Xác định hàm lượng vitamin C trong nấm bằng phương pháp sắc kí lỏng hiệu năng cao

49 11 0
  • Loading ...
1/49 trang

Thông tin tài liệu

Ngày đăng: 26/11/2016, 16:01

1. Lí do chọn đề tàiTheo quan điểm năm giới (Whittaker), cùng với động vật, thực vật, sinh vật nhân nguyên thuỷ (vi khuẩn, tảo lam...), nấm tạo thành một giới riêng biệt trên hành tinh chúng ta và giới nấm ngày càng có ý nghĩa to lớn trong nền kinh tế quốc dân, trong khoa học cũng như trong vòng tuần hoàn vật chất.Nấm là sinh vật không thể thiếu trong đời sống, không có nấm chu trình tuần hoàn vật chất sẽ bị mất một mắt xích quan trọng trong việc phân hủy chất bã hữu cơ. Nấm còn đem lại nguồn thực phẩm giàu đạm, đầy đủ các acid amin thiết yếu, hàm lượng chất béo ít và là những acid béo chưa bão hòa, do đó tốt cho sức khỏe, giá trị năng lượng cao, giàu khoáng chất và các vitamin. Ngoài giá trị cung cấp các chất dinh duỡng cần thiết cho cơ thể, trong nấm còn chứa nhiều hoạt chất có tính sinh học, góp phần ngăn ngừa và điều trị bệnh cho con người, phòng chống u bướu.Hiện nay các nhà khoa học đang nghiên cứu và phát hiện ra trong thành phần của nấm có những hoạt chất có dược tính rất mạnh với các căn bệnh nan y hiện nay như viêm gan, ung thư, HIV... Nhiều loài nấm là nguồn nguyên liệu để điều chế các hoạt chất điều trị bệnh. Trong số đó có một số loài đã được biết rõ về thành phần và dược tính, một số loài còn lại thành phần này vẫn chưa được công bố chính thức, đặc biệt là thành phần vitamin. Vitamin là một nhóm các vi chất dinh dưỡng cần thiết không sinh năng lượng, cơ thể con người chỉ cần chúng với một lượng rất nhỏ nhưng chúng lại đóng vai trò không thể thiếu đối với sự phát triển bình thường của cơ thể. Do đó, việc xác định thành phần và hàm lượng các loại vitamin cũng như các hợp chất khác có trong Nấm để phát hiện được những hoạt tính của nó là điều rất quan trọng. Vì vậy, trong đồ án này tôi lựa chọn đề tài: “Xác định hàm lượng vitamin C trong nấm bằng phương pháp sắc kí lỏng hiệu năng cao ”. TRNG KHOA === === đồ án tốt nghiệp Đề tài: XC NH HM LNG VITAMIN C TRONG NM BNG PHNG PHP SC K LNG HIU NNG CAO GV hớng dẫn : Ths hoàng văn trung SV thực : nguyễn thị Lớp : Mã số SV : ỏn tt nghip Thit k nh mỏy bia nng sut 25 triu lớt/nm VINH - 12/2012 GVHD: PGS TS Tụn Tht Minh SVTH: Nguyn Th Thỳy LI CM N Khúa lun c thc hin ti phũng thớ nghim Trung tõm Kim nh An ton Thc phm v Mụi trng, Trng i hc Vinh Vi lũng kớnh trng v bit n sõu sc, chỳng tụi xin chõn thnh cm n n thy giỏo ThS Hong Vn Trung - Khoa Húa, Trng i hc Vinh ó giao ti, tn tỡnh hng dn, to mi iu kin thun li sut quỏ trỡnh nghiờn cu v hon thnh khúa lun Chỳng tụi xin chõn thnh cm n ThS Chu Th Thanh Lõm - Khoa Húa, Trng i hc Vinh ó to iu kin thun li v giỳp chỳng tụi quỏ trỡnh lm thớ nghim, hng dn cỏch s dng mỏy HPLC o mu Nhõn dp ny, chỳng tụi cng xin gi li cm n n cỏc thy cụ, cỏc cỏn b khoa Hoỏ, trng i hc Vinh ó to iu kin cho chỳng tụi c hc v nghiờn cu mt mụi trng hc khoa hc, giỳp cho chỳng tụi cú nhng kin thc vng vng trc bc vo i Cui cựng chỳng tụi xin t lũng bit n sõu sc ti gia ỡnh, bn bố ó ng viờn ó giỳp chỳng tụi hon thnh khúa lun ny Vinh, ngy thỏng nm 2012 Sinh viờn thc hin Nguyn Th Thanh Hng MC LC Trang LI M U PHN I: TNG QUAN I Tng quan v nm II Tng quan v vitamin 15 Vitamin l mt nhúm