ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NGUYỄN KHẮC ĐẠI NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ, ĐẶC TÍNH SINH VẬT HỌC CỦA VI KHUẨN PASTEURELLA MULTOCIDA GÂY BỆNH TỤ HUYẾT TRÙNG Ở TRÂU, BÒ TẠI MỘT SỐ HUYỆN, TỈNH QUẢNG NINH VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG TRỊ Chuyên ngành: Thú y Mã số ngành: 60.64.01.01 LUẬN VĂN THẠC SĨ THÚ Y Người hướng dẫn khoa học: TS ĐỖ QUỐC TUẤN THÁI NGUYÊN - 2015 i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan rằng: - Các kết nghiên cứu luận văn trực tiếp nghiên cứu hướng dẫn TS Đỗ Quốc Tuấn, giúp đỡ cán Trạm Chẩn đoán xét nghiệm bệnh động vật - Cơ quan Thú y vùng II Hải Phòng Chi cục Thú y tỉnh Quảng Ninh - Các số liệu kết trình bày luận văn hoàn toàn trung thực, khách quan, rút từ tình hình thực tế tỉnh Quảng Ninh năm qua chưa sử dụng để bảo vệ học vị - Mọi giúp đỡ cho việc hoàn thành luận văn cảm ơn thông tin tài liệu trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc Thái Nguyên, tháng 12 năm 2015 Tác giả luận văn Nguyễn Khắc Đại ii LỜI CẢM ƠN Trong trình học tập thực luận văn, ngồi nỗ lực thân, tơi ln nhận giúp đỡ quý báu, bảo tận tình nhiều tập thể cá nhân, đến luận văn tơi hồn thành Nhân dịp này, cho phép tơi tỏ lịng biết ơn cảm ơn chân thành tới: - Thầy giáo TS Đỗ Quốc Tuấn, người trực tiếp hướng dẫn q trình nghiên cứu hồn thành luận văn - Ban Giám hiệu Trường Đại học Nông Lâm - Đại học Thái Nguyên, khoa Sau Đại học, khoa Chăn nuôi - Thú y, thầy cô giáo giúp đỡ, tạo điều kiện để học tập, tiếp thu kiến thức chương trình học - Các cán Chi cục Thú y tỉnh Quảng Ninh, cán Trạm Thú y huyện Bình Liêu, Trạm Thú y thị xã Quảng Yên - Cán Trạm Chẩn đoán xét nghiệm bệnh động vật - Cơ quan Thú y vùng II Hải Phịng Nhân dịp hồn thành luận văn, cho phép gửi lời cảm ơn sâu sắc tới gia đình, bạn bè, đồng nghiệp động viên giúp đỡ tơi vượt qua khó khăn suốt q trình học tập, nghiên cứu, thực đề tài Thái Nguyên, tháng 12 năm 2015 Tác giả luận văn Nguyễn Khắc Đại iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT vi DANH MỤC CÁC BẢNG vii DANH MỤC CÁC HÌNH ix MỞ ĐẦU 1 Đặt vấn đề Mục tiêu nghiên cứu Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU VÀ CƠ SỞ KHOA HỌC CỦA ĐỀ TÀI 1.1 Tình hình nghiên cứu bệnh tụ huyết trùng nước 1.1.1 Trên giới 1.1.2 Ở Việt Nam 1.2 Đặc điểm dịch tễ học bệnh tụ huyết trùng 1.2.1 Nguồn bệnh phương thức lây lan 1.2.3 Tuổi mắc bệnh 10 1.2.4 Mùa vụ phát bệnh 10 1.2.5 Vùng phát bệnh 12 1.2.6 Hiện tượng mang vi khuẩn Pasteurella multocida đường hô hấp gia súc khỏe 13 1.3 Đặc tính sinh học mầm bệnh 14 1.3.1 Phân loại vi khuẩn 14 1.3.2 Hình thái tính chất bắt màu 15 1.3.3 Đặc tính nuôi cấy 15 1.3.4 Đặc tính sinh hóa 18 1.3.5 Kháng nguyên vi khuẩn 19 1.3.6 Độc lực vi khuẩn Pasteurella multocida 23 iv 1.3.7 Sức đề kháng 24 1.4 Cơ chế sinh bệnh 25 1.5 Đặc điểm bệnh tụ huyết trùng trâu, bò 25 1.5.1 Biểu đặc trưng trâu, bò mắc bệnh tụ huyết trùng 25 1.5.2 Chẩn đoán bệnh 27 1.5.3 Phòng trị bệnh 28 Chương 2: NỘI DUNG, NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 31 2.1 Đối tượng, thời gian địa điểm nghiên cứu 31 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 31 2.1.2 Thời gian địa điểm 31 2.2 Nội dung nghiên cứu 31 2.2.1 Nghiên cứu số đặc điểm dịch tễ bệnh tụ huyết trùng trâu, bò tỉnh Quảng Ninh 31 2.2.2 Phân lập xác định đặc tính sinh vật, hóa học vi khuẩn Pasteurella multocida 31 2.2.3 Đề xuất biện pháp phòng trị bệnh tụ huyết