I HC HU TRNG I HC KHOA HC KHOA SINH HC HUNH TH MINH PHNG KHAO SAT MễI TRNG NUễI CY THICH HP CHO SINH TRNG, PHAT TRIN CA CHNG NM MEN PHN LP T CY DA AN TT NGHIP Chuyờn ngnh: Cụng ngh Sinh hc HU, 2016 I HC HU TRNG I HC KHOA HC KHOA SINH HC KHAO SAT MễI TRNG NUễI CY THICH HP CHO SINH TRNG, PHAT TRIN CA CHNG NM MEN PHN LP T CY DA AN TT NGHIP Cỏn b hng dn: PGS.TS PHM TH NGC LAN HU, 2016 Sinh viờn thc hin: HUNH TH MINH PHNG LI CAM OAN Tụi xin cam oan rng s liu v kt qu nghiờn cu ỏn tt nghip ny l hon ton trung thc, cha tng s dng cụng b bt k cụng trỡnh no khỏc Cỏc thụng tin, ti liu trớch dn khúa lun ó c ghi rừ ngun gc TC GI Hunh Th Minh Phng Lời Cảm Ơn Để hoàn thành đồ án tốt nghiệp em xin đợc bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến PGS.TS Phạm Thị Ngọc Lan tận tình hớng dẫn, giúp đỡ, dạy em suốt trình thực đề tài Em xin chân thành cám ơn thầy cô giáo Khoa Sinh học truyền tải cho em kiến thức vô quý báu suốt trình học tập Em xin đợc cảm ơn thầy cô giáo, anh chị phòng thí nghiệm Sinh lý Sinh hóa Vi sinh, thầy cô giáo môn Công nghệ Sinh học tạo điều kiện, giúp đỡ để em hoàn thành đồ án cách tốt Đồng thời xin đợc gửi lời cám ơn tới gia đình, bạn bè em sinh viên lớp Công nghệ Sinh học K37 ủng hộ, giúp đỡ đồng hành với suốt trình thực đề tài Hu, thỏng 05 nm 2016 Sinh viờn thc hin: Hunh Th Minh Phng MC LC DANH MC CC BNG S hiu 3.1 3.2 3.3 3.4 3.5 3.6 3.7 3.8 3.9 3.10 Tờn bng Anh hng cua cỏc mụi trng nuụi cy n sinh trng, phỏt trin cua nm men Anh hng cua ngun nitrogen n sinh trng, phỏt trin cua nm men Anh hng cua ngun phosphorus n sinh trng, phỏt trin cua nm men Anh hng cua hm lng r ng n sinh trng, phỏt trin cua nm men Anh hng cua hm lng nitrogen n sinh trng, phỏt trin cua nm men Anh hng cua hm lng KH2PO4 n sinh trng, phỏt trin cua nm men Anh hng cua t l C : N : P n sinh trng, phỏt trin cua nm men thay i t l r ng Anh hng cua t l C : N : P n sinh trng, phỏt trin cua nm men thay i t l nitrogen Anh hng cua t l C : N : P n sinh trng, phỏt trin cua nm men thay i t l KH2PO4 Sinh nm men iu kin nuụi cy vụ trựng v khụng vụ trựng Trang 28 31 34 36 38 41 43 44 46 48 DANH MC CC HèNH S hiu 3.1 3.2 3.3 3.4 3.5 3.6 3.7 3.8 3.9 3.10 Tờn hỡnh Anh hng cua cỏc mụi trng nuụi cy n sinh trng, phỏt trin cua nm men Anh hng cua ngun nitrogen n sinh trng, phỏt trin cua nm men Anh hng cua ngun phosphorus n sinh trng, phỏt trin cua nm men Anh hng cua hm lng r ng n sinh trng, phỏt trin cua nm men Anh hng cua hm lng nitrogen n sinh trng, phỏt trin cua nm men Anh hng cua hm lng KH 2PO4 n sinh trng, phỏt trin cua nm men Anh hng cua t l C : N : P n sinh trng, phỏt trin cua nm men thay i t l r ng Anh hng cua t l C : N : P n sinh trng, phỏt trin cua nm men thay i t l nitrogen Anh hng cua t