cỏc hp cht hu c cú phõn t bộ, cú cu to hoỏ hc rt khỏc cú cỏc tớnh cht hoỏ hc cng nh lý hc rt khỏc nhau, nhng chỳng u ging ch l rt cn cho hot ng sng bỡnh thng ca bt k c th no .15 Na cui th k XIX Rubner, Pettencopher ó a quan im tng ng nng lng Theo quan im ny thỡ ngi v gia sỳc ch cn nhúm cht gm protit, lipid, gluxit, mui khoỏng v nc khu phn n l cú th m bo cho c th phỏt trin bỡnh thng .15 Nhng vo th k XVI-XVIII, th k ca nhng phỏt hin mi v vt lớ v hng hi, ngi ta thy rng cỏc thy th i tu lõu ngy n lng khụ v khu phn n quỏ n iu thiu hoa qu v rau ti ó dn n mc bnh beri-beri Biu hin l viờm thn kinh, sng phự, xut huyt chõn rng, m mt Nhõn dõn mt s vựng n , Nht Bn, Trung Quc ó bit bnh ny n go xỏt quỏ k Mt s nghiờn cu sau ú chng minh nguyờn nhõn ny 15 Nm 1912 nh bỏc hc Ba Lan Funk ó phõn lp t cỏm mt cht cú tỏc dng cha bnh beriberi v t tờn l vitamin Sau Funk, danh t vitamin tr nờn ph bin rng rói 15 Do tm quan trng ca vitamin i vi s sng nờn nhiu nh bỏc hc i sõu nghiờn cu v mt húa hc, sinh hc, dc lý hc, cỏc biu hin lõm sng v cỏch phũng cha bnh thiu vitamin Hn 30 loi vitamin ó c phỏt hin, ú 20 cht ó xỏc nh c cu to húa hc 15 III Tng quan v cỏc phng phỏp xỏc nh vitamin C 19 3.1 Phng phỏp chun iot 19 3.2 Phng phỏp chun bng 2,6 -Diclorophenolindophenol (DPIP) (phng phỏp Tillman) 20 3.3 Phng phỏp HPLC 20 PHN II: THC NGHIM 33 PHN 3: KT QU V THO LUN 35 III Sc 41 KT LUN .46 TI LIU THAM KHO .48 ỏn tt nghip LI M U Lớ chn ti Theo quan im nm gii (Whittaker), cựng vi ng vt, thc vt, sinh vt nhõn nguyờn thu (vi khun, to lam ), nm to thnh mt gii riờng bit trờn hnh tinh chỳng ta v gii nm ngy cng cú ý ngha to ln nn kinh t quc dõn, khoa hc cng nh vũng tun hon vt cht Nm l sinh vt khụng th thiu i sng, khụng cú nm chu trỡnh tun hon vt cht s b mt mt mt xớch quan trng vic phõn hy cht bó hu c Nm cũn em li ngun thc phm giu m, y cỏc acid amin thit yu, hm lng cht bộo ớt v l nhng acid bộo cha bóo hũa, ú tt cho sc khe, giỏ tr nng lng cao, giu khoỏng cht v cỏc vitamin Ngoi giỏ tr cung cp cỏc cht dinh dung cn thit cho c th, nm cũn cha nhiu hot cht cú tớnh sinh hc, gúp phn ngn nga v iu tr bnh cho ngi, phũng chng u bu Hin cỏc nh khoa hc ang nghiờn cu v phỏt hin thnh phn ca nm cú nhng hot cht cú dc tớnh rt mnh vi cỏc cn bnh nan y hin nh viờm gan, ung th, HIV Nhiu loi nm l ngun nguyờn liu iu ch cỏc hot cht iu tr bnh Trong s ú cú mt s loi ó c bit rừ v thnh phn v dc tớnh, mt s loi cũn li thnh phn ny cha c cụng b chớnh thc, c bit l thnh phn vitamin Vitamin l mt nhúm cỏc vi cht dinh dng cn thit khụng sinh nng lng, c th ngi ch cn chỳng vi mt lng rt nh nhng chỳng li úng vai trũ khụng th thiu i vi s phỏt trin bỡnh thng ca c th Do ú, vic xỏc nh thnh phn v hm lng cỏc loi vitamin cng nh cỏc hp cht khỏc cú Nm phỏt hin c nhng hot tớnh ca nú l iu rt quan trng Vỡ vy, ỏn ny tụi la chn ti: Xỏc nh hm lng vitamin C nm bng phng phỏp sc kớ lng hiu nng cao Nhim v nghiờn cu Trong khúa lun ny, tụi cú cỏc nhim v sau: - Tng quan v Nm, hm lng mt s loi vitamin Nm SVTH: Nguyn Th Thanh Hng ỏn tt nghip - Nghiờn cu cỏc tớnh cht vt lý, húa hc v cỏc phng phỏp xỏc nh cỏc loi vitamin - Tỏch vitamin cỏc mu nm - nh lng mt s loi vitamin bng phng phỏp HPLC - Kim tra, ỏnh giỏ phng phỏp v cỏc iu kin phõn tớch vi quỏ trỡnh thc hin v kt qu thu c - Kt qu thc nghim Tụi hy vng rng ỏn s gúp phn b