1 MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài Ở thực vật protein, saccarit, lipit, vitamin, có chất khác có vai trò quan trọng trao đổi chất gọi chất thứ sinh (plant secondary metabolites) Căn vào tính chất hóa học, hợp chất thực vật thứ sinh chia thành số nhóm như: nhóm phenolic, nhóm terpen, nhóm alkaloid Các chất đa dạng cấu trúc kích thước, tìm thấy nhiều loài thực vật khác nhau, loài có dẫn xuất khác Lượng chất thứ cấp tạo thường nhỏ, chúng có khả tiềm ẩn hoạt tính sinh học mạnh chúng thấp 1% trọng lượng mô thực vật Các hợp chất thứ cấp sản xuất loại tế bào đặc biệt tế bào tuyến tiết, lông tơ, biểu bì… nơi mà chúng tiết có chức chất xua đuổi, tự vệ hay dẫn dụ Một chức dễ nhận thấy chất thứ cấp có vai trò sinh hóa chế bảo vệ thể chống lại tác nhân gây bệnh xâm hại [30], [32] Nhiều công trình nghiên cứu gần cho thấy hợp chất polyphenol (thuộc nhóm hợp chất phenolic) ngày ứng dụng rộng rãi điều trị số bệnh nan y như: nhiễm trùng, ung thư, béo phì, tiểu đường …[1] Hiện giới với thống kê bệnh tiểu đường, loại 2, đáng lo ngại Tại Mỹ có 25 triệu người mắc tăng lên tới 60 triệu 10 năm tới thay đổi nếp sống người dân người tình trạng tiền tiểu đường (pre diabetic) trở thành bị tiểu đường thực Tuy không riêng nước Mỹ phải đối diện với bệnh tiểu đường với tỷ lệ mắc bệnh trung bình % dân chúng Tại nước Châu Á có sóng bệnh tiểu đường lan tràn mau lẹ Tại Ấn độ tỷ lệ bệnh tiều đường lên tới khủng khiếp, chiếm 20 % tổng số người bị tiểu đường giới, khiến châu Á mỏ vàng cho công ty dược phẩm chế tạo thuốc trị bệnh tiểu đường thiết bị đo đường máu Tổ chức y tế giới WHO tiên đoán vào năm 2025 Ấn Độ sau Trung Quốc dẫn đầu giới tỷ lệ bệnh tiểu đường, nước Đông Nam Á có Việt Nam không hai nước khổng lồ kể Tính đến nay, Việt Nam có gần triệu người mắc bệnh đái tháo đường Với tỷ lệ tăng từ 8-20% năm, Việt Nam nằm nhóm nước có tỷ lệ bệnh đái tháo đường tăng nhanh giới Thống kê Hội Người giáo dục bệnh ĐTĐ Việt Nam cho thấy, năm 2002, tỷ lệ người mắc ĐTĐ chiếm 2,7% dân số số lên 7,2%, khu vực đô thị, thành phố lớn tập trung nhiều người mắc Đối tượng mắc ĐTĐ thường độ tuổi từ 30 - 65, có bệnh nhân bị ĐTĐ - 10 tuổi, điều phản ánh trẻ hóa bệnh nước ta [4], [8], [19] Hiện tại, để điều trị đái tháo đường có thuốc kinh điển gồm sulphonylurea, metformin, glitazone, insulin thuốc mang lại hiệu tốt biết dùng cách nhiên loại thuốc kèm theo nhiều phản ứng phụ không mong muốn, tốn điều trị nên chưa phù hợp với tình trạng kinh tế người dân Việt Nam [2], [10], [20], [27] Kinh nghiệm trị liệu đái tháo đường dân gian phong phú chưa ý mức khai thác hết Ví dụ: dùng ổi, rễ dâm bụt, rễ dâu tằm, mướp đắng, thiên hoa phấn, củ mài, hoàng liên, dưa hấu, cà rốt, lê, dưa chuột, bí đao, mướp đắng …Ở Việt Nam việc nghiên cứu, khảo sát thành phần hóa học tác dụng dược lý loài thuốc có giá trị nhằm đặt sở khoa học cho việc sử dụng chúng cách hợp lý có hiệu chưa quan tâm nhiều Cây đương quy, thảo sống nhiều