l C : N : P n sinh trng, phỏt trin cua nm men thay i t l KH2PO4 Sinh nm men iu kin nuụi cy vụ trựng v khụng vụ trựng 29,32,35,37,39,42,43,45,47,48 28,30,31,33,34,36,38,40,41,44,46,49- Trang 29 32 35 37 39 42 43 45 47 48 ụ an tụt nghiờp M U Cụng ngh lờn men ngy cng phỏt trin v to nhiu sn phm cú giỏ tr Ru vang l mụt nhng sn phm ú L thc ung thm ngon, b dng nờn cụng ngh sn xut ru vang ngy cng c chu v phỏt trin Hin nay, lờn men ru vang cú hai phng phỏp chớnh ú l lờn men t nhiờn v lờn men nh cỏc chung nm men thuõn khit Phng phỏp sn xut ru vang t cỏc chung nm men thuõn khit vi nhiu u im nh thi gian lờn men nhanh, s dng trit ngun c cht, nng ụ cn thu c cao hn lờn men t nhiờn, c bit l cú hng v khit hn nờn ngy cng c ỏp dng rụng rói Vic sn xut ru vang ngoi tớnh cht cua nguyờn liu thỡ ngun ging l mụt yu t quan nh hng n nng sut, cht lng cua sn phm Nm men sn xut ru vang phi l cỏc ging cú hot tớnh lờn men ru cao, s dng ng mnh, kh nng kt lng tt, lm ru nhanh cung nh chu ụ cn v ụ acid cua mụi trng, c bit l to hng v thm ngon tinh khit [12] Chớnh vỡ vy, yờu cõu v chung nm men cụng ngh lờn men ru vang c chu trong, ú vic sn xut sinh nm men ngy cng c y mnh Hiu sut thu nhn sinh nm men chu nh hng bi kh nng sinh trng v phỏt trin cua chung Kh nng sinh trng, phỏt trin cua nm men li chu nh hng cua nhiu yu t khỏc nh nhit ụ, oxygen, thi gian, c bit l mụi trng nuụi cy Cỏc chung nm men khỏc cú kh nng sinh trng v phỏt trin mụi trng cú cỏc ngun dinh dng khỏc Cỏc ngun dinh dng chớnh i vi sinh trng, phỏt trin cua nm men gm ngun carbon nh glucose, saccharose, tinh bụt, r ng; ngun nitrogen nh peptone, cỏc amino acid c bn, cỏc mui cha nitrogen; ngun phosphorus m chu yu l cỏc mui phosphate Ngoi hm lng cung nh t l cua cỏc ngun dinh dng ny cung nh hng mnh m n sinh trng, phỏt trin cua nm men Nc ta vi khớ hu nhit i núng m rt thun li vic trng nhiu loi hoa qu cú giỏ tr dinh dng Nhng cung chớnh vỡ khớ hu ny li khú khn SVTH: Huynh Thi Minh Phng ụ an tụt nghiờp vic bo qun trỏi cõy ti, chung dờ thi, hong sau thu hoch v chuyn nờn lm gim giỏ thnh Do ú, bờn cnh vic bo qun thỡ vic ch bin cỏc loi trỏi cõy cung cú y nghia ht sc quan nhm nõng cao giỏ tr s dng cua chung v phự hp vi th hiu cua ngi tiờu dựng Da l mụt nhng loi trỏi cõy c trng khỏ ph bin nc ta, l loi trỏi cõy cú nhiu giỏ tr dinh dng, cú thnh phõn dch qu phự hp ch bin ru vang Do ú, sn xut ru vang da t nm men l mụt gii phỏp dờ thc hin v tn thu cú hiu qu ngun da chớn khú tiờu th nhm khc phc c nhng khú khn vp phi v n Chớnh vỡ nhng ly trờn chung tụi xin c chon ti Khao sat mụi trng nuụi cy thich hp cho sinh trng, phat trin ca chng nm men phõn lp t cõy da nhm tỡm c cụng thc nhõn nuụi tt nht cho cỏc chung nm men ó phõn lp t cõy da phc v cho vic sn xut v thu