TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY ĐÔ KHOA SINH HỌC ỨNG DỤNG LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH NUÔI TRỒNG THỦY SẢN MÃ SỐ: 304 XÁC ĐỊNH TÍNH NHẠY CỦA MỘT SỐ LOẠI THUỐC KHÁNG SINH ĐỐI VỚI Edwardsiella sp VÀ Aeromonas sp GÂY BỆNH TRÊN CÁ TRA TẠI CẦN THƠ VÀ AN GIANG Sinh viên thực NGUYỄN THỊ MINH TRANG MSSV: 06803052 LỚP: NTTS K1 Cần Thơ, 2010 TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY ĐÔ KHOA SINH HỌC ỨNG DỤNG LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH NUÔI TRỒNG THỦY SẢN MÃ SỐ: 304 XÁC ĐỊNH TÍNH NHẠY CỦA MỘT SỐ LOẠI THUỐC KHÁNG SINH ĐỐI VỚI Edwardsiella sp VÀ Aeromonas sp GÂY BỆNH TRÊN CÁ TRA TẠI CẦN THƠ VÀ AN GIANG Cán hướng dẫn Sinh viên thực Ths LÂM PHÚC NHÂN KS PHẠM THANH HƯƠNG NGUYỄN THỊ MINH TRANG MSSV: 06803052 LỚP: NTTS_K1 Cần Thơ, 2010 LỜI CẢM TẠ Sau tháng thực tập từ tháng 03-06 năm 2010 Chi Cục Thủy Sản thành phố Cần Thơ, 168 Hai Bà Trưng, Phường Tân An-Quận Ninh Kiều-TP Cần Thơ, áp dụng kiến thức học kết hợp với kinh nghiệm thực tế, luận văn chỉnh sửa hoàn thành Em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc thầy Lâm Phúc Nhân cô Phạm Thanh Hương phòng thí nghiệm Chi Cục Thủy Sản TP Cần Thơ tận tình hướng dẫn dạy cho em suốt thời gian làm đề tài Em xin chân thành cám ơn quý thầy cô – Khoa Sinh Học Ứng Dụng – Trường Đại Học Tây Đô tận tình dạy bảo, truyền đạt cho em kiến thức qúy báu năm học vừa qua, tạo dựng hành trang để em bước vào sống sau Chân thành cám ơn cha mẹ người thân bên cạnh ủng hộ, động viên đóng góp ý kiến suốt thời gian qua Xin cám ơn tất cô chú, anh chị Chi Cục Thủy Sản tận tình dẫn, giúp đỡ đóng góp ý kiến bổ ích để em hoàn thành thực tập tốt nghiệp Chân thành cám ơn tất bạn lớp NTTS K1 thời gian qua ủng hộ, động viên để hoàn thành thực tập tốt nghiệp Cuối em xin chúc quý thầy cô – Khoa Sinh Học Ứng Dụng – Trường Đại Học Tây Đô vui, khỏe, công tác tốt không ngừng đường cống hiến cho nghiệp giáo dục Với hiểu biết hạn hẹp thu thập tài liệu hạn chế nên báo cáo tốt nghiệp không tránh khỏi sai sót Kính mong đóng góp ý kiến quý thầy cô bạn Em xin chân thành cám ơn ghi nhớ! TÓM TẮT Vi khuẩn Edwardsiella sp Aeromonas sp hai dòng vi khuẩn gây bệnh phổ biến cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) Nên việc sử dụng kháng sinh thường xuyên để điều trị bệnh dẫn đến tình trạng kháng thuốc vi khuẩn Mục tiêu đề tài “Xác định loại kháng sinh nhạy với vi khuẩn Edwardsiella sp Aeromonas sp để việc điều trị đạt hiệu cao” Đề tài thực kháng sinh đồ lên