Së GD - §T Th¸i Nguyªn Së GD - §T Th¸i Nguyªn Tr­êng THPT B¾c S¬n Tr­êng THPT B¾c S¬n Bµi 27: Bµi 27: Thùc hµnh Thùc hµnh Mét sè thÝ nghiÖm vÒ enzim Mét sè thÝ nghiÖm vÒ enzim GV: Ng« V¨n D­¬ng GV: Ng« V¨n D­¬ng B¾c S¬n, ngµy 20 th¸ng 03 n¨m 2008 B¾c S¬n, ngµy 20 th¸ng 03 n¨m 2008 I. Mục tiêu: I. Mục tiêu: - Học sinh làm được thí nghiệm về ảnh hưởng của nhiệt - Học sinh làm được thí nghiệm về ảnh hưởng của nhiệt độ, độ pH đối với enzim và thí nghiệm về tính đặc hiệu của độ, độ pH đối với enzim và thí nghiệm về tính đặc hiệu của enzim, trên cơ sở đó củng cố kiến thức về enzim. enzim, trên cơ sở đó củng cố kiến thức về enzim. - Rèn luyện kỹ năng làm thí nghiệm, tư duy sáng tạo cho - Rèn luyện kỹ năng làm thí nghiệm, tư duy sáng tạo cho học sinh. học sinh. Chia lớp thành 6 nhóm. Chia lớp thành 6 nhóm. Chuẩn bị đầy đủ dụng cụ, mẫu vật, hoá chất cho 6 nhóm. Chuẩn bị đầy đủ dụng cụ, mẫu vật, hoá chất cho 6 nhóm. Với thí nghiệm 2 liên quan đến thuốc thử và tương đối Với thí nghiệm 2 liên quan đến thuốc thử và tương đối khó giáo viên cần chuẩn bị từ trước. khó giáo viên cần chuẩn bị từ trước. Giáo viên cần làm trước thí nghiệm để làm thí nghiệm Giáo viên cần làm trước thí nghiệm để làm thí nghiệm đối chứng cho học sinh. đối chứng cho học sinh. II. Chuẩn bị: II. Chuẩn bị: 1. Nguyên liệu và hoá chất: 1. Nguyên liệu và hoá chất: Dung dịch iôt 0,3%, axit HCl 5%, nước bọt pha loãng 2 Dung dịch iôt 0,3%, axit HCl 5%, nước bọt pha loãng 2 3 lần. 3 lần. Dung dịch saccaraza nấm men, dung dịch tinh bột 1%, Dung dịch saccaraza nấm men, dung dịch tinh bột 1%, saccarôzơ 4%, thuốc thử lugol, thuốc thử phêlinh. saccarôzơ 4%, thuốc thử lugol, thuốc thử phêlinh. 2. Dụng cụ: 2. Dụng cụ: ố ố ng nghiệm, đèn cồn, lọ đựng hoá chất, tủ ấm hoặc nước ng nghiệm, đèn cồn, lọ đựng hoá chất, tủ ấm hoặc nước nóng, máy ly tâm ( phễu lọc ), giấy lọc và các dụng cụ khác. nóng, máy ly tâm ( phễu lọc ), giấy lọc và các dụng cụ khác. III. Cách tiến hành: III. Cách tiến hành: 1. Thí nghiệm về ảnh hưởng của nhiệt độ, pH đối với hoạt 1. Thí nghiệm về ảnh hưởng của nhiệt độ, pH đối với hoạt tính của enzim amilaza. tính của enzim amilaza. Bước 1 Bước 1 : Lấy 4 ống nghiệm, cho vào mỗi ống 2ml dung : Lấy 4 ống nghiệm, cho vào mỗi ống 2ml dung dịch tinh bột 1%. dịch tinh bột 1%. - Đặt ống 1 vào nồi cách thuỷ đang sôi. Đặt ống 1 vào nồi cách thuỷ đang sôi. - Đặt ống 2 vào cốc nước ấm 40 độ. Đặt ống 2 vào cốc nước ấm 40 độ. - Đặt ống 3 vào nước đá. Đặt ống 3 vào nước đá. - Cho vào ống 4, 1ml dung dịch HCl 1% Cho vào ống 4, 1ml dung dịch HCl 1% Bước 2 Bước 2 : Sau 5 phút cho vào mỗi ống nghiệm 1 ml dung : Sau 5 phút cho vào mỗi ống nghiệm 1 ml dung dịch amilaza pha loãng, để khoảng 15 phút. dịch amilaza pha loãng, để khoảng 15 phút. Bước 3 Bước 3 : Dùng dung dịch iốt 0,3% để xác định mức độ thuỷ : Dùng dung dịch iốt 0,3% để xác định mức độ thuỷ phân tinh bột ở 4 ống. phân tinh bột ở 4 ống. 2. Thí nghiệm về tính đặc hiệu của enzim: 2. Thí nghiệm về tính đặc hiệu của enzim: Bước 1 Bước 1 : Lấy 4 ống nghiệm. : Lấy 4 ống nghiệm. - Cho vào ống 1và 2 mỗi ống 1ml dung dịch tinh bột 1%. Cho vào ống 1và 2 mỗi ống 1ml dung dịch tinh bột 1%. - Cho vào ống 3 và 4 mỗi ống 1ml dung dịch saccarozo 4%. Cho vào ống 3 và 4 mỗi ống 1ml dung dịch saccarozo 4%. - Cho vào ống 1và 3 mỗi ống 1ml nước bọt pha loãng Cho vào ống 1và 3 mỗi ống 1ml nước bọt pha loãng - Cho vào ống 2 và 4 mỗi ống 1ml dung