sung, hon thin cỏc phng phỏp phõn tớch, xỏc nh mt s loi vitamin nhiu i tng khỏc nh mt s rau qu cú bỏn trờn th trng hin i tng nghiờn cu Mu nm c thu thp t cỏc rng thuc Bc Trung B nh rng Pự Mỏt Ngh An Mi mu c ly 50g, ng vo tỳi nilụng sch Bao gm cỏc h nm: - Coriolaceae - Ganodermataceae - Lentinaceae SVTH: Nguyn Th Thanh Hng ỏn tt nghip PHN I: TNG QUAN I Tng quan v nm 1.1 Gii thiu v gii nm Nm l mt gii riờng bit rt ln vi khong 1,5 triu loi (ch ng sau cụn trựng: 10 triu loi v s lng loi), ú ó mụ t c 69.000 loi (theo Hawksworth,1991), sng khp ni trờn Trỏi t, bao gm nm men, nm mc v cỏc loi nm ln S d nm c xp vo gii riờng m khụng c xp vo gii thc vt hay ng vt vỡ nm cú nhiu im khỏc thc vt nh: - Khụng cú lc lp, khụng cú sc t quang hp nờn khụng th t tng hp cỏc cht hu c cho c th t cỏc c th khỏc nh thc vt, ng vt - Khụng cú s phõn hoỏ c quan thnh thõn, r, lỏ, hoa - Phn ln khụng cú cha cenllulose vỏch t bo, m ch yu l bng chitin v glucan Chitin l cht gp nhiu ng vt hn thc vt, ch yu nhúm giỏp xỏc v cụn trựng, to thnh lp v hoc cỏnh cng cho cỏc loi ny - Nm d tr ng di dng glycogen thay vỡ tinh bt nh thc vt - Nm cng khụng cú mt chu trỡnh phỏt trin chung nh cỏc loi thc vt Nm cng khụng c xp vo gii ng vt vỡ: - Nm sinh sn ch yu bng bo t (hu tớnh hay vụ tớnh) ging ht phn ca thc vt - S sinh dng ca nm liờn quan n h si nm Nm ly cỏc cht dinh dng thụng qua mng t bo ca si nm (tng t nh c ch r thc vt) 1.2 Phõn loi nm Gii Nm c chia lm gii ph: - Gii ph Nm nhy - Gymnomycetoida - Gii ph Nm to - Phycomycetoida - Gii ph estomycetoida - Gii ph Nm tht - Eumycetoida 1.3 Tng quan v vitamin nm Nm cha cỏc vitamin nhúm B nh B1, B2, B3, B7, B12, vitamin D, K, tocoferol v acid ascorbic (vitaminC) Ngay c beta-carotene, khụng thng gp nm núi SVTH: Nguyn Th Thanh Hng ỏn tt nghip chung, nhng cú mt s loi nm Nng Vitamin D2 cỏc loi nm Maitake, ụng Cụ v vi loi nm cha bnh khỏc ó c xỏc nh bng phng phỏp sc ký HPLC v cho thy khong 10-150 IU 100gram th qu nm ti Ergosterol, mt tin sinh t D, chuyn thnh Vitamin D di tỏc dng ca ỏnh sỏng mt tri, chim khong 70% tng s phn sterol nhiu nm v khong 55-65% dng t Nm ụng Cụ cha khong 0.5% ergosterol (tớnh theo trng lng khụ) v cú kh nng chuyn thnh 400 IU vitamin D di ốn hunh quang (Journal of Food Products No 53-1990) Nm l loi thc phm thc vt nht cha vitamin B 12 (B12 thng ch cú thc phm ng vt, ú ngi n chay thng b thiu B 12) Ch cn 3g nm l cung cp nhu cu B12 khuyn cỏo hng ngy Nhng ngi n chay trng nờn s dng thng xuyờn thc phm ny 100g nm ti cung cp hn 1/4 nhu cu vitamin B hng ngy ngi trng thnh c bit nm cha rt nhiu cht dinh dng thit yu nh st, phosphorus, magnesium, potassium (kali), selenium m cỏc thc n ch bin cụng nghip thng thiu Hn na, nm cha ớt cht bộo li khụng cú cholesterol, lng natri thp, nhiu cht x, rt cú li cho sc khe 1.3.1 Nm n Gm cỏc loi Mc nh thuc chi Auricularia, Ngõn nh - Tremella, Nm hng Lentinula edodes, Nm rm - Volvariella volvacea, Nm thụng - Boletus edulis, Nm bo ng hay cũn gi l Nm sũ - Pleurotus Nm n l thc phm ph bin giu cht dinh dng, gm tt c cỏc khoỏng cht cn thit, cỏc vitamin nhúm B, axit ascorbic (vitamin C), cha hm lng ln vitamin A v D Vitamin D cú Nm cn thit cho s hp th Canxi Cỏc vitamin C, B v B12 tỡm thy Nm cú tỏc dng thỳc y h thng dch, giỳp loi b cỏc c t c th SVTH: Nguyn Th Thanh Hng ỏn tt nghip Bng 1.1: Thnh