năm, cao 40-60cm Rễ phát triển Thân hình trụ, có rãnh dọc màu tím Rễ dài 10 - 20 cm, gồm nhiều nhánh Mặt màu nâu nhạt, có nhiều nếp nhăn dọc Mặt cắt ngang màu vàng ngà, có vân tròn nhiều điểm tinh dầu Mùi thơm đặc biệt Vị ngọt, cay đắng Theo y học cổ truyền, đương quy có tác dụng điều trị: Huyết hư, chóng mặt, tim đập mạnh, điều hoà kinh nguyệt, kinh nguyệt bế tắc, hành kinh đau bụng, đau bụng hư hàn, táo bón Chữa chứng đau đầu, đau lưng thiếu máu, phong thấp tê đau, sưng đau sang chấn Tuy nhiên việc nghiên cứu đặc tính hóa sinh, y dược hoạt chất thiên nhiên từ đối tượng với việc điều trị bệnh tiểu đường chưa nghiên cứu Chính tiến hành đề tài “ Nghiên cứu đặc tính sinh dƣợc dịch chiết từ Đƣơng quy (Angelica sinensis (Oliv.) Diels) ” Mục đích nghiên cứu Đánh giá hoạt tính sinh dược số phân đoạn dịch chiết từ Đương quy (Angelica sinensis (Oliv) Diels) Nhiệm vụ nghiên cứu 3.1 Tách chiết, định tính, định lượng số phân đoạn dịch chiết chứa hoạt chất thiên nhiên từ Đương quy 3.2 Nghiên cứu đặc tính hóa sinh phân đoạn dịch chiết 3.3 Nghiên cứu tác động hạ đường huyết chống rối loạn trao đổi lipid mô hình chuột BP ĐTĐ phân đoạn dịch chiết từ Đương quy Đối tƣợng nghiên cứu 4.1 Mẫu thực vật + Cây Đương quy (Angelica sinensis (Oliv.) Diels) + Bộ phận sử dụng: lá, thân rễ (củ) + Địa điểm thu mẫu: Sìn Hồ - Lai Châu 4.2 Mẫu động vật Chuột nhắt trắng chủng Swiss tuần tuổi (14-16g), viện vệ sinh dịch tễ TW cung cấp Phƣơng pháp nghiên cứu 5.1 Phương pháp hóa lý: sử dụng hệ dung môi hữu có độ phân cực khác để tách số phân đoạn dịch chiết chứa hoạt chất thiên nhiên từ Đương quy 5.2 Sử dụng phương pháp hóa sinh: Định tính, định lượng, nghiên cứu đặc tính hóa sinh phân đoạn dịch chiết 5.3 Tạo mô hình chuột BP: Chuột nhắt trắng chủng Swiss(14-16g) sau ngày thích nghi với điều kiện phòng thí nghiệm, nuôi chế độ ăn giàu lipid thời gian tuần, chuột nuôi chế độ ăn giàu lipid tăng có ý nghĩa thống kê so với chuột nuôi thức ăn thường 5.4 Tạo mô hình chuột ĐTĐ type I: chuột nuôi BP gây ĐTĐ type II tiêm STZ màng bụng Sau 2-3 ngày chuột bị bệnh với nồng độ glucose huyết xác định ≥18mmol/l 5.5 Sử dụng phương pháp hóa sinh y dược để định lượng đường huyết số số hóa sinh liên quan đến rối loạn trao đổi lipid chuột nhắt sau điều trị phân đoạn dịch chiết từ Đương quy (phân tích số số Glucozơ, Triglycerid, cholesterol, LDL-Lipoprotein tỉ trọng thấp, HDLLipoprotein tỉ trọng cao) Đóng góp đề tài - Cung cấp số dẫn liệu khoa học thành phần hóa học hàm lượng nhóm chất hữu phân đoạn dịch chiết từ Đương quy (Angelica sinensis (Oliv) Diels) - Đánh giá phân đoạn dịch chiết có khả hạ đường huyết giảm béo phì từ Đương quy (Angelica sinensis (Oliv) Diels) Chƣơng TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu số hợp chất tự nhiên thực vật 1.1.1 Hợp chất phenolic 1.1.1.1 Phân loại Hợp chất phenolic nhóm chất khác phổ biến thực vật Đặc điểm chung chúng phân tử có vòng thơm (benzen) mang một, hai hay ba nhóm