nhn sinh nm men lờn men ru vang cỏc loi qu sau ny Mc tiờu ti Kho sỏt mụi trng nuụi cy thớch hp cho sinh trng, phỏt trin cua chung nm men c phõn lp t cõy da, lm c s thu nhn sinh Nụi dung nghiờn cu - Thm nh hng cua cỏc mụi trng Hansen, Sabouraud, nc chit khoai tõy, giỏ u n sinh trng v phỏt trin cua nm men - Ti u húa thnh phõn mụi trng nuụi cy gm ngun N, P; hm lng C, N, P; t l C : N : P - Th nghim nhõn nuụi v thu sinh nm men SVTH: Huynh Thi Minh Phng ụ an tụt nghiờp 10 Phõn TNG QUAN TI LIU 1.1 GII THIU V NM MEN Nm men (Yeast, Levures) l tờn chung ch nhúm nm cú cu to v sinh sn bng li ny chi [15] Chung phõn b rt rụng rói t nhiờn, nht l cỏc mụi trng cú cha ng, pH thp, chng hn nh hoa qu, rau da, mt mớa, mt ong, t ruụng mớa, t cõy n qu, t cú nhiờm dõu mo, khụng khớ v c ni sn xut ru vang [7] 1.1.1 Hỡnh thỏi nm men Nm men l vi sinh vt in hỡnh cua nhúm nhõn tht T bo nm men thng ln gp 10 lõn so vi vi khun Loi nm men m cỏc nh mỏy ru, bia thng s dng l Saccharomyces cerevisiae, cú kớch thc thay i khong 2,5 10 àm ì 4,5 21 àm, cú th thy rừ di kớnh hin vi quang hoc [7] T bo nm men thng cú hỡnh dng khỏc nhau, thng cú hỡnh cõu, hỡnh oval, elip, hỡnh qu chanh, hỡnh tr, hỡnh chựy Nm men cú th thay i hỡnh dng, kớch thc cỏc giai on phỏt trin v iu kin mụi trng xung quanh [20] Mụt s nm men cú t bo hỡnh di ni vi thnh nhng dng si goi l khun ty (mycelium) hay khun ty gi (pseudomycelium) Khun ty hỡnh thnh l kt qu cua mụt hoc mụt s si nm phỏt trin kộo di, vi vỏch ngn ngang khụng hon thin Khun ty gi hỡnh thnh si khụng rừ rt, hng lot t bo ục lp ni tip thnh chui di Cú loi cú th to thnh vỏng nuụi cy trờn mụi trng dch th [23] Tuy nhiờn hỡnh dng cua chung khụng n nh, ph thuục vo tui cua nm men v iu kin nuụi cy [7] 1.1.2 Cu to t bo nm men Nm men l sinh vt n bo hin vi, t bo c bn ging nh ụng, thc vt So sỏnh vi vi khun, t bo nm men tin húa hn v mt cu truc SVTH: Huynh Thi Minh Phng ụ an tụt nghiờp 58 TI LIU THAM KHO TING VIT Mó Phc Huyn Thanh An, Bỏ Dng, ng Ngoc Nam, Lờ Thi Thanh Nhi, Bựi Khc Hong Vu (2011), Phõn lp cac chng nm men cú ý ngha quy trỡnh san xut ru cn, ti nghiờn cu khoa hoc sinh viờn, Trng i hoc Lt Ngụ Th Phng Dung, Ly Hunh Liờn Hng v Hunh Xuõn Phong (2011), Phõn lp, tuyn chon nm men v xỏc nh iu kin nh hng quy trỡnh lờn men ru vang da hu, Tap chi khoa hoc, Trng i hoc Cõn Th, tr 137 - 145 Nguyờn Lõn Dung (1969), Nghiờn cu mụt s loi nm men phõn lp Vit Nam nõng cao cht lng thc n gia suc gia cõm, Tin tc hoat ng khoa hoc, Trng i hoc Tng hp H Nụi, tr - Nguyờn Lõn Dung, Vu Minh c (1978), Nghiờn cu chung nm men phõn gii tinh bụt Endomycopsis 119 v kh nng s dng chung sn xut sinh phc v chn nuụi, Tp san hoc Tng hp H Ni, tr - Nguyờn Lõn Dung, Dng Vn Hp (1986), Nghiờn cu la chon chung nm men v