phn cỏc nguyờn t vi lng cú Nm n Type of Nutrient Vitamins Minerals Nutrient Niacin (Vitamin B3) Pantothenic Acid (Vitamin B5) Pyridoxine (Vitamin B6) Riboflavin (Vitamin B2) Thiamin (Vitamin B1) Folate (Vitamin B9) Copper Selenium Potassium Phosphorus Iron Zinc Magnesium Amount per Serving 3,6 mg 1,5 mg 0,1 mg 0,4 mg 0,1 mg 16 àg 0,3 mg 9,3 àg 318 mg 86 mg 0,5 mg 0,5 mg mg %Daily Value 18 % 15 % 5% 24 % 5% 4% 16 % 13 % 9% 9% 3% 3% 2% Trong nm n cũn cú cha cỏc nguyờn t vi lng nh: Fe, Zn, Se, Na, Zn, Ca, K v P - ng (Cu): giỳp c th hp th oxy v to cỏc t bo mỏu - Selen (Se): cht chng oxy hoỏ giỳp trung ho cỏc gc t do, ú ngn nga tn thng t bo v gim nguy c ung th cựng cỏc bnh lý khỏc Nm l loi thc phm cha nhiu Selen nht - Kali (K): cú vai trũ vụ cựng quan trng iu chnh huyt ỏp v gi cho cỏc t bo hot ng ỳng nhp - Polisaccarit cacbohydrat: giỳp tng cng h thng dch Nm n cha ớt hm lng cht bộo, cacbohidrat v khụng cú cholesteron Hu ht cỏc Nm cú hm lng protein cao, thng l khong 20 - 30 % tớnh theo trng lng khụ Khụng ch cú cụng dng lm mún n m cỏc loi Nm nhúm Nm n cng cha cỏc thnh phn cú tỏc dng cha bnh Chớnh vỡ th nờn cng cú th a chỳng vo nhúm Nm dc liu 1.3.2 Nm dc liu 1.3.2.1 Nm Linh Chi Nm Linh Chi thuc h Ganoderma cú tờn ting Nht l Reishi, ngi Trung SVTH: Nguyn Th Thanh Hng ỏn tt nghip Quc gi loi Nm ny l Lingzhi Nú cũn cú tờn gi khỏc l Nm tiờn tho, Nm trng th hay niờn nhung, ó c nhc n nh mt cõy Nm linh Trong t nhiờn Nm phỏt trin nh l mt ký sinh trựng trờn cõy, ch yu l trờn cõy g si, cỏc lỏ ca loi cõy ny rng l iu kin tt cho s phỏt trin ca Nm linh chi Nm Linh Chi l loi Nm u tiờn c phỏt hin v chng minh l cú c tớnh cha bnh v tt cho sc kho Trờn ton th gii mt s ngnh nghiờn cu dc tho mc (ch yu l tin hnh ti Trung Quc, Hn Quc, Nht Bn v Hoa K) vo cỏc giỏ tr y hc v dinh dng ca Linh Chi ó tit l rng nú thc s cha cỏc thnh phn cú hot tớnh sinh hc (chng hn l cỏc triterpenes v polysaccharides) cú th cú li cho vic phũng chng v iu tr nhiu bnh Nm Linh Chi cú thnh phn khoỏng t vi lng loi, nhng nguyờn t ny tham gia vo quỏ trỡnh sinh hoỏ, trao i cht c th, rt tt cho chc nng thn kinh v cỏc tuyn thng thn Chng hn, germanium cỏc dc phm t Nm linh chi cú tỏc dng iu tr tim mch v ung th Gm cú loi Nm Linh Chi: Nm Linh Chi , Nm Hc Chi, Nm Bch Chi, Nm Hong Chi, v cũn c Nm T Chi (cú mu tớm), Nm Thanh Chi (cú mu xanh da tri) Hỡnh 1.1: Nm Linh Chi (cú mu ) SVTH: Nguyn Th Thanh Hng Hỡnh 1.2: Nm Hc Chi (cú mu en) 10 ỏn tt nghip PHN 3: KT QU V THO LUN I Xỏc nh khong tuyn tớnh v ng chun ca Vitamin C Dóy chun vitamin C c kho sỏt cú cỏc nng nh sau:1ppm; 10ppm; 50 ppm; 100ppm Phõn tớch cỏc chun núi trờn v xỏc nh phng trỡnh hi quy tuyn tớnh da vo din tớch cỏc pic Bng 3.1: Din tớch peak ca vitamin C tng ng vi tng nng chun Nng Din tớch pớc m Ln Ln Ln 10 211.12683 210.73795 210.93239 50 1024.89636 1023.99685 1025.79587 100 1949.97156 1950.70934 1950.34045 b R2 Phng trỡnh hi qui ca ng chun theo din tớch peak cú dng: y = 19.57309x +10.97903 ú: x l nng , y l din tớch pic H s hi quy tuyn tớnh l: R2 = 0,99968 Hỡnh 3.1 ng chun biu th mi quan h gia din tớch pic thu c v nng cỏc chun vitamin Giỏ tr LOD v LOQ ca phng phỏp qua ln o cỏc nng khỏc 1ppm, 5ppm, 10ppm, 100ppm ta c kt qu bng sau: Bng 3.2 Giỏ tr LOD v LOQ SVTH: Nguyn Th Thanh Hng 35 ỏn tt nghip Giỏ tr Chun