trùng trâu, bò tỉnh Quảng Ninh 32 2.3 Nguyên liệu dùng cho nghiên cứu 32 2.3.1 Mẫu bệnh phẩm dùng phân lập vi khuẩn 32 2.3.2 Động vật thí nghiệm 32 2.3.3 Hóa chất dụng cụ nghiên cứu 32 2.4 Phương pháp nghiên cứu 33 2.4.1 Phương pháp thiết kế lấy mẫu, số lượng, phân bố mẫu 33 2.4.2 Phương pháp nghiên cứu dịch tễ học 34 2.4.3 Phương pháp nuôi cấy, phân lập xác định vi khuẩn Pasteurella multocida 36 2.4.4 Kiểm tra độc lực vi khuẩn Pasteurella multocida phân lập 38 2.4.5 Phương pháp xử lý số liệu 40 Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 41 3.1 Đặc điểm dịch tễ học bệnh tụ huyết trùng gia súc Quảng Ninh 41 3.1.1 Tình hình bệnh tụ huyết trùng trâu, bị, lợn địa bàn tỉnh Quảng Ninh từ năm 2011 - 2014 41 3.1.2 Kết điều tra trâu, bò ốm chết bệnh tụ huyết trùng 43 v 3.1.3 Tỷ lệ huyện có dịch tụ huyết trùng trâu, bị Quảng Ninh từ năm 2011 - 2014 44 3.1.4 Kết điều tra trâu, bò ốm chết bệnh tụ huyết trùng theo mùa vụ Quảng Ninh 46 3.1.5 Kết điều tra trâu, bò mắc bệnh chết bệnh tụ huyết trùng trâu, bò theo lứa tuổi 49 3.2 Nghiên cứu yếu tố tự nhiên ảnh hưởng đến bệnh tụ huyết trùng trâu, bò 51 3.2.1 Kết điều tra trâu, bò mắc bệnh chết bệnh tụ huyết trùng theo vùng địa lý 51 3.2.2 Ảnh hưởng yếu tố khí hậu trâu, bị mắc bệnh tụ huyết trùng 53 3.3 Triệu chứng, bệnh tích bệnh tụ huyết trùng trâu, bị địa bàn tỉnh Quảng Ninh 56 3.3.1 Kết phân lập vi khuẩn Pasteurella multocida từ dịch ngoáy mũi trâu, bò khoẻ Quảng Ninh 57 3.3.2 Tỷ lệ mang trùng Pasteurella multocida trâu, bò khỏe theo lứa tuổi địa bàn tỉnh Quảng Ninh 58 3.3.3 Kết phân lập vi khuẩn Pasteurella multocida từ bệnh phẩm trâu, bò nghi mắc bệnh tụ huyết trùng Quảng Ninh 59 3.3.4 Kết giám định số đặc tính sinh vật – hố học chủng vi khuẩn Pasteurella multocida phân lập 60 3.3.5 Xác định serotype kháng nguyên chủng Pasteurella multocida phân lập 62 3.3.6 Xác định độc lực chủng Pasteurella multocida phân lập 63 3.3.7 Kết theo dõi hiệu vắc xin tiêm phòng cho trâu, bò 64 3.3.8 Kết kiểm tra tính mẫn cảm vi khuẩn Pasteurella multocida phân lập với số loại kháng sinh hóa dược 65 3.3.9 Kết thử nghiệm số phác đồ điều trị bệnh tụ huyết trùng trâu, bò 67 3.3.10 Đề xuất biện pháp phòng bệnh tụ huyết trùng trâu, bò Quảng Ninh 68 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 70 Kết luận 70 Đề nghị 70 TÀI LIỆU THAM KHẢO 72 vi DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT BHI: Brain Heart Infusion BL: Bình Liêu Cs: Cộng DNA: Deoxyribonucleic Acid FAO: Food and Agriculture Oganization HSND: Hệ số năm dịch MR: Methylen Red OIE: Office International Epizooties Tổ chức dịch tễ giới PCR: Polymerase Chain Reaction PRRSV: Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus PƯ: Phản ứng QY: Quảng Yên THT: Tụ huyết trùng TSI: Triple sugar iron agar TT: Thể trọng TW: Trung ương VK: Vi khuẩn VP: Voges Proskauer YPC: Yeast extract Pepton-L-Cystin vii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Tóm tắt danh pháp Pasteurella multocida 14 Bảng 1.2 Phân biệt loài Pasteurella 19 Bảng 1.3 Hệ thống phân loại serotype Pasteurella multocida (theo De Alwis, 1999) [63] 22 Bảng 3.1 Kết điều tra tình hình bệnh tụ huyết trùng gia súc Quảng Ninh từ năm 2011 - 2014 42 Bảng 3.2 Tình hình mắc bệnh tụ huyết trùng đàn trâu, bò Quảng Ninh từ năm 2011 đến năm 2014 43 Bảng 3.3 Tỷ lệ huyện có dịch tụ huyết trùng trâu, bò Quảng Ninh 45 Bảng 3.4 Tỷ lệ trâu, bò ốm chết bệnh tụ huyết trùng theo mùa vụ Quảng Ninh 47 