iu kin sn xut sinh Tap chi Sinh hoc 1, tr - 10 Nguyờn Lõn Dung, Nguyờn ỡnh Quyn, Phm Vn Ty (2003), Vi sinh vt hoc, NXB Giỏo dc, H Nụi Nguyờn Lõn Dung (2007), Thc vi sinh vt hoc, NXB Khoa hoc v K thut, H Nụi Bỏ Dng (2011), Phõn lp cac chng nm men cú ý ngha san xut ru cn, Bỏo cỏo ti nghiờn cu khoa hoc, i hoc Lt Vu Th Minh c (2001), Thc vi sinh vt hoc, NXB i hoc Quc gia H Nụi 10 Nguyờn Thanh Hng, Nguyờn ỡnh Thng (2000), Cụng nghờ san xut v kim tra cụn ethylic, NXB Khoa hoc v K thut, H Nụi 11 Vu Cụng Hu (1999), Trụng cõy qua Viờt Nam, NXB Nụng nghip, Thnh ph H Chớ Minh 12 Vu Cụng Hu (2005), Lm ru vang trai cõy gia ỡnh, NXB Nụng nghip thnh ph H Chớ Minh SVTH: Huynh Thi Minh Phng ụ an tụt nghiờp 59 13 Nguyờn Vn Hiu (1992), Hon thiờn quy trỡnh san xut banh men c truyn v ng dng san xut ru, Lun ỏn phú tin si, H Nụi 14 Nguyờn Th Hng, Hong ỡnh Hoa, ng Hng nh (2013), Nghiờn cu hot húa ht t bo nm men c nh sau thi gian xuc tỏc cho quỏ trỡnh lờn men ru, Tap chi Khoa hoc v Cụng nghờ, 51 (4), tr 465 474 15 Phm Th Ngoc Lan (2006), Vi sinh vt ch bin v bao quan, Tu sỏch i hoc Khoa hoc Hu 16 Phm Th Ngoc Lan (2012), Giao trỡnh thc vi sinh vt, NXB i hoc Hu 17 Phm Th Ngoc Lan, Ngụ Th Tng Chõu (2013), Giao trỡnh vi sinh vt hoc cụng nghiờp, NXB i hoc Hu 18 Vừ Th Lm (2008), Nghiờn cu quy trỡnh nhõn nuụi ch phm sinh hoc dựng x lý nc thai san xut tinh bt sn, Khúa lun tt nghip, i hoc Khoa hoc Hu 19 Nguyờn c Lng, Phan Th Huyn, Nguyờn nh Tuyt (2006), Thi nghiờm cụng nghờ sinh hoc 2, NXB i hoc Quc gia thnh ph H Chớ Minh 20 Lng c Phm, H Sng (1978), Vi sinh vt tng hp, NXB Khoa hoc v K thut, H Nụi 21 Lng c Phm (1998), Cụng nghờ vi sinh vt, NXB Nụng nghip, H Nụi 22 Lng c Phm (2006), Nm men cụng nghiờp, NXB Khoa hoc v K thut, H Nụi 23 Trõn Phi (1995), Cm nang ru tõy, NXB Khoa hoc v K thut, H Nụi SVTH: Huynh Thi Minh Phng ụ an tụt nghiờp 60 24 Hunh Th Minh Phng (2015), Phõn lp v tuyn chon cac chng nm men cú hoat tinh lờn men ru t vựng trụng da tai huyờn Lc, tnh Quang Nam, Bỏo cỏo tng kt ti nghiờn cu khoa hoc sinh viờn nm 2015, i hoc Khoa hoc Hu 25 Phm Hng Sn (2012), Giao trỡnh vi sinh vt hoc cng, NXB i hoc Hu 26 Nguyờn Phm Bớch Tho (2011), Hon thiờn quy trỡnh san xut ru vang da, Lun tt nghip, i hoc Cụng nghip thnh ph H Chớ Minh 27 Nguyờn Quang Tho (2000), Nghiờn cu lờn men vang vai thiu, Lun ỏn tin si sinh hoc, H Nụi 28 Nguyờn Th Ngoc Thanh (2009), Nghiờn cu chng nm men c phõn lp t mt s loai trai cõy trờn a bn thnh ph Hu, Khúa lun tt nghip, i hoc Khoa hoc Hu 29 Nguyờn Vn Thnh, Nguyờn Minh Thuy, Trõn Th Qu, Nguyờn Th Minh Tuyn, Nguyờn Phu Cng, Hunh Trõn Ton (2013), Lờn men ru vang khúm (Ananas comosus) Cõu uc (Hu Giang) bng nm men phõn lp thuõn chung, Tap chi Khoa hoc, Trng i hoc Cõn Th, tr 56 