hydroxyl (OH) gắn trực tiếp vào vòng benzen Dựa vào thành phần cấu trúc, người ta chia hợp chất phenolic thành nhóm [32]: - Nhóm hợp chất phenolic đơn giản: phân tử có vòng benzen vài nhóm hydroxyl Tuỳ thuộc vào số lượng nhóm hydroxyl mà chúng gọi monophenol (phenol), diphenol (pyrocatechin, hydroquinon, ), triphenol (pyrogalol, oxyhydroquinol, ) - Nhóm hợp chất phenolic phức tạp: thành phần cấu trúc phân tử chúng vòng thơm benzen (C 6) chúng có dị vòng, mạch nhánh Đại diện nhóm có acid cynamic, acid cumaric - Nhóm hợp chất phenolic đa vòng: nhóm đa dạng hợp chất phenol, có cấu trúc phức tạp liên kết trùng hợp đơn phân Ngoài gốc phenol có nhóm phụ dị vòng mạch nhánh đa vòng Nhóm có flavonoid, tannin coumarin 1.1.1.2 Vai trò hợp chất phenolic thực vật Hợp chất phenolic hình thành từ sản phẩm trình đường phân đường pentose qua acid cynamic hay theo đường acetate malonate qua Acetyl- CoA Nhóm hợp chất có số chức đời sống thực vật - Các hợp chất phenolic tham gia vào trình hô hấp chất vận chuyển hydro - Các polyphenol hình thành liên kết hydro với protein enzyme làm thay đổi hoạt động enzyme tương tự hiệu ứng điều hòa dị lập thể - Tác dụng mạnh lên trình sinh trưởng, đóng vai trò chất hoạt hoá IAA- oxydase tham gia vào trình sinh tổng hợp enzyme Hợp chất phenol tác dụng chất điều hoà chất điều khiển sinh trưởng thực vật - Hợp chất phenol có tính chất kháng khuẩn 1.1.2 Flavonoid thực vật Trong số polyphenol tự nhiên, flavonoid nhóm chất quan trọng chúng phổ biến hầu hết loài thực vật có nhiều hoạt tính sinh - dược học có giá trị [9] 1.1.2.1 Cấu tạo hoá học phân loại Về cấu tạo hóa học, khung cacbon flavonoid C6 - C3 - C6, gồm 15 nguyên tử cacbon, hai vòng benzene A B nối với qua dị vòng C, A kết hợp với C tạo khung chroman 2' 10 B 1' 4' C A 3' O 6' 5' Flavan (2-phenyl chroman) Tùy theo mức độ oxy hoá vòng pyran, có mặt hay mặt nối đôi C C3 nhóm cacbonyl C mà phân biệt flavonoid thành nhóm phụ sau: flavon, flavonol, flavanon, chalcon auron, antoxyanidin, leucoantoxyanidin, catechin, isoflavonoid, rotenoid, neoflavonoid Flavonoid tồn hai dạng: dạng tự gọi aglycon dạng liên kết với đường gọi glycoside Các glycoside bị thuỷ phân acid enzyme giải phóng đường aglycon tương ứng Có dạng glycoside O-glycoside C-glycoside Đối với O-glycoside phân tử đường liên kết với flavonoid thông qua nhóm hydroxyl rutin; C-glycoside, flavonoid liên kết với đường thông qua nguyên tử cacbon saponin OH HO OH O - R ham nose - gluc os e Glucose O OH Rutin O Saponin 1.1.2.2 Hoạt tính sinh học flavonoid - Tác dụng chống oxy hoá (antioxydant): flavonoid có khả kìm hãm trình oxy hoá dây chuyền sinh gốc tự hoạt động Những flavonoid có nhóm hydroxyl xếp vị trí octo dễ dàng bị oxy hoá tác dụng enzyme polyphenoloxydase peroxydase tạo thành dạng semiquinon quinon Polyphenoloxydase O2 + Flavonoid (dạng khử) Flavonoid (dạng oxi hoá) (dạng Hydroquinon) (Semiquinon Quinon) Peroxydase H2O2 + Flavonoid (dạng khử ) Flavonoid (dạng oxi hoá) (dạng Hydroquinon) (Semiquinon Quinon) + H2O Semiquinon quinon gốc tự bền vững, chúng nhận điện tử hydro từ chất cho khác để trở lại dạng hydroquinon Các chất có khả phản ứng với gốc tự hoạt động sinh trình sinh lý bệnh lý để tiêu diệt chúng - Flavonoid có khả điều hòa hoạt độ enzyme khả liên kết với nhóm amin phân tử protein, làm thay đổi cấu hình không gian enzyme tạo hiệu ứng điều hòa dị lập thể - Flavonoid có tính kháng khuẩn, kháng virus, tăng khả đề kháng thể kích thích lympho bào, tăng sản xuất interferon, ức chế tượng thoát bọng (digramilation) - Flavonoid có hoạt tính vitamin PP, làm tăng tính bền đàn hồi thành mạch, giảm sức thấm mao mạch - Flavonoid có tác dụng chống ung thư kìm hãm enzyme oxy hoá khử, trình đường phân hô hấp, kìm hãm phân bào, phá vỡ cân trình trao đổi chất tế bào ung thư [6] - Tác dụng giảm béo phì lipid máu Theo kết nghiên cứu nhà khoa học Nhật cho thấy chuột béo phì điều trị dịch chiết giàu flavonoid từ Bằng lăng (Lagerstroemia specciosa L.) có trọng lượng giảm đáng kể (~ 10% ) Thí nghiệm tương tự với flavonoid từ Kim ngân (Lonicera japonica Thunb.) chuột cống trắng uống cholesterol cho thấy có tác dụng làm giảm số cholesterol, triglycerid, LDL-C đồng thời tăng HDL-C [34] Naringin (C17H32O4) hesperidin (C28H34O15) flavonoid có hàm lượng cao họ cam chanh (Rutaceae) nhiều nhà nghiên cứu chiết xuất thử tác dụng mô hình chuột béo phì cho kết tốt việc làm hạ số lipid máu [28], [32] - Tác dụng hạ glucose huyết OH O OH OH OH H 3OC O HO O OH O O Quercetin O O O HO CH3 OH OH HO HO O OH OH HO OH OH Hesperidin OH HO Epicatechin Một số flavonoid tách chiết từ nguyên liệu thực vật chứng minh có tác dụng điều hòa glucose huyết như: quercetin có Đỗ trọng (Eucommia ulmoides Oliver.) [43], Hesperidin Naringin có thuộc họ Rutaceae, Genistein Daidzein có Đậu nành (Glycine max L.) [39], Myricetin có Vông vang (Abelmoschus moschatus) 1.1.3 Tannin 1.1.3.1 Cấu trúc hoá học phân loại Tannin hợp chất phenol có trọng lượng phân tử cao, có chứa nhóm chức hydroxyl nhóm chức khác (như cacboxyl), có khả tạo phức với protein phân tử lớn khác điều kiện môi trường đặc biệt [27] OH HO O OH OH OH OH O OH HO OH OH Procyanidin Quebracho Tannin cấu tạo dựa acid gallic acid tanic Tannin có nhóm chính: tannin thuỷ phân tannin ngưng tụ - Tannin thuỷ phân: gồm có tannin mà thành phần để tạo polymer thường ester acid gallic với gốc đường, ester không mang đường acid phenolcacbonic ester acid ellagovic với đường - Tannin ngưng tụ: oligomer hay polymer đơn vị flavonoid (flavan 3- ol) nối với dây nối C - C không bị cắt thuỷ phân catechin, epicatechin chất tương tự Tannin ngưng tụ có từ tới 50 hay đơn vị flavonoid 10 Tannin thường hợp chất vô định hình tinh thể, không màu, có tính quang học, vị chát Tannin tan nước tạo dung dịch keo độ hoà tan thay đổi tuỳ thuộc vào mức độ polymer hoá Chúng tan tốt ethanol, acetone 1.1.3.2 Tác dụng sinh học - Tannin chất