vitamin C(ppm) LOD 0.076 LOQ 0.253 Vi: 3*Sy LOD = LOQ = m 10*LOD LOQ = m: h s gúc ca phng trỡnh hi quy lch chun Sy: (Xi Xtb)2 Sy = n-1 Xi Xtb = n Qua bng s liu ta thy phng phỏp cú khong gii hn phỏt hin v khong nh lng rt nh chng t thit b cú nhy cao, cú th phỏt hin c hm lng vitamin C di dng vt cú mu phõn tớch T giỏ tr din tớch peak o c ta tớnh c hm lng vitamin C (C0 ppm) Sau ú ta tớnh hm lng Vitamin C (mg/100g) cú mu nm theo cụng thc sau: X = C0 ì V 100 ì (mg / 100 g ) m 1000 Trong ú: V: Th tớch dch cui (ml) X: Hm lng acid ascorbic mu th (mg/100g, mg/100ml) C0: Nng vitamin C dung dch mu bm mỏy (àg/ml) m: Khi lng ca mu phõn tớch (g) SVTH: Nguyn Th Thanh Hng 36 ỏn tt nghip Bng 3.3 Kt qu phõn tớch hm lng vitamin C nm Mu C0(ppm) ụng Cụ 163.24395 Linh Chi Khi lng Din tớch pic C(mg/100g) 10 3206.16821 40.811 115.67676 10 2275.13110 28.92 Bch Tuyt 84.60059 10 1666.87439 21.15 Bo Ng 68.01154 10 1342.17529 17.003 650 3.24190 74.43304 4.0524 660 3.11146 71.87991 3.89 661 12.38663 253.42366 15.483 662 9.85456 203.86325 12.32 mu (g) II ỏnh giỏ phng phỏp Xỏc nh lp li ca phng phỏp Theo lý thuyt thng kờ, cỏc i lng c trng cho lp li l lch chun SD v h s bin thiờn CV% (RSD) Thc hin phõn tớch 10g i vi cỏc mu nm ti, 2g i vi cỏc mu nm khụ tin hnh phõn tớch lp li ln cựng mt iu kin Kt qu phõn tớch ln lp li v lp li ca phng phỏp c nờu Bng 3.3 lp li ca phng phỏp c ỏnh giỏ qua lch chun tng i (RSD) Da vo nng tng ng tớnh kt qu trung bỡnh v tớnh lch chun cng nh h s bin thiờn SVTH: Nguyn Th Thanh Hng 37 ỏn tt nghip Bng 3.4 Kt qu trung bỡnh, lch chun, h s bin thiờn ca cỏc mu nm ti TT Mu nm ụng Cụ Khi lng Mu nm Linh Chi Mu nm Bch Tuyt Mu nm Bo Ng Hm Khi Hm Khi Hm Khi Hm lng lng lng lng lng lng lng (mg/100g) (mg/100g) (mg/100g) (mg/100g) 10 40.810 10 28.90 10 21.15 10 18.004 10 40.815 10 28.95 10 21.13 10 18.002 10 40.808 10 28.91 10 21.17 10 18.003 Xtb 40.811 28.92 21.15 18.003 S 0,0036 0,0265 0.02 0.001 CV(%) 0.0088 0.092 0.095 0.0056 - Giỏ tr trung bỡnh hm lng vitamin C mu nm ụng Cụ l: Xtb = n x = 40.811 n i =1 n lch chun: s= ( xi xtb ) = 0.0036 i =1 n lch chun tng i: CV(%) = S ì 100 0.0036 ì 100 = 0.0088 % = xtb 40.811 - Giỏ tr trung bỡnh hm lng vitamin C mu nm Linh Chi l: n Xtb = x = 28.92 n i =1 n lch chun: s= (x i =1 i xtb ) = 0.0265 n lch chun tng i: CV(%) = S ì 100 0.0265 ì 100 = 0.092% = xtb 28.92 - Giỏ tr trung bỡnh hm lng vitamin C mu nm Bch Tuyt l: n Xtb = x = 21.15 n i =1 SVTH: Nguyn Th Thanh Hng 38 ỏn tt nghip n (x s= lch chun: i =1 i xtb ) = 0.02 n lch chun tng i: CV(%) = S ì 100 0.02 ì 100 = 0.095 % = xtb 21.15 - Giỏ tr trung bỡnh hm lng vitamin C mu nm Bo Ng l: Xtb = n x = 18.003 n i =1 n ( xi xtb ) s= lch chun: = 0.001 i =1 n lch chun tng i: CV(%) = S ì 100 0.001 ì 100 = 0.0056 % = xtb 18.003 Bng 3.5 Kt qu trung bỡnh, lch chun, h s bin thiờn ca cỏc mu nm khụ Mu nm 650 Mu nm 660 Mu nm 661 Mu nm 662 TT Khi lng Hm Khi Hm Khi Hm Khi Hm lng lng lng lng lng lng lng (mg/100g) (mg/100g) (mg/100g) (mg/100g) 4.0525 3.82 15.485 12.36 2 4.0523 3.87 15.480 12.31 4.0524 3.98 15.484 12.32 Xtb 4.0524 3.89 15.483 12.32 S 0.0001 0.082 0.0027 0.017 CV(%) 0.0025 0.021 0.017 0.237 - Giỏ tr trung bỡnh hm lng vitamin C mu 650 l: Xtb = n x = 4.0524 n i =1 n lch chun: s= ( xi xtb ) i =1 = 0.0001 n SVTH: Nguyn Th Thanh Hng 39 ỏn tt nghip lch