Bảng 3.5 Kết xác định trâu, bò mắc bệnh tụ huyết trùng theo lứa tuổi Quảng Ninh 50 Bảng 3.6 Kết xác định tỷ lệ trâu, bò mắc bệnh, chết bệnh tụ huyết trùng theo vùng địa lý Quảng Ninh 52 Bảng 3.7 Tương quan yếu tố khí hậu với trâu, bò mắc bệnh tụ huyết trùng Quảng Ninh 54 Bảng 3.8 Kết theo dõi triệu chứng, bệnh tích trâu, bò mắc bệnh tụ huyết trùng Quảng Ninh 56 Bảng 3.9 Kết phân lập vi khuẩn Pasteurella multocida từ dịch ngốy mũi trâu, bị khoẻ 57 Bảng 3.10 Tỷ lệ mang trùng Pasteurella multocida trâu, bò khỏe theo tuổi địa bàn tỉnh Quảng Ninh 59 Bảng 3.11 Kết phân lập Pasteurella multocida từ bệnh phẩm trâu, bò nghi mắc bệnh tụ huyết trùng 60 Bảng 3.12 Kết giám định số đặc tính sinh vật, hoá học vi khuẩn Pasteurella multocida phân lập 61 Bảng 3.13 Kết xác định serotype kháng nguyên chủng Pasteurella multocida phân lập 62 viii Bảng 3.14 Kết thử độc lực chủng Pasteurella multocida phân lập 63 Bảng 3.15 Kết theo dõi hiệu vắc xin tiêm phòng cho trâu, bò 65 Bảng 3.16 Kết thử tính mẫn cảm với kháng sinh chủng Pasteurella multocida phân lập 66 Bảng 3.17 Kết thử nghiệm số phác đồ điều trị bệnh tụ huyết trùng trâu, bò 67 ii LỜI CẢM ƠN Trong q trình học tập thực luận văn, ngồi nỗ lực thân, nhận giúp đỡ quý báu, bảo tận tình nhiều tập thể cá nhân, đến luận văn tơi hồn thành Nhân dịp này, cho phép tơi tỏ lịng biết ơn cảm ơn chân thành tới: - Thầy giáo TS Đỗ Quốc Tuấn, người trực tiếp hướng dẫn q trình nghiên cứu hồn thành luận văn - Ban Giám hiệu Trường Đại học Nông Lâm - Đại học Thái Nguyên, khoa Sau Đại học, khoa Chăn nuôi - Thú y, thầy cô giáo giúp đỡ, tạo điều kiện để học tập, tiếp thu kiến thức chương trình học - Các cán Chi cục Thú y tỉnh Quảng Ninh, cán Trạm Thú y huyện Bình Liêu, Trạm Thú y thị xã Quảng Yên - Cán Trạm Chẩn đoán xét nghiệm bệnh động vật - Cơ quan Thú y vùng II Hải Phịng Nhân dịp hồn thành luận văn, cho phép gửi lời cảm ơn sâu sắc tới gia đình, bạn bè, đồng nghiệp động viên giúp đỡ tơi vượt qua khó khăn suốt q trình học tập, nghiên cứu, thực đề tài Thái Nguyên, tháng 12 năm 2015 Tác giả luận văn Nguyễn Khắc Đại 70 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Kết luận Từ kết nghiên cứu thu được, rút số kết luận sau: 1.1 Tỷ lệ mắc bệnh tụ huyết trùng trâu, bò Quảng Ninh 0,34% Trong đó, tỷ lệ mắc bệnh đàn trâu 0,42%, tỷ lệ mắc bệnh đàn bò 0,15% Dịch xảy hầu hết năm, song mức độ bùng phát dịch theo năm khác Tỷ lệ trâu, bò mắc bệnh vụ Hè - Thu 0,25%, tỷ lệ tử vong 16,83%, vụ Đông Xuân tương ứng 0,09% 12,94% Trâu, bị khu vực miền Đơng có tỷ lệ mắc bệnh, tỷ lệ chết tỷ lệ tử vong cao khu vực miền Tây 1.2 Trâu, bò khoẻ mạnh có mang vi khuẩn Pasteurella multocida đường hơ hấp, tỷ lệ phân lập đàn trâu, bị trung bình 8,40% Tỷ lệ phân lập trâu cao bò Tỷ lệ mang trùng cao giai đoạn < năm tuổi (trâu 20,83%; bò 23,53%) 1.3 Các chủng phân lập có đặc tính sinh vật, hóa học đặc trưng, điển hình lồi Pasteurella multocida, thuộc serotype B:2 Có độc lực mạnh, gây chết 82,14% chuột thí nghiệm vịng 48 sau công cường độc Vi khuẩn Pasteurella multocida phân lập mẫn cảm mạnh với kháng sinh enrofloxacin, norfloxacin, kháng lại oxytetracyclin, gentamicin, spectinomycin 1.4 Sử dụng vắc xin tụ huyết trùng trâu, bò chủng P52, nhũ dầu để tiêm phòng cho hiệu phòng bệnh cao Dùng 02 loại kháng sinh bio-enrofloxacin 100mg, norfloxacin 50mg hai phác đồ khác để điều trị bệnh tụ huyết trùng trâu, bò Quảng Ninh cho kết tốt (tỷ lệ khỏi bệnh từ 94,73%91,66%), kháng sinh