cầm rửa có tác dụng giảm tiết ống tiêu hóa, kết tủa protein tạo thành màng che niêm mạc - Tannin có tác dụng chống ung thư có khả kết hợp với chất gây ung thư - Tannin nồng độ cao ức chế hoạt động enzyme nồng độ thấp chúng thường kích hoạt enzyme - Tannin có tác dụng ức chế diệt khuẩn, tác dụng cầm máu làm se hệ mao mạch hay tác dụng làm giảm đau chỗ làm giảm tác dụng đầu dây thần kinh trung ương Tannin chữa ngộ độc kim loại nặng alkaloid tạo tủa với chúng 1.1.4 Alkaloid 1.1.4.1 Khái quát Alkaloid Alkaloid hợp chất chứa nitơ, đa số có nhân dị vòng có tính kiềm, thường gặp thực vật động vật [27] Đa số alkaloid thành phần có chứa oxy thể rắn (cafein), oxy thường thể lỏng dễ bay (nicotin) Alkaloid thường màu, không mùi vị đắng Một số alkaloid có màu vàng berberin, palmitin Các alkaloid dạng base thường không tan nước [34] HO CH3 N O N N O N N H3C O Caffein CH3 NH H N HO Morphine Nicotin CH3 52 Hiện nay, có nhiều mô hình ĐTĐ mô type 2, mô hình ĐTĐ di truyền, chuột thường ĐTĐ, mô hình chuột béo phì ĐTĐ ưa chuộng nhiều đặc điểm bệnh lý giống với ĐTĐ type người [36], [51] Tuy nhiên, khả gây ĐTĐ type chuột tuỳ thuộc nhiều yếu tố dòng chuột lựa chọn, thời gian chế độ nuôi béo, liều tiêm STZ Nhiều công trình khác công bố hiệu mô hình [10], [16], [35], [39], [42], [45] Qua tham khảo thử nghiệm thấy rằng: dòng chuột chủng Swiss, để gây ĐTĐ với hiệu suất cao cần có thời gian nuôi béo dài thông thường từ 4- tuần, kết hợp với tiêm STZ liều thấp Căn vào liều STZ gây ĐTĐ type chuột cống Reed cộng (thường 50mg/kg thể trọng) [45], thấy chuột nhắt trắng cần tiêm liều cao thông thường từ 90 – 120mg/kg thể trọng Kế thừa nghiên cứu trước [10], [11], [12], [14]…, định chọn tiêm liều 100mg/kg thể trọng Với liều tiêm vậy, đạt hiệu suất gây ĐTĐ 92% chuột có đường huyết ≥ 18mmol/l Lô chuột thường tiêm STZ với liều trên, nồng độ glucose huyết lúc đói có tăng nhẹ sau tiêm (nồng độ glucose lúc đói trước sau 72 tiêm tương ứng 6.72 6.84 mmol/l) Điều chuột ăn chuẩn tự điều chỉnh nồng độ glucose máu nhờ tăng lượng Insulin tiết để điều hòa lượng glucose máu Đối với lô chuột béo phì tiêm STZ nồng độ glucose sau 72 tiêm tăng cách rõ rệt (từ 7.89 mmol/l trước tiêm lên 22.42 mmol/l sau tiêm 72 giờ) 53 3.6.2 Tác dụng phân đoạn dịch chiết từ Đƣơng quy đến nồng độ glucose huyết lúc đói chuột ĐTĐ Với mô hình thí nghiệm phần phương pháp nghiên cứu, thu kết thể bảng 3.9 hình 3.6 sau: Bảng 3.9 Kết nồng độ glucose huyết lúc đói lô chuột sau 21 ngày điều trị Các lô chuột điều trị Chuột ăn thường Chuột ĐTĐ không điều trị Chuột ĐTĐ + EtOAc Chuột ĐTĐ + nHexan Chuột ĐTĐ + EtOH Nồng độ glucose huyết lúc đói (mmol/l) Trước ngày 10 ngày 15 ngày 21 ngày điều trị điều trị điều trị điều trị điều trị 6.72 6.68* 6.75* 6.82* 6.71* ±0.4 ±0.2 ±0.3 ±0.5 ±0.2 (↑1.49%) (↓0.15%) (↓0.59%) (↑0.44%) 21.5 22.6* 22.3* 23.7* 21.9* ±2.1 ±1.4 ±1.3 ±1.6 ±1.4 (↑5.1%) (↑3.7%) (↑10.2%) (↑1.9%) 22.3 19.5** 17.2** 15.4** 11.6** ±2.9 ±1.7 ±2.5 ±1.3 ±1.6 (↓30.9%) (↓48.0%) (↓12.6%) (↓22.9%) 21.6 19.2** 18.4** 13.9** 12.1** ±4.2 ±1.9 ±1.7 ±0.9 ±1.6 (↓35.6%) (↓43.9%) (↓11.1%) (↓14.8%) 22.8 17.5** 16.4** 11.9** 9.7** ±3.9 ±1.6 ±1.8 ±2.0 ±0.8 (↓47.8%) (↓57.5%) (↓23.2%) (↓28.1%) (Ghi chú: giá trị p là: *:(p>0.05); **:(p 0.05) Tuy nhiên lô chuột ĐTĐ không điều trị nồng độ glucose có tăng giảm thất thường qua ngày điều trị không giảm trạng thái ban đầu (trước tiêm STZ, p > 0.05 ) tượng nồng độ glucose máu tăng cao không giảm lúc bệnh ĐTĐ thực ngày nghiêm trọng Về tác dụng phân đoạn dịch chiết Đương quy đến khả hạ đường huyết cho thấy rằng: với liều điều trị 2000mg/kg tất cao 55 phân đoạn có tác dụng giảm mạnh đường huyết qua ngày điều trị giảm rõ sau ngày thứ 15 ngày 21 Phân đoạn cao ethanol có tác dụng giảm mạnh đồng qua ngày điều trị (5, 10, 15, 21) nhiên giảm mạnh nhất, rõ sau ngày thứ 15 điều trị, (11.9 mmol/l) tương ứng với giảm 47.8% so với trước điều trị 22.8 mmol/l (p < 0.05) đến ngày thứ 21 mức đường huyết giảm xuống 9.7 mmol/l Cao phân đoạn ethylacetate có tác dụng giảm không mạnh phân đoạn cao ethanol nhiên mang tính ổn định tương đối hiệu qua ngày điều trị (5, 10, 15) giảm mạnh sau ngày 21 điều trị xuống (11.6 mmol/l) tương ứng với giảm 48.0% so với trước điều trị 22.3 mmol/l (p < 0.05) Tiếp theo cao phân đoạn n–hexan với mức giảm tối đa vào ngày thứ 15 điều trị (13.9 mmol/l, tương ứng giảm 35.6%) sau 21 ngày điều trị giảm xuống 12.1 mmol/l, tương ứng với giảm 43.9% so với trước điều trị 21.6 mmol/l (p < 0.05) hiệu điều trị so với cao phân đoạn ethanol cao phân đoạn ethylacetate Từ kết ta giải thích Đương quy có chứa nhiều hợp chất có tác dụng giảm glucose huyết theo chế Các hợp chất diện flavonoid (ví quercetin phân đoạn ethylacetate), tannin Có thể N-AC (N-acetylcysteine) có tác dụng làm giảm stress oxy hóa, cải thiện dung nạp glucose [39] Nhiều nghiên cứu rằng, flavonoid nhóm hợp chất có tác dụng chữa bệnh ĐTĐ mà polyphenol khác (mangiferin, resverratrol, epigallocatechin-3-gallat…), saponin (charatin, sitosterol, acid maslinic,… ) alkaloid (berberin, radicamine A B, casuarine6-O-α-glucoside, javaberine A B, hexanacetate…) có tác dụng [12] Tuy nhiên muốn phát triển thực phẩm chức hỗ trợ điều trị ĐTĐ từ 56 Đương quy cần có thêm nhiều nghiên cứu sâu hợp chất phân đoạn 3.7 Tác dụng đến chuyển hóa lipid Đƣơng quy mô hình chuột ĐTĐ type Để đánh giá ảnh hưởng phân đoạn dịch chiết Đương quy đến số số lipid huyết chuột vào ngày cuối thời gian điều trị, sau cho nhịn đói qua đêm, chọn lô chuột có số đường huyết thấp, lấy máu tổng số phân tích số số hoá sinh Kết trình bày bảng 3.10 hình 3.7 sau Bảng 3.10 So sánh số số lipid máu chuột ĐTĐ trƣớc sau điều trị cao phân đoạn ethanol, cao phân đoạn n – hexan cao phân đoạn ethylacetate Chỉ số Hóa Trước điều sinh trị Cholesterol tổng số (mmol/l) HDL –c (mmol/l) LDL –c (mmol/l) Cao PĐ Cao PĐ Cao PĐ EtOH n – hexan EtOAc 5.31* ± 0.32 4.90* ± 0.15 3.80* ± 0.18 Giảm 5.85% Giảm 