loại phôi 21 2.2.4.6 Các kiểu phát sinh phôi soma 16 2.2.5 Những nhân tố ảnh hưởng đến hình thành phôi vô tính 22 2.2.5.1 Mẫu cấy 22 2.2.5.2 Môi trường nuôi cấy 23 2.2.5.3 Nguồn cacbohydrate 23 2.2.5.4 Chất điều hòa tăng trưởng 23 2.2.5.5 Sự tương quan độ tuổi mẫu cấy sucrose 25 2.2.5.6 Nồng độ môi trường 25 2.2.5.7 Trạng thái vật lý môi trường 25 2.2.5.8 Kiểu gene 25 Footer Page of 161 vi Header Page of 161 2.2.5.9 Cường độ ánh sáng 26 2.2.6 Những vấn đề thường gặp trình phát sinh phôi 26 2.3 Nuôi cấy mô mít 27 Chƣơng VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP THÍ NGHIỆM 29 3.1 Vật liệu 29 3.1.1 Mẫu nuôi cấy 29 3.1.2 Thiết bị 29 3.1.3 Hoá chất 29 3.1.4 Điều kiện nuôi cấy 31 3.2 Bố trí thí nghiệm 31 3.2.1 Thí nghiệm 1: Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến phát sinh tế bào soma 31 3.2.2 Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng loại mẫu nuôi cấy đến phát sinh tế bào soma 32 3.2.3 Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến tăng sinh khối tế bào soma 32 3.2.4 Thí nghiệm 4: Nuôi cấy tế bào soma môi trường lỏng 33 3.2.5 Thí nghiệm 5: Tái sinh tế bào soma 34 3.2.6 Thí nghiệm 6: Nhân chồi mít 35 3.2.7 Thí nghiệm 7: Nuôi cấy phát sinh rễ 35 3.3 Phương pháp xử lý số liệu 36 Chƣơng KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 37 4.1 Thí nghiệm 1: Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến phát sinh tế bào soma (sau 15 ngày nuôi cấy) 37 4.2 Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng mẫu nuôi cấy đến phát sinh tế bào soma 40 4.3 Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến Footer Page of 161 vii Header Page of 161 cấy chuyền tế bào (trên agar) 41 4.4 Thí nghiệm 4: Nhân sinh khối tế bào soma môi trường lỏng 43 4.4.1 Thí nghiệm 4-1: Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy lỏng đến tăng sinh khối tế bào soma 43 4.4.2 Thí nghiệm 4-2: Ảnh hưởng mật độ nuôi cấy ban đầu đến khả tăng sinh khối tế bào soma 44 4.5 Thí nghiệm 5: Tái sinh tế bào soma 46 4.6 Thí nghiệm 6: Nhân chồi mít 49 4.7 Nuôi cấy phát sinh rễ 51 Chƣơng KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 55 5.1 Kết luận 55 5.2 Đề nghị 55 Tài liệu tham khảo Footer Page of 161 56 viii Header Page 10 of 161 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 2.1: Lá mít 1,5 tuổi Hình 2.2: Cây mít trưởng thành mang Hình 2.3: Quả mít chín bổ đôi 11 Hình 2.4: Các loại phôi soma 21 Hình 4.1 Tế bào soma mít phát sinh môi trường nuôi cấy (MS+BA(1mg/l)+NAA(5mg/l)+CW(10%)+Đường(30g)) 39 Hình 4.2 Tế bào soma mít tăng sinh khối môi trường nuôi cấy 42 Hình 4.3 Dịch huyền phù tế bào soma môi trường mật độ tế bào nuôi cấy ban đầu khác 45 Hình 4.4: Tái sinh phôi soma mít (sau 15 ngày nuôi cấy) 48 Hình 4.5: Nhân chồi mít nuôi cấy sau 30 ngày môi trường 50 Hình 4.6: Cây mít in vitro rễ tốt môi trường kích thích rễ 53 Hình 4.7: Cây mít rễ in vitro hóa bầu đất 54 Footer Page 10 of 161 ix Header Page 72 of 161 60 Thí nghiệm 2: Ảnh hƣởng mẫu nuôi cấy đến phát sinh tế bào soma TN2:Tỉ lệ tạo tế bào soma Bảng