bio-enrofloxacin 100mg cho hiệu tốt Đề nghị Để hạn chế tiến tới khống chế bệnh tụ huyết trùng cho đàn trâu, bò cần thực nội dung sau: - Áp dụng kết nghiên cứu đề tài tỉnh Quảng Ninh để phòng điều trị bệnh tụ huyết trùng đạt hiệu cao, tăng thu nhập cho người chăn nuôi 71 - Cần tiếp tục nghiên cứu bệnh tụ huyết trùng tỉnh miền núi phía Bắc tượng mang trùng gia súc khoẻ để có đủ sở xây dựng chương trình phịng chống bệnh thích hợp - Xây dựng vùng an toàn dịch bệnh tụ huyết trùng trâu, bị qua việc chăn ni theo hướng thâm canh, an toàn sinh học, thường xuyên mở lớp tập huấn nâng cao trình độ chun mơn cho đội ngũ cán chăn nuôi thú y thôn bản, chủ trang trại chăn nuôi./ 72 TÀI LIỆU THAM KHẢO I Tài liệu nước Đặng Xuân Bình, Nguyễn Thị Kim Dung, Nguyễn Thị Hà, Lê Bá Hiệp (2010), “Khảo sát lưu hành vi khuẩn Pasteurella multocida gia súc số tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam”, Tạp chí KHKT Thú y, 17(2), tr 53-57 Nguyễn Xuân Bình (1996), Nghiên cứu số đặc điểm dịch tễ bệnh tụ huyết trùng gia cầm biện pháp phịng trị thích hợp, Luận án Phó Tiến sỹ Nơng nghiệp, Viện Khoa học Kỹ thuật Nông nghiệp Việt Nam Tơ Du (1987), Ni trâu, bị gia đình, Nxb Nông nghiệp, tr 3-8 Nguyễn Thị Kim Dung (2010), Xác định vi khuẩn Pasteurella multocida gây bệnh tụ huyết trùng trâu, bị số huyện có dịch địa bàn tỉnh Cao Bằng bước đầu thử nghiệm Auto-Vaccine, Luận văn Thạc sĩ khoa học Nông nghiệp, Trường Đại học Nông Lâm, Đại học Thái Nguyên Bùi Văn Dũng (2000), Nghiên cứu tình hình bệnh tụ huyết trùng vi khuẩn Pasteurella multocida phân lập từ dịch ngốy mũi trâu, bị khỏe tỉnh Lai Châu, Luận văn Thạc sỹ Nông nghiệp, Trường Đại học Nông nghiệp I, Hà Nội Lê Văn Dương (2013), Nghiên cứu số đặc tính sinh học vi khuẩn Actinobacillus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida, Streptococcus suis gây viêm phổi hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản lợn Bắc Giang, biện pháp phòng trị, Luận án Tiến sỹ Nông nghiệp, Đại học Thái Nguyên Phan Đình Đỗ Trịnh Văn Thịnh (1958), Bệnh truyền nhiễm gia súc, bệnh thường có Việt Nam, Nxb Nông thôn, Hà Nội Đỗ Văn Được (1998), “Vài nét tình hình dịch bệnh đàn trâu, bị Lạng Sơn năm 1991-1996”, Tạp chí KHKT thú y, 4(5), tr 92-93 Đỗ Văn Được (2003), Nghiên cứu số nguyên nhân, đặc điểm bệnh lý, triệu chứng bệnh viêm phổi trâu Lạng Sơn biện pháp phịng chống, Luận án Tiến sỹ Nơng nghiệp, Trường Đại học Nông nghiệp I, Hà Nội 10 Nguyễn Thị Hà (2010), Nghiên cứu lưu hành vi khuẩn Pasteurella multocida bệnh tụ huyết trùng trâu, bị số huyện có dịch địa bàn tỉnh Hà Giang biện pháp phòng trị, Luận văn Thạc sỹ khoa học Nông nghiệp, Trường Đại học Nông Lâm, Đại học Thái Nguyên Nguyễn Quang Tuyên cs (2012) [44] kết phân lập xác định số đặc tính sinh học chủng Pasteurella multocida lợn dương tính với PRRSV Bắc Giang Lê Văn Dương (2013) [6] nghiên cứu số đặc tính sinh học vi khuẩn Actinobacillus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida, Streptococcus suis gây viêm phổi hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản lợn Bắc Giang, biện pháp phòng trị Phạm Thị Phương Lan (2013) [18] nghiên cứu xác định số yếu tố gây bệnh vi khuẩn Pasteurella multocida bệnh tụ huyết trùng trâu, bò Hà Giang, Cao Bằng lựa chọn vắc xin phòng bệnh Phạm Thị Phương Lan Đặng Xuân Bình (2014) [19] diễn biến bệnh THT trâu, bò theo mùa năm ảnh hưởng yếu tố khí hậu đến tỷ lệ mắc bệnh tỉnh Cao Bằng Cù Hữu Phú cs (2014) [27] lựa