13.12% Giảm 32.62% 1.05* ± 0.16 2.17* ± 0.24 1.52* ± 0.32 Giảm 52.91% Giảm 2.69% Giảm 31.84% 1.24* ± 0.17 1.87* ± 0.28 1.43* ± 0.25 Tăng 74.6% Tăng 163.4% Tăng 101.4% 0.98* ± 0.19 0.75* ± 0.13 1.13* ± 0.17 Giảm 46.2% Giảm 58.8% Giảm 37.9% 5.64 ± 0.31 (mmol/l) Triglyceride Chuột béo phì điều trị 2.23 ± 0.24 0.71 ± 0.15 1.82 ± 0.12 (*): p < 0.05 so sánh với chuột trước điều trị 57 Trước điều trị mmol/l Chuột ĐTĐ + EtOH Chuột ĐTĐ + N - hexan Chuột ĐTĐ + EtOAc 5.64 5.31 4.9 3.8 2.23 1.05 2.17 1.82 1.87 1.52 1.24 1.43 0.98 0.71 0.75 1.13 Cholesterol tổng số (mmol/l) Triglyceride (mmol/l) HDL –c (mmol/l) LDL –c (mmol/l) Chỉ số lipit máu Hình 3.7 So sánh số số lipid máu chuột ĐTĐ trƣớc sau điều trị cao phân đoạn ethanol, cao phân đoạn n – hexan cao phân đoạn ethylacetate Qua bảng 3.10 hình 3.7 cho thấy chuột béo phì có biểu rối loạn lipid máu với số quan trọng Cholesterol Trigrixerit nhiên sau 21 ngày điều trị phân đoạn EtOH, phân đoạn n – hexan phân đoạn cao EtOAc số Cholesterol toàn phần giảm tương ứng 5.8%,13.1% 32.6%, số triglixerit giảm tương ứng 52.9%, 2.7% 31.8%; số LDL-C giảm mạnh nhất: giảm 58.8% điều trị phân đoạn n – hexan, giảm 46.1% điều trị phân đoạn EtOH giảm 37.9% điều trị phân đoạn cao EtOAc (các số liệu có ý nghĩa thống kê với p < 0.05) 58 Kết bước đầu cho thấy dịch chiết phân đoạn EtOH, phân đoạn n – hexan phân đoạn EtOAc có tác dụng giảm Cholesterol toàn phần, triglixerit LDL -c Mặt khác số HDL – c lại có xu hướng tăng mạnh: tăng 76.6% điều trị phân đoạn EtOH, tăng 163% điều trị phân đoạn cao n – hexan tăng 101% điều trị phân đoạn cao EtOAc; số HDL-C tăng mạnh dấu hiệu khả quan HDL mệnh danh “lipoprotein tốt”, hoạt động vận chuyển cholesterol dư thừa từ tế bào ngoại vi gan để đào thải qua đường mật, điều phần giải thích lượng cholesterol toàn phần triglyxerit giảm 59 KẾT LUẬN Thành phần hợp chất dịch chiết phân đoạn Đương quy (Angelica sinensis (Oliv.) Diels) phong phú, có đầy đủ nhóm hợp chất tự nhiên phổ biến flavonoid, tannin, alkaloid, saponin glycoside Trong phân đoạn EtOAc phân đoạn cao EtOH hàm lượng polyphenol cao Một số phân đoạn dịch chiết từ Đương quy có khả hạ đường huyết mô hình chuột ĐTĐ: Hàm lượng glucose huyết lô chuột uống cao n-Hexan giảm 43.9%; lô chuột uống cao phân đoạn ethylacetate nồng độ glucose huyết giảm tới 48.0%, lô chuột uống phân đoạn cao cồn giảm mạnh 57.5%; so với lô bình thường Với liều uống 2000mg/kg thể trọng chuột ĐTĐ cao phân đoạn EtOH, cao phân đoạn N- hexan cao phân đoạn EtOAc, sau 21 ngày điều trị số Cholesterol toàn phần giảm tương ứng 5.85%, 13.12% 32.62%, số triglixerit giảm tương ứng 52.91%, 2.69% 31.84%; số LDL-C giảm mạnh nhất: giảm 58.8% điều trị phân đoạn cao n – hexan, 46.2% điều trị phân đoạn EtOH giảm 37.9% điều trị phân đoạn cao EtOAc Mặt khác số HDL – c lại có xu hướng tăng mạnh: tăng 163.4% điều trị phân đoạn cao n – hexan, tăng 101.4% điều trị phân đoạn EtOH tăng 74.6% điều trị phân đoạn cao EtOAc (p