chun tng i: CV(%) = S ì 100 0.0001 ì 100 = 0.0025 % = xtb 4.0524 - Giỏ tr trung bỡnh hm lng vitamin C mu 660 l: Xtb = n x = 3.98 n i =1 n lch chun: s= (x i =1 i xtb ) = 0.082 n lch chun tng i: CV(%) = S ì 100 0.082 ì 100 = 0.021% = xtb 3.98 - Giỏ tr trung bỡnh hm lng vitamin C mu 661 l: n Xtb = x = 15.483 n i =1 n lch chun: s= (x i =1 i xtb ) = 0.0027 n lch chun tng i: CV(%) = S ì 100 0.0027 ì 100 = 0.017% = xtb 15.483 - Giỏ tr trung bỡnh hm lng vitamin C mu 662 l: Xtb = n x = 12.32 n i =1 n lch chun: s= ( xi xtb ) i =1 = 0.029 n lch chun tng i: CV(%) = S ì 100 0.029 ì 100 = 0.237% = xtb 12.32 Trong ú: Xi l nng ca vitamin A ln chy th i Xtb l nng trung bỡnh ca n ln chy n l s ln chy lp li Nhn xột: Kt qu tớnh toỏn cho thy, phng phỏp cú lp li cao cho ỳng tt ỏp ng yờu cu nh lng SVTH: Nguyn Th Thanh Hng 40 ỏn tt nghip III Sc Hỡnh 3.2: Sc chun nng 10ppm Hỡnh 3.3: Sc chun nng 50ppm SVTH: Nguyn Th Thanh Hng 41 ỏn tt nghip Hỡnh 3.4: Sc chun nng 100ppm Hỡnh 3.5: Sc mu nm ụng Cụ SVTH: Nguyn Th Thanh Hng 42 ỏn tt nghip Hỡnh 3.6: Sc mu nm Linh Chi Hỡnh 3.7: Sc mu nm Bch Tuyt SVTH: Nguyn Th Thanh Hng 43 ỏn tt nghip Hỡnh 3.8: Sc mu nm Bo Ng Hỡnh 3.9: Sc mu nm 660 SVTH: Nguyn Th Thanh Hng 44 ỏn tt nghip Hỡnh 3.10: Sc mu nm 650 Hỡnh 3.11: Sc mu nm 662 SVTH: Nguyn Th Thanh Hng 45 ỏn tt nghip KT LUN ỏn ó hon thnh cỏc nhim v ó ra, ú l tỡm hiu v trỡnh by cỏc nh sau: - Tng quan v Nm, tng quan v vitamin C v ttoongr quan v phng phỏp HPLC - Nghiờn cu cỏc phng phỏp xỏc nh vitamin C - Chit, tỏch, nh lng vitamin C cỏc mu nm bng phng phỏp HPLC - Kim tra, ỏnh giỏ phng phỏp v cỏc iu kin phõn tớch vi quỏ trỡnh thc hin v kt qu thu c - Kt qu thc nghim thu c sau phõn tớch: + Hm lng vitamn C cú mu nm ụng Cụ ti l: 40.811(mg/100g) + Hm lng vitamin C cú nm Linh Chi ti l: 28.92(mg/100g) + Hm lng vitamin C cú nm Bch Tuyt ti l: 21.15(mg/100g) + Hm lng vitamin C cú nm Bo Ng ti l: 17.003(mg/100g) + Hm lng vitamin C cú nm 650 l: 4.0524(mg/100g) + Hm lng vitamin C cú nm 660 l: 3.89(mg/100g) + Hm lng vitamin C cú nm 661 l: 15.483(mg/100g) + Hm lng vitamin C cú nm 662 l: 12.32(mg/100g) - ó xỏc nh c gii hn phỏt hin ca phng phỏp l: 0.076ppm - ó xỏc nh gii hn xỏc nh ca phng phỏp l: LOQ = 0.253ppm Kin ngh: Nm l ngun thc phm giu, y cỏc acid amin thit yu, hm lng cht bộo ớt v l nhng acid bộo cha bóo hũa, ú tt cho sc khe, giỏ tr nng lng cao, giu khoỏng cht v cỏc vitamin Ngoi giỏ tr cung cp cỏc cht dinh dung cn thit cho c th, nm cũn cha nhiu hot cht cú tớnh sinh hc, gúp phn ngn nga v iu tr bnh cho ngi, phũng chng u bu Hin cỏc nh khoa hc ang nghiờn cu v phỏt hin thnh phn ca nm cú nhng hot cht cú dc tớnh rt mnh vi cỏc cn bnh nan y hin nh viờm gan, ung th, HIV Nhiu loi nm l ngun nguyờn liu iu ch cỏc hot cht iu tr bnh Trong s ú cú mt s loi ó c bit rừ SVTH: Nguyn Th Thanh Hng 46 ỏn tt nghip v thnh phn v dc tớnh, mt s loi cũn li thnh phn ny cha c cụng b chớnh thc, c bit l thnh phn vitamin Tm quan trng ca nm ó c khng nh, vỡ th cú mt ch s dng nm hp lý cn xỏc nh chớnh xỏc hm lng cỏc cht dinh dng cú nm Mun cú kt qu chớnh xỏc phõn tớch thỡ ngoi vic la chn phng phỏp cn phi cú cỏch thu nhn, bo qun v x lý mu nm lm trỏnh hao ht cỏc cht dinh dng d b mt hay bin tớnh nh mt s vitamin v axit amin Kt qu cho thy hm lng vitamin C cú cỏc mu ti cao hn cỏc mu khụ vỡ vy cú kt qu