vi khuẩn trên, với 13 loại kháng sinh 10 chủng dòng vi khuẩn Vi khuẩn phân lập từ cá tra bệnh mủ gan xuất huyết Cần Thơ An Giang quý năm 2010 Kết phân lập vi khuẩn Edwardsiella sp Aeromonas sp Kết kháng sinh đồ cho thấy: kháng sinh có tỉ lệ % nhạy với vi khuẩn Edwardsiella sp 75% là: ampicillin, amoxicillin, ciprofloxacin Các kháng sinh có tỉ lệ % nhạy với vi khuẩn Aeromonas sp 75% là: enrofloxacin, ciprofloxacin, norfloxacin, ofloxacin Ngoài ra, đề tài xác định loại kháng sinh nhạy đồng thời với vi khuẩn Edwardsiella sp Aeromonas sp, Cần Thơ là: ciprofloxacin, An Giang là: ofloxacin, norfloxacin, ciprofloxacin florfenicol Các kháng sinh kháng với Edwardsiella sp với tỉ lệ % kháng >50% là: colistin, doxycyclin, tetracyclin, enrofloxacin, florfenicol, kanmycin rifamycin Các kháng sinh kháng với Aeromonas sp với tỉ lệ % kháng >50% là: ampicillin, amoxicillin, cefalexin, colistin, tetracyclin, kanamycin rifamycin Từ khóa: Edwardsiella, Aeromonas , kháng sinh LỜI CAM KẾT Tôi xin cam kết luận văn hoàn thành dựa kết nghiên cứu kết nghiên cứu chưa dùng cho luận văn cấp khác Cần Thơ, ngày tháng 08 năm 2010 Nguyễn Thị Minh Trang MỤC LỤC LỜI CẢM TẠ i TÓM TẮT ii MỤC LỤC .iv DANH SÁCH BẢNG .vi DANH SÁCH HÌNH vii DANH SÁCH TỪ VIẾT TẮT ix CHƯƠNG I ĐẶT VẤN ĐỀ 1.1 Giới thiệu 1.2 Mục tiêu đề tài 1.3 Nội dung đề tài CHƯƠNG II LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1 Đặc điểm sinh học cá tra 2.1.1 Hệ thống phân loại 2.1.2 Đặc điểm hình thái 2.1.3 Phân bố 2.1.4 Đặc điểm dinh dưỡng .3 2.1.5 Đặc điểm sinh trưởng .4 2.1.6 Đặc điểm sinh sản 2.2 Tổng quan vi khuẩn Edwardsiella sp Aeromonas sp .4 2.2.1 Vi khuẩn Edwardsiella sp .4 2.2.2 Vi khuẩn Aeromonas sp 2.3 Tình hình nghiên cứu bệnh vi khuẩn Edwardsiella sp Aeromonas sp…6 2.3.1 Nghiên cứu giới 2.3.2 Nghiên cứu Việt Nam 2.4 Tổng quan loại kháng sinh 2.4.1 Định nghĩa 2.4.2 Nguyên tắc sử dụng kháng sinh .7 2.4.3 Các loại kháng sinh phổ biến 2.5 Các nghiên cứu thuốc kháng sinh nuôi trồng thủy sản 18 CHƯƠNG III .20 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 3.1 Vật liệu nghiên cứu 20 3.1.1 Thời gian địa điểm nghiên cứu 20 3.1.2 Vật liệu nghiên cứu .20 3.1.3 Thiết bị, dụng cụ hóa chất .20 3.2 Phương pháp nghiên cứu 20 3.2.1 Đối tượng nghiên cứu 20 3.2.2 Phương pháp thu mẫu 20 3.2.3 Phương pháp phân lập định danh vi khuẩn .