DNA tích di chuy n d n c i n tr ng di chuy n tùy kích th Phân tách DNA theo kích th c Nguyên lý c, m t ch t n n So sánh v i m t thang kích th c chu n Chu n b DNA ch t n n (gel) n di DNA thang kích th c chu n Ph Phát quang DNA (v i Ethidium Bromide tia c c tím) Phân tích kích th c DNA ng pháp Kích th c n DNA Lo i gel Th i gian n di, n di n di t qu xác n th phân gi i Bán nh l n ch ng Theo c ch t DNA tách r i c a hai m ch DNA g c Các u ki n n thi t nm i gi a Nguyên lý c nh t ng h p m ch DNA m i b i enzyme Phóng im t c hi u lên nhi u l n Chu n b Bi n tính DNA, lai nm i phiên b n / phiên b n Ph ng pháp Nuôi c y / ch n TB phân chia n di PCR Thu ho ch c nh n, l p n Ph Nhi m s c th Có SP/ SP ng pháp nh l Kh o sát toàn b b NST t qu d ng SP cho k thu t khác c hi u nh ng không t ng quát Ph m thích h p, 37 ºC Bình th ng n / thêm n Bi n tính DNA b i nhi t ng h p mc t FISH n ch NH GIEN Nguyên lý Gi i thi u k thu t ch n oán nh di truy n Ph n DNA Ph n ng lai Quan sát, ch p hình phân tích k t qu tín hi u, úng NST t ho c thêm tín hi u t qu Chuy n ch tín hi u n di c hi u nh ng thi u t ng quát Nitrocellulose nh Ph CÁC K THU T DI TRUY N PHÂN T ng pháp n ch NH NHI M S C TH t th ng c u trúc 10 Kb nh b ng nhi t / UV Ph n ng LAI Southern-Blot Ph n ng LAI Nguyên lý i hu nh quang: toàn b NST Ghi tín hi u phóng x Bi n tính DNA DNA ích có / không t qu c DNA ích (so v i chu n) Ph nh l Chuy n t qu d ng ch t phóng x Nh FISH ng pháp Nhu m toàn b m t NST thu t c ng k nh phân gi i th p bán i m ch Bi n tính DNA ng pháp CÁC K THU T DI TRUY N T BÀO Bi n tính DNA Kích th Tách nm i ánh d u hu nh quang Phát hi n làm hi n hình DNA ích Chuy n sang màng c Ph n ng LAI n m i t ng ng v i vùng c n kh o sát, ánh d u hu nh quang t qu n m i ánh d u phóng x Nylon Th t b i Nguyên t c b sung Nguyên lý t gi i h n c d ng cho k thu t khác Nhi u ng ng tính gi / Âm tính gi ng pháp t r i DNA o dòng ng c u trúc Nguyên lý Ch n enzyme t ng s l t th phân gi i : nh nh t Mb n ch Phân tích kích th n DNA c t r i t th Th i gian: 72h - tu n n ch nh ng Ch p hình phân tích t qu ng SP Gi i trình t t DNA m ch kép t i v trí xác c tr nh lý b ng dài SP phiên b n / pb / 3pb Thêm n ch ng t th n n ng c u trúc nh n ch Microarray nh ng t n p n Giá thành cao h n FISH n m i: spots DNA b nh nhân ch ng: xanh Nguyên lý Ph n ng lai DNA b nh nhân ch ng microarray So sánh c ng Ph n ng lai R a C Phân tích c ng ng ng Ph n NST ng pháp CGH array nh Scan Gi m: M t n ng c u trúc : thêm n, nhân t th n, ng s l t th n, m t n ng c u trúc d ng chuy n o n n ch DNA polymerase t ng h p DNA Nguyên lý c khác c trình t chu i DNA màu hu nh quang thay th cho ánh d u phóng x Gi i trình t ng h p DNA v i nucleotide th ng lo i dideoxynucleotide A, T, G, C hu nh quang n di Ph DNA ng pháp c tín hi u hu nh quang trình t chu i DNA Trình t chu i DNA xác c c t qu n DNA ng n 500 - 650 pb n ch u n di truy n: Allelle cha m : khác methyl hóa Bisulfite bi n C thành U u methyl hóa: không tác d ng Có SP = methyl hóa Không SP = không methyl hóa nh l l ng allelle methyl hóa bình th Nguyên lý PCR phóng ng ho c bán i nh l ng (1) hay b t th Chuy n n DNA Phân tích d u n di truy n ng SP ng (0 ho c 2) n n ng c u trúc nh Giá thành r t cao ng ng ph n ng dideoxynucleotide lo i dideoxynucleotide A, T, G, C n di, t qu n ch t qu ng Giá thành cao Nhi u s n ph m - kích th Nh FISH i NST : m t màu hu nh quang quang ph Thêm Tín hi u DNA b nh nhân t th t th Ph ng pháp màu s c tín hi u n, nhân i hu nh quang: toàn b NST Bi n tính DNA DNA b nh nhân DNA ch ng nhu m hu nh quang ng: thêm Ph n ng LAI Nguyên lý tín hi u BN ch ng Chu n b microarray t vùng c n kh o sát c Ch s tâm u trúc b ng Tinh s ch DD Kích th Nh n bi t, s p x p toàn b NST, theo p l i 20 - 35 l n o dòng ng Nguyên lý n m i, t ng h p Ki m tra s n ph m / Thêm c tr lý b ng n DNA t qu Gioi thieu cac ky thuat chan doan di truyen.mmap - 12/17/2010 - Mindjet t n p n