dịch saccaraza nâm Cho vào ống 2 và 4 mỗi ống 1ml dung dịch saccaraza nâm men men Bước 2 Bước 2 : Đặt cả 4 ống nghiệm trong nước ấm 40 độ trong : Đặt cả 4 ống nghiệm trong nước ấm 40 độ trong 15 phút. Sau đó nhấc ra. 15 phút. Sau đó nhấc ra. - Cho vào ống 1và 3 mỗi ống 3 giọt thuốc thử lugol. Cho vào ống 1và 3 mỗi ống 3 giọt thuốc thử lugol. - Cho vào ống 2 và 4 mỗi ống1ml thuốc thử phêlinh. Cho vào ống 2 và 4 mỗi ống1ml thuốc thử phêlinh. Sau đó đun trên đén cồn đến khi sôi. Sau đó đun trên đén cồn đến khi sôi. Bước 3 Bước 3 : Quan sát màu sắc các ống nghiệm và giải thích. : Quan sát màu sắc các ống nghiệm và giải thích. IV. Thu hoạch: IV. Thu hoạch: Điền kết quả vào bảng và giải thích: Điền kết quả vào bảng và giải thích: 1. Thí nghiệm 1: ảnh hưởng của nhiệt độ, độ pH đến hoạt 1. Thí nghiệm 1: ảnh hưởng của nhiệt độ, độ pH đến hoạt tính của enzim. tính của enzim. ống 1 ống 1 ống 2 ống 2 ống 3 ống 3 ống 4 ống 4 Điều kiện Điều kiện thí nghiệm thí nghiệm Nồi cách Nồi cách thuỷ đang thuỷ đang sôi, amilaza sôi, amilaza Cốc nước Cốc nước ấm 40 độ. ấm 40 độ. amilaza amilaza Nước đá. Nước đá. Amilaza Amilaza Dung dịch Dung dịch HCl. HCl. Amilaza Amilaza Kết quả Kết quả ( màu ) ( màu ) Giải thích Giải thích 1. ThÝ nghiÖm 2: ThÝ nghiÖm vÒ tÝnh ®Æc hiÖu cña enzim. 1. ThÝ nghiÖm 2: ThÝ nghiÖm vÒ tÝnh ®Æc hiÖu cña enzim. èng 1 èng 1 èng 2 èng 2 èng 3 èng 3 èng 4 èng 4 C¬ chÊt C¬ chÊt Enzim Enzim Thuèc thö Thuèc thö KÕt qu¶ KÕt qu¶ Mµu Mµu Quan sát và giải thích: Quan sát và giải thích: ống 1 ống 1 ống 2 ống 2 ống 3 ống 3 ống 4 ống 4 Điều kiện Điều kiện thí nghiệm thí nghiệm Nồi cách Nồi cách thuỷ đang thuỷ đang sôi, amilaza sôi, amilaza Cốc nước Cốc nước ấm 40 độ. ấm 40 độ. amilaza amilaza Nước đá. Nước đá. Amilaza Amilaza Dung dịch Dung dịch HCl. HCl. Amilaza Amilaza Kết quả Kết quả ( màu ) ( màu ) Giải thích Giải thích Màu xanh Màu xanh Không màu Không màu Màu xanh Màu xanh Màu xanh Màu xanh Enzim bị biến Enzim bị biến tính bởi nhịêt tính bởi nhịêt độ nên không độ nên không có khả năng có khả năng xúc tác phân xúc tác phân giải tinh bột vì giải tinh bột vì vậy tinh bột vậy tinh bột tác dụng với tác dụng với iốt tạo màu iốt tạo màu xanh xanh Tinh bột đã bị Tinh bột đã bị enzim amilaza enzim amilaza phân giải hết phân giải hết nên khi cho nên khi cho thuốc thử iốt thuốc thử iốt vào không vào không thấy có màu thấy có màu xanh xanh Enzim bị biến Enzim bị biến tính bởi nhịêt tính bởi nhịêt độ nên tinh độ nên tinh bột không bị bột không bị phân giải phân giải thành đường thành đường đã tác dụng đã tác dụng với iốt tạo màu với iốt tạo màu xanh xanh Enzim bị biến Enzim bị biến tính bởi axit tính bởi axit nên tinh bột nên tinh bột không bị phân không bị phân giải thình đư giải thình đư ờng đã tác ờng đã tác dụng với iốt dụng với iốt tạo màu xanh tạo màu xanh Quan s¸t vµ gi¶i thÝch: Quan s¸t vµ gi¶i thÝch: èng 1 èng 1 èng 2 èng 2 èng 3 èng 3 èng 4 èng 4 C¬ chÊt C¬ chÊt Enzim Enzim Thuèc thö Thuèc thö KÕt qu¶ KÕt qu¶ Mµu Mµu Tinh bét Tinh bét Tinh bét Tinh bét Saccarozo Saccarozo Saccarozo Saccarozo Saccaraza Saccaraza Saccaraza Saccaraza Amilaza Amilaza Amilaza Amilaza Lugol Lugol Lugol Lugol Phªlinh Phªlinh Phªlinh Phªlinh Kh«ng Kh«ng mµu mµu Kh«ng Kh«ng mµu mµu Cã mµu Cã mµu Cã mµu Cã mµu . Nguyªn Së GD - §T Th¸i Nguyªn Tr­êng THPT B¾c S¬n Tr­êng THPT B¾c S¬n Bµi 27: Bµi 27: Thùc hµnh Thùc hµnh Mét sè thÝ nghiÖm vÒ enzim Mét sè thÝ nghiÖm vÒ