63 30 ng Th Thu (1989), Nghiờn cu glucoamilase ca Endomycopsis fibuliger v mt vi ng dng, Lun ỏn phú tin si khoa hoc, H Nụi 31 Nguyờn ỡnh Thng, Nguyờn Thanh Hng (2007), Cụng nghờ san xut v kim tra cụn ethylic, NXB Khoa hoc v K thut H Nụi 32 Nguyờn Minh Tựng (2008), Tỡm hiu iu kiờn nuụi cy ti u ca cac chng nm men phõn lp t nc thai san xut tinh bt sn, Khúa lun tt nghip, i hoc Khoa hoc Hu 33 Trõn Cm Võn (2001), Vi sinh vt hoc mụi trng, NXB i hoc Quc gia, H Nụi 34 Phm Hong Vit (2011), Nghiờn cu cụng nghờ san xut ru vang t qua da, Lun thc si, i hoc Bỏch Khoa H Nụi SVTH: Huynh Thi Minh Phng ụ an tụt nghiờp 61 TING ANH 35 Charoen Charoenchai, Graham H Fleet, Paul A Henschke (1998), Effects of Temperature, pH, and Sugar Concentration on the Growth Rates and Cell Biomass of Wine Yeasts, American Journal of Enology and Viticulture, pp 283 288 36 Maziar Safaei Asli (2009), A study on some efficient parameters in batch fermentation of ethanol using Saccharomyces cerevesiae SC1 extracted from fermented siahe sardasht pomace, African Journal of Biotechnology, Vol (20), pp 2906 2912 37 Murli Dharmadhikari (2000), Red wine production, Vineyard and Vintage View Volume 15 38 Noộ Arroyo Lúpez, Sandi Orlớc, Amparo Querol, Eladio Barrio (2009), Effects of temperature, pH and sugar concentration on the growth parameters of Saccharomyces cerevisiae, S kudriavzevii and their interspecific hybrid, International Journal of Food Microbiology, pp 120 127 39 Pasari AB , Korus RA , Heimsch RC (1988), Kinetics of the amylase system of Schwanniomyces castellii, Enzyme and Microbial Technology, vol.10 N 3, P 1566160 40 Rosma, A and Cheong, M W (2007), Effects of nitrogen supplementation on yeast (Candida utilis) biomass production by using pineapple (Ananas comosus) waste extracted medium, Malaysian Journal of Microbiology, Vol (1), pp 19 26 41 Schnierda T, Bauer FF, Divol B, van Rensburg E, Gửrgens JF (2014), Optimization of carbon and nitrogen medium components for biomass production using non-Saccharomyces wine yeasts, Letters In Applied Microbiology, Vol 58 (5), pp 478-85 SVTH: Huynh Thi Minh Phng ụ an tụt nghiờp 62 TI LIU MANG 42 http://doc.edu.vn/tai-lieu/de-tai-phan-lap-va-tuyen-chon-chung-nam-men-cohoat-luc-cao-trong-san-xuat-ruou-dac-san-tu-banh-men-la-o-mot-so-vung9742/ 43 http://ihay.thanhnien.com.vn/phuot/du-lich-kham-pha/tham-dai-loc-muadua-chin-44842.html 44 http://tailieu.vn/doc/de-tai-quy-trinh-san-xuat-sinh-khoi-nam-men1691352.html https://vi.wikipedia.org/wiki/Khoai_t%C3%A2y SVTH: Huynh Thi Minh Phng PH LC Ph lc Quan sỏt i thờ v vi thờ cỏc chng nm men Hỡnh Anh chp vi th (x100) v i th chung nm men M83 Hỡnh Anh chp vi th (x100) v i th chung nm men M91 Ph lc Nhõn ging v bo