chọn chủng vi khuẩn để chế tạo thử nghiệm vắc xin phòng bệnh vi khuẩn Actinobacillus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida Streptococcus suis gây lợn 1.2 Đặc điểm dịch tễ học bệnh tụ huyết trùng 1.2.1 Nguồn bệnh phương thức lây lan Nguồn lây bệnh tụ huyết trùng chủ yếu trâu, bò, lợn gia cầm bị bệnh mang trùng Ngoài ra, nguồn bệnh khác dê, cừu hay ngựa bị bệnh Trong thể gia súc khỏe mạnh, điều kiện định, vi khuẩn Pasteurella multocida thường tồn đường hô hấp vật chủ, quan hệ cộng sinh Khi sức đề kháng thể giảm, vi khuẩn tăng số lượng, độc lực gây bệnh Cho đến chưa rõ vi khuẩn tồn cách truyền số dãy cá thể quần thể hay cịn tồn lâu dài số Có nhiều cách lây bệnh khác nhau: Nhiễm qua đường hơ hấp, đường tiêu hóa, qua vết xước da, bệnh lây từ ốm sang khỏe qua tiếp xúc Bệnh lây lan việc giết mổ gia súc ốm, chó, mèo số trùng hút máu ruồi, mịng… vật mơi giới truyền mầm bệnh xa (Nguyễn Vĩnh Phước, 1978) [28] Hiramune De Alwis (1982) [69] cho rằng: có tỷ lệ thấp trâu, bò mang khuẩn 74 20 Phạm Sỹ Lăng Phan Địch Lân (2002), Bệnh thường gặp bò sữa Việt Nam kỹ thuật phịng trị, NXB Nơng nghiệp Hà Nội, tập 1, tr 18-27 21 Phạm Sỹ Lăng, Nguyễn Bá Hiên, Trần Xuân Hạnh, Nguyễn Kim Lan, Nguyễn Hữu Nam, Huỳnh Văn Kháng, Hoàng Văn Năm, Nguyễn Văn Quang, Nguyễn Văn Thọ, Phạm Quang Thái (2009), Bệnh trâu, bị, Nxb nơng nghiệp 22 Dương Thế Long (1995), Nghiên cứu số đặc điểm dịch tễ vi khuẩn học bệnh tụ huyết trùng trâu, bò Sơn La để xác định biện pháp phịng trị thích hợp, Luận án Phó Tiến sỹ Khoa học Nơng nghiệp, Viện Khoa học Nông nghiệp Việt Nam, Hà Nội 23 Đặng Ngọc Lương (2012), Xác định số đặc tính sinh học vi khuẩn Pasteurella multocida gây bệnh tụ huyết trùng trâu, bò Cao Bằng lựa chọn vắc xin phịng bệnh, Luận văn Thạc sỹ khoa học Nơng nghiệp, Trường Đại học Nông Lâm, Đại học Thái Nguyên 24 Chu Văn Mẫn (2001), Ứng dụng tin học sinh học (Sử dụng Microsoft Excel nghiên cứu sinh học), Nxb Đại học Quốc gia Hà Nội 25 Nguyễn Văn Minh (2005), Nghiên cứu số đặc điểm dịch tễ bệnh tụ huyết trùng xác định tỷ lệ mang trùng Pasteurella multocida đàn trâu, bò tỉnh Hà Tây, Luận văn Thạc sỹ Nông nghiệp, Trường Đại học Nông nghiệp I, Hà Nội 26 Nguyễn Ngã (1996), Đặc tính sinh học tương đồng kháng nguyên vi khuẩn Pasteurella multocida gây bệnh tụ huyết trùng trâu, bò miền Trung với chủng Iran chế tạo vắc xin, Luận án Phó Tiến sỹ Khoa học Nơng nghiệp, Viện Thú y Quốc gia, Hà Nội 27 Cù Hữu Phú, Nguyễn Xuân Huyên, Âu Xuân Tuấn, Lê Thị Minh Hằng, Lưu Hải Yến, Văn Thị Hường, Trần Việt Dũng Kiên, Tăng Thị Phương (2014), “Lựa chọn chủng vi khuẩn để chế tạo thử nghiệm vắc xin phòng bệnh vi khuẩn Actinobacillus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida Streptococcus suis gây lợn”, Tạp chí KHKT thú y, 21(2), tr 33-42 28 Nguyễn Vĩnh Phước (1978), Giáo trình bệnh truyền nhiễm gia súc, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 75 29 Nguyễn Vĩnh Phước, Lê Thanh Tòng, Lê Anh Phụng, Nguyễn Văn Vĩnh, Mai Hồng Phước (1986a), “Phân lập định type huyết học vi khuẩn tụ huyết trùng trâu, bò tỉnh phía Nam”, Kết hoạt động Khoa học Kỹ thuật thú y 1975 - 1985, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội, tr 105-125 30 Nguyễn Vĩnh Phước, Lê Thanh Tòng, Lê Anh Phụng, Nguyễn Văn Vĩnh, Mai Hồng Phước (1986b), “Phân lập định type huyết học vi khuẩn tụ huyết trùng lợn tỉnh phía Nam”, Kết hoạt động Khoa học Kỹ thuật thú y 1975 - 