ANOVA ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between Within 9155.556 4577.778 266.667 44.444 103.000 0.0000 Total 9422.222 Coefficient of Variation = 15.00% TRẮC NGHIỆM PHÂN HẠNG Original Order Ranked Order Mean = 60.00 B Mean 2= Mean = 73.33 A Mean = 60.00 B Mean = 0.0000 Mean = 0.0000 C 73.33 A C Least Significant Difference Test LSD value = 13.32 at alpha = 0.050 TN2:Kích thước trung bình Bảng ANOVA ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between Within 230.889 3.333 115.444 207.800 0.0000 0.556 Total 234.222 Coefficient of Variation = 11.37% Footer Page 72 of 161 Header Page 73 of 161 61 TRẮC NGHIỆM PHÂN HẠNG Original Order Ranked Order Mean = 7.333 B Mean 2= Mean = 12.33 A Mean = 7.333 B Mean = 0.0000 C Mean 12.33 A = 0.0000 C Least Significant Difference Test LSD value = 1.490 at alpha = 0.050 Thí nghiệm 3: Ảnh hƣởng môi trƣờng nuôi cấy đến cấy chuyền tế bào soma TN3:Khối lượng sau 30 ngày cấy chuyền (lá) Bảng ANOVA ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between Within 0.248 0.022 0.124 33.651 0.0005 0.004 Total 0.270 Coefficient of Variation = 4.00% TRẮC NGHIỆM PHÂN HẠNG Original Order Ranked Order Mean = 1.720 A Mean = 1.720 A Mean = 1.320 C Mean 3= 1.510 B Mean = 1.510 B Mean 2= 1.320 C Least Significant Difference Test LSD value = 0.1264 Footer Page 73 of 161 at alpha = 0.050 Header Page 74 of 161 62 TN3: Khối lượng sau 30 ngày cấy chuyền (thân) Bảng ANOVA ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between Within 0.295 0.024 0.148 36.320 0.0004 0.004 Total 0.320 Coefficient of Variation = 2.30% TRẮC NGHIỆM PHÂN HẠNG Original Order Ranked Order Mean = 2.980 A Mean = 2.980 A Mean = 2.540 C Mean = 2.810 B Mean = 2.810 B Mean 2= 2.540 C Least Significant Difference Test LSD value = 0.1264 at alpha = 0.050 TN3: Khối lượng trung bình tăng sinh khối(lá) B ảng ANOVA ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between Within 0.179 0.034 0.090 15.664 0.0042 0.006 Total 0.214 Coefficient of Variation = 16.94% Footer Page 74 of 161 Header Page 75 of 161 63 TRẮC NGHIỆM PHÂN HẠNG Original Order Ranked Order Mean = 0.6300 A Mean = 0.6300 A Mean = 0.2900 B Mean = 0.4200 B Mean = 0.4200 B Mean = 0.2900 B Least Significant Difference Test LSD value = 0.1548 at alpha = 0.050 TN3: Khối lượng trung bình tăng sinh khối (thân) Bảng ANOVA ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between Within 0.107 0.024 0.053 13.234 0.0063 0.004 Total 0.131 Coefficient of Variation = 15.57% TRẮC NGHIỆM PHÂN HẠNG Original Order Ranked Order Mean = 0.5400 A Mean = 0.5400 A Mean = 0.2800 B Mean = 0.4000 B Mean = 0.4000 B Mean = 0.2800 B Least Significant Difference Test LSD value = 0.1264 Footer Page 75 of 161 at alpha = 0.050 Header Page 76 of 161 64 Thí nghiệm 4: Nuôi cấy tế bào soma môi trƣờng lỏng TN4: Mật độ tế bào sau 15 ngày nuôi cấy B ảng ANOVA ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between Within 0.178 0.018 0.089 30.298 0.0007 0.003 Total 0.196 Coefficient of Variation = 12.03% TRẮC