chớnh xỏc nờn tin hnh lỳc mu cũn ti v sau chit em mu i o ngay, khụng nờn lõu Trong trng hp bo qun nm cn chỳ ý quỏ trỡnh v lm khụ trỏnh lm hao ht cỏc cht dinh dng cú nm SVTH: Nguyn Th Thanh Hng 47 ỏn tt nghip TI LIU THAM KHO Ting Vit 1) Hong Kim Anh Húa hc thc phm NXB Khoa Hc v K Thut 2) PGS.TS Trn Th Xụ Húa sinh I Khoa Húa Trng H Bỏch khoa Nng 3) Nguyn Hu Nhõn Dinh dng hc NXB Nụng nghip 4) Phm Luõn (1999) C s lý thuyt phõn tớch sc ký lng hiu sut cao i hc quc gia H Ni 5) o Hu Vinh, Nguyn Xuõn Dng v cng s (1985) Cỏc phng phỏp sc ký Nh xut bn khoa hc k thut 6) Hong Minh Chõu, T Vng Nghi, T Vn Mc C s húa hc phõn tớch Nh xut bn Khoa Hc v K Thut 7) Dc in Vit Nam 8) Phm Vn S, Bựi Th Nh Thun Kim nghim Lng thc - Thc phm, Khoa Húa hc thc phm, Trng H Bỏch khoa H Ni, 1991 9) Hong Vn Lu Cỏc phng phỏp sc ký H Vinh 10) PGS.TS Nguyn Khc Ngha X lớ s liu thng kờ H Vinh 11) Vin kim nghim nh lng Vitamin NXB Y hc 12) Hong Minh Chõu, T Vng Nghi, T Vn Mc C s húa hc phõn tớch Nh xut bn Khoa Hc v K Thut 13) Mai Tt T, V Th Trõm, o Th Vui, Lờ Phan Tun Dc lý hc, Trng i hc Dc H Ni Ting Anh 1) Litwack, Gerald (2007) Vitamin v Hormones 75 San Diego, CA: Elsevie 2) Vitamin analysis for the health and food sciences Ronald R ấitnmiller Lin Ye W.O.Landen, Jr 3) Unitat de Nutricio'i Bromatologia, Facultat de Farmacia, H de Barcelona,Av Joan XXIII, Spain 4) Chinese Journal of Chromatography 1995/01 5) Celluar and Molecular Life Sciences SVTH: Nguyn Th Thanh Hng 48 ỏn tt nghip 6) Updated by: Alison Evert, MS, RD, CDE, Nutritionist, University of Washington Medical Center Diabetes Care Center, Seattle, Washington Also reviewed by David Zieve, MD, MHA, Medical Director, A.D.A.M., Inc Trang Web 1) http://www.cvg.ca 2) http://www.sciencedirect.com 3) http://tusach.thuvienkhoahoc.com 4) http://www.hoahocvietnam.com 5) http://www.hoahoc.org 6) http://www.chemvn.net 7) http://www.khoahoc.com.vn/doisong/ung-dung 8) http://www.Ti liu VN Th vin eBook 9) http://www.Vitamin Khoa hc- Sỏch hay MaxReading.com 10) http://www Y hc c truyn 11) http://www Nguyen Anh LTD SVTH: Nguyn Th Thanh Hng 49 [...]... thành c ng để tách c c hỗn hợp c c chất c tính chất gần tương tự nhau và thu c loại không phân c c, phân c c yếu hay trung bình như c c Vitamin, c c thu c hạ hiệt giảm đau Chủ yếu hiện nay chúng ta sử dụng lọai s c ký hấp phụ pha đảo (RP) 3.3.4 C c đại lượng đ c trưng c a s c ký đồ Kết quả c a quá trình tách c c chất đư c Detector phát hiện ghi thành s c ký đồ Từ c c thông số c a c c pic, nhiều đại lượng. .. tất c c c nguyên t c của s c kí như: phân bố, hấp phụ, trao đổi ion, l c gel… Những ưu điểm c a HPLC chủ yếu là do hai yếu tố sau: - Sự ra đời c a c c chất mang pha tĩnh c kích thư c hạt rất nhỏ và diện tích bề mặt lớn - T c độ tách đư c cải thiện do vi c tăng áp l c đối với dòng dung môi S c ký lỏng hiệu năng cao là một phương pháp chia tách trong đó pha động là chất lỏng và pha tĩnh chứa trong c t... trái c y và rau quả chứa vitamin C, nhưng vi c chế biến món ăn đã làm mất đi hàm lượng vitamin C, vì vậy, trái c y tươi loại cam quýt và nư c uống c a chúng là nguồn cung c p chủ yếu acid ascorbic cho c thể Một trong những phương pháp x c định hàm lượng vitamin C trong th c phẩm là sử dụng phương pháp khử oxy hóa Phản ứng khử oxy hóa tốt hơn phương