1985, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội, tr 126-128 31 Phan Thanh Phượng (1994), Ba bệnh đỏ lợn, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội, tr 59-91 32 Phan Thanh Phượng (2000), “Bệnh tụ huyết trùng gia súc, gia cầm biện pháp phịng chống”, Tạp chí KHKT Thú y, 7(2), tr 87- 96 33 Đoàn Thị Băng Tâm (1987), Bệnh động vật nuôi, Nxb Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội, 1, tr 51 – 79 34 Phạm Quang Thái cs (2007), “An toàn hiệu lực vắc xin tụ huyết trùng nhũ hóa chủng P52”, Tạp chí KHKT Thú y, 14(2), tr 16-23 35 Nguyễn Như Thanh cs (2001), Vi sinh vật thú y, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 36 Nguyễn Thiên Thu (1996), Nghiên cứu số đặc tính vi sinh vật kháng nguyên vi khuẩn Pasteurella multocida phân lập từ trâu, bò mang trùng khu vực miền Trung Việt Nam, Luận án Phó Tiến sỹ khoa học Nông nghiệp, Viện Thú y Quốc gia, Hà Nội 37 Đỗ Ngọc Thúy, Âu Xuân Tuấn, Cù Hữu Phú, Lê Xuân Tạo (2007), “Ứng dụng kỹ thuật PCR để định Type giáp mô chủng vi khuẩn Pasteurella multocida phân lập từ vật nuôi”, Tạp chí KHKT thú y, 14(1), tr 36-41 38 Phạm Huy Thụy (2000), “Phòng chống bệnh tụ huyết trùng trâu, bò Vĩnh Phúc”, Tạp chí KHKT thú y, 7(4), tr 94-96 39 Nguyễn Quang Tính, Trương Quang Hải, Cù Hữu Phú, Lê Văn Dương (2012), “Xác định số đặc tính sinh học thử kháng sinh đồ chủng vi khuẩn Pasteurella multocida Streptococcus suis phân lập từ bệnh phẩm 76 lợn mắc bệnh viêm phổi Bắc Giang”, Tạp chí Khoa học Cơng nghệ, Đại học Thái Nguyên, 95(07), tr 15-19 40 Nguyễn Đình Trọng (2002), Phân lập, xác định đặc tính sinh học vi khuẩn Pasteurella sp trâu, bị ni tỉnh Bắc Kạn, lựa chọn vắc xin phịng bệnh thích hợp, Luận án Tiến sỹ khoa học Nông Nghiệp, Hà nội 41 Đỗ Quốc Tuấn (2008), Nghiên cứu bệnh tụ huyết trùng lợn số tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam, Luận án Tiến sỹ Nông nghiệp, Viện Thú y, Hà Nội 42 Đỗ Quốc Tuấn (2012), Nghiên cứu đặc tính sinh vật hóa học vi khuẩn Pasteurella multocida gây bệnh tụ huyết trùng dê tỉnh Thái Nguyên biện pháp phòng trị, Đề tài cấp Đại học, Đại học Nông Lâm, Đại học Thái nguyên 43 Nguyễn Hải Tuất Ngô Kim Khôi (1996), Xử lý thống kê kết nghiên cứu thực nghiệm Nơng lâm nghiệp máy tính (bằng excel 5.0) Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội 44 Nguyễn Quang Tuyên, Lê Văn Dương, Cù Hữu Phú, Hoàng Đăng Huyến (2012), “Kết phân lập xác định số đặc tính sinh học chủng Pasteurella multocida lợn dương tính với PRRSV Bắc Giang”, Tạp chí KHKT thú y, 19(6), tr 52-56 II Tài liệu tham khảo nước 45 Bain R V S (1954), “Studies on Haemorrhagic septicaemia of cattle I Naturally acquired Immunity in Siamese buffaloes”, British Veterinary, pp 110 46 Bain R V S., De Alwis M C L., Carter G R and Gupta B K (1982), “Haemorrhagic septicaemia”, Animal Production and Health, No 33, FAO, Rome 47 Bergey (1974), Manual of determinative bacteriology 8th Buchanan R.E and Gibbsons N.E Co-editors, Saltimore, the Williams and Wilking Company 48 Bolin F.D.M and Eveleth D.F (1951), “The use of biological products in experimental fowl cholera”, Pro 88th Annu Meet An Vet Asso, pp 110-102 49 Burrow W., Moulder J W., Lewert R W., Rippol J W (1968), The epidemiology of infection disease text book of Microbiology, Nineteeth edition popan company limited, Tokyo Japan 77 50 Carter G R (1952), “Type specific capsulars antigens of Pasteurella multocida”, Canadian Journal of Medican Science, 30, pp 48-53 51 Carter