qun cỏc chng nm men Hỡnh Gi ging cỏc chung nm men M83 v M91 trờn thch nghiờng Ph lc nh hng ca cỏc mụi trng nuụi cy khỏc n sinh trng, phỏt triờn ca nm men Hỡnh Sinh cua chung M83 vi cỏc Hỡnh Sinh cua chung M91 vi cỏc mụi trng nuụi cy khỏc mụi trng khỏc Ph lc nh hng ca nguụn nitrogen n sinh trng, phỏt triờn ca nm men Hỡnh Sinh cua chung M83 vi cỏc ngun nitrogen khỏc Hỡnh Sinh cua chung M91 vi cỏc ngun nitrogen khỏc Ph lc nh hng ca nguụn phosphorus n sinh trng, phỏt triờn ca nm men Hỡnh Sinh cua chung M83 vi cỏc ngun phosphorus khỏc Hỡnh Sinh cua chung M91 vi cỏc ngun phosphorus khỏc Ph lc nh hng ca hm lng r ng n sinh trng, phỏt triờn ca nm men Hỡnh 10 Sinh cua chung M83 vi cỏc hm lng r ng khỏc Hỡnh 11 Sinh cua chung M91 vi cỏc hm lng r ng khỏc Ph lc nh hng ca hm lng nitrogen n sinh trng, phỏt triờn ca nm men Hỡnh 12 Sinh cua chung M83 vi cỏc hm lng nitrogen khỏc Hỡnh 13 Sinh cua chung M91 vi cỏc hm lng nitrogen khỏc Ph lc nh hng ca hm lng KH2PO4 n sinh trng, phỏt triờn ca nm men Hỡnh 14 Sinh cua chung M83 vi cỏc hm lng KH2PO4 khỏc Hỡnh 15 Sinh cua chung M91 vi cỏc hm lng KH2PO4 khỏc Ph lc nh hng ca t l C : N : P n sinh trng, phỏt triờn ca nm men Hỡnh 16 Sinh cua chung M83 vi cỏc t l C : N : P khỏc Hỡnh 17 Sinh chung M91 vi cỏc t l C : N : P khỏc Ph lc 10 Th nghim nhõn nuụi sinh nm men Hỡnh 18 Nhõn nuụi sinh nm men iu kin vụ trựng Hỡnh 19 Nhõn nuụi sinh nm men iu kin khụng vụ trựng [...]... và phân tích ANOVA (Duncan’s test p < 0,05) bằng phần mềm SPSS 16.0 trong xử lý thống kê SVTH: Huỳnh Thị Minh Phương Đồ án tốt nghiệp 35 Phần 3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 3.1 ẢNH HƯỞNG CỦA MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY ĐẾN SINH TRƯỞNG, PHÁT TRIỂN CỦA NẤM MEN Để xác định môi trường nuôi cấy tối ưu cho sinh trưởng, phát triển của nấm men, chúng tôi tiến hành khảo sát trên ba môi trường nuôi. .. chất của nấm men như carbon, nitrogen, phosphorus, magiesium, lưu huỳnh, tạo điều kiện thuận lợi cho sinh trưởng, phát triển của nấm men Đó có thể là nguyên nhân làm cho sinh khối nấm men trong môi trường Hansen thu được nhiều hơn so với môi trường Saubouraud và môi trường nước chiết khoai tây, giá đậu Như vậy, có thể kết luận rằng môi trường nuôi cấy thích hợp cho sinh trưởng, phát triển của... cho 1 L môi trường gồm: Glucose 50 g MgSO4 2–5g Peptone 10 g Agar 20 g KH2PO4 3g pH 6,0 Để bảo quản các chủng nấm men cho các nghiên cứu tiếp theo, tiến hành cấy chuyền định kì một tháng một lần trên môi trường Hansen thạch nghiêng, sau đó bảo quản ở 4ºC [16] 2.2.2 Khảo sát ảnh hưởng của môi trường nuôi cấy đến sinh trưởng, phát triển của nấm men * Để xác định môi trường nuôi cấy tối ưu cho. .. nuôi cấy: Hansen, Sabouraud và nước chiết