NGHIỆM PHÂN HẠNG Original Order Ranked Order Mean = 0.3400 B Mean = 0.6500 A Mean = 0.6500 A Mean = 0.3600 B Mean = 0.3600 B Mean = 0.3400 B Least Significant Difference Test LSD value = 0.1094 Footer Page 76 of 161 at alpha = 0.050 Header Page 77 of 161 65 TN4: Ảnh hƣởng mật độ cấy ban đầu đến khả tăng sinh khối tế bào soma TN4: Mật độ trung bình sau 15 ngày nuôi cấy Bảng ANOVA ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between Within 35.102 0.869 17.551 121.125 0.0000 0.145 Total 35.971 Coefficient of Variation = 7.27% TRẮC NGHIỆM PHÂN HẠNG Original Order Ranked Order Mean = 2.957 C Mean = 7.773 A Mean = 4.977 B Mean 2= Mean = 7.773 A Mean = 2.957 Least Significant Difference Test LSD value = 0.7608 Footer Page 77 of 161 at alpha = 0.050 4.977 B C Header Page 78 of 161 66 Thí nghiệm 5: Tái sinh tế bào soma TN5: Số chồi trung bình/cụm Bảng ANOVA ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between Within 64.231 2.545 21.410 67.313 0.0000 0.318 Total 11 66.776 Coefficient of Variation = 8.91% TRẮC NGHIỆM PHÂN HẠNG Original Order Ranked Order Mean = 3.650 C Mean Mean = 7.570 B Mean 2= 7.570 B Mean = 4.640 Mean 3= 4.640 C Mean = 9.460 A Mean = 3.650 C C = 9.460 A Least Significant Difference Test LSD value = 1.062 Footer Page 78 of 161 at alpha = 0.050 Header Page 79 of 161 67 TN5: Chiều cao trung bình chồi Bảng ANOVA ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between Within 93.328 7.305 31.109 34.071 0.0001 0.913 Total 11 100.633 Coefficient of Variation = 13.37% TRẮC NGHIỆM PHÂN HẠNG Original Order Ranked Order Mean = 8.750 A Mean = 10.25 A Mean = 2.820 C Mean = 8.750 A Mean = 10.25 A Mean = 6.780 B Mean = 6.780 B Mean 2= Least Significant Difference Test LSD value = 1.799 Footer Page 79 of 161 at alpha = 0.050 2.820 C Header Page 80 of 161 68 Thí nghiệm 6: Nhân chồi mít TN6: Số chồi trung bình/cây Bảng ANOVA ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between Within 14.249 5.840 7.124 7.320 0.0246 0.973 Total 20.089 Coeffic ient of Variation = 10.37% TRẮC NGHIỆM PHÂN HẠNG Original Order Mean 1= Ranked Order 7.667 B Mean Mean = 9.333 AB Mean Mean = 11.13 A Mean 3= = 9.333 AB = 7.667 B Least Significant Difference Test LSD value = 1.998 Footer Page 80 of 161 11.13 A at alpha = 0.050 Header Page 81 of 161 69 TN6: Chiều cao trung bình Bảng ANOVA ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between Within 47.876 5.083 23.938 28.259 0.0009 0.847 Total 52.959 Coefficient of Variation = 12.60% TRẮC NGHIỆM PHÂN HẠNG Original Order Ranked Order Mean = 10.18 A Mean = 10.18 A Mean = 7.200 B Mean 2= Mean = 4.530 C Mean = 4.530 Least Significant Difference Test LSD value = 1.733 Footer Page 81 of 161 7.200 B at alpha = 0.05 C Header Page 82 of 161 70 Thí nghiệm 7: Nuôi cấy phát sinh rễ TN7: Số rễ/cây Bảng ANOVA ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between Within 275.222 3.057 137.611 270.055 0.0000 0.510 Total 278.280 Coefficient of Variation = 4.28% TRẮC NGHIỆM PHÂN HẠNG Original Order Ranked Order Mean = 23.19 A Mean 1= 23.19 A Mean = 17.15 B Mean 2= 17.15 B Mean = 9.670 C Mean = 9.670 C Least Significant Difference Test LSD value = 1.427 Footer Page 82 of 161 at alpha = 0.050 Header Page 83 of 161 71 TN7: Chiều dài rễ Bảng ANOVA ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between Within 418.667 114.833 209.333 10.938 0.0100 19.139 Total 533.500 Coefficient of Variation = 14.04% TRẮC NGHIỆM PHÂN HẠNG Original Order Ranked Order Mean = 39.17 A Mean = 39.17 A Mean = 31.83 A Mean = 31.83 A Mean = 22.50 B Mean = 22.50 B Least Significant Difference Test LSD value = 8.740 Footer Page 83 of 161 at alpha = 0.050 Header Page 84 of 161 72 TÓM TẮT LÝ THỊ LẸ, Đại học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh.Tháng 9/2006 “TÁI SINH PHÔI SOMA CÂY MÍT” Hội đồng hướng dẫn: PGS.TS TRẦN VĂN MINH CÔ: BÙI THỊ TƯỜNG THU Đề tài thực từ tháng đến tháng 8/2006 phòng thí nghiệm trọng điểm Quốc gia Công nghệ tế bào thực vật phía Nam Viện Sinh học Nhiệt đới TP.Hồ Chí Minh Tiến hành thí nghiệm với mẫu cấy chồi mít khử trùng nuôi cấy phòng thí nghiệm.Gồm thí nghiệm: -Thí nghiệm 1: Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến phát sinh tế bào soma Mục đích: tìm môi trường thích hợp để nuôi cấy phát sinh tế bào soma -Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng loại mẫu nuôi cấy đến phát sinh tế bào soma Mục đích: xác định loại mẫu cấy cho tỉ lệ phát sinh tế bào soma tốt -Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến tăng sinh khối tế bào soma Mục đích: tìm môi trường thích hợp làm tăng sinh khối tế bào soma -Thí nghiệm 4: Nuôi cấy tế bào soma môi trường lỏng Mục đích: tìm môi trường lỏng thích hợp cho tăng sinh khối tế bào soma -Thí nghiệm 5: Tái sinh tế bào soma Mục đích: tìm môi trường tốt cho phát sinh chồi -Thí nghiệm 6: Nhân chồi mít Mục đích: tìm môi trường tốt cho nhân chồi -Thí nghiệm 7: Nuôi cấy phát sinh rễ Mục đích: xác định môi trường tốt cho phát sinh rễ KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN: Sử dụng phần mềm MSTATC để tính toán phân tích số liệu Footer Page 84 of 161 Header Page 85 of 161 73 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM Tp HCM BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC LÝ THỊ LẸ TÁI SINH PHÔI SOMA CÂY MÍT (Artocarpus heterophyllus Lam) Luận văn kỹ sƣ Ngành:công nghệ sinh học Tp Hồ Chí Minh Tháng 9/2006 Footer Page 85 of 161 Header Page 86 of 161 Footer Page 86 of 161 74 ... THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC  TÁI SINH PHÔI SOMA CÂY MÍT (Artocarpus heterophyllus Lam) Luận Văn Kỹ Sƣ Chuyên Ngành: Công Nghệ Sinh Học Giáo viên hƣớng dẫn PGS TS TRẦN... khả tái sinh phôi soma mít 1.2.2 Mục tiêu Xác định môi trường phát sinh cấy chuyền tế bào soma Xác định môi trường lỏng để nuôi cấy dịch huyền phù tế bào soma Xác định môi trường tái sinh phôi. .. MỤC CÁC HÌNH Hình 2.1: Lá mít 1,5 tuổi Hình 2.2: Cây mít trưởng thành mang Hình 2.3: Quả mít chín bổ đôi 11 Hình 2.4: Các loại phôi soma 21 Hình 4.1 Tế bào soma mít phát sinh môi trường nuôi cấy