G R (1955), “Studies on Pasteurella multocida I, a haemagglutination test for indentification of serological type”, American Journal of Veterinary Research, 16, pp 481-484 52 Carter G R (1959), “Studies on Pasteurella multocida IV, serological types from species other cattle and swine”, American Journal of Veterinary Research 25, pp 173-175 53 Carter G R (1961), “A new serological type of Pasteurella multocida from central Africa”, Veterinary record, 73, pp 1052 54 Carter G R (1967), “Pasteurellosis: Pasteurella multocida and Pasteurella haemolytica”, In Advences in Veterinary Science, 11, pp 321-329 55 Carter G R (1982), “Whatever happened to Haemorrhagic septicaemia”, American Journal of Veterinary Medical Association, 180, pp 176-177 56 Carter G R and De Alwis M C L (1989), “Haemorrhagic septicaemia, in ADLAM C and RUTTER J M (eds) Pasteurella and Pasteurellosis”, Academic Press London, pp 131-160 57 Chung W B., Backtron L and Collins M T (1992), “Swine pneumonia Pasteurellosis studies”, Proceeding of 12th IPVS congress, pp 160 58 De Alwis M C L (1982a), “Pasteurella multocida serotype 6:B infection from an elephant Sri Lanka”, Veterinary Juornal, 18, pp 28 59 De Alwis M C L (1982b), “The immune status of buffalo calves exposed to natural infection with Haemorrhagic septicaemia”, Tropical Animal Health and Production, 14, pp 29-30 60 De Alwis M C L (1984), “Haemorrhagic septicaemia in cattle and buffaloes”, Office international des Epizooties revue Scientifique et technique, 3, pp 707-730 61 De Alwis M C L (1987), “Serological classification of Pasteurella multocida”, Veterinary record, 121, pp 62 De Alwis M C L (1992), “A review, Pasteurellosis in Production Animal”, ACIAR proceedings, No 43, pp 707-730 hầu, họng, mũi tuyến hạnh nhân Ở có hiệu giá kháng thể cao với vật không mang trùng vi khuẩn thông qua dịch tiết niêm mạc mũi xuất gây nhiễm cho gia súc khác Theo De Alwis (1982b) [59] kiểm tra 72 trâu thấy có kháng thể (trong số có mang vi khuẩn Pasteurella multocida chủng 6:B), 67 khơng có kháng thể khơng mang vi khuẩn Nguyễn Vĩnh Phước cs (1986a) [29], Gupta (1962) [65], thấy vật mang trùng nguồn bệnh tiềm tàng có liên quan đến tần số xuất dịch tụ huyết trùng vùng Theo Saharee cs, (1991) [86], gia súc mang trùng từ vùng có dịch xâm nhập vào vùng chưa có dịch nguyên nhân quan trọng làm cho bệnh phát Chung cs (1992) [57] cho Pasteurella multocida có sẵn thể, gặp điều kiện thuận lợi gây chứng viêm phổi Một số tác giả cho nguồn tàng trữ mầm bệnh động vật hoang dã (chồn, cáo, thỏ rừng, loài gặm nhấm loài trùng bọ chó, ruồi trâu v v ) Tại ổ dịch cũ, phần lớn gia súc sống sót sau dịch thường trở thành vật mang trùng thường xuyên thải mầm bệnh môi trường Bệnh phát gia súc sinh sau dịch hay gia súc nhập chưa có miễn dịch (De Alwis, 1999) [63] Sự xuất bệnh có liên quan đến yếu tố stress mơi trường, quản lý chăm sóc (nóng, lạnh, kích động, chăn ni vệ sinh kém, thức ăn không tốt) kèm theo vi khuẩn gây bệnh nấm độc, vi khuẩn độc độc tố làm giảm sức đề kháng thể nguyên nhân làm tăng tỷ lệ nhiễm trùng phát sinh bệnh Gia súc bị nuôi nhốt chật chuồng thơng gió, ẩm ướt, gia súc phải làm việc q sức, điều kiện không thuận lợi ảnh hưởng đến sức khỏe, bệnh dễ phát (Bolin Eveleth, 1951) [48] Vận chuyển xa phương tiện thiếu vệ sinh, thiếu khơng khí, nhốt q chật, thiếu nước uống, vận chuyển với tốc độ nhanh, trời nắng 79 75 Lignieres J M (1900), Contribution