khoai tây, giá đậu Sau thời gian nuôi cấy tối ưu (chủng M83: 48 giờ, chủng M91: 60 giờ), tiến hành xác định sinh khối khô của các chủng nấm men trong từng môi trường nuôi cấy Kết quả được trình bày ở bảng 3.1 và hình 3.1 (kèm phụ lục 3) Bảng 3.1 Ảnh hưởng của các môi trường nuôi cấy đến sinh trưởng, phát triển của nấm men Môi trường Sinh khối... thành phần của môi trường nuôi cấy theo các điều kiện tối ưu như đã khảo sát trước đó, không tiến hành khử trùng môi trường nuôi cấy - Nuôi cấy thu sinh khối: lấy 100 mL sinh khối nấm men từ các ống giống thuần khiết cho vào bình chứa 1 lít môi trường, sau đó tiến hành nuôi cấy trong điều kiện có sục khí ở pH và thời gian thích hợp rồi tiến hành thu sinh khối nấm men 2.2.5 Xử lý số liệu -... trong môi trường này không đủ để nấm men tăng sinh khối nhiều như môi trường Hansen Mặt khác nấm men có khả năng sử dụng nguồn nitrogen là peptone cao hơn nhiều so với protein nên có thể giải thích được sinh khối trong môi trường nước chiết khoai tây, giá đậu không cao hơn hai môi trường còn lại Hình 3.1 Ảnh hưởng của các môi trường nuôi cấy đến sinh trưởng, phát triển của nấm men Trong môi. .. trường trên và tiến hành nuôi cấy lắc với thời gian tối ưu của từng chủng Sau thời gian nuôi cấy tối ưu tiến hành lọc thu phần cặn, sấy khô đến khối lượng không đổi, cân để xác định sinh khối khô 2.2.3 Khảo sát ảnh hưởng của thành phần môi trường nuôi cấy đến sinh trưởng, phát triển của nấm men Các nghiên cứu trước đã khảo sát được ở hai chủng nấm men [22]: Trong môi trường Hansen dịch... peptone với pH, thời gian nuôi cấy và nguồn carbon tối ưu cho từng chủng Tiến hành nuôi cấy lắc ở nhiệt độ phòng, sau thời gian nuôi cấy tối ưu, lọc dịch nuôi cấy thu phần cặn, sấy khô đến khối lượng không đổi, cân để xác định sinh khối 2.2.3.2 Ảnh hưởng của nguồn phosphorus Để xác định nguồn phosphorus thích hợp cho sự sinh trưởng và phát triển của nấm men, cho 5 mL dịch huyền phù chứa... hòa tan vào dịch lên men Nếu lượng giống tiếp vào lên men ít người ta phải thổi khí sạch để cho giống nấm men sinh trưởng [20] Oxygen hòa tan vào môi trường lỏng ở dạng bọt khí nhỏ làm kích thích sinh sản của nấm men và tạo điều kiện cho tế bào nấm men hô hấp Trong môi trường có khuấy trộn và thổi khí làm cho bọt khí càng phân tán nhỏ và đều hơn Do đó tế bào nấm men càng được tiếp xúc... 100 mL sinh khối nấm men từ các ống giống thuần khiết cho vào bình chứa 1 lít môi trường, sau đó tiến hành nuôi cấy trong điều kiện có sục khí ở pH và thời gian thích hợp rồi tiến hành thu sinh khối nấm men 2.2.4.2 Nhân nuôi sinh khối nấm men trong điều kiện không vô trùng - Tiến hành pha loãng rỉ đường theo tỷ lệ 1 : 3 rồi đun sôi, lọc loại bỏ cặn sau đó bổ sung các thành phần của môi