pháp chuẩn độ acid-baz bởi vì cho thêm acid vào nư c. .. th c phẩm đư c chiết bằng dung dịch acid phosphoric pH=3, sau đó l c và bơm vào máy s c ký lỏng hiệu năng cao, phát hiện và định lượng bằng detector UV-VIS ở bư c sóng 254nm Sơ lư c về phương pháp s c kí lỏng cao áp SVTH: Nguyễn Thị Thanh Hằng 20 Đồ án tốt nghiệp 3.3.1 Đ c điểm S c kí lỏng hiệu năng cao (High Performance Liquid Chromatography - HPLC) ra đời từ năm 1967-1968 trên c sở phát triển, c i... dịch chuẩn g c 1000 µg/ml (ppm): C n chính x c 10mg chất chuẩn acid ascobic vào bình định m c 10ml Hòa và định m c đến vạch bằng acid phosphoric pH=3 ta thu đư c dung dịch chuẩn c nồng độ 1000 µg/ml - Dung dịch chuẩn trung gian 100 µg/ml: Hút 1 ml dung dịch chuẩn g c 1000ppm cho vào bình định m c 10ml, định m c đến vạch bằng dung môi pha động -Dung dịch chuẩn làm vi c: Chuẩn bị c c dung dịch chuẩn... hiện c c chất hữu c phát huỳnh quang tự nhiên c ng như c c dẫn chất c huỳnh quang và là loại Detector c độ chọn l c cao nhất - Loại hiện đại hơn c Detector Diod Array, ELSD (Detector tán xạ bay hơi) c c Detector này c khả năng quét chồng phổ để định tính c c chất theo độ hấp thu c c đại c a c c chất Ngoài ra c n c một số loại Detector kh c là: - Detector điện hóa: Đo dòng, c c phổ, độ dẫn, điện lượng ... Pha động: dùng cho lọai này là c c dung môi phân c c như: Methanol, Acetonitril, Chlorofoc • C t pha đảo (RP): (Silicagel đã Alkyl hóa) Dùng để tách c c chất không phân c c, ít phân c c, c c chất phân c c có thể tạo c p ion Trên bề mặt hoạt động c c nhóm OH đã bị Alkyl hóa t c là thay thế nguyên tử H bằng c c mạch cacbon thẳng (C8 hay C1 8 tương đương RP 8 hay RP 18) hay c c mạch cacbon vòng (Phenyl-... đổi protein, đ c biệt là protein c a c c mô chống đỡ như gân, xương Ch c năng chủ yếu c a vitamin C là sự sản xuất collagen, một protein chính c a c thể - Ch c năng miễn dịch: Vitamin C làm tăng c ờng hệ thống miễn dịch, đ c biệt trong ngăn ngừa và điều trị c m c m trông thường - Ch c năng chống oxi hóa: Vitamin C hoạt động như một chất chống oxi hóa trong môi trường nư c của c thể - c nội bào lẫn... “Máy s c ký lỏng cao áp hiệu năng cao (HPLC) Agilent 1100” 3.3.2 Nguyên t c của quá trình s c ký trong c t Pha tĩnh là một yếu tố quan trọng quyết định bản chất c a quá trình s c ký và loại s c ký Nếu pha tĩnh là chất hấp phụ thì ta c s c ký hấp phụ pha thuận hay pha đảo Nếu pha tĩnh là chất trao đổi ion thì ta c S c ký trao đổi ion Nếu pha tĩnh là chất lỏng thì ta c s c ký phân bố hay s c ký chiết... thể th c hiện chỉ sử dụng dung dịch iốt và không dùng iodate, nhưng dung dịch iodate ổn định hơn và cho kết quả chính x c hơn acid ascorbic 3.2 Phương pháp chuẩn độ bằng 2,6 -Diclorophenolindophenol (DPIP) (phương pháp Tillman) X c định vitamin C trong trái c y (cam, bưởi, sơ ri ) bằng phương pháp chuẩn độ bằng 2,6- Diclorophenolindophenol (DPIP) (phương pháp Tillman) Tiêu chuẩn này áp dụng cho c c sản
- Xem thêm -

Xem thêm: Xác định hàm lượng vitamin C trong nấm bằng phương pháp sắc kí lỏng hiệu năng cao, Xác định hàm lượng vitamin C trong nấm bằng phương pháp sắc kí lỏng hiệu năng cao, Xác định hàm lượng vitamin C trong nấm bằng phương pháp sắc kí lỏng hiệu năng cao

Mục lục

Xem thêm

Gợi ý tài liệu liên quan cho bạn

Nạp tiền Tải lên
Đăng ký
Đăng nhập