…………21 3.2.4 Phương pháp làm kháng sinh đồ… 22 CHƯƠNG IV 24 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 24 4.1 Kết phân lập định danh vi khuẩn Edwardsiella sp Aeromonas sp 24 4.2 Kết kháng sinh đồ 26 4.2.1 Kết kháng sinh đồ vi khuẩn Edwardsiella sp tỉnh Cần Thơ An Giang 27 4.2.2 Kết kháng sinh đồ vi khuẩn Aeromonas sp tỉnh Cần Thơ An Giang 31 4.2.3 Khảo sát tính nhạy vi khuẩn Edwardsiella sp Aeromonas sp tỉnh Cần Thơ An Giang .34 CHƯƠNG V 37 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 37 5.1 Kết luận 37 5.2 Đề xuất 37 TÀI LIỆU THAM KHẢO 38 PHỤ LỤC .A DANH SÁCH BẢNG Trang Bảng 4.1: Kết kiểm tra đặc điểm sinh hóa vi khuẩn Edwardsiella sp Aeromonas sp .25 Bảng 4.2: Tỉ lệ tính nhạy 10 chủng vi khuẩn Edwardsiella sp với 13 loại kháng sinh 28 Bảng 4.3: Tỉ lệ tính nhạy 10 chủng vi khuẩn Aeromonas sp với 13 loại kháng sinh 32 DANH SÁCH HÌNH Trang Hình 2.1: Hình dạng bên cá tra Hình 2.2: Vi khuẩn Aeromonas hydrophila có tiêm mao .5 Hình 2.3: Công thức cấu tạo ampicillin Hình 2.4: Mô hình phân tử ampicillin Hình 2.5: Công thức cấu tạo amoxcillin Hình 2.6: Mô hình phân tử amoxcillin Hình 2.7: Công thức cấu tạo cefalexin 10 Hình 2.8: Công thức cấu tạo colistin 10 Hình 2.9: Công thức cấu tạo doxycyclin .11 Hình 2.10: Mô hình phân tử doxycyclin .11 Hình 2.11: Công thức cấu tạo tetracylin 12 Hình 2.12: Công thức cấu tạo enrofloxacin 13 Hình 2.13: Công thức cấu tạo ciprofloxacin .14 Hình 2.14: Mô hình phân tử ciprofloxacin 14 Hình 2.15: Công thức cấu tạo norfoxacin 15 Hình 2.16: Công thức cấu tạo ofloxacin 15 Hình 2.17: Công thức cấo tạo florfenicol 16 Hình 2.18: Công thức hóa học kanamycin 17 Hình 2.19: Công thức cấu tạo rifamycin 18 Hình 3.1: Quy trình phân lập vi khuẩn Edwardsiella sp Aeromonas sp .21 Hình 4.1: Nội tạng cá tra bị bệnh mủ gan 24 Hình 4.2: Cá tra bị bệnh xuất huyết 24 Hình 4.3: Nội tạng cá tra bị xuất huyết .24 Hình 4.4: Kết tách ròng vi khuẩn Edwardsiella sp .25 Hình 4.5: Kết tách ròng vi khuẩn Aeromonas sp 25 Hình 4.6: Hình nhuộm Gram vi khuẩn Edwardsiella sp (100X) 25 Hình 4.7: Hình nhuộm Gram vi khuẩn Aeromonas sp (100X) 25 Hình 4.8: Vi khuẩn Aeromonas sp thực test O/F .26 Hình 4.9: Vi khuẩn Aeromonas sp cho phản ứng lên men sau 24 26 Hình 4.10: Kết kháng sinh đồ chủng Edwardsiella sp sau 48 27 Hình 4.11: Đường kính trung bình vô trùng thuốc kháng sinh Edwardsiella sp Cần Thơ An Giang 30 Hình 4.12: Kết kháng sinh đồ chủng Aeromonas sp sau 24 31 Hình 4.13: Đường kính trung bình vô trùng thuốc kháng sinh Edwardsiella sp Cần Thơ An Giang 33 Hình 4.14: Phần trăm nhạy vi khuẩn Edwardsiella sp Aeromonas sp 34 Hình 4.15: Đường kính trung bình vô trùng thuốc kháng sinh Aeromonas sp Edwardsiella sp An Giang 35 10