Létude et la classification des septicaemia haemorrhagique les Pasteurella Ann Inst Pasteur (Paris), 15:734 76 Mustafa A A., Ghalile H W and Shighidi M T (1978), “Carrier rate of Pasteurella multocida in cattle herd with an out-break of Haemorrhagic septicaemia in Zambia”, British Veterinary Journal, 124, pp 357-358 77 Namioka S and Murata M (1961a), “Serological studies on Pasteurella multocida I A simplified method for capsule typing of the organisms”, Cornell Veterinarian, Vol 51, pp 498-507 78 Namioka S and Murata M (1961b), “Serological studies on Pasteurella multocida II Charecteristics of somatic “O” antigen of the organism”, Cornell Veterinarian, Vol 51, pp 507-512 79 Namioka S and Murata M (1961c), “Serological studies on Pasteurella multocida III: “O” antigen analysis of cultures isolated from various animals”, Cornell Veterinarian, Vol 51, pp 522-528 80 Prince G H and Smith J E (1966), “Antigenic studies on Pasteurella multocida using unodiffusion techniques I Identification and nomenclature of soluble antigens of a bovine Haemorrhagic septicaemia strain”, Juornal of comparative Pathology, 76, pp 303-314 81 Quinn P J., Carter M E., Markey B K., Carter G R (1994), “Pasteurella multocida species In: Quinn, P.J; Carter, M.E; Markey, B.K; Carter, G.R (Eds.)”, Clinical Veterinary Microbiology, Mosby, Edinburgh, pp 254–259 82 Ramdani, Dawkins H J., Johnson R B., Spencer T L., Adler B (1990), “Pasteurella multocida infections in mice with refence to haemorrhagic septicaemia in cattle and buffalo”, Immunol Cell Biol 68(1), pp 57-61 83 Rimler R B and Rhoades K R (1987), “Serogroup F, a new capsule serogroup of Pasteurella multocida”, Journal of Clinical Microbiology, 25, pp 615-618 84 Robert R S (1947), “An immunologycal study of Pasteurella septicaemia”, Journal of comparative pathology, 57, pp 261-278 85 Rosenbush C T and Merchant I A (1939), “A study of the Haemorrhagic septicaemia Pasteurella”, Journal of Bacteriology, 37, pp 69 80 86 Saharee A A., and Salim N B (1991), “The epidemiology of Haemorrhagic septicaemia in cattle and buffalo in Malaysia”, A paper presented at the fourth international Worshop, pp 11-15 87 Seleim R S (2005), “Review: Major pathogenic components of Pasteurella multocida and Mannhemia (Pasterella) haemolytica isolated from animal origin, Bacteriology Department”, Animal Health Research Institute, Nadi El-Seed St Dokki, 12311 Cairo, Egypt 88 Singh N, (1984), “Nasal carriers in bovine Pasteurellosis Indian”, Journal of Veterinary Science and animal Husbandry, 18, pp 261-178 89 Smith H (1990), “Pathogenicity and the microbe in vivo”, Journal of General Microbiology, Vol 136, pp 371-383 90 Wijewantha E A And Karanatna T G (1992), “Studies on nasopharynx of healthy cattle”, Cornell Veterinarian, 58, pp 462-465 91 Yeo B K and Mokhtar (1992), “Haemorrhagic septicaemia of buffalo on sabah, Malaysia, Pasteurellosis in Production Animal”, ACIAR proceedings, No 43, pp 112-115 MỘT SỐ HÌNH ẢNH MINH HỌA CHO ĐỀ TÀI Một số hình ảnh chuồng trại chăn ni Phương thức chăn ni Hình thái tính chất bắt mầu Hình thái khuẩn lạc mơi trường Hiện tượng phát huỳnh quang khuẩn lạc Phản ứng Indol dương tính Chuột thí nghiệm trước thử độc lực Chuột thí nghiệm sau cơng cường độc Thử kháng sinh đồ Điện di Gel sản phẩm PCR chủng vi khuẩn Pasteurella multocida Lấy mẫu từ ống nghiệm Ria cấy bệnh phẩm môi trường thạch Soi kính tìm vi khuẩn Nhuộm Gram